1、适合专业（群）：食品加工技术专业群 教师：万国福食品微生物技术实训项目教程实训项目教程行动领域任务一 菌落总数测定菌落总数测定任务二 大肠菌群检验大肠菌群检验任务三 霉菌、酵母菌检验霉菌、酵母菌检验任务四 乳酸菌检验乳酸菌检验前期准备试管、平皿和吸量管包扎灭菌行动领域任务一 菌落总数测定菌落总数测定一、目的要求 1、学习活菌计数的计数方法。2、掌握食品细菌总数的测定报告方式。二、实验原理 本实验采用平板计数技术测定水中细菌总数。细菌总数主要作为判定被检水样污染程度的标志，是指1mL水样在肉膏蛋白胨琼脂培养基中，置37经24小时培养后，所生长的细菌菌落的总数。三、实验材料 1、培养基：LST培养
2、基、GLGB培养基 2、器皿：已灭菌的1mL吸管，试管（15150），三角锥瓶500mL、三角锥瓶500mL（内装蒸馏水225mL），10mL吸管 3、其他：牛皮纸或报纸，酒精灯，棉花，高压蒸汽菌锅，电烘箱，线绳，毛刷等四、操作方法1、样品的采样 依据取样原则采样。2、细菌总数测定 （1）稀释水样 以无菌操作，将检样25mL放于含有225mL灭菌水的三角锥瓶中，摇匀，做成1：10的均匀稀释液。三、实验器材1、培养基：平板计数琼脂培养基2、器皿：已灭菌的平皿，1mL吸管，试管（15150），三角锥瓶500mL、三角锥瓶500mL（内装蒸馏水225mL），10mL吸管3、其他：牛皮纸或报纸，酒精灯
3、，棉花，高压蒸汽菌锅，电烘箱，线绳，毛刷等 取一支lmL吸管插入吸取110稀释液1ml注入含有9mL灭菌水的试管内，振摇试管，混合均匀，做成1100稀释液。另取1mL灭菌吸管按上述操作顺序操作10倍递增稀释液，如此每递增释1次，即换用1支1mL灭菌吸管。分别吸取1mL，依次稀释 用每个稀释度的移液管吸1ml稀释液注入灭菌平皿内，每个稀释度三个平皿。10-110-210-3 稀释液移入平皿后，应及时将凉至46的肉汤蛋白胨琼脂培养基（可放置50水浴保温），倾注入平皿内，约15ml，并迅速转动平皿使之混合均匀。凝固后倒置于37培养箱中培养24小时后取出，计算平皿内菌落数目。3菌落计数方法（参见GB4
4、789.2-2010）（1）先计算相同稀释度的平均菌落数。若其中一个培养皿有较大片状菌苔生长时，则不应采用，而应以无片状菌苔生长的培养皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到培养皿的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘2以代表全培养皿的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数。（2）公式计算（3）若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数。（4）若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数。（5）若所有稀释度的平均菌落数均不在30300之间，则以最近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数。五、实验数据及结果将各稀释平板上的菌落数填入下表稀释度101102103平板号123平均123平均123平均菌落个数根据试验结果，报告检测结果：被检样品每1mL（g）中食品菌落总数为：。
