1、第六章第六章 水产品检验检疫技术水产品检验检疫技术第一节第一节 概概 述述 水产品含丰富的蛋白质、脂肪、矿物质和维水产品含丰富的蛋白质、脂肪、矿物质和维生素等，营养价值较高，是人类摄取动物蛋生素等，营养价值较高，是人类摄取动物蛋白的重要来源。人类使用动物蛋白有白的重要来源。人类使用动物蛋白有20%20%来自来自水产动物。水产动物。我国我国食品卫生法食品卫生法第六条规定；第六条规定；“食品应食品应当无毒、无害。符合应当有的营养要求，具当无毒、无害。符合应当有的营养要求，具有相应的色、香、味等感官性状有相应的色、香、味等感官性状”。水产品。水产品作为食品的首要条件也应是无毒、无害。作为食品的首要条
2、件也应是无毒、无害。一般而言，一般而言，“毒与害毒与害”来源于原料，也可能来源于来源于原料，也可能来源于加工生产过程，它们对人类的危害可分为三类：加工生产过程，它们对人类的危害可分为三类：生物性危害生物性危害 化学性危害化学性危害 物理性危害物理性危害致病菌：自身原有致病菌和非自身原有致病菌致病菌：自身原有致病菌和非自身原有致病菌病毒：甲型肝炎病毒、诺弱病毒病毒：甲型肝炎病毒、诺弱病毒寄生虫：已知鱼体和贝类中有寄生虫：已知鱼体和贝类中有50多种蠕虫寄生虫多种蠕虫寄生虫生物毒素类：主要来源于有毒海藻生物毒素类：主要来源于有毒海藻,如河豚毒素等如河豚毒素等添加化合物添加化合物(食品添加剂食品添加剂
3、):为防腐、发色或保水等为防腐、发色或保水等环境污染物环境污染物:包括养殖用、清洁用化学药品残留等包括养殖用、清洁用化学药品残留等捕捞过程中遗留在鱼体上的鱼钩捕捞过程中遗留在鱼体上的鱼钩生产过程中，设备、工器具损坏而混入产品中生产过程中，设备、工器具损坏而混入产品中有意插入，如对虾、鲳鱼中插入钉子。有意插入，如对虾、鲳鱼中插入钉子。无公害水产品无公害水产品.第二节第二节 水产品检验抽样和制样水产品检验抽样和制样 抽制检验是从产品的总体中抽出一部分，通过检验抽制检验是从产品的总体中抽出一部分，通过检验这一部分产品来估计产品总体质量。这一部分产品来估计产品总体质量。一、抽样方法一、抽样方法（一）百
4、分比抽样（一）百分比抽样 原则上应以同一产地、同一条件下加工的同一产品、原则上应以同一产地、同一条件下加工的同一产品、同一级别、同一规格的产品构成商品批，或以出口同一级别、同一规格的产品构成商品批，或以出口报检批构成商品批。一个检验批就是需要检验的一报检批构成商品批。一个检验批就是需要检验的一组单位产品，简称批。组单位产品，简称批。一般水产品检验所采用的方法是百分比抽样，该方一般水产品检验所采用的方法是百分比抽样，该方法是参考历史做法，并考虑实际检验工作量而提出法是参考历史做法，并考虑实际检验工作量而提出的，即不论产品的批量大小，按同样的百分比从批的，即不论产品的批量大小，按同样的百分比从批中
5、抽取样品。中抽取样品。（二）计数调查型抽样方案（二）计数调查型抽样方案 把正常抽样方案、加严抽样方案和放宽抽把正常抽样方案、加严抽样方案和放宽抽样方案用一整套的调整规则联系起来，这样方案用一整套的调整规则联系起来，这就是调整型抽样方案（见就是调整型抽样方案（见SN/T0376SN/T037619951995出口水产品检验抽样方法）出口水产品检验抽样方法）调查型抽样方案是随着对一批产品质量检调查型抽样方案是随着对一批产品质量检查结果的变化情况，随时调整抽样方案。查结果的变化情况，随时调整抽样方案。当发现产品质量比较正常时，采用正常抽当发现产品质量比较正常时，采用正常抽样方案，当发现产品质量较差时
