1、课件制作 陆曙梅非发酵菌非发酵菌是一大群不发酵葡萄糖或以氧化形式利是一大群不发酵葡萄糖或以氧化形式利用糖、需氧或兼性厌氧、无芽孢的革兰用糖、需氧或兼性厌氧、无芽孢的革兰阴性杆菌阴性杆菌.课件制作 陆曙梅非发酵菌主要种类非发酵菌主要种类铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌不动杆菌属不动杆菌属产碱杆菌属产碱杆菌属莫拉菌属莫拉菌属 黄杆菌属黄杆菌属金氏杆菌属金氏杆菌属土壤杆菌属等土壤杆菌属等.课件制作 陆曙梅非发酵菌主要特点非发酵菌主要特点氧化酶:;不动杆菌属除外氧化酶:;不动杆菌属除外O/F试验:试验:O/动力试验:多数有鞭毛,但半固体动力动力试验:多数有鞭毛,但半固体动力试验不明显,常采用镜检或鞭毛染色试验
2、不明显,常采用镜检或鞭毛染色.课件制作 陆曙梅葡萄糖氧化发酵试验(葡萄糖氧化发酵试验(O/F)O/F培养基培养基(半固体高层)(半固体高层)指示剂:溴麝香草酚蓝指示剂:溴麝香草酚蓝培养基培养基pH:7.0O/F:OO/F:F.课件制作 陆曙梅葡萄糖氧化发酵试验(葡萄糖氧化发酵试验(O/F)O/F:OO/F:FO/F:.课件制作 陆曙梅肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别鉴定试验鉴定试验肠杆菌科肠杆菌科非发酵菌非发酵菌弧菌科弧菌科氧化酶氧化酶葡萄糖氧化葡萄糖氧化/发酵(发酵(O/F)FOF鞭毛鞭毛周鞭毛周鞭毛单、丛、周单、丛、周单、丛单、丛.课件制作 陆曙梅假单胞菌属假单
3、胞菌属假单胞菌科细菌根据假单胞菌科细菌根据rRNA-DNA同源性同源性分为分为5群,其中群,其中群属于假单胞菌属,共群属于假单胞菌属,共7种细菌,代表菌种为铜绿假单胞菌。种细菌,代表菌种为铜绿假单胞菌。多为条件致病菌,是医院感染的主要病多为条件致病菌,是医院感染的主要病原菌原菌.课件制作 陆曙梅假单胞菌属共同点假单胞菌属共同点革兰阴性杆菌,无芽孢、无荚膜,单或革兰阴性杆菌,无芽孢、无荚膜,单或丛鞭毛丛鞭毛专性需氧专性需氧营养要求不高营养要求不高氧化酶:氧化酶:O/F:OMac生长:生长:产生水溶性色素产生水溶性色素.课件制作 陆曙梅铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌形态染色形态染色革兰阴性杆菌,无芽孢、
4、无荚膜,单革兰阴性杆菌,无芽孢、无荚膜,单或丛鞭毛或丛鞭毛.课件制作 陆曙梅铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌培养特性培养特性专性需氧、营养要求不高专性需氧、营养要求不高最适温度最适温度35,42 生长,生长,4不生长不生长产生荧光素和蓝绿色水溶性的绿脓素,产生荧光素和蓝绿色水溶性的绿脓素,培养物呈蓝绿色。培养物呈蓝绿色。培养物有生姜气味培养物有生姜气味.课件制作 陆曙梅铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌菌落特征菌落特征典型菌落:扁平湿润,边缘不规则,菌典型菌落:扁平湿润,边缘不规则,菌落和培养基灰绿色,表面有金属光泽落和培养基灰绿色,表面有金属光泽大肠菌样菌落:菌落圆形凸起,似大肠大肠菌样菌落:菌落圆形凸起,似
5、大肠杆菌杆菌黏液型菌落:菌落凸起,呈粘液状黏液型菌落:菌落凸起,呈粘液状侏儒型菌落:细小,无光泽侏儒型菌落:细小,无光泽在血平板上形成透明溶血环在血平板上形成透明溶血环在在SS、Mac上形成不发酵乳糖菌落上形成不发酵乳糖菌落.课件制作 陆曙梅铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌生化反应生化反应氧化酶氧化酶O/F:O枸櫞酸盐利用枸櫞酸盐利用精氨酸双水解精氨酸双水解乙酰胺酶乙酰胺酶明胶液化明胶液化.课件制作 陆曙梅铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌抗原结构和抵抗力抗原结构和抵抗力抗原结构抗原结构 O抗原:包括外膜蛋白和脂多糖抗原:包括外膜蛋白和脂多糖 H抗原抗原 S抗原抗原抵抗力:抵抗力:对外界环境抵抗力强对外界环境抵
