1、工作人员职业暴露作业指导书1 范围本章规定了实验室安全防护和职业暴露预防。本规范适用于房县人民医院检验科实验室安全防护和职业暴露预防。2 规范性引用文件医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则（试行）中华人民共和国卫生部，2004年5月31日颁布，2004年6月1日起实施。实验室生物安全通用要求GB 19489-2004，2004年10月1日起实施。 微生物和生物医学实验室生物安全通用准则（WS 233-2002）中华人民共和国卫生行业标准，2002-12-03发布，2003-08-01实施。Guidelines for the Safe Transport of Infectious Su
2、bstances and Diagnostic Specimens .WHO 1997.Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, CDC/NIH, Fourth Edition, 1999.Update: Provisional recommendations for chemoprophylaxis after occupational exposure to Human Immunodeficiency Virus MMWR. 1996;45:468-472, and from B Schoub. Virus SA
3、. 1997. Guidelines to the Management of Occupational Exposure to HIV. National Institute of Virology.消毒技术规范（2002年版）中华人民共和国卫生部2002-11-15发布，2003-04-01起实施。3 实验室生物安全级别血清学检测：血清学检测和免疫学检测应在符合级生物安全实验室（BSL-2）要求检测实验室中进行。4 实验室安全防护4.1 个人防护及保健 实验室所用个人防护装备均应符合国家有关标准要求。4.1.1 防护服4.1.1.1实验室应为每个工作人员配备足够防护服，包括白大衣、隔离衣或
4、一次性工作服。平时应将清洁防护服置于实验室清洁区内专用存放处。4.1.1.2 离开实验室时，应脱去防护服。每次穿过污染防护服应及时放入污衣袋中，待消毒后方可洗涤或废弃。4.1.1.3 当有液体（样品或病毒培养液）可能溅到工作人员时，应使用防渗透性（如塑料）围裙。4.1.1.4 当发现防护服已被污染时，应立即更换。4.1.2实验室应配备一次性手套、一次性口罩、安全防护眼镜及冲洗眼睛装置。 4.1.3实验室应配备实验室专用工作鞋，鞋面覆盖足背，鞋底防滑。4.1.4 个人保健4.1.4.1 高标准个人保健对于减少感染危险性很重要。皮肤受损、患病都会增加感染危险。皮肤任何伤口和擦伤都应以防水敷料覆盖。
5、4.1.4.2 进实验室前要摘除首饰，修剪长带刺指甲，以免刺破手套。4.1.4.3 进入实验室应穿隔离衣，戴手套。如果接触物传染危险性大，则应戴双层手套和防护眼镜。4.1.4.4 离开实验室前必须脱去隔离衣，并洗手。4.1.4.5 严禁在实验室内进食、饮水、吸烟和化妆。4.2 实验室管理要求4.2.1 建立安全制度4.2.1.1 实验室仪器设备、建筑和设施安全性应符合实验室生物安全通用要求GB 19489-2004和本规范要求。4.2.1.2 根据本规范制订本实验室安全工作制度或安全标准操作程序（S-SOP），该制度或程序应适用于现有实验条件，并与实验室其它规定相一致。4.2.1.3 无论是否
6、发生意外事故，每年都要对安全工作制度或安全标准操作程序及其实施情况进行检查和修订，并有记录。4.2.1.4 制定意外事故处理预案。建立意外事故登记和报告制度。4.2.1.5 实验室主任负责组织对突发事件和职业暴露事故进行调查、登记、处理和报告。4.2.2 人员培训和管理4.2.2.1 向管理人员和所有检测人员提供并完成与工作相关充足有效技术培训。强化全员安全培训和“普遍性防护原则”安全意识。所有工作人员必须经过检测技术和省级以上实验室安全培训，包括上岗培训和复训，并接受实验室管理人员监督。实验室安全责任人要对工作和环境安全负责，所有工作人员都有责任保护自己和他人安全。4.2.2.2 必须告知新
7、上岗人员实验室工作潜在危险，进行安全教育，直至有能力后方可单独工作。4.2.2.3 实验室主任应了解所有工作人员。在安排工作区域时，要根据人员工作种类和所涉及生物材料，对实验室环境做好安全检查。4.2.2.4 新调入人员、外来合作、进修和学习人员在进入实验室之前必须经过实验室主任批准。非实验室人员和非实验室物品不得进入实验室。4.2.2.5 严格执行实验室工作人员年度采血检测病毒抗体和备案制度，工作人员血清应长期保留。实验室工作人员从事工作前必须进行HIV抗体和乙肝、丙肝等肝炎病毒标记物检测；注射乙肝疫苗；每半年至1年进行1次HIV抗体检测，并保留血清样品。4.2.3 建立严格保密制度并定期检