6、，改用加样方案，当发现产品质量较差时，改用加严抽样方案。相反，当发现产品质量比较严抽样方案。相反，当发现产品质量比较稳定时，则采用放宽抽样方案。稳定时，则采用放宽抽样方案。1、质量感官检验抽样、质量感官检验抽样（1）活水产品）活水产品 必须在现场抽样检验，有必须在现场抽样检验，有的品种还需在加工、包装过程中抽样检验。的品种还需在加工、包装过程中抽样检验。抽样前要先了解捕捞时间和活力情况，开抽样前要先了解捕捞时间和活力情况，开件（箱）后，应先观察有无异常现象和腐件（箱）后，应先观察有无异常现象和腐臭气味。臭气味。活鱼、活河蟹、活梭子蟹装袋前检验抽样，活鱼、活河蟹、活梭子蟹装袋前检验抽样，按每批不
7、少于按每批不少于5%的百分比例随机抽样。的百分比例随机抽样。（2）冻水产品）冻水产品 冻前半成品冻前半成品：采取流动批抽样检验，在：采取流动批抽样检验，在加工过程的某一工序中，不将产品组成批，加工过程的某一工序中，不将产品组成批，而直接抽样。按生产加工日、班分别抽样，而直接抽样。按生产加工日、班分别抽样，对分级整理后，如速冻间前的半成品按不对分级整理后，如速冻间前的半成品按不少于少于5%5%的比例抽样。的比例抽样。冻后成品冻后成品：应重点抽查冻后产品质量。：应重点抽查冻后产品质量。分批抽样检验。每批在分批抽样检验。每批在500500箱以内的开采箱以内的开采2 2箱，每增加箱，每增加500500
8、箱增开箱增开1 1箱；增加数量不足箱；增加数量不足500500箱的也增开箱的也增开1 1箱。箱。2 2、化学检验抽样、化学检验抽样（1 1）抽样容器：）抽样容器：容器必须清洁，不得使用盛过化学容器必须清洁，不得使用盛过化学药品的容器盛放样品。药品的容器盛放样品。（2 2）抽样数量：）抽样数量：抽样数量按下表，抽样数在不同存抽样数量按下表，抽样数在不同存放部位抽取具有代表性的样品。放部位抽取具有代表性的样品。批量批量/件件最低抽样数量最低抽样数量冷冻品冷冻品活品、腌制品活品、腌制品150及以下及以下90及以下及以下31513200905005320010000500120013120010000
9、203、微生物检验抽样、微生物检验抽样 一般要求一般要求：取样必须遵循无菌操作，防止一切可：取样必须遵循无菌操作，防止一切可能的外来污染。能的外来污染。确定检验批确定检验批，应注意产品的均质性和来源。如产，应注意产品的均质性和来源。如产品包括若干不同的质量档次或来源，应将质量档品包括若干不同的质量档次或来源，应将质量档次或来源相同的那些产品划分在一起，组成若干次或来源相同的那些产品划分在一起，组成若干分批，然后由这些分批按分层随机取样法取样，分批，然后由这些分批按分层随机取样法取样，或其他适当取样方法进行。或其他适当取样方法进行。抽样数量抽样数量，可按单位包装件数的平方根计算取样。，可按单位包
10、装件数的平方根计算取样。每批货物的取样数量不少于每批货物的取样数量不少于5件需要检验沙门氏菌件需要检验沙门氏菌的水产品取样数量不少于的水产品取样数量不少于8件。件。二、样品制备二、样品制备（一）化学检验样品制备（一）化学检验样品制备 化学检验样品分为：化学检验样品分为：检验样品检验样品：由整批产品的各部分采取的少量样品。：由整批产品的各部分采取的少量样品。原始样品原始样品：把许多份检验样品混合在一起；：把许多份检验样品混合在一起；平均样品平均样品：原始样品经过处理再抽取其中一部分作为检验用。：原始样品经过处理再抽取其中一部分作为检验用。平均样品的制备：将抽取的样品取其可食部分，切碎平均样品的制
