1、 1 实验专题复习提纲实验专题复习提纲 一、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 1、原理 还原糖斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀砖红色沉淀； 脂肪苏丹/溶液橘黄色橘黄色/红色红色； 蛋白质+双缩脲试剂 紫色 淀粉碘液蓝色蓝色 2、注意事项 还原糖鉴定实验材料要求 (1)浅色浅色：不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰。 (2)还原糖含量高还原糖含量高：不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗甜菜(含蔗糖)。 唯一需要加热唯一需要加热：还原糖鉴定，且必需水浴加热，水浴加热，不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。 非还原糖(如蔗糖)斐林试剂 水浴 加热
2、 现象不是无色而是浅蓝色浅蓝色（Cu(OH)2的颜色）。 .唯一可能唯一可能需要显微镜显微镜：脂肪鉴定；实验用 50%酒精的作用：洗掉浮色。洗掉浮色。 .斐林试剂：混合后加入且现配现用混合后加入且现配现用；双缩脲试剂：分别加入分别加入(先加先加 A 液，后加液，后加 B 液，且液，且 B 液不能过量液不能过量)。 两者成分相同，但 CuSO4 的浓度不同的浓度不同。 二、用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体二、用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 1、实验原理 （1）叶绿体一般是绿色的、扁平的椭球形或球形绿色的、扁平的椭球形或球形，不需染色，制片后直接观察。 （2）健那绿染液健那绿染液是专一性染线粒体的活
3、细胞染料，可以使活细胞中的线粒体线粒体呈现蓝绿色蓝绿色，而细胞质细胞质 接近无色无色。 2、实验注意事项 （1）观察线粒体与叶绿体均需保持细胞活性状态持细胞活性状态。 （2）选材：菠菜叶稍带些叶肉的下表皮菠菜叶稍带些叶肉的下表皮，细胞排列疏松，易撕取，叶绿体数少，个体大叶绿体数少，个体大。藓类叶片藓类叶片， 叶片薄，仅有一两层叶肉细胞直接制片观察直接制片观察。 三、观察植物细胞的质壁分离及复原三、观察植物细胞的质壁分离及复原 1、质壁分离的原因 （1）外界溶液浓度外界溶液浓度 细胞液浓度细胞液浓度 （2）原生质层原生质层相当于半透膜半透膜，原生质层伸缩性伸缩性大于细胞壁。 2、实验步骤 3、注
4、意事项 2 （1）该实验中，实验组和对照组在同一装片中先后进行，属于自身对照。自身对照。 （2）实验时要选择紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞原因细胞液中含有色素，使液泡呈现紫色细胞液中含有色素，使液泡呈现紫色，更有利于观察。 （3）适宜浓度的 KNO3KNO3 溶液或尿素、甘油溶液或尿素、甘油等会出现先发生质壁分离后又自动复原原因 K 和 和 NO 3等 等可被细 胞吸收，从而使细胞液浓度细胞液浓度增大。 （4）引流法：从盖玻片的一侧滴入蔗糖一侧滴入蔗糖，在另一侧用吸水纸吸引另一侧用吸水纸吸引，重复几次重复几次，使洋葱鳞片叶表皮浸润在 蔗糖中。 （5）质壁分离后在细胞壁和细胞膜之间的是浓度降低的外界溶
5、液浓度降低的外界溶液。 四、验证酶的高效性和专一性四、验证酶的高效性和专一性 1、原理 （1）与无机催化剂相比，酶降低化学反应的活化能更显著降低化学反应的活化能更显著，催化效率更高催化效率更高； （2）酶只能缩短缩短达到化学平衡所需的时间化学平衡所需的时间，不改变不改变化学反应的平衡点平衡点。 2、注意事项 （1）利用淀粉、蔗糖和淀粉酶验证酶专一性时，不能用碘液碘液检测试剂，原因是加碘液无法判断蔗糖是否加碘液无法判断蔗糖是否 被水解被水解。 （2）验证酶专一性时，各实验组均在 37 的恒定温度下进行的原因是：37 是是唾液淀粉唾液淀粉酶的适宜温酶的适宜温 度度 排除温度变化排除温度变化(无关变