8、查4.2.3.1 与HIV/AIDS相关检测项目所有资料均应严格保密，包括送检单与检测记录保管、报告单发放和工作人员年度采血检测等。4.2.3.2检测实验室所有人员应具有高度保密意识。不可对无关人员透露检测结果。4.2.3.3 保密制度纳入年度考核，发现问题及时处理并根据情况修订保密制度。4.2.4 严格质量管理4.2.4.1 按要求做好安全操作管理以及检测试剂选择、检测工作室内质控和室间质评。4.2.4.2 对所有检测报告严格把关，杜绝漏报、误报现象发生。4.2.5 对存放试剂和有毒物区域监控4.2.5.1 冷藏柜、冰箱、培养箱和存放生物试剂、化学危险品、放射性物质容器置于工作人员视线之外地
9、点时应上锁。4.2.5.2 应设有专门储存阳性血清、质控品低温冰柜和/或血清库毒种库，并应上锁，专人管理。各级实验室血清库/毒种库设置按有关规定执行。4.2.6 建立应付突发事件措施4.2.6.1 在紧急预案中要包括在紧急事件发生时通知实验室主任、设备管理员、实验室工作人员和设备安全员。 4.2.6.2 实验室主任和设备安全员要遵循有关规定，报告、调查和处理突发事件以及可能发生意外职业暴露。4.3 实验室安全操作4.3.1 在安排工作人员实验室区域时，要根据其工作种类和所涉及生物试剂，对实验室环境做好安全检查。4.3.2 进入实验室应穿隔离衣、戴手套，必要时（如对初筛阳性标本进行复测或确认时，
10、或直接对HIV毒种进行操作时）戴防护眼镜，以防污染暴露皮肤和衣物。不用戴手套手触摸暴露皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等。4.3.2 进入实验室应穿隔离衣、戴手套，必要时（如对初筛阳性标本进行复测或确认时，或直接对HIV毒种进行操作时）戴防护眼镜，以防污染暴露皮肤和衣物。不用戴手套手触摸暴露皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等。4.3.3 如接触物传染性危险大，可戴双层（两付）手套以增加保护。操作时手套破损，应立即丢弃、洗手并戴上新手套。4.3.4 禁止采用口腔吸液管，必须使用移液器来操作实验室所有液体。4.3.5 操作中有标本、检测试剂外溅时应及时消毒。对大量溅出浓度高传染物在清洁之前应先用1%次氯酸
11、钠溶液浸泡，然后戴上手套擦净。4.3.6 工作完毕，要对工作台面消毒。工作台面应当用0.1%?0.2%次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；4.3.7 工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作衣，用肥皂和流动水洗手。4.3.8 血清及其它体液样品均应严格按要求妥善保存，HIV抗体阳性样品应做好标记单独保存。4.4 避免利器使用4.4.1 尽量避免在实验室使用针头、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺伤。如果必须使用，在处理或清洗时应采取措施防止刺伤或划伤，并应对用过物品进行消毒处理。4.4.2 尽量使用安全针具采血，如蝶形真空针，自毁性针具等，以降低直接接触血液和刺伤危险性。4.4.3 应将
12、用过锐器直接放入耐刺、防渗漏利器盒，针头直接放入坚固容器内，消毒后废弃。禁止将使用后一次性针头重新套上针头套。禁止用手直接接触使用后针头、刀片等锐器。4.5 样品采集 所有血液、血清、未固定组织和组织液样品，均应视为有潜在传染性，都应以安全方式进行操作。4.5.1 应象操作未知传染风险样品一样，小心存放、拿取和使用所有可能有传染性质量控制和参考物质。用后包裹应进行消毒。4.5.2 采血时一定要注意安全，采血用一次性注射器，谨慎操作，防止发生刺伤皮肤和造成外界污染。4.5.3 如用滤纸采样，则手指或耳垂局部消毒严格按常规进行。在刺破皮肤后，迅速把滤纸沾上，切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。采
13、血后要待血样干燥后再包装送检。4.5.4 离心机要使用密闭罐和密封头，以防液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。4.6 带入和带出实验室物品4.6.1 对所有带入实验室物品都应进行检查。含有测试样品包裹应在安全柜或送到合适实验室方可打开，不能在收发地点和仓库等地点打开，应有合适包装（见第一章）并有醒目标记。包裹必须在下列情况下才能打开：人员在处理感染源方面受过训练；具有处理感染源设备实验室；穿戴防护衣工作人员；用后置可消毒容器中。4.6.2 打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留样品移出，对样品管和盛器消毒，同时要报告有关领导