11、备：将抽取的样品取其可食部分，切碎混合于组织捣碎机混匀。不能用组织捣碎机捣碎的样混合于组织捣碎机混匀。不能用组织捣碎机捣碎的样品，如藻类干制品等则剪成很小的碎片充分混合均匀。品，如藻类干制品等则剪成很小的碎片充分混合均匀。测定鲜度的样品要求品质具有均一性。测定鲜度的样品要求品质具有均一性。检验有害物质含量的样品，产地应当相同，以便找出检验有害物质含量的样品，产地应当相同，以便找出污染源污染源（二）微生物样品制备（二）微生物样品制备 样品的全部制备过程均应遵循无菌操作。样品的全部制备过程均应遵循无菌操作。检验冷冻品检验冷冻品前应先使其融化。可在前应先使其融化。可在04C融化，融化，时间不超过时间
12、不超过18 h，也可在温度不超过，也可在温度不超过45C的环境的环境中融化，时间不超过中融化，时间不超过15min.检验液体或半固体样品检验液体或半固体样品前应先将其充分摇匀，如前应先将其充分摇匀，如容器已装满，可迅速翻转容器容器已装满，可迅速翻转容器25次；如未装满，次；如未装满，可于可于7s内以内以30cm的幅度摇动的幅度摇动25次。从混样到取样次。从混样到取样检验相融时间不超过检验相融时间不超过3min。检验干燥样品检验干燥样品前应先用灭菌勺或刮板将样品搅拌前应先用灭菌勺或刮板将样品搅拌均匀。根据不同的检验目的采用不同的样品制备均匀。根据不同的检验目的采用不同的样品制备方法。方法。第三节
13、第三节 水产品品质感官检验水产品品质感官检验一、活水产品一、活水产品 成活率是活水产品的主要指标，活水产品的活力由暂成活率是活水产品的主要指标，活水产品的活力由暂养保管条件和活水产品的生活习性所决定。养保管条件和活水产品的生活习性所决定。（一）活力的鉴别（一）活力的鉴别（1）活鱼：）活鱼：装袋前将活鱼起池后放入流动水槽内，观察有无装袋前将活鱼起池后放入流动水槽内，观察有无病、弱、伤、死鱼。把健康、活力良好的鱼放入第二个流病、弱、伤、死鱼。把健康、活力良好的鱼放入第二个流水槽中，检验其对外界的反应和游动情况。水槽中，检验其对外界的反应和游动情况。（2）活河蟹活河蟹：半成品检验。将样品倒入检查容品
14、内，观察其：半成品检验。将样品倒入检查容品内，观察其活动情况，对不活动的蟹，翻转或按其双腿，如无反应，活动情况，对不活动的蟹，翻转或按其双腿，如无反应，用手托起蟹身，如步足垂下者为死蟹，对反应迟钝，翻转用手托起蟹身，如步足垂下者为死蟹，对反应迟钝，翻转其身无力复位的为弱蟹。其身无力复位的为弱蟹。（二）成活率的计算（二）成活率的计算 被检样品净重与死、伤、残、病、弱等总净重的差值被检样品净重与死、伤、残、病、弱等总净重的差值占被检样品净重的百分比为成活率。占被检样品净重的百分比为成活率。二、冰鲜水产品 水产品保鲜的三条原则：水产品保鲜的三条原则：冷却、清洁、小心冷却、清洁、小心 水产品品质变坏主
15、要因素：水产品品质变坏主要因素：细菌变化、酶促变化、化学变化细菌变化、酶促变化、化学变化 鱼类鲜度的感官检验是根据鱼体死后的变鱼类鲜度的感官检验是根据鱼体死后的变化规律来确定的。鱼体死后变化可分为三化规律来确定的。鱼体死后变化可分为三个阶段：个阶段：死后僵硬阶段死后僵硬阶段（新鲜）（新鲜）自溶作用阶段自溶作用阶段（较新鲜）（较新鲜）腐败变质阶段腐败变质阶段（不新鲜）（不新鲜）三、三、冻水产品冻水产品 冻水产品主要检验冻品的色泽、气味、外冻水产品主要检验冻品的色泽、气味、外观状态、冰衣和风干氧化情况，必要时解观状态、冰衣和风干氧化情况，必要时解冻检验。冻检验。（1）冰衣量的确定）冰衣量的确定：镀
