1、第六章第六章芳酸及其酯类药物的分析芳酸及其酯类药物的分析 芳酸及其酯类药物1.共同点：苯环、羧基2.不同点：取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）3.包括：芳酸、芳酸盐、芳酸酯主要内容主要内容n分类与性质 n鉴别n特殊杂质检查n含量测定芳酸类药物芳酸类药物苯甲酸类苯甲酸类水杨酸类水杨酸类其他芳酸类其他芳酸类羧基与苯环直接相连羧基与苯环直接相连一、分类一、分类1.苯甲酸类苯甲酸类SO2COOHN(CH2CH2CH3)2丙磺舒丙磺舒NHCOOHCH3CH3甲芬那酸甲芬那酸苯甲酸（pKa4.20）COOH苯甲酸(钠)(Na)(2)苯环：UV和IR特性(1)羧基：酸性2.水杨酸类水杨酸类 COONaOHNH2
2、对氨基水杨酸钠COOHOCOCH3阿司匹林双水杨酯COOHOOOH双水杨酯COONHCOCH3OCOCH3贝诺酯COOHOHFF二氟尼柳OCO HOH水杨酸(钠)(Na)1、酚羟基：与、酚羟基：与FeCl3反应反应2、羧基：酸性、成盐、成酯、羧基：酸性、成盐、成酯3、酯基：水解、异羟肟酸铁反应、酯基：水解、异羟肟酸铁反应4、UV和和IR特性特性水杨酸类水杨酸类 3.其他芳酸类其他芳酸类ClOCCH3CH3COOC2H5氯贝丁酯氯贝丁酯CHCH3COOHCHCH2CH3CH3布洛芬布洛芬二、理化性质二、理化性质 （1）少数为液体，多数为固体，具有一定熔点 （2）芳酸在水中微溶或不溶，易溶有机溶剂
3、溶有机溶剂（3）碱金属盐易溶于水(4)酸性:pKa36，中等强度的酸或弱酸(5)酯：水解生成相应的酸和醇(6)苯环：UV和IR特性盐酸、硫酸芳酸碳酸、酚酸+碱 盐酸+醇 酯第二节 鉴别试验n与铁盐的反应n重氮化-偶合反应n水解反应n分解产物反应n紫外吸收光谱n红外吸收光谱n薄层色谱法n高效液相色谱法化学法光谱法色谱法1、与铁盐反应、与铁盐反应 1）与FeCl3反应：（酚羟基的鉴别）+COO-O-2Fe3Fe+12HCICOOHOH4FeCI36中性或弱酸性（pH46），生成紫堇色配合物COONaOHNH2对氨基水杨酸钠COOHOCOCH3阿司匹林双水杨酯COOHOOOH对氨基水杨酸钠加热煮沸与
4、加热煮沸与FeCl3生成紫堇色生成紫堇色加酸微酸化与加酸微酸化与FeCl3生成紫红色生成紫红色双水杨酯与与FeCl3生成紫色生成紫色pH5.06.0溶液，与FeCl3生成米黄色沉淀3）丙磺舒）丙磺舒2）苯甲酸（盐）苯甲酸（盐）赭色苯甲酸（钠）碱性或中性3FeCl4）异羟肟酸铁反应）异羟肟酸铁反应RC =O OR/+H2NOH HCl +FeCl3 异羟肟酸铁 （紫色）ClOCCH3CH3COOC2H5+NH2OHHCl+2KOHClOCCH3CH3CNHOK+O Fe3+ClOCCH3CH3CNH OOFe/3异羟肟酸铁（紫色）氯贝丁酯氯贝丁酯2、芳伯氨基的反应：重氮化、芳伯氨基的反应：重氮化
5、偶合反应偶合反应 重氮盐OH萘酚橙黄猩红色22rHClNaNOANH 重氮盐COONaOHNH2+NaNO2COOHOHNN+HCl COOHOHNN+OHOH-COO-OHNNOHCl-.Cl.-萘酚橙红色橙红色对氨基水杨酸钠贝诺酯有该反应吗？如何进行？COOOCOCH3NHCOCH3+O3H2HCIOHNH2HCI+OHCOOH+COOH32CHHONH2+2HCIHON+2Cl-+O2HNaCI2N2+CI-HO+OH+NaOHOHNNOH+OHNaCI2+NaNO2阿司匹林醋酸臭气醋酸臭气3、酯结构的反应：水解反应COONaOHCOOHOCOCH3+Na2CO3+H2SO4COOHOH
6、COONaOHCH3COONa+H2SO4CH3COOH白色+CH3COONa苯甲酸苯甲酸钠42SOH4、分解产物的反应、分解产物的反应管壁凝结成白色升华物 丙磺舒 NaOH Na2SO33+HNO 硫酸盐显硫酸盐反应显硫酸盐反应(含硫含硫)2SO 高温丙磺舒臭味5、紫外分光光度法、紫外分光光度法1%m axm in1cmAAEA12、原理：此类药物分子中含有苯环而显示特征吸收 光谱，可作为鉴别依据。n紫外分光光谱法紫外分光光谱法药物药物溶剂溶剂 max/minE值值A值值A1/A2丙磺舒丙磺舒盐酸盐酸-乙醇乙醇(20 g/ml)225，2490.67甲芬那酸甲芬那酸盐酸盐酸-乙醇乙醇279，
