1、教学目标教学目标1、学会直接接种法无菌检查的操作。学会直接接种法无菌检查的操作。2、懂得无菌检查供试品溶液的制备。、懂得无菌检查供试品溶液的制备。 3、熟知无菌检查的结果判断。、熟知无菌检查的结果判断。4、学习薄膜无菌检查法的使用。学习薄膜无菌检查法的使用。5、掌握影响无菌检验的因素和解决办法。、掌握影响无菌检验的因素和解决办法。教学重点：教学重点：直接接种法无菌检查的操作。直接接种法无菌检查的操作。教学难点：教学难点：薄膜无菌检查法的使用。薄膜无菌检查法的使用。 第五节第五节 直接接种检查技术直接接种检查技术 药品无菌检查法的具体操作方法可分为直接接种法和薄膜药品无菌检查法的具体操作方法可分
2、为直接接种法和薄膜过滤法。过滤法。中国药典中国药典（20052005年版）指出：年版）指出：如供试品性状如供试品性状允许，应优先采用薄膜过滤法。进行供试品无菌检查时允许，应优先采用薄膜过滤法。进行供试品无菌检查时，所采用的检查方法和检验条件应与验证的方法相同。直接所采用的检查方法和检验条件应与验证的方法相同。直接接种法即每支（或瓶）供试品按规定量分别接种至各接种法即每支（或瓶）供试品按规定量分别接种至各含硫含硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基的容器中，除另有乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基的容器中，除另有规定外，规定外，每个每个容器中培养基的用量应符合接种的供试品体容器中培养基的用量应符合
3、接种的供试品体积不得大于培养基体积的积不得大于培养基体积的1010，同时，硫乙醇酸盐流体培，同时，硫乙醇酸盐流体培养基养基每管装量不少于每管装量不少于15ml15ml，改良马丁培养基改良马丁培养基每管装量每管装量不少不少于于10ml10ml。培养基的用量和高度同方法验证；培养基的用量和高度同方法验证；每种每种培养基接培养基接种的管数同种的管数同供试品的检验数量。供试品的检验数量。 由于直接接种法具有操作简便等优点，特由于直接接种法具有操作简便等优点，特别适宜无抑菌和防腐作用药品的无菌检查。据别适宜无抑菌和防腐作用药品的无菌检查。据统计，统计，中国药典中国药典（20052005年版年版( (二部
4、二部) )共有共有5757种单列品种（占种单列品种（占39.339.3）采用该法规定。）采用该法规定。 操作时，用适当的消毒液对供试品容器表面或操作时，用适当的消毒液对供试品容器表面或外包装采用浸没或擦试的方法彻底消毒。如果外包装采用浸没或擦试的方法彻底消毒。如果容器内有一定的真空度，可用适宜的无菌器材容器内有一定的真空度，可用适宜的无菌器材（如带有除菌过滤器的针头），向供试品容器（如带有除菌过滤器的针头），向供试品容器内导入无菌空气，再按无菌操作启开容器取出内导入无菌空气，再按无菌操作启开容器取出内容物。内容物。 无论使用何种检查法，无论使用何种检查法，其检查操作过程均包括其检查操作过程均包
5、括供试品的处理及接种供试品的处理及接种与与培养及观察培养及观察两大步骤。两大步骤。 除另有规定外，除另有规定外，供试品处理按照样品的不同用以下方法供试品处理按照样品的不同用以下方法处理与接种。处理与接种。 1 1混悬液等非澄清水溶液供试品混悬液等非澄清水溶液供试品 该类供试品操作最简单，该类供试品操作最简单，取规定量的供试品直接无菌操作接种至各管培养基中取规定量的供试品直接无菌操作接种至各管培养基中。 2 2固体制剂供试品固体制剂供试品 取规定量的供试试品，无菌操作直接取规定量的供试试品，无菌操作直接接种至各管培养基中；或供试品中加入适宜的溶剂溶解，或接种至各管培养基中；或供试品中加入适宜的溶