6、量无关变量)对实验结果的影响对实验结果的影响。 五、五、 探究温度和探究温度和 PH 对酶活性影响对酶活性影响 1、原理 （1）探究温度对酶活性影响 鉴定原理：温度影响酶的活性，从而影响淀粉的水解，滴加碘液，根据是否出现蓝色及蓝色的深浅是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断判断 酶的活性酶的活性。 (2)探究 pH 对酶活性的影响 反应原理(用反应式表示)：2H2O2 过氧化氢酶2H2OO2。 鉴定原理：pH 影响酶的活性，从而影响氧气的生成速率，可用带火星的卫生香燃烧的情况带火星的卫生香燃烧的情况来检验验 O2 的生成速率的生成速率。 2、实验注意事项 （1）应将酶和反应物分别达到预设温度分别达到预
7、设温度和和 PH 后再混合后再混合，因为酶具有高效性，把酶和反应物混合后就会 立即发生催化反应。 （2）探究温度对酶活性影响时，不能利用斐林试剂斐林试剂作检测实验 试 剂 应 选 碘碘 液液，因为利用斐林试剂需要水浴加热，斐林试剂需要水浴加热，会改变各试管的温度，改变各试管的温度，最终影响实验结影响实验结 果果。 （3）探究温度对酶活性影响时，不宜用过氧化氢过氧化氢作探究温度探究温度对酶活性的影响对酶活性的影响 材料，因为过氧化氢不稳定因为过氧化氢不稳定，在高温下易分解，在高温下易分解，这样实验的变量不唯一。 （4）不能利用淀粉、淀粉酶和斐林试剂探究 pH 对酶活性的影响，原因是酸性条件下淀粉
8、会水解，会对实酸性条件下淀粉会水解，会对实 验结果造成干扰验结果造成干扰。 六、探究酵母菌的呼吸方式六、探究酵母菌的呼吸方式 1、实验原理 （1）酵母菌酵母菌是一种单细胞真菌单细胞真菌，代谢类型兼性厌氧型兼性厌氧型即既能进行有氧呼吸又能进行无氧呼吸。 3 （2）CO2 的检测与澄清的石灰水变浑浊澄清的石灰水变浑浊或与麝香水酚蓝水溶液麝香水酚蓝水溶液反应由蓝变绿再变黄由蓝变绿再变黄。根据浑浊程度或由浑浊程度或由 蓝变绿再变黄的时间蓝变绿再变黄的时间来判断培养液产生 CO2 多少。 （2）酒精酒精的与橙色酸性重铬酸钾橙色酸性重铬酸钾反应变为反应变为灰绿色灰绿色。 2、实验装置 3、实验现象 甲乙两
9、装置中澄清的石灰水都变浑浊都变浑浊，且甲中浑浊程度高且快甲中浑浊程度高且快。 从甲乙两装置中 A、B 锥形瓶中取样液锥形瓶中取样液，用酸性重铬酸钾检验 B 锥形瓶样液出现灰绿色，而 B 瓶中样液没 有。 4、实验结论 酵母菌在有氧和无氧条件下都能进行细胞呼吸。 在有氧条件下产生大量 CO2，在无氧条件下酒精和 CO2。 5、注意事项 （1）甲装置质量分数 10%NaOH 作用：吸收空气中吸收空气中 CO2，以免影响实验结果。 （2）乙装置放置一段时间后，再连接澄清石灰水的原因：保证引起澄清石灰水变浑浊是由于无氧呼吸产保证引起澄清石灰水变浑浊是由于无氧呼吸产 生的二氧化碳所致。生的二氧化碳所致。
10、 七、叶绿体色素的提取和分离七、叶绿体色素的提取和分离 1、原理 （1）绿叶中色素能够溶解在无水乙醇色素能够溶解在无水乙醇等有机溶剂 （2）不同色素在层析液中溶解度不同，溶解度大的色素随着层析液在滤纸条扩散速度快，反之则慢，分 离方法纸层析法纸层析法 2、步骤 2、实验结果 4 八、观察植物根分生区的有丝分裂八、观察植物根分生区的有丝分裂 1、材料选择 取材部位应选 分裂旺盛的部位分裂旺盛的部位，如根尖分生区根尖分生区 选择 分裂期占细胞周期的比例分裂期占细胞周期的比例相对相对 大大 的细胞，易观察到分裂期的细胞。 2、实验步骤 （1）根尖的培养： （2）装片的制作 解离解离：剪取洋葱根尖 2
11、3mm，放入盛有质量分数为 15%的盐酸和体积分数为的盐酸和体积分数为 95%的酒精的酒精混合液的玻璃 皿中，解离 3-5min。 解离的目的是：使组织细胞相互离使组织细胞相互离。 漂洗：漂洗：将根尖放入盛有清水清水的玻璃皿中漂洗约 10min。 漂洗的目的是防止解离过度和影响染色防止解离过度和影响染色。 染色：染色：把根尖放在盛有 0.01g/mL 龙胆紫溶液龙胆紫溶液的玻璃皿中染色 3-5min。 制片：制片：将根尖放一片载玻片中央，用镊子将根尖捣碎根尖捣碎，盖上盖玻片盖上盖玻片，再加一片载玻片再加一片载玻片，用拇指轻压，去 掉载玻片再观察。 （3）显微镜观察 在低倍镜下观察到的兰花根尖分