7、3500.69-0.74,0.59-0.601.15-1.30贝诺酯贝诺酯无水乙醇无水乙醇240730-760氯贝丁酯氯贝丁酯甲醇甲醇(10 g/ml)(0.1mg/ml)226;280，288460;44，31布洛芬布洛芬0.4%NaOH265，273;245，2716、红外吸收光谱法、红外吸收光谱法峰位（峰位（cm-1）峰强度峰强度归属基团或化学键归属基团或化学键37503000强强O-H、N-H(羟基羟基,胺基胺基)33003000弱中等弱中等CH、=CH、Ar-H30002700弱强弱强24002100弱中等弱中等CN19001650强强C=O(醛醛,酮酮,羧酸及衍生物羧酸及衍生物)1
8、6701500中等强中等强C=C、C=N、N-H13001000强强C-O（醇醇,酚酚,醚醚,酯酯,羧酸）羧酸）典型化学键的红外特征吸收峰典型化学键的红外特征吸收峰 C-H（烷基）、（烷基）、-CHO7、薄层色谱法薄层色谱法 8、高效液相色谱法高效液相色谱法1.鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是 A.碘化钾 B.碘化汞钾C.三氯化铁 D.硫酸亚铁E.亚铁氰化钾 2、三氯化铁与水杨酸类药物显色反应最适宜 酸度是 A 强酸性 B 弱酸性 C 中性 D 弱碱性 E 强碱性 3.阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是A.苯酚 B.乙酰水杨酸C.水杨酸 D.醋酸钠 E.醋酸苯
9、酯 4、能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物 有 A苯甲酸钠 B水杨酸 C氢化可的松 D丙酸睾酮 5、中性或碱性条件下，可与FeCl3试液反应，生成赭色沉淀的药物是 A.水杨酸钠B.对氨基水杨酸钠C.乙酰水杨酸D.苯甲酸钠6、阿司匹林是哪一种芳酸的酯？A.苯甲酸B.水杨酸C.对氨基水杨酸D.对氨基苯甲酸7、水杨酸在中性或弱酸介质中和FeCl3发生呈色反应的原理是？A.Fe3+水解B.Fe3+氧化所含酚羟基成醌C.所含酚羟基将Fe3+还原成Fe2+酸D.所含酚羟基与Fe3+生成有色配位化合物8、阿司匹林化学结构中可被用于质量控制的部分是？A.苯环B.羧基C.酯键D.酚羟基阿司匹林红外吸收光
10、谱中主要特征的波数是 A.33002300cm-1B.1760,1695cm-1C.1610,1580cm-1D.1310,1190cm-1E.750cm-110.羰基基VC=O9.羟基VOH11.苯环VC=CABC(一)阿司匹林中特殊杂质的检查ONa2COONaCOONaH+OHCOOHOHCOOHOCO)(CH23+乙 酰 化COOH3OCOCH+COOHCH3第三节第三节 特殊杂质检查特殊杂质检查1、合成工艺OH32()CH COOOHOCOCH3醋酸苯酯OHOHCOOH+OHCOOOH水杨酸苯酯OHOHCOOHOCOCH3OHCOOOHOCOCH3+2、杂质及其检查方法酚乙酰水杨酸苯酯
11、（1）溶液澄清度：阿司匹林 Ch.P(2010)【检查】取本品0.50g，加温热至约45的碳酸 钠试液10ml溶解后，溶液应澄清。检查酚、苯酯类杂质。检查原理酚、苯酯类杂质不溶于Na2CO3 而阿司匹林溶于Na2CO3（2）水杨酸：生产过程中乙酰化不完全贮藏过程中水解产生 检查原理水杨酸有游离酚羟基可与Fe3+反应，产生紫堇色，而阿司匹林无游离 酚羟基，无此反应。来源供试品供试品(阿司匹林阿司匹林)溶液溶液 水杨酸对照液水杨酸对照液水杨酸检查水杨酸检查合格，不超标合格，不超标 供试液制备：取本品0.1g，精密称定，置10ml量瓶，加1%冰醋酸甲醇溶液，溶解稀释至刻度，作供试品溶液。Ch.P(2
12、010)利用HPLC法检查阿司匹林中水杨酸 对照液制备：取水杨酸对照品10mg，精密称定，置100ml量瓶，加1%冰醋酸甲醇溶液，溶解稀释至刻度，摇匀，精密吸取5ml，置50ml量瓶，用1%冰醋酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。色谱条件：照高效液相色谱法(附录VD)试验，用十八烷基键合硅胶为填充剂，以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水(20:5:5:70)为流动相，检测波长为303nm。测定：精密量取供试品溶液、对照品溶液各10l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有与水杨酸保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.1%。NH2OHCOONa-CO2H2ONH2