6、剂溶解，或按标签说明复溶后，取规定量无菌操作接种至各管培养基中按标签说明复溶后，取规定量无菌操作接种至各管培养基中。 3 3- -内酰胺类或磺胺类供试品内酰胺类或磺胺类供试品 取规定量供试品，混合，取规定量供试品，混合，加入适量的无菌加入适量的无菌-内酰胺酶溶液或对氨基苯甲酸溶液使中和，内酰胺酶溶液或对氨基苯甲酸溶液使中和，接种至各管培养基中，或直接接入含接种至各管培养基中，或直接接入含-内酰胺酶或对氨基苯内酰胺酶或对氨基苯甲酸的各管培养基中。甲酸的各管培养基中。 4 4非水溶性供试品非水溶性供试品 取规定量供试品，混合，加入适量的聚取规定量供试品，混合，加入适量的聚山梨酯山梨酯8080或其它
7、适宜的乳化剂及稀释剂使其乳化，接种至各或其它适宜的乳化剂及稀释剂使其乳化，接种至各管培养基中。或直接接种至含聚山梨酯管培养基中。或直接接种至含聚山梨酯8080或其它适宜乳化剂或其它适宜乳化剂的各管培养基中。的各管培养基中。 一、供试品的处理及接种一、供试品的处理及接种 5 5敷料敷料供试品供试品 取规定数量，取规定数量，每个包装每个包装以以无菌操作拆开，于不同部位剪取约无菌操作拆开，于不同部位剪取约100 mg100 mg或或cmcm3cm3cm的供试品；接种于的供试品；接种于各管各管足以浸没供试足以浸没供试品的适量培养基中。品的适量培养基中。 6 6肠线、缝合线等肠线、缝合线等供试品供试品肠
8、线、缝合线肠线、缝合线及其它一次性的及其它一次性的医用材料按规定量医用材料按规定量取最小包装，取最小包装，无菌拆开包装，接种于无菌拆开包装，接种于各管各管足以浸没供试品的足以浸没供试品的适量培养基中。适量培养基中。 7 7灭菌医用器具供试品灭菌医用器具供试品 取规定量，必要取规定量，必要时应将其拆散或切成小碎块，接种于各管足以时应将其拆散或切成小碎块，接种于各管足以侵没供试品的适量培养基中。侵没供试品的适量培养基中。 8 8放射性药品放射性药品 取供试品取供试品1 1瓶（支），接种于瓶（支），接种于装量为装量为7 75ml5ml的的硫乙醇酸盐流体培养基和改良硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基
9、马丁培养基中。中。每每管接种量为管接种量为0 02ml2ml。接种阴性对照接种阴性对照 与此同时另取与此同时另取1 1支硫乙醇酸盐培养基管，支硫乙醇酸盐培养基管，加入上述同一容器内的供试品稀释液或加入上述同一容器内的供试品稀释液或0.90.9灭菌氯化钠溶液灭菌氯化钠溶液1 ml1 ml，作阴性对照。（作阴，作阴性对照。（作阴性对照的目的是说明未接检品前的培养基和性对照的目的是说明未接检品前的培养基和供试品稀释液及无菌检查操作都是无菌生长供试品稀释液及无菌检查操作都是无菌生长的，而供试品阳性检出的菌确是来自检品。）的，而供试品阳性检出的菌确是来自检品。） 如供试品液未经验证试验，可同步进行，方如
10、供试品液未经验证试验，可同步进行，方法见第五节的直接接种法的验证试验法见第五节的直接接种法的验证试验 。接种阳性对照接种阳性对照 根据根据GMPGMP和和中国药典中国药典要求，接种阳性对要求，接种阳性对照应在阳性对照室中进行，以防交叉污染。接照应在阳性对照室中进行，以防交叉污染。接种时应按验证试验的结果选择阳性对照菌。方种时应按验证试验的结果选择阳性对照菌。方法是：在相应的培养基中接入小于法是：在相应的培养基中接入小于100100个个cfucfu的的阳性对照菌（菌液的制备和同培养基灵敏度检阳性对照菌（菌液的制备和同培养基灵敏度检查菌液的制备相同）。供试品用量同供试品无查菌液的制备相同）。供试品
11、用量同供试品无菌检查每份培养基接种的样品量（见表菌检查每份培养基接种的样品量（见表6 62 2、表表6 63 3）相同。阳性对照管培养）相同。阳性对照管培养4872 h4872 h应生应生长良好。长良好。二、培养及观察二、培养及观察培培养养基基按规定的温度培养按规定的温度培养14 14 d d逐日观察并记录逐日观察并记录浑浊浑浊新鲜培养新鲜培养基或划线基或划线斜面培养斜面培养基基培养液涂片，染色，镜检培养液涂片，染色，镜检判断是否有菌判断是否有菌 三、结果判断三、结果判断供试品符供试品符合规定合规定培养基管均澄清，或虽显浑浊但培养基管均澄清，或虽显浑浊但经确证无菌生长经确证无菌生长供试品供试品