16、冰衣的冻水产，冻：镀冰衣的冻水产，冻品脱盘后称其重量，再浸入温度品脱盘后称其重量，再浸入温度10C以下以下的水中即捞出，待冻品冰衣形成后，称其的水中即捞出，待冻品冰衣形成后，称其重量。根据其增加的重量与镀冰衣后样品重量。根据其增加的重量与镀冰衣后样品的重量的比值计算冰衣量。的重量的比值计算冰衣量。（2）冻熟淡水螯虾品质检验）冻熟淡水螯虾品质检验第四节第四节 水产品理化检验水产品理化检验一、品质理化检验一、品质理化检验（一）物理检验（一）物理检验1、规格、规格（1）剖割规格：按产品要求检查剖割是否正确、整）剖割规格：按产品要求检查剖割是否正确、整齐。齐。（2）长度规格：以长度分规格的种类。）长度
17、规格：以长度分规格的种类。（3）只数规格：以单位重量的只数，每种重量又有）只数规格：以单位重量的只数，每种重量又有规定的种类。规定的种类。（4）均匀度（适用于冻对虾仁检验）：从最小包装）均匀度（适用于冻对虾仁检验）：从最小包装单位样品中挑选出单位样品中挑选出510只明显偏大的虾仁，称其重只明显偏大的虾仁，称其重量。再挑出同样数目的明显偏小的虾仁，称其重量。量。再挑出同样数目的明显偏小的虾仁，称其重量。前者与后者重量比值为均匀度。前者与后者重量比值为均匀度。（5）鱼苗、鱼种的计数方法：开间法、碗（或杯）鱼苗、鱼种的计数方法：开间法、碗（或杯）量法和推算法。量法和推算法。2、温度、温度 冻鲜品、冷
18、冻品的质量变化与温度有直接冻鲜品、冷冻品的质量变化与温度有直接关系。关系。国内推广应用的温度自动记录装置有：国内推广应用的温度自动记录装置有：棒状玻璃温度计、双金属温度计（温棒状玻璃温度计、双金属温度计（温差温度计）、热电阴温度计、温度自动记差温度计）、热电阴温度计、温度自动记录仪。录仪。3、重量鉴定、重量鉴定（1）衡器：）衡器：须经国家计量部门鉴定合格，并在有须经国家计量部门鉴定合格，并在有效使用期内，应按国家计量部门的检定规程进行效使用期内，应按国家计量部门的检定规程进行定期鉴定。按检验检疫部门规定的技术规程进行定期鉴定。按检验检疫部门规定的技术规程进行校正，经鉴定、校正后方能使用。校正，
19、经鉴定、校正后方能使用。（2）鉴重方法）鉴重方法活水产品：根据不同情况分别采用间接或直接称活水产品：根据不同情况分别采用间接或直接称重方法。重方法。活活贝类、活河蟹、活梭子蟹、活鲍鱼采用直接称贝类、活河蟹、活梭子蟹、活鲍鱼采用直接称重法，即先称被检样品的毛重，后称皮重。净重重法，即先称被检样品的毛重，后称皮重。净重为毛重与皮重之差。为毛重与皮重之差。活鱼类采用直接称重法，将已装袋的活鱼倒入三活鱼类采用直接称重法，将已装袋的活鱼倒入三角形的塑料网袋中沥水，待水成滴状时，即可称角形的塑料网袋中沥水，待水成滴状时，即可称重。净重为活鱼毛重与网袋皮重之差。重。净重为活鱼毛重与网袋皮重之差。冻水产品、袋
20、装干冻产品：分别称量被检冻水产品、袋装干冻产品：分别称量被检样品的毛重，在相同包装条件下，任选不样品的毛重，在相同包装条件下，任选不少于两个样品的包装称重，取其平均值为少于两个样品的包装称重，取其平均值为包装平均重量。包装平均重量。（3 3）检验结果判定）检验结果判定 被检样品净重与标明净重的差重在允许误被检样品净重与标明净重的差重在允许误差范围内，则判为样品净重合格。如超出差范围内，则判为样品净重合格。如超出允许误差范围，则判为净重不合格。允许误差范围，则判为净重不合格。全部检验样品的平均净重，不低于标明净全部检验样品的平均净重，不低于标明净重（净含量），则判为全批重量合格，反重（净含量），
