1、技能训练1 实验室常用玻璃器皿洗刷、消毒和仪器使用 实训目标实训目标 q 熟悉各种玻璃器皿的洗刷和灭菌方法；q 了解传染病实验室常用仪器的构造；q 熟悉仪器的使用方法和注意事项。 仪器材料仪器材料 试管、刻度吸管、培养皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、量杯、漏斗、乳钵、普通棉花、脱脂棉、纱布、牛皮纸、旧报纸、新洁尔灭、来苏儿、石炭酸、肥皂粉、重铬酸钾、粗硫酸、盐酸、橡胶手套、橡胶围裙等； 电热恒温培养箱、电热干燥箱、高压蒸气灭菌器、电冰箱、电动离心机、电热恒温水浴箱等。 方法步骤方法步骤（一）玻璃器皿的洗刷、包装和消毒（一）玻璃器皿的洗刷、包装和消毒 （二）实验室常用仪器的使用（二）实验室常用仪器的使
2、用 （一）玻璃器皿的洗刷、包装和消毒（一）玻璃器皿的洗刷、包装和消毒1玻璃器皿的洗刷玻璃器皿的洗刷 2玻璃器皿的包装玻璃器皿的包装3玻璃器皿的灭菌玻璃器皿的灭菌1玻璃器皿的洗刷玻璃器皿的洗刷（1）新购入的玻璃器皿 用12盐酸溶液浸泡数小时或过夜,再用清水反复冲刷，最后用蒸馏水冲洗23次，倒立使之自然干燥或烘干。（2）一般使用过的器皿 可于用后立即用清水冲净。凡沾有油污的，可用肥皂水煮半小时后趁热刷洗，再用清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗23次，晾干。（3）载玻片 用毕立即浸泡于消毒液中，经12d取出，用洗衣粉液煮沸5min，再用毛刷刷去油脂及污垢，然后用清水冲洗，晾干或将洗净的玻片用蒸馏水煮沸，
3、趁热把玻片摊放在干毛巾或干纱布上，稍等片刻，玻片即干，保存备用或浸泡于95酒精中备用。（4）细菌培养用过的试管、平皿等 须高压蒸气灭菌后，倒去内容物，用热肥皂水刷去污物，然后用清水冲洗，最后用蒸馏水冲洗23次，晾干或烘干。（5）对污染有病原微生物的吸管 用后投入盛有消毒液（23来苏儿或5石炭酸）的玻璃筒内（筒底必须垫有棉花，消毒液要淹没吸管），经12d后取出，浸入2肥皂粉液中12h（或煮沸）取出，再用一根橡皮管，使一端接于自来水龙头，另一端与吸管口相接，用自来水反复冲洗 ，最后用蒸馏水冲洗。（6）如遇玻璃器皿用上述方法不能洗净者，可用下列清洗液浸泡后洗刷。 重铬酸钾（工业用）80g，粗硫酸10
4、0ml，水1000ml。（1）培养皿 将合适的底盖配对，用报纸6个一摞包成一包，装入金属盒内。（2）试管、三角烧瓶等 塞上大小适合的棉塞或纱布塞（也可用各种型号的软木塞），并在棉塞、瓶口之外，包以牛皮纸，用细绳扎紧即可。（3）吸管 用35cm宽的长纸条（旧报纸、牛皮纸等），由尖端缠卷包裹，直至包没吸管将纸条合拢。 （4）乳钵、漏斗、烧杯等 可用纸张直接包扎或用厚纸包严开口处，再以牛皮纸包扎。 2玻璃器皿的包装 常用干热灭菌法 将包装的玻璃器皿放入干燥箱内，为使空气流通，堆放不宜太挤，也不能紧贴箱壁，以免烧焦。一般160，维持2h。 灭菌完毕，关闭电源待箱中温度下降至60以下，开箱取出玻璃器皿。
5、 3玻璃器皿的灭菌（二）实验室常用仪器的使用（二）实验室常用仪器的使用 1电热恒温培养箱2电热干燥箱3高压蒸气灭菌器4电冰箱5电动离心机6电热恒温水浴箱1电热恒温培养箱 电热恒温培养箱又称温箱，主要由箱体、电热丝、温度调节器等构成。温箱主要用于细菌的培养、某些血清学试验及有关器皿的干燥等 （1）电热恒温培养箱使用方法插上电源插头，开启电源开关，绿色指示灯明亮，表明电源接通。然后把温控仪上的调节旋钮旋至所需温度刻度处，此时红灯亮，箱内开始升温，待红绿指示灯交替发亮时，工作室内温度达到设定状态，进入正常工作。应注意，近几年销售的温箱有的红灯亮表示通电及恒温，绿灯亮表示升温。 （2）电热恒温培养箱使
6、用注意事项 温箱必须放置于干燥及平稳处。使用时，随时注意温度计的指示温度是否与所需温度相同。除了取放培养物开启箱门外，尽量减少开启次数，以免影响恒温。工作室内隔板放置试验材料不宜过重、过密，以防影响热空气对流。底板为散热板，其上切勿直接放置物品。培养箱内禁止放入易挥发性物品，以免发生爆炸。 2电热干燥箱电热干燥箱又称干热灭菌箱，其构造和使用方法与温箱相似，但所用温度较高。主要用于玻璃器皿和金属制品的干热灭菌。灭菌时箱内放置物品要留空隙，保持热空气流动，以利彻底灭菌。常用灭菌温度160，维持2 h。灭菌时，关门加热应开启箱顶上的活塞通气孔，使冷空气排出，待升至60时，将活塞关闭，为了避免玻璃器皿