14、和专家。4.6.3 检查样品状况，记录有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。如果污染过重或者认为样品不能被接受，则应将样品安全废弃。要将情况立即通知送样人。4.6.4 对血液和体液常规操作要在工作台上进行。样品处理时若内容物有可能溅出，则应在生物安全柜中戴手套进行。同时应戴口罩、防护眼镜，以防皮肤或粘膜污染。4.6.5 在将样本转到其它实验室时，运送样本时应防止对工作人员、患者或环境造成污染。护送样品人应明确接收地点和接收人，实验室负责人或其指定人员应及时确认样品已送达指定实验室，被转入安全位置并得到妥善处理。4.6.6 污染或可能造成污染材料在带出实验室前应进行消毒。4.6.7
15、用于国际空运样品要按照国际空运协会（IATA）规则进行包装和标记，并提交相应资料。5 废弃物处置和消毒5.1 废弃物处置5.1.1 废弃物处置应符合实验室生物安全通用要求（GB 19489-2004）和消毒技术规范（2002年版）。5.1.2 从病毒血清学实验室出来所有废弃物，包括不再需要样品、培养物和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用密封防漏容器中，安全运至消毒室，并在高压消毒后再进行处理或废弃。5.2 HIV常用消毒方法5.2.1 物理消毒方法5.2.1.1 高压蒸汽消毒，121，保持15-20min; 5.2.1.2 干燥空气烘箱消毒（干烤消毒），140，保持2-3h。5.2.2
16、 HIV常用化学消毒方法 HIV最常用化学消毒剂是含氯消毒剂（次氯酸钠，含有效氯2000-5000mg/L）、75%乙醇和2%戊二醛，保持10?30 min。5.2.2.1 废弃物缸：5000mg/L 次氯酸钠。5.2.2.2 生物安全柜工作台面和仪器表面：75%乙醇。5.2.2.3 溢出物：5000mg/L次氯酸钠。5.2.2.5 污染台面和器具：2000mg/L 次氯酸钠,也可以用过氧化氢或过氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒6 实验室意外和事故处理6.1 意外和事故6.1.1 意外是指发生了未导致个人伤害偶然发生危险，但也可能已经发生了伤害。6.1.2 事故是指发生了人身伤害。意外和事故都可
17、被分为小型和重大。6.1.3 小型意外：少量潜在传染性物质漏到椅子上，常用于这种情况有效处理措施是消毒污染处。6.1.4 重大意外：任何情况下，如果怀疑有严重性意外，都将被视为重要，实验室必须被清空，锁上，并且实验室管理者要请教安全专家，听从他们意见。6.2 意外和事故紧急处理措施 发生意外事故时，应立即进行紧急处理，并报告实验室负责人。 6.2.1 皮肤针刺伤或切割伤：立即用肥皂和大量流水冲洗，尽可能挤出损伤处血液，用70%乙醇或其它消毒剂消毒伤口。6.2.2 皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，并用适当消毒剂浸泡，如70%乙醇或其它皮肤消毒剂。6.2.3 粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲
18、洗污染部位。6.2.4 衣物污染：尽快脱掉污染衣物，进行消毒处理。6.2.5 污染物泼溅：发生小范围污染物泼溅事故时，应立即进行消毒处理。发生大范围污染物泼溅事故时，应立即通知实验室主管领导和安全负责人到达事故现场查清情况，确定消毒程序。6.2.6 低温蒸汽甲醛气体消毒6.2.6.1 由于甲醛有致癌作用，不宜用于生物安全柜和实验室常规空气消毒。6.2.6.2 如果实验室一旦发生了重大泼溅事故，应按严重情况处理，并采取以下措施：（1）从污染处疏散人员，但要防止污染扩散；（2）控制污染锁门并防止进一步进入；（3）通知实验室主管领导、安全负责人等，以便查清情况，确定消毒处理程序；（4）如果认为合适，
19、可进行生物安全柜和/或实验室低温蒸汽甲醛气体消毒，但生物安全柜和/或实验室必须有可靠密闭性能，人员必须完全离开。【生物安全柜：25ml福尔马林和等量水混合后放在一个蒸发皿中使其在密封生物安全柜中蒸发，保持至少6h，最好过夜。实验室：福尔马林和水体积根据实验室大小而定】。具体操作可按说明书执行。（5）发生溢出后应离开房间约30分钟。 穿防护服，被溅地方用经消毒剂浸泡吸水物质覆盖；消毒剂起作用1015分钟后清理该地方。移走吸水性物质，用消毒剂冲洗该地方。6.3 意外和事故登记、报告和检测6.3.1 重大意外和事故必须进行登记，内容包括：6.3.1.1 意外和，事故发生时间、地点及详细经过。6.3.