21、则判为全批重量合格，反之为不合格。之为不合格。（二）化学成分品质分析检验（二）化学成分品质分析检验（1）水分的测定）水分的测定：60C恒重法（适用于卤虫卵检恒重法（适用于卤虫卵检验）、常压干燥法（适用于鱼粉检验）、减压干验）、常压干燥法（适用于鱼粉检验）、减压干燥法燥法仲裁法（适用于鱼粉检验）。仲裁法（适用于鱼粉检验）。（2 2）蛋白质的测定）蛋白质的测定凯氏定氮法（适用于鱼粉检凯氏定氮法（适用于鱼粉检验）验）（3 3）脂肪的测定）脂肪的测定索氏抽提法（适用于鱼粉检验索氏抽提法（适用于鱼粉检验仲裁法）。仲裁法）。（4 4）盐分的测定）盐分的测定：包括快速法（适用于腌制水产品：包括快速法（适用于
22、腌制水产品检验）、直接滴定法（适用于水产品检验）和电检验）、直接滴定法（适用于水产品检验）和电位滴定法（适用于水产品检验）。位滴定法（适用于水产品检验）。（5 5）沙分的测定）沙分的测定：酸不溶性灰分的测定（适用于鱼：酸不溶性灰分的测定（适用于鱼粉检验）和泥沙杂质的测定（适用于干海带检粉检验）和泥沙杂质的测定（适用于干海带检验）。验）。二、鲜度检验二、鲜度检验 水产品鲜度检验主要是对水产品的原料进行检验。水产品鲜度检验主要是对水产品的原料进行检验。（一）吲哚的测定（一）吲哚的测定 分光光度法分光光度法（适用于冻无头虾、冻虾仁及其制品（适用于冻无头虾、冻虾仁及其制品的检验）。的检验）。样品中的吲
23、哚随水蒸气蒸馏蒸出，用三氯甲烷萃样品中的吲哚随水蒸气蒸馏蒸出，用三氯甲烷萃取，加显色剂振荡，分离出酸层，以乙酸定容，取，加显色剂振荡，分离出酸层，以乙酸定容，用分光光度计测定，标准曲线定量。用分光光度计测定，标准曲线定量。（二）挥发性盐基氮（二）挥发性盐基氮三、食品添加剂含量的检验三、食品添加剂含量的检验（一）硼酸的测定（一）硼酸的测定 采用比色法（适用于水产品检验）采用比色法（适用于水产品检验）（二）乙氯三甲喹啉的测定（二）乙氯三甲喹啉的测定 荧光光度法测定（适用于鱼粉的检验）荧光光度法测定（适用于鱼粉的检验）（三）亚硝酸与硝酸盐的测定（三）亚硝酸与硝酸盐的测定（四）亚硫酸盐的测定（四）亚硫
24、酸盐的测定 盐酸副玫瑰苯胺法、蒸馏法盐酸副玫瑰苯胺法、蒸馏法（五）叔丁基羟基茴香醚（五）叔丁基羟基茴香醚(BHA)与与2，6-二叔丁基对甲酚二叔丁基对甲酚(BHT)的的测定测定 样品中的样品中的BHA和和BHT用石油醚提取，通过层析柱使用石油醚提取，通过层析柱使BHA和和BHT净化浓缩后，经气相色谱分离后用氢火焰离子化检测器检测，净化浓缩后，经气相色谱分离后用氢火焰离子化检测器检测，根据样品峰高与标准峰高比较定量。根据样品峰高与标准峰高比较定量。（六）山梨酸、苯甲酸的测定（六）山梨酸、苯甲酸的测定 样品酸化后样品酸化后,用乙醚提取山梨酸、苯甲酸用乙醚提取山梨酸、苯甲酸,用附氢火焰离子化检测用附
25、氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定器的气相色谱仪进行分离测定,与标准系列比较定量与标准系列比较定量.四、环境污染的检验四、环境污染的检验（一）有害元素检验（一）有害元素检验 采用冷原子吸收法测定总汞、砷、铜等，气相色谱法（酸采用冷原子吸收法测定总汞、砷、铜等，气相色谱法（酸提取巯基棉法）测定提取巯基棉法）测定甲基汞甲基汞。（二）农药残留量的检验（二）农药残留量的检验1、六六六（、六六六（BHC）滴滴涕残留量的测定）滴滴涕残留量的测定2、多种有机氮残留的测定、多种有机氮残留的测定3、多氯联苯残留的测定、多氯联苯残留的测定气相色谱（适用于鱼虾贝的检验）气相色谱（适用于鱼虾贝的检验）（三）渔
