1、适合专业(群):食品加工技术专业群 教师:万国福食品微生物技术实训项目教程实训项目教程行动领域任务一 菌落总数测定菌落总数测定任务二 大肠菌群检验大肠菌群检验任务三 霉菌、酵母菌检验霉菌、酵母菌检验任务四 乳酸菌检验乳酸菌检验前期准备试管、平皿和吸量管包扎灭菌行动领域任务一 菌落总数测定菌落总数测定一、目的要求 1、学习活菌计数的计数方法。2、掌握食品细菌总数的测定报告方式。二、实验原理 本实验采用平板计数技术测定水中细菌总数。细菌总数主要作为判定被检水样污染程度的标志,是指1mL水样在肉膏蛋白胨琼脂培养基中,置37经24小时培养后,所生长的细菌菌落的总数。三、实验材料 1、培养基:LST培养
2、基、GLGB培养基 2、器皿:已灭菌的1mL吸管,试管(15150),三角锥瓶500mL、三角锥瓶500mL(内装蒸馏水225mL),10mL吸管 3、其他:牛皮纸或报纸,酒精灯,棉花,高压蒸汽菌锅,电烘箱,线绳,毛刷等四、操作方法1、样品的采样 依据取样原则采样。2、细菌总数测定 (1)稀释水样 以无菌操作,将检样25mL放于含有225mL灭菌水的三角锥瓶中,摇匀,做成1:10的均匀稀释液。三、实验器材1、培养基:平板计数琼脂培养基2、器皿:已灭菌的平皿,1mL吸管,试管(15150),三角锥瓶500mL、三角锥瓶500mL(内装蒸馏水225mL),10mL吸管3、其他:牛皮纸或报纸,酒精灯
3、,棉花,高压蒸汽菌锅,电烘箱,线绳,毛刷等 取一支lmL吸管插入吸取110稀释液1ml注入含有9mL灭菌水的试管内,振摇试管,混合均匀,做成1100稀释液。另取1mL灭菌吸管按上述操作顺序操作10倍递增稀释液,如此每递增释1次,即换用1支1mL灭菌吸管。分别吸取1mL,依次稀释 用每个稀释度的移液管吸1ml稀释液注入灭菌平皿内,每个稀释度三个平皿。10-110-210-3 稀释液移入平皿后,应及时将凉至46的肉汤蛋白胨琼脂培养基(可放置50水浴保温),倾注入平皿内,约15ml,并迅速转动平皿使之混合均匀。凝固后倒置于37培养箱中培养24小时后取出,计算平皿内菌落数目。3菌落计数方法(参见GB4
4、789.2-2010)(1)先计算相同稀释度的平均菌落数。若其中一个培养皿有较大片状菌苔生长时,则不应采用,而应以无片状菌苔生长的培养皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到培养皿的一半,而其余的一半菌落分布又很均匀时,则可将此一半的菌落数乘2以代表全培养皿的菌落数,然后再计算该稀释度的平均菌落数。(2)公式计算(3)若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数。(4)若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数。(5)若所有稀释度的平均菌落数均不在30300之间,则以最近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数。五、实验数据及结果将各稀释平板上的菌落数填入下表稀释度101102103平板号123平均123平均123平均菌落个数根据试验结果,报告检测结果:被检样品每1mL(g)中食品菌落总数为:。