13、OHNH2OH（二）对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查合成合成降解降解OOHOH2NOHNH2OOHOHOOHOHONH2OHO氧化成联苯醌氧化成联苯醌红棕色红棕色间氨基酚间氨基酚1、方法1双相滴定法Ch.P(2005)原理利用杂质易溶于乙醚，用乙醚提取，使两者分离，再用盐酸滴定，以甲基橙为指示剂。2、间氨基酚的检查NH2OH+HClNH2OH.HCl乙醚相乙醚相水相水相双相滴定法双相滴定法ChP（2005年版）年版）取本品，研细，称取3.0g，置50ml烧杯中加入用熔融氯化钙脱水的乙醚25ml，用玻璃棒搅拌1分钟，注意将乙醚溶液滤入分液漏斗中，不溶物再用脱水的乙醚提取2次，每次25ml，乙醚溶液
14、滤入同一分液漏斗中，加水10ml与甲基橙指示液1滴，振摇后，用盐酸滴定液（0.02mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白实验校正，消耗盐酸滴定液（0.02mol/L）不得超过0.3ml。供试液制备：取本品精密称定，加流动相溶解并 稀释制成每1ml约含0.7mg的溶液。HPLC法检查对氨基水杨酸钠中间氨基酚 对照液制备：取间氨基酚对照品精密称定，加流 动相溶解并定量稀释制成每1ml约 含1.2g的溶液作为对照品溶液。方法2-Ch.P(2010)色谱条件：照含量测定项下的色谱条件，以280nm为检测波长，测定 测定：精密量取供试品、对照品溶液各20l，分 别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品 溶液
15、色谱图中如有与间氨基酚保留时间一 致的色谱峰，按外标法以峰面积计算，不 得过0.25%。n方法3离子对HPLC法 USP(29)色谱条件：色谱条件：分析柱分析柱C18；流动相流动相磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液-甲醇甲醇-氢氧化四丁基铵氢氧化四丁基铵检测波长检测波长254nm内标溶液内标溶液磺胺溶液（磺胺溶液（5 g/ml）杂质对照液杂质对照液间氨基酚溶液（间氨基酚溶液（12 g/ml）供试品溶液供试品溶液对氨基水杨酸钠样品液（对氨基水杨酸钠样品液（6.9mg/ml）n系统适用性试验：系统适用性试验：杂质对照液杂质对照液10ml+内标溶液内标溶液10ml100ml（1）供试品溶液供试品溶液10ml+
16、内标溶液内标溶液10ml100ml（2）R取溶液取溶液(1)重复进样重复进样6次，次，间氨基酚与内标磺胺峰间氨基酚与内标磺胺峰的分离度应大于的分离度应大于2.5；RSD小于小于7%（按（按A杂杂/A内内比值计算）；比值计算）；测定方法：取溶液(1)和(2)分别进样，记录色谱图 间氨基酚的含量%=10（C对/C样）（R样/R对）限量0.25%为何采用ion-pair HPLC法？对氨基水杨酸钠具碱性，在水溶液中易离解；离子型化合物或能解离的化合物用常规HPLC分离时，常会出现色谱峰拖尾和保留值不稳定等问题，用离子对色谱则能解决以上问题。离子对色谱适用于pKa在2-8的弱酸和弱碱性化合物的分离。离
17、子对高效液相色谱 把离子对试剂加入到流动相中，被分析的组分离子在流动相中与离子对试剂的反离子生成不荷电的中性离子对，从而增加溶质与非极性固定相的作用，使分配系数增加，改善分离效果，用于分离可离子化或离子型化合物。对于碱性化合物（B，如-NH2），用烷基磺酸盐（R-SO3Na）作离子对试剂。NaRSO33RSOBH3RSOBH HBBHNaRSO3对于酸类样品（RCOOH），用四丁基铵盐（TBA+X）作离子对试剂。RCOOH HRCOOXTBA XTBATBARCOOTBARCOOn氯贝丁酯中特殊杂质的检查氯贝丁酯中特殊杂质的检查合成工艺合成工艺缩合，水解CH3COCH3，CHCl3，NaOHC
18、lOHClO CCH3CH3COONa酸化HClCH3COOHClO CCH3酯化C2H5OH，H2SO4COOC2H5CH3ClO CCH3对氯酚对氯酚对氯苯氧异丁酸对氯苯氧异丁酸n对氯酚对氯酚GC法法 Ch.P(2010)色谱条件：分析柱5%SE-30（甲基硅橡胶），2m玻璃柱；载气氮气；柱温160C；检测器FID杂质对照液0.0025%对氯酚的三氯甲烷溶液供试品溶液：样品10g+NaOH 氯仿洗涤（弃取），水层+HCl 用氯仿提取加氯仿至10ml进样取对照液和样品液分别进样测定，规定样品中对氯酚峰不得大于对照品峰（0.0025%）第四节第四节 含量测定含量测定 酸碱滴定法 （阿司匹林为例