26、药残留检验（三）渔药残留检验1、噁喹酸残留的测定、噁喹酸残留的测定液相色谱（适用于活鳗鱼的检验）液相色谱（适用于活鳗鱼的检验）2、氯霉素残留的测定、氯霉素残留的测定3、硝基呋喃及代谢产物残留的测定、硝基呋喃及代谢产物残留的测定4、孔雀石绿孔雀石绿和结晶紫及其代谢产物残留的测定和结晶紫及其代谢产物残留的测定5、四环素族残留的测定、四环素族残留的测定第五节第五节 水产品细菌学检验水产品细菌学检验一、样品的采集和送检一、样品的采集和送检 赴现场采取水产食品样品时，应按检验目赴现场采取水产食品样品时，应按检验目的和水产品的种类确定采样量和方法。的和水产品的种类确定采样量和方法。二、检样的处理二、检样的
27、处理（1 1）鱼类：采样的部位为背肌（用灭菌工）鱼类：采样的部位为背肌（用灭菌工具），取样量具），取样量10g10g，磨碎后加入，磨碎后加入90ml90ml灭菌生灭菌生理盐水，混匀成稀释液。在剪取肉样时，理盐水，混匀成稀释液。在剪取肉样时，勿触破及沾上鱼皮。勿触破及沾上鱼皮。（2 2）虾类：采样部梯形为腹节内的肌肉（用）虾类：采样部梯形为腹节内的肌肉（用灭菌工具），取样量灭菌工具），取样量10g10g，同鱼类检样处理。，同鱼类检样处理。（三）检验方法（三）检验方法（1）菌落总数测定）菌落总数测定：按：按GB/T4789.2-2003食品卫生食品卫生微生物学检验微生物学检验 菌落总数测定菌落总数
28、测定；（2）大肠菌群测定）大肠菌群测定：按：按GB/T4789.2-2003食品卫生食品卫生微生物学检验微生物学检验 大肠菌群测定大肠菌群测定；（3）沙门氏菌检验：）沙门氏菌检验：按按GB/T4789.2-2003食品卫生食品卫生微生物学检验微生物学检验 沙门氏菌测定沙门氏菌测定；（4）副溶血性弧菌检验）副溶血性弧菌检验：按：按GB/T4789.2-2003食品食品卫生微生物学检验卫生微生物学检验 副溶血性弧菌测定副溶血性弧菌测定；（5）金黄色葡萄球菌检验）金黄色葡萄球菌检验：按：按GB/T4789.2-2003食食品卫生微生物学检验品卫生微生物学检验 金黄色葡萄球菌测定金黄色葡萄球菌测定；（
29、6）霉菌和酵母计数）霉菌和酵母计数：按：按GB/T4789.2-2003食品卫食品卫生微生物学检验生微生物学检验 霉菌和酵母计数测定霉菌和酵母计数测定；第六节第六节 水产品寄生虫检验水产品寄生虫检验水产品寄生虫水产品寄生虫成虫成虫宿主宿主检查检查双槽蚴双槽蚴曼氏裂头绦曼氏裂头绦虫虫青蛙、鱼青蛙、鱼类类放大镜下可放大镜下可见见微孢子虫微孢子虫虾、鳗鱼、虾、鳗鱼、鳕鱼鳕鱼显微镜下可显微镜下可见见异尖线虫蚴异尖线虫蚴异尖线虫异尖线虫许多海水许多海水鱼鱼放大镜下可放大镜下可见见绦虫蚴绦虫蚴绦虫绦虫鳕鱼鳕鱼显微镜下可显微镜下可见见后尾蚴后尾蚴中华分支睾中华分支睾吸虫吸虫鱼类鱼类显微镜下可显微镜下可见见第