6、抗力强 对多种抗生素不敏感对多种抗生素不敏感.课件制作 陆曙梅铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌临床意义临床意义致病物质:内毒素、外毒素、胞外酶、致病物质:内毒素、外毒素、胞外酶、菌毛、荚膜菌毛、荚膜所致疾病所致疾病 条件致病菌条件致病菌 医院感染的重要病原菌医院感染的重要病原菌 大面积烧伤创面感染的重要病原菌大面积烧伤创面感染的重要病原菌.课件制作 陆曙梅铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌检验程序检验程序标本标本 增菌增菌 分离培养分离培养(血平板)(血平板)最后鉴定最后鉴定可疑菌落(性状、色素)可疑菌落(性状、色素)初步鉴定初步鉴定 涂片涂片染色镜检染色镜检血标本血标本涂片镜检涂片镜检氧化酶氧化酶菌落特征菌落
7、特征绿脓素绿脓素气味气味色素鉴定色素鉴定生化反应生化反应42生长生长分型分型O/F:O枸櫞酸盐利用枸櫞酸盐利用精氨酸双水解精氨酸双水解乙酰胺酶乙酰胺酶明胶液化明胶液化.课件制作 陆曙梅铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌检验方法检验方法显微镜检查:标本直接涂片革兰染色镜显微镜检查:标本直接涂片革兰染色镜检;鞭毛染色镜检检;鞭毛染色镜检培养:标本接种血平板、培养:标本接种血平板、Mac平板分离平板分离培养,血标本先增菌,再转种培养,血标本先增菌,再转种鉴定:鉴定:初步鉴定:菌落特征、水溶性绿色色素、初步鉴定:菌落特征、水溶性绿色色素、生姜气味、氧化酶、生姜气味、氧化酶、O/F全面鉴定:色素不典型者需全面鉴定
8、全面鉴定:色素不典型者需全面鉴定.课件制作 陆曙梅铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌分型检查分型检查血清学分型血清学分型噬菌体分型噬菌体分型质粒指纹图谱分析质粒指纹图谱分析脉冲场凝胶电泳脉冲场凝胶电泳分型检查意义:对医院感染的流行病学分型检查意义:对医院感染的流行病学调查有重要意义调查有重要意义.课件制作 陆曙梅荧光假单胞菌荧光假单胞菌革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛专性需氧专性需氧营养要求不高,普通平板、营养要求不高,普通平板、Mac平板可生长平板可生长最适生长温度最适生长温度2530,4生长,生长,35、42不生长不生长产生水溶性荧光素(青脓素),不产绿脓素产生水溶性荧光素(青脓素)
9、,不产绿脓素氧化酶;氧化酶;O/F:O;卵磷脂酶;明胶液化;卵磷脂酶;明胶液化具有嗜冷性,可在冰箱储存血中繁殖具有嗜冷性,可在冰箱储存血中繁殖.课件制作 陆曙梅恶臭假单胞菌恶臭假单胞菌革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛专性需氧专性需氧最适生长温度最适生长温度2530,4生长,生长,35、42不生长不生长产生水溶性荧光素(青脓素),不产绿产生水溶性荧光素(青脓素),不产绿脓素;陈旧培养物有腥臭味脓素;陈旧培养物有腥臭味氧化酶;氧化酶;O/F:O;卵磷脂酶;明胶;卵磷脂酶;明胶液化液化.课件制作 陆曙梅斯氏假单胞菌斯氏假单胞菌革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛或侧生鞭毛革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛
10、或侧生鞭毛最适温度最适温度35,42生长,生长,4不生长不生长菌落特征:干燥、粗糙、皱缩,可产生菌落特征:干燥、粗糙、皱缩,可产生黄色色素,无绿脓素和荧光素黄色色素,无绿脓素和荧光素.课件制作 陆曙梅产碱杆菌属产碱杆菌属粪产碱杆菌粪产碱杆菌木糖氧化产碱杆菌木糖氧化产碱杆菌木糖氧化产碱杆菌木糖氧化产碱杆菌 氧化亚种氧化亚种木糖氧化产碱杆菌木糖氧化产碱杆菌 脱硝亚种脱硝亚种.课件制作 陆曙梅产碱杆菌属产碱杆菌属主要特征主要特征革兰阴性杆菌、有周鞭毛、无芽孢、无革兰阴性杆菌、有周鞭毛、无芽孢、无荚膜荚膜专性需氧专性需氧营养要求不高,普通平板和营养要求不高,普通平板和Mac平板上平板上可生长可生长氧化