19、）双相滴定法 （苯甲酸钠为例）紫外分光光度法(丙磺舒、阿司匹林胶囊为例)高效液相色谱法 (阿司匹林栓剂为例)1.直接滴定法COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O（一）酸碱滴定法（一）酸碱滴定法讨论：(1)滴定剂：NaOH，摩尔比1：1(2)指示剂：酚酞(3)中性乙醇：防止酯键水解扣除乙醇中酸的影响。溶解阿司匹林中性是对所用的指示剂而言怎样配制中性乙醇溶液？取乙醇加入2滴酚酞指示液，用氢氧化钠溶液滴至溶液刚好呈粉红色，即得。方法方法：取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇(对 酚酞指示液显中性)20ml，溶解后，加酚酞 指示液3滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定。
20、每1ml的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。阿司匹林 Ch.P（2010）应用范围：水杨酸、二氟尼柳、双水杨酯、苯甲酸、丙磺舒、布洛芬等水解：COOHOCOCH3+2NaOHCOONaOH+CH3COONa2NaOH H2SO4=Na2SO4 2H2O（定量过量）剩余滴定：2.水解后剩余滴定法：同时做空白试验 取本品约1.5g，精密称定，加入NaOH滴定液(0.5mo1/L)50.0m1，混合缓缓煮沸10min,放冷,加酚酞指示液，用H2SO4滴定液(0.25mo1/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH滴定液(0.5mol/
21、l)相当于45.04mg的C9H8O4。USP（32）(1)空白试验？V0：空白试验消耗硫酸体积，V:主试验消耗硫酸体积F：硫酸滴定液浓度校正因数，T：TNaOH/阿司匹林W：取样量0(2)1 0 0(V-V)FT%W含 量讨论讨论：NaOH+CO2Na2CO3，酸回滴时消耗的体积减小(3)优点：消除了酯键水解的干扰优点：消除了酯键水解的干扰 缺点：酸性杂质干扰缺点：酸性杂质干扰 3.两步滴定法阿司匹林片、阿司匹林肠溶片步步 中和中和酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸+N aO H钠盐+H2OCOONaOCOCH3+NaOHCOONaOH+CH3COONa(定量过量）2NaOH H2SO4 Na2SO4
22、2H2O步 水解后剩余滴定 中和 取本品10片，精密称定，研细，精密称取片粉适量，加入中性乙醇(对酚酞指示液显中性)20ml，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)至溶液显粉红色。此时中和了存在的游离酸，阿司匹林也同时成为钠盐。水解与测定 在中和后的供试品溶液中，加入定量过量的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热15min并时时振摇(使酯结构水解)，迅速放冷至室温，再用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定剩余的碱，并将滴定的结果用空白试验校正。制剂含量测定结果的计算%100%标示量每片含量标示量%100/片）标示量（平均片重供试品重）测
23、得量（gWWg%100/)(0片）标示量（平均片重供试品重gWWTFVV%100/)(0片）标示量（供试品重平均片重gWWTFVV二、亚硝酸钠滴定法Cl-+22+2+ArNH2 NaNO2 HCl ArNN NaCl H2O 1、用于具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物含量 测定 2、原理 +NaCl+2H2O 三.双相滴定法1、定义：在水和与水不相混溶的有机溶剂两相中进行的滴定方法。2、原理：芳酸碱金属盐 +HCl 芳酸3、适于芳酸碱金属盐含量测定 易溶于水，水相易溶于有机溶剂,有机相 滴定前：甲基橙，呈黄色（红 pH3.14.4 黄）滴定中：滴定终点：过量HCl使指示剂变橙红色水相乙醚相+HCl
24、苯甲酸（pKa4.20）COOHONa苯甲酸（pKa4.20）COOHONa苯甲酸（pKa4.20）COOH强力振摇水杨酸钠可否用双相滴定法测定含量？1、直接紫外分光光度法四、紫外分光光度法1）对照品法XXRRACACXXRRACCA%100%XCDW含量n 贝诺酯原料药含量测定n 取本品适量，精密称定，加无水乙醇溶解使成1ml中约含7.5g的溶液，于240nm处测定吸收度，另取贝诺酯对照品，精密称定，同法测定，计算，即得。2）吸收系数法1%1cmAEC l1%1100XXcmACE(%)100%XCDWW含量标示量n 丙磺舒片剂含量测定n 取10片，称重，研细，精密称取适量(W)，加乙醇稀释