12、生区细胞的特点是_细胞呈正方形，排列紧密细胞呈正方形，排列紧密_；在高倍镜下看到的细胞 大部分处于细胞分裂的间期，原因是间期在一个细胞周期中所占的比例最大间期在一个细胞周期中所占的比例最大。 九、观察蝗虫的减数分裂九、观察蝗虫的减数分裂 材料选择：如蚕豆幼嫩的雄蕊、蝗虫的精巢 提示：(1) 雄性个体产生的精子数多于雌性个体产生卵细胞数雄性个体产生的精子数多于雌性个体产生卵细胞数，如桃花的雌蕊就不能选择 (2)在大多数动物卵巢内的减数分裂没有进行彻底减数分裂没有进行彻底， 排卵时排出的仅仅是次级卵母细胞， 只有和精子相遇后， 在精子的刺激下，才继续完成减数第二次分裂，如小鼠的卵巢就不能选择。 十
13、、十、调查人群中的发病率和遗传方式调查人群中的发病率和遗传方式 1.调查遗传病的发病率： 1. 在广大人群广大人群中随机取样随机取样，调查的人群数量要足够大。调查完之后进行分析。 2.调查遗传病的遗传方式： （1）选发病率高发病率高的单基因遗传病单基因遗传病 （2）到患者家系患者家系中调查，画出遗传系谱图进行分析。 十十一一、探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 1、实验原理： （1）用液体培养基培养酵母菌，种群的数量增长受_培养液的成分、空间、培养液的成分、空间、pH、温度、温度_等因素的影响。 （2）在理想环境中，酵母菌种群的增长呈_J_型曲线；在有限的
14、环境条件下，酵母菌种群的增长呈_S_型 曲线。在恒定培养液中当酵母菌种群数量达 K 值后，还会转而下降直至全部死亡(原因_营营养物质消耗、代养物质消耗、代 谢产物积累及谢产物积累及 pH 变化所致变化所致_) （3）计算酵母菌数量可用抽样检测法抽样检测法显微计数法。显微计数法。 2.实验注意事项 （1）从试管中吸出培养液进行取样时，需将试管轻轻振荡几次，目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，使培养液中的酵母菌均匀分布， 减小误差。减小误差。 （2）制片时，先将盖玻片盖玻片放在血球计数板上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。 多余培养液用滤纸吸去，待酵母菌全部沉降到计数室底部待酵母
15、菌全部沉降到计数室底部再用显微镜进行观察、计数。 （3） 本实验_不需要不需要_设置对照实验， 原因_在时间上形成前后自身对照在时间上形成前后自身对照_； 本实验_ 需要需要 做重复实验， 5 目的是_尽量减少误差，需对每个样品计数三次，取其平均值尽量减少误差，需对每个样品计数三次，取其平均值 。 （4）培养后期的样液中菌体密度较大，因此要_稀释后取样计数稀释后取样计数_，计算时乘以稀释倍数乘以稀释倍数。 （5）血球计数板使用后，可采用 浸泡和冲洗浸泡和冲洗 的方法，然后自行晾干，但清洗切勿用硬物洗刷。 十十二二、探究生长素类似物促进扦插枝条最适宜的的浓度探究生长素类似物促进扦插枝条最适宜的的
16、浓度 1. 自变量：生长素类似物浓度生长素类似物浓度 因变量：扦插枝条生根的平均长度和扦插枝条生根的平均长度和数量数量 无关变量：如插条处理的方法、处理的时间、植物枝条的长度、生理状如插条处理的方法、处理的时间、植物枝条的长度、生理状况、枝条上保留芽数目、培养温度况、枝条上保留芽数目、培养温度 等。等。 2.材料的选取及枝条处理 要选取一年生的枝条，如月季、柳树等原因：因为一年生的枝条形成层细胞分裂能力强、发育快、易成活。细胞分裂能力强、发育快、易成活。 将准备好的枝条剪成长度要一致，粗细相同长度要一致，粗细相同，去掉大部分叶片的枝条，各个枝条的芽体数和叶片的数量尽芽体数和叶片的数量尽 量一样
