1、LOGO1单克隆抗体单克隆抗体3教学内容教学内容v单克隆抗体的发现v单克隆抗体的概念v单克隆抗体的制备v单克隆抗体的应用4多克隆抗体的概念56单克隆抗体技术发现以及原理19751975年年KohlerKohler和和MilsteinMilstein首先报道，用细胞杂交技术，使经绵羊红细胞首先报道，用细胞杂交技术，使经绵羊红细胞(SRBC)(SRBC)免疫免疫的小鼠的脾细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合，并由此创建了第一个的小鼠的脾细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合，并由此创建了第一个B B细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞株，获得了细胞株，获得了抗抗SRBCSRBC的单克隆抗体的单克隆抗体。这是免疫学，乃至医学史上
2、的一个里程。这是免疫学，乃至医学史上的一个里程碑。碑。概述概述20022002年年发明单克隆抗体技术发明单克隆抗体技术Nobel Prize in 1984Nobel Prize in 1984发明单克隆抗体技术发明单克隆抗体技术Nobel Prize in 1984Nobel Prize in 198420022002年年8单克隆抗体的相关概念u 杂交细胞：在诱导物的作用下同一细胞或不同细胞间的融合，融合的细胞具有双亲本细胞的染色体和全部或部分特性。u 杂交瘤细胞：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后产生的杂交细胞。单克隆抗体单克隆抗体v单克隆抗体是将产生抗体的细胞与骨髓瘤细胞融合，通过有限稀释法及
3、克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而生产的。v由于这种抗体是针对一个抗原决定簇的抗体，又是单一的B淋巴细胞克隆产生的，因此称为单克隆抗体。它是结构和特异性完全相同的高纯度抗体。抗体X-a-b-c-d-a -b -c -d抗原決定基BALB/cabbcd传统抗体(抗血清)是所有抗体的混和 脾脏产生各种 B 細胞免疫前要先把抗原作成乳剂免疫 抗原采血后可得传统抗血清已建立之小鼠骨髓癌细胞株由脾脏收集 B 細胞抗原通常有多个抗原決定基免疫后的脾脏约在两月內注射五到八次Ag X单克隆抗体的制备过程TK-HGPRT-d细胞融合-a-b-c-dAgXAgXELISAHAT筛选PEG Cell fus
4、ionHybridoma cells 融合瘤细胞（Subcloning）(确定只有一种细胞)ddabcdabcd+-X-d-c-b-a+-dNS-1骨髓癌细胞B cell脾细胞分株培养筛选筛选单抗传统抗体(抗血清)试验专一性对抗原的反应无法分辨完全不同d旧有抗原d新的抗原单克隆抗体的制备过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程v一、抗原与动物免疫v二、细胞融合v三、杂交瘤细胞的筛选v四、特异抗体的筛选v五、单克隆抗体的大量制备先免后合，两筛两得先免后合，两筛两得14优点和常规抗血清相比 1.特异性强：单克隆抗体是针对抗原分子表面抗原决定簇的，有人称为“单特异性”。它是研究生物大分子和细胞表面细
5、微结构以及诊断治疗疾病的有力工具。2.可大量生产，容易标准化：一旦获得1株杂交瘤细胞株，就可以无限制地反复制备出相同特异性的单克隆抗体。由于来自同一株细胞，很容易标准化。3.用不纯的抗原，可以制备出纯的单克隆抗体。用这种抗体又可以提纯抗原。因为具有上述特点，单克隆抗体应用范围很广，几乎渗透到生物医学的每一个领域，在生物医学研究，临床医学，军事医学和工业生产上都有重要的实用意义。vFDA批准了批准了46种单克隆抗种单克隆抗体药物上市体药物上市v 2002年年 29亿美元亿美元v 2011年年 500亿美元亿美元v 2015年年 680亿美元亿美元思考题思考题v1.单克隆抗体是来自谁？如果直接给人注射，会有什么反应？v2.查找出至少3种单克隆抗体药物及其适应症？参考资料参考资料vhttp:/ 2005.抗体理论与技术.科学出版社v龚非力 2002.医学免疫学.北京：科学出版社18LOGO谢谢敬请各位专家批评指正