25、至200ml，滤过，取续滤液5ml，稀释100ml，于249nm处测定吸收度，按 =338计算含量。1%1cmEClOCCH3CH3COOC2H5氯贝丁酯2.离子交换离子交换-紫外分光光度法紫外分光光度法ClOCCH3CH3COOC2H5H杂质（2）测定氯贝丁酯的含量 先用强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，再对照法定量测定主成分（1）离子交换色谱3.柱分配色谱紫外分光光度法（1）柱分配色谱(2)阿司匹林胶囊中阿司匹林和水杨酸的含量 测定洗脱时，若有三氯化铁被洗下，则使洗脱洗脱时，若有三氯化铁被洗下，则使洗脱液带黄色，影响测定结果，故在色谱柱下液带黄色，影响测定结果，故在色谱柱下层加入拌有磷酸
26、的硅藻土，与层加入拌有磷酸的硅藻土，与FeFe3+3+生成不溶生成不溶于洗脱液的磷酸铁而避免干扰。于洗脱液的磷酸铁而避免干扰。磷酸硅藻土尿素试剂新制三氯化铁硅藻土-的氯仿液含杂质水杨酸阿司匹林)(随洗脱液流出阿司匹林未反应，被尿素吸附保留生成配合物水杨酸与三氯化铁反应,氯仿洗脱阿司匹林流出氯仿水饱和乙醚冰醋酸-水杨酸流出配合物解离，2.阿司匹林的含量测定原理：在硅藻土碳酸氢钠色谱柱中，阿司匹林及水杨酸成钠盐保留于柱上，先用氯仿洗脱除去中性或碱性杂质，再用醋酸酸化，使阿司匹林游离，被氯仿洗脱后测得其含量。柱分配色谱紫外分光光度法不需特殊仪器，结果重现性较好，但操作较繁琐。五五 高效液相色谱法高效
27、液相色谱法 1)色谱条件与系统适用性试验 2）溶液的配制 内标溶液:咖啡因 对照品溶液：阿司匹林对照品 供试品溶液：阿司匹林栓剂1、内标法3 3）测定和计算）测定和计算峰面积峰面积 浓度浓度f=AS/CSAR/CRf=AS/CSAx/Cx AxCx=f AS/CS对照液（R）：AR CR 内标物（S）：AS CS供试液（X）：AX CX内标物（S）：AS CS 1)色谱条件与系统适用性试验 2）溶液的配制 对照品溶液：阿司匹林对照品 供试品溶液：阿司匹林栓剂2、外标法对照液（R）：AR CR 供试液（X）：AX CXCX CRAX AR CXAX CRAR3）测定和计算重点回顾重点回顾n1.了
28、解本类药物的结构和性质。n2.掌握芳酸类药物的鉴别试验，n3.掌握阿司匹林和对氨基水杨酸钠的特殊杂质检查方法，n4.掌握本类药物的酸碱滴定法，双相滴定法，熟悉其它含量测定方法，1.1.用直接滴定法测定阿司匹林含量用直接滴定法测定阿司匹林含量 A.A.反应摩尔比为反应摩尔比为1 1：1 1 B.B.在中性乙醇溶液中滴定在中性乙醇溶液中滴定 C.C.用盐酸滴定液滴定用盐酸滴定液滴定 D.D.以中性红为指示剂以中性红为指示剂 E.E.滴定时应在不断振摇下稍快滴定时应在不断振摇下稍快 进行进行 2、中性乙醇是指 A pH=7的乙醇 B 100%的乙醇 C 对酚酞指示液显中性的乙醇 D 对甲基橙指示液显
29、中性的乙醇 E 对酚红指示液显中性的乙醇n3、乙酰水杨酸的含量测定可采用n A 直接滴定法 n B 两步滴定法n C 水解后剩余滴定法 n D 氧化中和法 n E 光度滴定法 4.4.双相滴定法可适用的药物为双相滴定法可适用的药物为 A.A.阿司匹林阿司匹林B.B.对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚C.C.水杨酸水杨酸D.D.苯甲酸苯甲酸E.E.苯甲酸钠苯甲酸钠 5.两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是时，第一步滴定反应的作用是 A.测定阿司匹林含量测定阿司匹林含量B.消除共存酸性物质的干扰消除共存酸性物质的干扰C.使阿司匹林反应完全
30、使阿司匹林反应完全D.便于观测终点便于观测终点 E.有利于第二步滴定有利于第二步滴定 一一.对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查：称取本品对氨基水杨酸钠中间氨基酚的检查：称取本品3.0g，置，置50ml烧烧杯中，加入无水乙醚杯中，加入无水乙醚25ml，用玻璃棒搅拌，用玻璃棒搅拌1min，注意将乙醚液滤，注意将乙醚液滤入分液漏斗中，不溶物入分液漏斗中，不溶物(A)再用无水乙醚提取两次，每次再用无水乙醚提取两次，每次25ml，乙醚液滤入同一分液漏斗中，加水乙醚液滤入同一分液漏斗中，加水10ml与甲基橙指示液与甲基橙指示液1滴。振滴。振摇后，用盐酸滴定液摇后，用盐酸滴定液(0.02mol/L)滴定，并将滴