11、酶、氧化酶、O/F:K、不分解任何糖、不分解任何糖是医院感染病原菌之一,粪产杆菌多见是医院感染病原菌之一,粪产杆菌多见检验程序检验程序.课件制作 陆曙梅产碱杆菌属产碱杆菌属鉴定要点鉴定要点革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌氧化酶氧化酶O/F:硝酸盐还原;亚硝酸盐还原硝酸盐还原;亚硝酸盐还原KIA:底层斜面不变色:底层斜面不变色注意与不动杆菌鉴别注意与不动杆菌鉴别.课件制作 陆曙梅不动杆菌属不动杆菌属主要特征主要特征现已命名现已命名6个生物种,代表菌为醋酸钙不个生物种,代表菌为醋酸钙不动杆菌动杆菌革兰阴性球杆菌,成双排列,无鞭毛,革兰阴性球杆菌,成双排列,无鞭毛,动力阴性动力阴性专性需氧,营养要求不高,普
12、通平板、专性需氧,营养要求不高,普通平板、Mac平板上可生长平板上可生长氧化酶;氧化酶;O/F:O;硝酸盐还原;硝酸盐还原临床标本分离率仅次于铜绿假单胞菌临床标本分离率仅次于铜绿假单胞菌检验程序检验程序.课件制作 陆曙梅不动杆菌属不动杆菌属鉴定要点鉴定要点革兰阴性球杆菌革兰阴性球杆菌无动力无动力氧化酶氧化酶硝酸盐还原硝酸盐还原KIA:底层斜面不变色:底层斜面不变色注意与形态相似的奈瑟菌鉴别注意与形态相似的奈瑟菌鉴别注意与不分解糖的产碱杆菌鉴别注意与不分解糖的产碱杆菌鉴别.课件制作 陆曙梅嗜麦芽窄食黄单胞菌嗜麦芽窄食黄单胞菌革兰阴性杆菌,丛鞭毛革兰阴性杆菌,丛鞭毛专性需氧、营养要求不高,普通平板
13、生专性需氧、营养要求不高,普通平板生长良好,麦康凯平板可生长长良好,麦康凯平板可生长氧化酶氧化酶葡萄糖葡萄糖O/F:麦芽糖麦芽糖O/F:赖氨酸脱羧赖氨酸脱羧明胶液化明胶液化.课件制作 陆曙梅黄杆菌科黄杆菌科革兰阴性杆菌,无鞭毛革兰阴性杆菌,无鞭毛专性需氧、营养要求不高,普通平板上专性需氧、营养要求不高,普通平板上生长,形成黄色色素生长,形成黄色色素麦康凯平板上不生长麦康凯平板上不生长氧化酶氧化酶O/F:O.课件制作 陆曙梅莫拉菌属莫拉菌属革兰阴性球杆菌革兰阴性球杆菌,不易脱色,成双排列,不易脱色,成双排列(与奈瑟菌相似),无鞭毛,部分菌株(与奈瑟菌相似),无鞭毛,部分菌株有荚膜有荚膜专性需氧,
14、营养要求高,普通平板上不专性需氧,营养要求高,普通平板上不生长生长氧化酶氧化酶O/F:.课件制作 陆曙梅非发酵菌非发酵菌检验程序检验程序标本标本 增菌增菌 分离培养分离培养(血平板、麦康凯)(血平板、麦康凯)可疑菌落可疑菌落 涂片涂片染色镜检染色镜检血标本血标本涂片涂片动力观察动力观察革兰染色革兰染色鞭毛染色鞭毛染色氧化酶氧化酶O/F硝酸盐还原硝酸盐还原KIA斜面底层不变色斜面底层不变色其他生化反应其他生化反应.课件制作 陆曙梅测验测验1关于铜绿假单胞菌,错误的是关于铜绿假单胞菌,错误的是 A 革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌 B 氧化酶、触酶氧化酶、触酶 C 硝酸盐还原硝酸盐还原 D 产生水溶性蓝绿
15、色素产生水溶性蓝绿色素 E 菌落有金属光泽菌落有金属光泽.课件制作 陆曙梅测验测验2下列哪项是非发酵菌的主要特征下列哪项是非发酵菌的主要特征 A 需氧或兼性厌氧需氧或兼性厌氧 B 革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌 C 营养要求不高营养要求不高 D 无芽孢无芽孢 E 不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用糖不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用糖.课件制作 陆曙梅测验测验3对革兰阴性杆菌出现下列哪种特征,可对革兰阴性杆菌出现下列哪种特征,可怀疑为非发酵菌怀疑为非发酵菌 A 氧化酶氧化酶 B 发酵葡萄糖发酵葡萄糖 C 动力阴性动力阴性 D 触酶触酶 E 氧化利用麦芽糖氧化利用麦芽糖.课件制作 陆曙梅测验测验4假单胞菌属中
16、营养要求不高,新分离菌株在培假单胞菌属中营养要求不高,新分离菌株在培养基上形成特征性干燥、皱缩样菌落,并黏附养基上形成特征性干燥、皱缩样菌落,并黏附于平板表面难以移动,可产生黄色色素的细菌于平板表面难以移动,可产生黄色色素的细菌可能是可能是 A 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌 B 斯氏假单胞菌斯氏假单胞菌 C 产碱假单胞菌产碱假单胞菌 D 荧光假单胞菌荧光假单胞菌 E 恶臭假单胞菌恶臭假单胞菌.课件制作 陆曙梅测验测验5关于不动杆菌错误的是关于不动杆菌错误的是 A 氧化酶氧化酶 B 硝酸盐还原硝酸盐还原 C 革兰阴性杆菌,形态多为球杆状革兰阴性杆菌,形态多为球杆状 D 无动力无动力 E 专性需氧专性需氧.