12、不符合不符合规定规定培养基管中任何培养基管中任何1 1管显浑浊并确证管显浑浊并确证有菌生长有菌生长 除非能充分证明生长的微生物非供试品所含。当满足下列至除非能充分证明生长的微生物非供试品所含。当满足下列至少一个条件时，判试验结果无效：少一个条件时，判试验结果无效： 对无菌检查试验相关设施对无菌检查试验相关设施的微生物监控数据表明其不符合规定。的微生物监控数据表明其不符合规定。 对无菌试验过程的回对无菌试验过程的回顾，揭示了本操作程序是错误的。顾，揭示了本操作程序是错误的。 阴性对照管有菌生长。阴性对照管有菌生长。 供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证微生物生长是因无菌供试品管中生长的微生物经鉴
13、定后，确证微生物生长是因无菌试验中所使用的物品和（或）无菌操作技术不当引起的。试验中所使用的物品和（或）无菌操作技术不当引起的。 试验若经确认无效，应重试。重试时，重新取同试验若经确认无效，应重试。重试时，重新取同量供试品，依法重试，若无菌生长，判供试品符合量供试品，依法重试，若无菌生长，判供试品符合规定；若有菌生长，判供试品不符合规定。规定；若有菌生长，判供试品不符合规定。直接接种法图示直接接种法图示无抗菌无抗菌作用的作用的供试品供试品抽抽样样接种于培养基接种于培养基硫乙醇酸盐流体硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基管培养基及改良马丁培养基管 培培养养每天观察每天观察观察观察14天天报告报告
14、澄清无混浊澄清无混浊合格合格混浊（疑混浊（疑似情况）似情况）镜检镜检重新重新培养培养确证确证无菌无菌有菌有菌不合格不合格培培养养基基直接接种法教学片第六节第六节 薄薄膜过滤法检查技术膜过滤法检查技术 该法是各国药典和该法是各国药典和中国药典中国药典规定的第二种规定的第二种无菌检查的方法，适用于任何类型药品的无菌检无菌检查的方法，适用于任何类型药品的无菌检查。具有适用性广，准确性强的特点。查。具有适用性广，准确性强的特点。中国药中国药典典（2005年版）规定：如供试品性状允许，应年版）规定：如供试品性状允许，应优先采用薄膜过滤法。据统计，优先采用薄膜过滤法。据统计，中国药典中国药典（2005年版
15、二部）共有年版二部）共有88种单列规定品种（占种单列规定品种（占60.7）规定采用该法。薄膜过滤法可采用封闭）规定采用该法。薄膜过滤法可采用封闭式薄膜过滤器（图式薄膜过滤器（图62）或一般薄膜过滤器（图）或一般薄膜过滤器（图63），但应优先选用封闭式薄膜过滤器。），但应优先选用封闭式薄膜过滤器。 待过滤 的 液待过滤 的 液体体滤膜滤膜接负压吸引抽接负压吸引抽滤机滤机图图6-4：HTY微孔滤膜孔径测定仪微孔滤膜孔径测定仪 图：滤膜阻挡的细菌图：滤膜阻挡的细菌 一般新购得一批滤膜，因各厂家生产相同规格一般新购得一批滤膜，因各厂家生产相同规格的滤膜其质量不尽一致，应对滤膜任选以下三种的滤膜其质量不
16、尽一致，应对滤膜任选以下三种方法中的一种进行孔径大小的测试，符合规定的方法中的一种进行孔径大小的测试，符合规定的滤膜才能用于无菌检查滤膜才能用于无菌检查。 （一）（一） 气泡法气泡法 其原理是测滤膜孔径的大小，其原理是测滤膜孔径的大小，可用气泡压力方法（可用气泡压力方法（图图6-46-4）测定。先将滤膜浸入）测定。先将滤膜浸入水中，使完全湿润，然后用镊子夹住一片滤膜放水中，使完全湿润，然后用镊子夹住一片滤膜放于气泡点测定装置上于气泡点测定装置上( (硬聚氯乙烯气泡点测定装置，硬聚氯乙烯气泡点测定装置，上海化工厂生产上海化工厂生产DYDY25)25)或或滤膜孔径测定仪滤膜孔径测定仪上，膜上，膜上