31、定结果用空白试验滴定，并将滴定结果用空白试验校正，消耗盐酸滴定液校正，消耗盐酸滴定液(0.02mol/L)不得过不得过0.3ml。问：。问：(1)此限量检查为何种滴定方法？此限量检查为何种滴定方法？(2)不溶物不溶物A为何物？为何物？(3)无水乙醚提取什么？无水乙醚提取什么？(4)盐酸滴定液滴定什么？盐酸滴定液滴定什么？(5)何为杂质限量？间氨基酚何为杂质限量？间氨基酚(分子量为分子量为109)限量是多少？限量是多少？计算题本节结束！本节结束！请复习下一章节！请复习下一章节！取本品取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，精密称定，置分液漏斗中，加水加水25m1、乙醚、乙醚50ml及甲基红指示液
32、及甲基红指示液2滴，用滴，用HCl滴定液（滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙加乙醚醚20m1，继续用，继续用HCl滴定液滴定液(0.5mo1/L)滴定，滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每。每1ml的的HCl滴定液（滴定液（0.5mol/L）相当于）相当于72.06mg的的C7H5NaO2。2.主要测定条件主要测定条件（1）加入适量）加入适量KBr加速反应加速反应N
33、aNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O 在盐酸存在下，重氮化反应的机在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：理为：NN+Cl-快N N OH快NNOH慢NO+Cl-NH2OHNOBr HBr HNO22OHNOCl HClHNO22（1）K1（2）K2 K1 300 K2 加入加入KBr，可增大被测溶液中，可增大被测溶液中NO+的的浓度，所以能加快重氮化反应速度浓度，所以能加快重氮化反应速度KBrKBr为催化剂为催化剂（2）酸的种类及其浓度）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO3盐酸盐酸 1:2.56
34、；加入过量盐酸：加入过量盐酸：重氮化反应速度加快；重氮化反应速度加快；重氮盐在酸性溶液中稳定；重氮盐在酸性溶液中稳定；防止生成偶氮氨基化合物，而影防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果响测定结果NN+Cl-+H2NNN NH+HCl（3）室温条件下滴定）室温条件下滴定 1030（4）滴定速度：先快后慢）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下滴定管尖端插入液面下2/3处，滴处，滴定液一次大部分放下，近终点时方定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定改为慢速滴定 3.指示终点的方法指示终点的方法（1）永停滴定法）永停滴定法 ChP（2005）永停滴定法（附录永停滴定法（附录A）用作重氮化法的终
35、点指示时，调节用作重氮化法的终点指示时，调节R R1 1使加于使加于电极上的电压约为电极上的电压约为50mV50mV。取供试品适量，精密。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml40ml与盐酸溶液（与盐酸溶液（1212）15ml15ml，而后置电磁搅拌器，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g2g，插入铂，插入铂铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/32/3处，处，用亚硝酸钠滴定液（用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L0.1mol/L或或0.05mol/L0.05mo
36、l/L）迅）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。偏转，并不再回复，即为滴定终点。对氨基水杨酸钠的含量测定对氨基水杨酸钠的含量测定n取本品约取本品约0.4g,0.4g,精密称定，加水精密称定，加水180ml180ml与盐酸溶液（与盐酸溶液（1 21 2）15ml15ml，照永停滴，照永停滴定法（附录定法（附录AA），用亚硝酸钠滴定液），用亚硝酸钠滴定液（0.1m
