1、实验八 镇痛药和解热镇痛药实验 动物疾病模型的复制:动物疾病模型的复制是用人为的方法,使动物在一定的致病因素(物理的、化学的、生物的)作用下,造成动物组织或全身一定损害,出现某些类似人类疾病的功能、代谢、形态结构方面的变化或各种疾病,通过这种手段来研究人类疾病的饿发生、发展规律,为研究人类疾病的预防、治疗提供理论依据。模型复制方法(一) 生物学法 通过接种细菌、病毒、寄生虫、细胞、生物毒素、激素等各种致疾病原,而使正常动物发生疾病。(二) 物理学法 通过施加各种物理因素,使动物发生疾病。例如用电刺激小鼠尾部,产生疼痛,以其嘶叫为痛反应指标。用加热来刺激动物躯体的某一部分,使其产生痛反应。(三)
2、 化学方法 化学因素可直接或间接对机体产生有害作用。如用强酸、强碱可导致皮肤损伤,醋酸腹腔注射可引起小鼠疼痛,出现扭体反应。目前国内外筛选镇痛药的常用的致痛方法有:1. 械刺激法 2. 电刺激法 3. 热板法 4. 化学物质刺激法【实验目的】1掌握用腹腔注射刺激性物质,引起扭体反应,来筛选镇痛药物的方法和用一定温度刺激动物某一部位,来筛选镇痛药物的方法。2观察度冷丁和阿司匹林的镇痛效应及比较。【实验材料】1. 器材:小鼠固定器、天平、注射器、秒表、恒温水浴锅、大烧杯2. 药品:0.6%醋酸溶液、0.25%度冷丁溶液、4%阿司匹林混悬液、生理盐水、苦味酸3. 动物:小白鼠【方法步骤】1. 化学刺
3、激法和结果记录:第一步:取1822g小鼠6只,称重,编号,随机均匀分为3组,每组两只第二步:按下表操作鼠号药品剂量给药途径30分钟后(0.6%醋酸溶液)1号2号0.25%度冷丁溶液0.15ml/10g皮下注射0.2ml/10g3号4号4%阿司匹林混悬液0.15ml/10g灌胃注射0.2ml/10g5号6号生理盐水0.15ml/10g皮下注射0.2ml/10g 第三步:15分钟后记录结果并计算两药的镇痛百分率。 组号药品扭体反应数无扭体反应数 1组度冷丁2组阿司匹林 3组生理盐水计算公式如下: 实验组无扭体反应动物数-对照组无扭体反应动物数药物镇痛百分率= 100% 对照组扭体反应动物数(二)热
4、板法【方法步骤】第一步:筛选小白鼠 先将恒温水浴加温水,使大烧杯底部接触水面,控制温度在55 度上下。取雌性小鼠若干只,逐一将小鼠放入大烧杯内,并立即用秒表记录自 小鼠入烧杯始,到出现舔后足的时间(为潜伏期)作为痛阈指标。4分钟后重 新测试,如果两次痛觉反应均为1030秒内为合格。并计算每只小鼠的痛阈 的平均值作为给药前的痛阈值。第二步:取合格小白鼠6只,随机均匀分为3组,每组2只第三步:按下表给药鼠号药品剂量给药途径1号2号0.25%度冷丁溶液0.15ml/10g皮下注射3号4号4%阿司匹林混悬液0.15ml/10g灌胃注射5号6号生理盐水0.15ml/10g皮下注射给药后分别在5、10、2
5、0、30和60 分钟测定各鼠的痛阈值一次。【实验结果】鼠号药品药前痛阈值(秒)药后阈值(秒)及提高率5 10 20 30 60 1组度冷丁2组阿司匹林3组生理盐水【注意事项】化学刺激法1醋酸应新鲜配制。2室温不能低于10度,否则不易出现扭体反应。3给药组比对照组减少扭体反应发生率50%以上才能认为有镇痛效力。热板法1热板法选用雌性小鼠,因为小鼠受热时睾丸下垂,阴囊触及热板而导致反应过敏,影响测定的准确性。2小鼠舔后足为痛觉反应指标。3用药后,小鼠痛阈超过60秒,即表示有镇痛作用,立即将小鼠拿出,避免烫伤足部而影响结果。4温在1520度为宜。过低,小鼠反应迟钝,过高则敏感性增强。5一般小鼠放入烧杯内1015秒内,有舔后足、踢后肢,跳跃等现象,不作为痛阈指标。