17、放一块与滤膜大小相同的尼龙筛网，再加上多上放一块与滤膜大小相同的尼龙筛网，再加上多孔板，将螺旋固定圈旋紧，在多孔板上加孔板，将螺旋固定圈旋紧，在多孔板上加3 35 5 mmmm深的水深的水( (注意排除气泡注意排除气泡) )关闭放气阀，启动空压关闭放气阀，启动空压机或氮气阀，使压力缓缓上升，注意观查水面上机或氮气阀，使压力缓缓上升，注意观查水面上产生第一个气泡时，记录压力表的压力，气泡点产生第一个气泡时，记录压力表的压力，气泡点压力不应小于压力不应小于0.2 MPa(2.2 kg/cm2)0.2 MPa(2.2 kg/cm2)。（二）水流量法（二）水流量法 其原理是在一定的压力下，定量的水在单
18、其原理是在一定的压力下，定量的水在单位时间内通过滤膜的流量与孔径及孔隙率有关。位时间内通过滤膜的流量与孔径及孔隙率有关。将滤膜装于除菌滤器上，开动真空泵，压力在将滤膜装于除菌滤器上，开动真空泵，压力在93 KPa(700 mm Hg)下，抽滤已滤清的水约下，抽滤已滤清的水约500 ml，计算出每计算出每1 mim的滤速。中国药典的滤速。中国药典对滤膜的滤速未明确规定，而对滤膜的滤速未明确规定，而SP()规定在规定在93 KPa(700 mm Hg)压力下，滤膜直径压力下，滤膜直径47 mm；流速流速5575 mm/min。此法操作简单，此法操作简单，但误差大。但误差大。（三）（三） 细菌过滤法
19、细菌过滤法 其原理是利用细菌细胞大小稳定的特性，可将标其原理是利用细菌细胞大小稳定的特性，可将标准菌株制备的菌液，用待测滤膜过滤，其滤液经培准菌株制备的菌液，用待测滤膜过滤，其滤液经培养无菌生长，则该滤膜孔径符合规定。常用的细菌养无菌生长，则该滤膜孔径符合规定。常用的细菌为粘质沙雷菌为粘质沙雷菌(CMCC(B)41002)(CMCC(B)41002)，将该菌的斜面培养，将该菌的斜面培养物，接种于营养肉汤培养基中，物，接种于营养肉汤培养基中，30303535培养培养18 1820 h20 h，用，用0.90.9氯化钠溶液稀释至氯化钠溶液稀释至10 10-3-3( (约相当于约相当于7x107x1
20、05 5cfu/ml)cfu/ml)取此菌液取此菌液1 ml1 ml加至加至50 ml 0.950 ml 0.9氯化钠溶氯化钠溶液中，按薄膜过滤法过滤，取该滤液液中，按薄膜过滤法过滤，取该滤液5 ml5 ml接种于营接种于营养肉汤培养基养肉汤培养基40 ml40 ml中，中，30303535培养培养24 h24 h，应无，应无菌生长，而将滤膜加至营养肉汤培养基管中应有菌菌生长，而将滤膜加至营养肉汤培养基管中应有菌生长，证明该滤膜滤效合格。生长，证明该滤膜滤效合格。三、三、薄薄膜过滤法检查的操作膜过滤法检查的操作 应根据不同供试品而用不同的样品处理法来进行。应根据不同供试品而用不同的样品处理法来
21、进行。 应优先选用封闭式薄膜过滤器应优先选用封闭式薄膜过滤器，滤膜孔径不大于，滤膜孔径不大于0.450.45m m，直径为，直径为47mm47mm。根据供试品及其溶剂的特性选。根据供试品及其溶剂的特性选择滤膜材质。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。择滤膜材质。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。 水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜。油类供试品，其滤膜和过滤器在使用前应充分干燥。膜。油类供试品，其滤膜和过滤器在使用前应充分干燥。为发挥滤膜的最大过滤效率，应
22、注意保持供试品溶液及为发挥滤膜的最大过滤效率，应注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后，若需冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后，若需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量为要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量为100ml100ml，且总过滤量不宜太大，以避免滤膜上的微生物受损伤。且总过滤量不宜太大，以避免滤膜上的微生物受损伤。下面就不同供试品的处理操作介绍如下：下面就不同供试品的处理操作介绍如下：1水溶液供试品水溶液供试品 取规定量，直接过滤，或混合至含适量稀释液取规定量，直接过滤，或混合至含适量稀释液的无菌容器内，混匀，立即过滤。如供试品具有的无菌容器内，混