37、ol/L)0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml1ml亚硝酸钠滴亚硝酸钠滴定液（定液（0.1mol/L)0.1mol/L)相当于相当于17.51mgC17.51mgC7 7H H6 6NNNNa aO O3 3（2）外指示剂法）外指示剂法KIKI淀粉糊剂或试纸淀粉糊剂或试纸n2NaNO2NaNO2 2+2KI+4HCl+2KI+4HCl 2NO+I 2NO+I2 2+2KCl+2NaCl+2H+2KCl+2NaCl+2H2 2O O（3 3）.阿司匹林的含量测定阿司匹林的含量测定nUSPUSP（2525）阿司匹林胶囊）阿司匹林胶囊 可同时定量测可同时定量测定阿司匹林和水杨酸定阿司匹林和水杨酸
38、n填充剂：硅藻土和新制的碳酸氢钠的混合填充剂：硅藻土和新制的碳酸氢钠的混合物物n过程：过程：SASA和和ASAASA成钠盐保留，洗脱中性或成钠盐保留，洗脱中性或碱性物质，醋酸提取，碱性物质，醋酸提取，UvUv测含量测含量阿司匹林栓剂阿司匹林栓剂 Ch.PCh.P（20052005）内标法定量内标法定量四、四、HPLC1.内标对比法内标对比法n采用内标法定量时，首先将一定量的待测物标采用内标法定量时，首先将一定量的待测物标准品溶液与内标物标准品溶液混合，进行色谱准品溶液与内标物标准品溶液混合，进行色谱分离，测得峰面积分别为分离，测得峰面积分别为AiAi和和AsAs，求出相对校，求出相对校正因子正
39、因子f f。n 样品分析时，将一定量的内标物加入待测样品分析时，将一定量的内标物加入待测样品中，进行色谱分析，测得峰面积，计算样样品中，进行色谱分析，测得峰面积，计算样品中待测物的量。品中待测物的量。2.2.内标曲线法内标曲线法nAi/As=a+BCin主药量大，附加成份不干扰主药量大，附加成份不干扰n 容量法或重量法测定容量法或重量法测定n主药可溶于有机溶剂主药可溶于有机溶剂n 有机溶剂提取后测定有机溶剂提取后测定n主药量少主药量少n 光谱法或色谱法光谱法或色谱法5对氨基水杨酸钠中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B.间氨基酚 C.水杨酸 D.苯甲酸 E.苯酚4中国药典检查对氨基水杨酸钠中的间氨
40、基酚，采用的滴定液是（）A氢氧化钠滴定液 B盐酸滴定液 C高氯酸滴定液 D亚硝酸钠滴定液2.阿司匹林片规格为0.3g，含阿司匹林(M=180.2)应为标示量的95%105%，现用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定本品一片，应消耗滴定液体积为 A.15.0018.31mL B.16.65mL C.17.48mL D.不低于15.82mL E.15.8217.48mL第五节第五节 体内药物分析体内药物分析n一、血清中一、血清中ASAASA和和SASA的的HLPCHLPC含量测定含量测定n二、尿中丙磺舒的固相萃取净化二、尿中丙磺舒的固相萃取净化-HLPCHLPC分析分析重点回顾重点回顾n1.1.
41、了解本类药物的结构和性质。了解本类药物的结构和性质。n2.2.掌握芳酸类药物的鉴别试验，掌握芳酸类药物的鉴别试验，n3.3.掌握阿司匹林和对氨基水杨酸钠的特殊掌握阿司匹林和对氨基水杨酸钠的特殊杂质检查方法，杂质检查方法，n4.4.掌握本类药物的酸碱滴定法，双相滴定掌握本类药物的酸碱滴定法，双相滴定法，熟悉其它含量测定方法，法，熟悉其它含量测定方法，2.2.测定阿司匹林片和栓中药物的含量测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是（可采用的方法是（BCBC）A.A.重量法重量法B.B.酸碱滴定法酸碱滴定法C.C.高效液相色谱法高效液相色谱法 D.D.络合滴定法络合滴定法E.E.高锰酸钾法高锰酸钾
42、法 复习总结复习总结典型术语典型术语（一）巴比妥类药物的分析（一）巴比妥类药物的分析n1.1.银量法银量法n2.2.溴量法溴量法n3.3.非水溶液滴定法非水溶液滴定法n4.4.差示分光光度法差示分光光度法（二）芳酸及其酯类药物的分析（二）芳酸及其酯类药物的分析n1.1.双波长吸收度比法双波长吸收度比法n2.2.反相离子对色谱反相离子对色谱n3.3.水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法（Back titration Back titration）n4.4.两步滴定法（两步滴定法（Two-steps titration）n5.5.双相滴定法（双相滴定法（Diphasic Titration）n7.7.
