1、实验:绿叶中色素的提取和分离实验:绿叶中色素的提取和分离 杨琪 一实验原理 实验中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇(丙酮,汽油,苯等)中,所以, 可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。 绿叶中的色素不止一种,他们都能溶解在层析液中。然而,它们在层析液中 的溶解度不同;溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快;反之则慢。这样,几分 钟之后绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。 且溶解度最高的 是胡萝卜素, 它随层析液在滤纸上扩散的最快; 叶黄素和叶绿素 a 的溶解度次之, 叶绿素 b 的溶解度最低,扩散的最慢。 二实验目的 1. 掌握提取和分离叶绿体色素的方法 2. 探究绿叶中含有几种色素 三实
2、验材料用具 材料:新鲜的绿色叶片(如菠菜的绿叶) 。无水乙醇,层析液,SiO2、CaCO3 用具:干燥的定性滤纸,烧杯(100ml),小试管,试管架,培养皿盖,棉塞, 研钵,玻璃漏斗,尼绒布,毛细吸管,剪刀,药勺,量筒(10ml),天 平,铅笔 四实验步骤 1.提取绿叶中的色素 取材:用天平称取 5g 的新鲜绿叶,剪碎,放入研钵中。向研钵中加入少许 SiO 2、CaCO3 ,再加入 10ml 无水乙醇,进行快速,充分的研磨。 过滤:将研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一块单层尼绒布)中进行过 滤。将滤液收集到小试管中,及时用棉塞将试管口塞严。 2.制备滤纸条 将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与
3、直径的滤纸条,将滤纸条的一端剪去 两角,并在距这一端 1cm 处用铅笔画一条细的横线。 3.画滤液细线 用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀的画出一条细线。待滤液干后,再 画一两次 4.分离绿叶中的色素 将适量的层析液倒入烧杯中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)略微倾斜 靠着烧杯的内壁,轻轻插入层析液中,随后用培养皿盖盖住烧杯口。注意, 不能让滤液细线触及层析液 5.观察与记录 几分钟以后,打开培养皿盖,取出滤纸条,干燥后观察滤纸条上的色素带, 以及每条色素带的颜色和宽度,将观测结果记录下来。 6观察结果分析结果:滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带(如下图) 最宽:叶绿素 a(蓝绿色) ;
4、最窄:叶绿素 b(黄绿色) ; 相邻色素带最近:叶绿素 a 和叶绿素 b; 相邻色素带最远:胡萝卜素(橙黄色)和叶黄素(黄色) 。 实验关键点实验关键点 1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶 等。 2.画滤液细线时,应以细、直、颜色浓绿为标准,重复画线时必须等上次画线干 燥衙再进行,重复 2-3 次。 3.层析时不要让滤液细线触及层析液。 实验总结实验总结 (1) 在研磨绿叶时,加入少许 SiO2 是为了研磨得充分,加入少许的 CaCO3 是为了防止研磨过程中色素受到破坏,加入 10ml 无水乙醇是使色素溶解 在其中,便于提取; (2) 因无水乙醇和层析液都
5、是易挥发且层析液是有一定毒性的有机溶剂,所以 研磨要快,收集的滤液要用棉塞塞住,层析时要加盖,尽量减少有机溶剂 的挥发。 (3)用毛细吸管画滤液细线时,线条越细越直效果越好,重复划几次的目的是 使滤液细线中含有较多的色素 (4)如果层析液浸没了滤纸条上的滤液细线,滤纸条上就不会出现色素带,其 原因是滤液细线中的色素溶解在了烧杯中的层析液中,会导致色素带不清 晰,影响整个实验的效果。 课堂巩固练习课堂巩固练习 1.提取高等植物叶绿体中的色素,在研磨时加入少量 CaCO3 的作用是 A调节 PH 值,加速叶绿素溶解B使叶片研磨充分 C调节 PH 值,保护叶绿素不被破坏D促使 4 种色素的分开 2通
6、过纸层析分离叶绿体色素,结果在滤纸条上出现四条色素带,从上而下依 次为: A胡萝卜素、叶黄素、叶绿素 a、叶绿素 b B胡萝卜素、叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素 C叶绿素 b、叶绿素 a、叶黄素、胡萝卜素 D叶黄素、叶绿素 a、叶绿素 b、胡萝卜素 3做色素提取和分离实验的正确装置是图中 4在叶绿体中色素的提取与分离实验中,扩散速度最快的色素是 A叶绿素 aB叶绿素 bC叶黄素D胡萝 卜素 5下列哪一种液体不能作为叶绿体中色素提取液? A丙酮溶液B酒精溶液C水溶液D汽油 6下面是有关叶绿体色素的提取和分离实验的问题,请回答: (1) 实验中加入研钵内的丙酮的作用是; 实验中加入研钵内的石英砂的
7、作用是; 实验中加 入研钵内的碳酸钙的作用是。 ( 2 ) 实 验 中 将 研 磨 液 倒 入 漏 斗 中 , 漏 斗 底 部 放 有。 (3)画滤液细线的要求是。 (4)层析时的关键注意事项是;加盖的目的 是;色素带最宽的是;扩散速 度最快的是。 7.某同学在做“叶绿体中色素的提取和分离”实验时,操作情况如下所述,结果 实验失败,请指出其错误所在: (1)将 5 克新鲜菠菜剪碎后,放入研钵中,加入酒精、石英砂后,迅速研磨。 (2)用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔细线小心均匀地划出一道滤液细线,并 连续迅速地重复划 2-3 次。 (3)把划好细线的的滤纸条插入层析液中,并不断振荡,以加快层析液在滤纸 条上的扩散。 8分别在 A、B、C 三个研钵中加入 2 克剪碎的新鲜菠菜绿叶,并按下表所示 添加试剂,经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液,即:深绿色、黄绿色(或褐 色) 、几乎无色。 处理ABC SiO2(少量) CaCO3(少量) 95乙醇(10 毫 升) 蒸馏水(10 毫升) 注: “”表示加; “”表示不加 试回答: (1)A 处理得到的溶液颜色是,原因 是。 (2) B 处理 得到的 溶液 颜色 是,原因 是。 (3)C 处理 得到的 溶液 颜色 是,原因 是。