23、匀，立即过滤。如供试品具有抑菌作用或含防腐剂，须用适量的冲洗液冲洗滤抑菌作用或含防腐剂，须用适量的冲洗液冲洗滤膜，冲洗次数不得少于三次。膜，冲洗次数不得少于三次。 冲洗后，如用封闭式过滤器，分别将冲洗后，如用封闭式过滤器，分别将100ml硫硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基加入相应乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基加入相应的滤筒内。如果仅用薄膜过滤器，则无菌操作取的滤筒内。如果仅用薄膜过滤器，则无菌操作取出滤膜，将其剪成出滤膜，将其剪成3等份；分别置于含等份；分别置于含50ml硫乙硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基容器中，其醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基容器中，其中中1份接种阳性对照值做
24、阳性对照用。份接种阳性对照值做阳性对照用。2可溶于水的固体制剂供试品可溶于水的固体制剂供试品 取规定量，加取规定量，加适宜的溶剂溶解或按标签说明复溶，然后照水适宜的溶剂溶解或按标签说明复溶，然后照水溶液供试品项下的方法操作。溶液供试品项下的方法操作。 3-内酰胺类供试品取规定量，按水溶液内酰胺类供试品取规定量，按水溶液或固体制剂供试品的处理方法处理，立即过滤，或固体制剂供试品的处理方法处理，立即过滤，用适宜的冲洗液冲洗滤膜。再用含适量用适宜的冲洗液冲洗滤膜。再用含适量-内酰胺内酰胺酶的冲洗液清除残留在滤筒、滤膜上的抗生素后酶的冲洗液清除残留在滤筒、滤膜上的抗生素后接种培养基，必要时培养基中可加
25、入少量的接种培养基，必要时培养基中可加入少量的-内内酰胺酶；或将滤膜直接接入含适量酰胺酶；或将滤膜直接接入含适量-内酰胺酶的内酰胺酶的培养基中。接种培养基的方法照水溶液供试品项培养基中。接种培养基的方法照水溶液供试品项下的方法操作。下的方法操作。4非水溶性制剂供试品非水溶性制剂供试品 取规定量，直接过滤；或混取规定量，直接过滤；或混合溶于含聚山梨酯合溶于含聚山梨酯80或其它适宜乳化剂的稀释液中，或其它适宜乳化剂的稀释液中，充分混合，过滤。用含充分混合，过滤。用含01%1%聚山梨酯聚山梨酯80的冲的冲洗液冲洗滤膜至少三次。滤膜于含或不含聚山梨酯洗液冲洗滤膜至少三次。滤膜于含或不含聚山梨酯80的培
26、养基中培养。培养基接种照水溶液供试品项下的的培养基中培养。培养基接种照水溶液供试品项下的方法操作。方法操作。 5可溶于十四烷酸异丙酯的膏剂和粘性油剂供试品可溶于十四烷酸异丙酯的膏剂和粘性油剂供试品 取取规定量，混合至适量的无菌十四烷酸异丙酯（无菌十四规定量，混合至适量的无菌十四烷酸异丙酯（无菌十四烷酸异丙酯的制备：采用薄膜过滤法过滤除菌。选用孔烷酸异丙酯的制备：采用薄膜过滤法过滤除菌。选用孔径为径为0.22m的脂溶性滤膜，并经的脂溶性滤膜，并经140干热灭菌干热灭菌2 h）中，）中， 剧烈振摇，使供试品充分溶解，如果需要可适当加热，剧烈振摇，使供试品充分溶解，如果需要可适当加热，但温度不得超过
27、但温度不得超过44），趁热迅速过滤。若无法过滤，），趁热迅速过滤。若无法过滤，应加入不少于应加入不少于100ml的稀释液，充分振摇萃取，静置，取的稀释液，充分振摇萃取，静置，取下层水相作为供试液过滤。过滤后滤膜冲洗及培养基接下层水相作为供试液过滤。过滤后滤膜冲洗及培养基接种照非水溶液供试品项下的方法操作。种照非水溶液供试品项下的方法操作。6无菌气（喷）雾剂供试品无菌气（喷）雾剂供试品 取规定量，将各容器取规定量，将各容器置冰室冷冻约置冰室冷冻约1 h。以无菌操作迅速在溶器上端钻一。以无菌操作迅速在溶器上端钻一小孔，释放抛射剂后再无菌开启容器，然后照水溶小孔，释放抛射剂后再无菌开启容器，然后照水