43、亚硝酸钠滴定法亚硝酸钠滴定法n8.8.离子交换离子交换-紫外分光光度法柱紫外分光光度法柱n9.9.柱分配色谱柱分配色谱-紫外分光光度法柱紫外分光光度法柱n10.10.内标法内标法1.1.鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（液是（C C）A.A.碘化钾碘化钾 B.B.碘化汞钾碘化汞钾C.C.三氯化铁三氯化铁 D.D.硫酸亚铁硫酸亚铁E.E.亚铁氰化钾亚铁氰化钾 2.2.测定阿司匹林片和栓中药物的含量测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是（可采用的方法是（BCBC）A.A.重量法重量法B.B.酸碱滴定法酸碱滴定法C.C.高效液相色谱法高效液相色谱法 D.D.络合
44、滴定法络合滴定法E.E.高锰酸钾法高锰酸钾法 3.3.两步滴定法测定阿司匹林片的含量两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每时，每1ml1ml氢氧化钠溶液（氢氧化钠溶液（0.1mol/L0.1mol/L）相当于阿司匹林（分子量相当于阿司匹林（分子量=180.16=180.16）的）的量是（量是（A A）A.18.02mgA.18.02mg B.180.2mg B.180.2mgC.90.08mg D.45.04mgC.90.08mg D.45.04mgE.450.0mg E.450.0mg 反应摩尔比为1 1mlmgLgmolgLmolncMT02.1802.18116.1801.0T滴定度，每1
45、ml滴定液相当于被测组分的mg数c滴定液浓度，mol/LM被测物的摩尔质量，g/moln1mol 样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比 为1 n4.4.苯 甲 酸 钠 的 含 量 测 定，苯 甲 酸 钠 的 含 量 测 定，C h.PC h.P（20052005）采用双相滴定法，其所用）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为（的溶剂体系为（D D）A.A.水水乙醇乙醇 B.B.水水冰醋酸冰醋酸C.C.水水氯仿氯仿 D.D.水水乙醚乙醚E.E.水水丙酮丙酮 5.5.双相滴定法可适用的药物为（双相滴定法可适用的药物为（E E）A.A.阿司匹林阿司匹林B.B.对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚
46、C.C.水杨酸水杨酸D.D.苯甲酸苯甲酸E.E.苯甲酸钠苯甲酸钠 6.6.含量测定方法含量测定方法(Ch.P 2005(Ch.P 2005）为）为:A.A.直接中和滴定法直接中和滴定法 B.B.两步滴定法两步滴定法C.C.两者均可两者均可 D.D.两者均不可两者均不可阿司匹林片（阿司匹林片（B B）阿司匹林原料药（阿司匹林原料药（A A）阿司匹林栓剂（阿司匹林栓剂（D D）阿司匹林肠溶片（阿司匹林肠溶片（B B）A A两步酸碱滴定法两步酸碱滴定法 B B双相滴定法双相滴定法C C两者皆是两者皆是 D D两者皆不是两者皆不是1.1.苯甲酸钠的测定（苯甲酸钠的测定（D D）2.2.苯甲酸的测定（苯
47、甲酸的测定（A A）7.7.阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是（应是（C C）A.A.苯酚苯酚 B.B.乙酰水杨酸乙酰水杨酸C.C.水杨酸水杨酸 D.D.醋酸钠醋酸钠 E.E.醋酸苯酯醋酸苯酯 8.8.水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的产物的反应，要求溶液的pHpH值是（值是（D D）A.pH10.0 B.pH2.0A.pH10.0 B.pH2.0C.pH7C.pH78 8 D.pH4D.pH46 6 E.pH2.0 E.pH2.00.1 0.1 9.9
48、.两步滴定法测定阿司匹林片或阿司两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是（用是（B B）A.A.测定阿司匹林含量测定阿司匹林含量B.B.消除共存酸性物质的干扰消除共存酸性物质的干扰C.C.使阿司匹林反应完全使阿司匹林反应完全D.D.便于观测终点便于观测终点 E.E.有利于第二步滴定有利于第二步滴定 10.10.能用与能用与FeC1FeC13 3试液反应产生现象鉴试液反应产生现象鉴别的药物有（别的药物有（ABAB）A A苯甲酸钠苯甲酸钠 B B水杨酸水杨酸 C C氢化可的松氢化可的松 D D丙酸睾酮丙酸睾酮 11.11.采用双相滴定法测定
49、苯甲酸钠含量采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是（时，加入乙醚的目的是（A A）A.A.防止反应产物的干扰防止反应产物的干扰B.B.乙醚层在水上面，防止样品被氧化乙醚层在水上面，防止样品被氧化C.C.消除酸碱性杂质的干扰消除酸碱性杂质的干扰D.D.防止样品水解防止样品水解E.E.以上都不对以上都不对 12.12.采用两步滴定法测定阿司匹林制剂采用两步滴定法测定阿司匹林制剂含量时，被测组分与标准溶液的反应含量时，被测组分与标准溶液的反应摩尔比为（摩尔比为（C C）A.2:1 B.1:2A.2:1 B.1:2 C.1:1 C.1:1 D.3:1 D.3:1 E.E.以上都不对以上都不
50、对 13.13.区别水杨酸和苯甲酸钠，最常用的区别水杨酸和苯甲酸钠，最常用的试液是（试液是（C C）A.A.碘化钾碘化钾B.B.碘化汞钾碘化汞钾C.C.三氯化铁三氯化铁 D.D.硫酸亚铁硫酸亚铁 E.E.亚铁氰化钾亚铁氰化钾 14.14.在中性条件下，可与三氯化铁试液在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成赭色沉淀的药物是（反应，生成赭色沉淀的药物是（D D）A.A.水杨酸钠水杨酸钠B.B.对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠C.C.乙酰水杨酸乙酰水杨酸D.D.苯甲酸钠苯甲酸钠15.15.用直接滴定法测定阿司匹林含量用直接滴定法测定阿司匹林含量（ABEABE）A.A.反应摩尔比为反应摩尔比为1 1：1