17、多量一样多，且插条下端要削成斜面削成斜面原因：增加吸水和生根的面积增加吸水和生根的面积,促进成活。促进成活。 插条处理方法插条处理方法: (1)浸泡法:把插条的_基部基部_浸泡在配制好的溶液中,深约 3 cm,处理几小时至一天。(要求溶液的浓度_较低较低 _,并且最好是在遮阴和空气湿度较高的地方进行处理。) (2)沾蘸法:把插条基部在_浓度较高浓度较高_的药液中蘸一下(约 5 s),深约 1.5 cm 即可。 小结：小结：1.颜色反应的实验 颜色 原理 红 还原糖斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀； 脂肪苏丹溶液红色； RNA吡罗红溶液红色； 染色体(质)醋酸洋红液红色； 叶绿素 a 和叶绿素 b
18、主要吸收红光和蓝紫光 黄 脂肪苏丹溶液橘黄色； 叶绿体中色素分离中的滤纸条：胡萝卜素橙黄色，叶黄 素黄色 溴麝香草酚蓝+CO2蓝绿黄 绿 DNA甲基绿溶液绿色； 线粒体健那绿染液蓝绿色； 酒精橙色的重铬酸钾溶液 在酸性条件下灰绿色； 叶绿体中色素分离中的滤纸条：叶绿素 b黄绿色，叶绿 素 a蓝绿色 6 蓝 淀粉碘液蓝色； DNA二苯胺试剂 沸水浴加热蓝色 紫 染色体(质)龙胆紫溶液紫色； 蛋白质双缩脲试剂紫色； 叶绿体中的 4 种色素主要吸收蓝紫光 2. 常见药品的使用比较 (1)酒精 比较项目 实验 作用 50%的酒精 检测生物组织中的脂肪 脂肪鉴定中洗去浮色 75%的酒精 微生物的实验室培
19、养 用于杀菌消毒 无水乙醇 叶绿体中色素的提取与 分离 提取叶绿体中的色素 95%的酒精 观察细胞有丝分裂 解离液(质量分数为15%的 盐酸和体积分数为 95%的 酒精等体积混合) 鉴定光合作用产物淀粉 脱色 DNA 粗提取和鉴定 使 DNA 析出除去溶于酒 精杂质 （2）其他常用试剂 试剂名称 实验 作用 0.3 g mL 1 蔗糖溶液 使植物细胞刚好发生质 壁分离且对细胞无伤害 植物细胞的质壁分离及复 原实验 层析液 溶解并分离色素 绿叶中色素的分离 二氧化硅(石英砂) 使研磨充分 绿叶中色素的提取 碳酸钙 防止色素被破坏 高中生物技术方法归纳总结高中生物技术方法归纳总结 (1)显微观察法
20、观察多种多样的细胞、观察线粒体和叶绿体、观察细胞有丝分裂、减数分裂、观察质壁 分离及质壁分离复原、观察染色体变异等。 (2)差速离心法分离各种细胞器、制备细胞膜等。 (3)对比实验法设置两个或两个以上的实验组通过对结果的比较分析，探究某种因素对实验结果的影 响，如“探究酵母菌细胞呼吸的方式”及“酶作用特性相关实验”等。 7 (4)密度梯度离心法用 15N 标记 DNA，证明 DNA 半保留复制(重带、轻带、中带等)。 (5)细胞染色法活细胞染色(健那绿染色线粒体)；碘染色法(证明光合作用产生淀粉)；死细胞染色(醋酸 洋红液、龙胆紫溶液、改良苯酚品红染液、甲基绿吡罗红溶液)。 (6) 放 射 性
21、 同 位 素 标 记 法 分 泌 蛋 白 形 成 ； 光 合 作 用 H218O 、 C18O2探 究 O2中 放 射 性 ： 14CO 2 14C 3( 14CH 2O)；噬菌体侵染细菌实验( 32P、35S)；基因诊断等。 (7)纸层析法叶绿体中色素的提取与分离(选修 1，胡萝卜素的提取与鉴定)。 (8)浓度梯度设置实验探究生长素对扦插枝条生根的最适浓度；探究酶活性的最适温度和最适 pH。 (9)假说演绎法孟德尔两大定律的发现；摩尔根证明基因在染色体上(用白眼雄果蝇为材料)；DNA 半 保留复制方式的证明。 (10)类比推理法萨顿提出“基因在染色体上”。 (11)样方法估算植物及活动能力弱的动物(如蚯蚓、蚜虫、昆虫卵等)种群密度。 (12)标志重捕法估算活动能力强的动物种群密度。 (13)取样器取样法探究土壤动物类群丰富度。 (14)抽样检测法探究培养液中酵母菌种群数量的变化。 (15)模型构建法构建细胞亚显微结构物理模型，构建 DNA 双螺旋结构物理模型，构建光合模型、种群特 征、细胞分裂等概念模型，构建种群增长两种数学模型(公式、“J”型、“S”型曲线)，构建减数分裂、血 糖调节过程物理模型