28、溶性制剂或非水溶性制剂项下的方法操作。性制剂或非水溶性制剂项下的方法操作。 7装有药物的注射器供试品装有药物的注射器供试品 取规定量，装上无取规定量，装上无菌针头（非包装中所配带的），若需要可吸入稀释菌针头（非包装中所配带的），若需要可吸入稀释液或标签所示的溶剂溶解，然后照水溶性制剂或非液或标签所示的溶剂溶解，然后照水溶性制剂或非水溶性供试品项下方法操作。同时应采用直接接种水溶性供试品项下方法操作。同时应采用直接接种法进行包装中所配带的无菌针头的无菌检查。法进行包装中所配带的无菌针头的无菌检查。 8具有导管的医疗器具（输血、输液袋等）具有导管的医疗器具（输血、输液袋等）供试品取规定量，每个最小
29、包状用供试品取规定量，每个最小包状用50100ml冲洗液分别冲洗内壁，收集冲洗液冲洗液分别冲洗内壁，收集冲洗液于无菌容器中，然后照水溶液供试品项下方法于无菌容器中，然后照水溶液供试品项下方法操作。同时应采用直接接种法进行包装中所配操作。同时应采用直接接种法进行包装中所配带的针头的无菌检查。带的针头的无菌检查。四、培养及观察同直接接种检查法。四、培养及观察同直接接种检查法。五、结果判断同直接接种检查法。五、结果判断同直接接种检查法。开开放放式式薄薄膜膜过过滤滤法法操操作作将药品加入无菌稀释剂溶液中将药品加入无菌稀释剂溶液中无菌稀释剂溶剂分无菌稀释剂溶剂分3次洗涤滤膜次洗涤滤膜取下滤膜取下滤膜除去
30、掉上层滤纸除去掉上层滤纸将滤膜分成将滤膜分成3份份加加硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基管硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基管按规定温度和时间进行培养按规定温度和时间进行培养薄薄膜过滤法检查膜过滤法检查 教学片教学片第七节第七节 无菌检查无菌检查各种中和各种中和( (灭活灭活) )剂的作用机理剂的作用机理一、硫乙醇酸盐、半胱氨酸、巯基化合物的作用一、硫乙醇酸盐、半胱氨酸、巯基化合物的作用机理机理 此类化合物因含有此类化合物因含有SHSH基，可以和重金属结合基，可以和重金属结合, ,因而能解除或阻止含汞、含砷盐等重金属化合因而能解除或阻止含汞、含砷盐等重金属化合物对细菌的毒害或抑制作用。此外
31、硫乙醇酸盐物对细菌的毒害或抑制作用。此外硫乙醇酸盐可维持培养基中氧化还原电位，特别是保持培可维持培养基中氧化还原电位，特别是保持培养基下层的厌氧条件，有利于厌氧菌生长。而养基下层的厌氧条件，有利于厌氧菌生长。而半胱氨酸可作为细菌长所需的氮源。半胱氨酸可作为细菌长所需的氮源。二、青霉素酶的作用机理二、青霉素酶的作用机理 青霉素酶是目前较理想的青霉素灭活剂，它能通青霉素酶是目前较理想的青霉素灭活剂，它能通过破坏青霉素结构中的过破坏青霉素结构中的内酰胺环迅速完全而特异内酰胺环迅速完全而特异地使青霉素灭活。地使青霉素灭活。三、三、 对氨基苯甲酸的作用机理对氨基苯甲酸的作用机理 磺胺类药物的分子结构与对
32、氨基苯甲酸非常相似，磺胺类药物的分子结构与对氨基苯甲酸非常相似，因此它可以竟争性地取代叶酸结构中的对氨基苯甲因此它可以竟争性地取代叶酸结构中的对氨基苯甲酸的地位，导致二氢叶酸合或酶失去作用而使细菌酸的地位，导致二氢叶酸合或酶失去作用而使细菌生长受阻碍。此类作用属竞争性抑制作用，其抑制生长受阻碍。此类作用属竞争性抑制作用，其抑制作用的强弱受底物的浓度而影响，故此在培养基中作用的强弱受底物的浓度而影响，故此在培养基中加入足够量的对氨基苯甲酸才能发挥较强的解决抑加入足够量的对氨基苯甲酸才能发挥较强的解决抑制作用而有利于细菌生长，无菌检查的效果才真实。制作用而有利于细菌生长，无菌检查的效果才真实。关于对氨基苯甲酸的作用机理见图关于对氨基苯甲酸的作用机理见图6-56-5示。示。