30、七节第七节 水产品天然毒素检验水产品天然毒素检验一、贝类毒素的检验贝类毒素的检验（一）腹泻性贝类毒素（一）腹泻性贝类毒素（DSP）的检验）的检验 适用于海产双壳类贝肉、贝柱、外套及其制品。适用于海产双壳类贝肉、贝柱、外套及其制品。用丙酮提取贝类中毒素，再转移至乙醚中，经减用丙酮提取贝类中毒素，再转移至乙醚中，经减压浓缩至干后，再以压浓缩至干后，再以1%吐温吐温60生理盐水溶解残留生理盐水溶解残留物注射小白鼠观察存活情况，计算其毒力。物注射小白鼠观察存活情况，计算其毒力。（二）麻醉性贝类毒素（二）麻醉性贝类毒素（PSP）的检验）的检验 适用于海产双壳类贝肉、贝柱、外套及其他可供适用于海产双壳类贝
31、肉、贝柱、外套及其他可供食用部分的检验。食用部分的检验。本方法采用鼠单位测定，对本方法采用鼠单位测定，对PSP予以定量。鼠单予以定量。鼠单位定义为，对体重为位定义为，对体重为20g的小白鼠腹腔注射的小白鼠腹腔注射1ml贝贝类提取液后，在类提取液后，在15min时杀死小白鼠所需的最低毒时杀死小白鼠所需的最低毒素量。素量。（三）记忆丧失性贝类毒素（三）记忆丧失性贝类毒素（ASP）的检验）的检验 样品用甲醇样品用甲醇/水提取，经水提取，经LC-SAX强阴离子柱固相强阴离子柱固相萃取（萃取（SPE）净化，用反相液相色谱紫外检测器）净化，用反相液相色谱紫外检测器测定，外标法定量。测定，外标法定量。（四）
32、神经性贝类毒素（四）神经性贝类毒素（NSP）的检验）的检验 目前在我国对贝类的检验中，尚未发现神经性贝目前在我国对贝类的检验中，尚未发现神经性贝类毒素（类毒素（NSP）二、组胺的检验二、组胺的检验 鱼体中组胺用戊醇提取。遇偶氮试剂显橙色，与鱼体中组胺用戊醇提取。遇偶氮试剂显橙色，与标准系列比较定量。最低检出浓度为标准系列比较定量。最低检出浓度为5mg/100g.三、河豚毒素的测定三、河豚毒素的测定（一）毒性（一）毒性 河豚是含有天然毒素的著名毒鱼，多数种类的内脏河豚是含有天然毒素的著名毒鱼，多数种类的内脏含有剧毒。尤其是卵巢和肝脏最多。含有剧毒。尤其是卵巢和肝脏最多。（二）毒素的测定（二）毒素
33、的测定1、毒素判定性试验、毒素判定性试验2、毒素定量试验、毒素定量试验（1）试样制备）试样制备：取绞碎样：取绞碎样5g于于200ml圆底烧瓶中，加圆底烧瓶中，加入甲醇入甲醇50ml，用稀醋酸调至微酸性（，用稀醋酸调至微酸性（pH4-5）后，）后，在水浴上用回流冷凝器浸出在水浴上用回流冷凝器浸出1020min，这样浸出，这样浸出2次，将每次浸出液离心分离后取澄清液，再移入蒸次，将每次浸出液离心分离后取澄清液，再移入蒸发皿中，在水浴上将甲醇蒸干。用乙醚约发皿中，在水浴上将甲醇蒸干。用乙醚约20ml洗油洗油脂数次，再用水脂数次，再用水10ml溶解，过滤除去不溶物，滤液溶解，过滤除去不溶物，滤液作为原
34、液，试样原液作为原液，试样原液1ml相当于样品相当于样品0.5g。（2）生物试验（最小致死量的判定）生物试验（最小致死量的判定）：试样原液用水：试样原液用水稀释成不同浓度，各取稀释成不同浓度，各取0.5ml注入体重注入体重15-20g的小白的小白鼠腹腔内，测定水白鼠呈现河豚毒素特有症状病倒的鼠腹腔内，测定水白鼠呈现河豚毒素特有症状病倒的时间。时间。（3）毒力计算）毒力计算：毒力单位：毒力单位以试样以试样1g致死小白鼠的致死小白鼠的克数为单位，称鼠单位（克数为单位，称鼠单位（MU）原液体积（原液体积（ml）小白鼠体重（小白鼠体重（g)毒力毒力=试样重试样重(g）注射液量（注射液量（0.5)最小致死量的原液稀释度最小致死量的原液稀释度 目前河豚毒素（目前河豚毒素（TTX）测定方法除小鼠生物试验法）测定方法除小鼠生物试验法外，还有免疫化学测定法、高效液相色谱法以及外，还有免疫化学测定法、高效液相色谱法以及HPLC/MS等。等。