20、1.2 处理方法和经过，包括专家或领导赴现场指导和处理情况。6.3.1.3 随访检测日期、项目和结果。6.3.2 意外和事故报告和检测6.3.2.1 发生重大事故时，在紧急处理同时要立即向主管领导和专家报告。同时抽血检测HIV抗体，暴露后4周、8周、12周、6个月要定期检测。6.3.2.2 发生小型事故时可在紧急处理后立即将事故情况和处理方法报告主管领导和专家。7职业暴露后预防7.1 职业暴露职业暴露是指医务工作者、实验室工作人员及有关监管人员在从事诊断、治疗、护理、预防、检验、管理工作过程中，暴露于血液、体液和实验室培养液，即暴露于含有病毒液体等引起危害。7.2职业暴露后预防职业暴露后预防（
21、Postexposure Prophylaxis，PEP）应包括急救、对暴露级别评估、暴露源严重程度评估、预防性用药推荐处理方案、报告与保密。7.2.1 急救处理7.2.1.1 刺激出血：职业暴露紧急处理，只要情况允许，应实行急救。如皮肤有伤口，应当反复轻轻挤压，尽可能挤出损伤处血液。7.2.1.2 肥皂和清水冲洗伤口或沾污皮肤。如果是粘膜暴露，应用生理盐水（或清水）反复冲洗。7.2.1.3 受伤部位消毒与包扎：伤口应用消毒液（如75%酒精、2000mg/L 次氯酸钠、0.2%?0.5%过氧乙酸、0.5%碘伏等）浸泡或涂抹消毒，并包扎伤口。7.2.1.4 由于暴露后有无采取急救措施对职业暴露后
22、HIV感染有一定影响，故应尽量为受伤者寻找医疗机构，以求正确护理伤口和暴露后急救处理。7.2.1.5 可介绍已发生职业暴露人员到艾滋病防治机构进一步咨询和处理。7.2.2 暴露级别（Exposure Code）评估，分为1、2、3级。7.2.3 确定暴露源头严重程度，分为轻度、重度和不明。7.2.4建立职业暴露登记和监测制度（1）职业暴露登记制度：职业暴露事故事故发生单位应建立“艾滋病职业暴露人员个案登记表”，对职业暴露情况进行登记、保存和上报。详细记录职业暴露发生时间、地点及经过；暴露方式；损伤具体部位、程度；暴露物种类（培养液、血液或其它体液）和含有HIV情况；处理方法及处理经过（包括赴现
23、场专家或领导活动）。（2）监测暴露源：如果暴露源没有阳性或阴性血清学化验结果应立即检测，最好做快速试验，因其结果可在几十分钟内得到。如果暴露源有急性HIV综合征症状，应同时检测病毒载量。（3）监测职业暴露者：由本省HIV监测（或确认）中心抽血检测职业暴露者HIV-1/2抗体（包括做快速试验），该血清留样备用。如果职业暴露者以前已有HIV抗体化验结果，则应加以记录。暴露后1年内要定期监测HIV抗体，即分别在暴露后4周、8周、12周、6个月监测。结果填写在报来“艾滋病职业暴露人员个案登记表”内。7.2.5 保密和报告制度（1）保密：无论职业暴露、重大事故或小型事故，对涉及职业暴露者，均应注意做好保密工作。每一个得到信息机构或个人均应做好保密工作。（2）报告制度：各职业暴露处理单位及时将填报“艾滋病职业暴露人员个案登记表”报至本院防保科。