7、炸裂，灭菌后箱内温度降至60时，才能开启箱门取物品。若仅需达到干燥目的，可一直开启活塞通气孔，温度只需60左右即可。灭菌过程中如遇温度突然升高，箱内冒烟，应立即切断电源，关闭排气小孔，箱门四周用湿毛巾堵塞，杜绝氧气进入，火则自熄。 3高压蒸气灭菌器 高压蒸气灭菌器是应用最广、效率最高的灭菌器，有手提式、立式、横卧式三种，其构造和工作原理基本相同。 高压蒸气灭菌器为一锅炉状的双层金属圆筒，外筒盛水，内筒有一活动金属隔板，隔板有许多小孔，使蒸气流通。灭菌器上方或前方有金属厚盖，盖上有压力表、安全阀和放气阀。盖的边缘附有螺旋，借以紧闭灭菌器，使蒸气不能外溢。 在标准大气压下，水的沸点是100，这个温
8、度能杀死一般细菌的繁殖体，要杀死芽胞则需要很长时间。如果人为地加大压力，则水的沸点可以升高。因高压蒸气灭菌器是一个密闭的容器，加热时蒸气不能外溢，所以锅内压力不断增大，使水的沸点超过121。 （1）高压蒸气灭菌器使用方法 加适量水于灭菌器外筒内，使水面略低于支架，将灭菌物品包扎好放入内筒筛板上。 器盖盖上时，必须将器盖腹侧的放气软管插入消毒内筒的管架中，然后对称扭紧六个螺栓； 检查安全阀、放气阀，并使安全阀关闭，放气阀打开。 通电后，待水蒸气从放气阀均匀冒出时，表示锅内冷空气已排尽，然后关闭放气阀继续加热，待灭菌器内压力升至约1105Pa（121.3），开始计时，维持2030min（通过控制电
9、源维持），即可达到灭菌的目的。灭菌完毕，停止加热，待压力自动降至零时才能开盖取物。手提式高压蒸气灭菌器灭菌之后，可放出器内的水，并擦干净。 高压蒸气灭菌器使用方法视频（2）高压蒸气灭菌器使用注意事项 螺栓必须对称均匀旋紧，以免漏气。内筒中的灭菌物品，不可堆压过紧，以免妨碍蒸气流通，影响灭菌效果。凡能耐热和潮湿的物品，如培养基、生理盐水、敷料、病原微生物等都可应用此法灭菌。为了达到彻底灭菌的目的，灭菌时间和压力必须准确可靠，操作人员不能擅自离开。 注意安全，在高压灭菌密封液体时，如果压力骤降，可能造成物品内外压力不平衡而炸裂或液体喷出。 4电冰箱电冰箱主要由箱体、制冷系统、自动控制系统和附件四大
10、部分构成。实验室中常用以保存培养基、药敏片、病料以及菌种、疫苗、诊断液等生物制品。 电冰箱使用方法及注意事项 （1）电冰箱应放置在干燥通风处，避免日光照射，远离热源，离墙10cm以上，以保证对流，利于散热。（2）电冰箱电源的电压一般为220V，如不符合，须另装稳压器稳压。（3）通电检查箱内照明灯是否明亮，机器是否运转。（4）使用时将温度调节器调至一定刻度（冷冻室0以下，冷藏室温度410）。调节温度时不可一次调得过低，以免冻坏箱内物品。应作第二次、第三次调整。（5）冷冻室冰霜较厚时，按化霜按钮或切断电路，进行化霜，融化后清洁整理。（6）箱内存放物品不宜过挤，以利冷空气对流，使箱内温度均匀。（7）
11、箱内保持清洁干燥，如有霉菌生长，断电后取出物品，经福尔马林熏蒸消毒后，方可使用。5电动离心机实验室常用电动离心机沉淀细菌、血细胞、虫卵和分离血清等，较多用的低速离心机转速可达4000r/min。常用倾角电动离心机，其中管孔有一定倾斜角度，使沉淀物迅速下沉。上口有盖，确保安全，前下方装有电源开关和速度调节器，可以调节转速。 电动离心机使用方法及注意事项 （1）先将盛有材料的两个离心管及套管放天平上配平，然后对称放入离心机中，若分离材料为一管，则对侧离心管放入等量的其他液体。（2）将盖盖好，接通电路，慢慢旋转速度调节器到所需刻度，保持一定的速度，达到所需的时间（一般转速2000r/min，维持32
12、0min），将调节器慢慢旋回“0”处，停止转动方可揭盖取出离心管。6电热恒温水浴箱为镀镍的铜或不锈钢制成的水浴箱，加热快耗电省，箱前有“电源”和“加热”指示灯（一红一绿），并装有温度调节器，自37100可以调节定温，箱侧有一水笼头，供放水用。水浴箱主要用于蒸馏、干燥、浓缩、温渍化学药品及血清学试验用。 使用时必须先加水于箱内，通电后电源指示灯（绿灯）即亮，再顺时针方向旋转温度调节器，绿灯灭，使加热指示灯（红灯）亮，即接通内部电热丝，使之加温。如水温达到所需温度，再逆时针方向微微调节温度调节器，使红绿指示灯忽亮忽灭，经3060min观察，水温恒定不变即达到定温。如下次使用需要同样温度，可不必旋转调节旋钮，或记下所需刻度，以作下次转向之用。使用时，不可加水过多，以浸过加热容器为宜。加水少于最低水位，则箱旁焊锡溶化引起漏水。使用完毕，待水冷却后，必须放水擦干。 电热恒温水浴箱使用方法及注意事项 课后作业课后作业1.写出实习报告
