1、MSCsMSCs治疗肝硬化临床应用研究治疗肝硬化临床应用研究 干细胞分类干细胞分类(1)胚胎干细胞胚胎干细胞：指胚胎早期的干细胞。这类：指胚胎早期的干细胞。这类干细胞分化潜能宽，具有分化为机体任何组织细干细胞分化潜能宽，具有分化为机体任何组织细胞的能力。如囊胚期内细胞团的细胞。胞的能力。如囊胚期内细胞团的细胞。(2)成体干细胞成体干细胞：指成体各组织器官中的干细：指成体各组织器官中的干细胞，成体干细胞具有自我更新能力，但分化潜能胞，成体干细胞具有自我更新能力，但分化潜能窄，只能分化为相应窄，只能分化为相应(或相邻或相邻)组织器官组成的细组织器官组成的细胞。如神经干细胞，表皮干细胞。胞。如神经干
2、细胞，表皮干细胞。2干细胞的分化潜能干细胞的分化潜能 根据其分化潜能大小，干细胞可分为三根据其分化潜能大小，干细胞可分为三类。类。全能干细胞全能干细胞多能干细胞多能干细胞专能干细胞专能干细胞3干细胞的分裂方式干细胞的分裂方式干细胞有干细胞有对称对称与与不对称不对称两种分裂方式。两种分裂方式。对称分裂：干细胞对称分裂：干细胞 分裂分裂干细胞干细胞干细胞干细胞对称分裂：干细胞对称分裂：干细胞 分裂分裂分化细胞分化细胞分化细胞分化细胞不对称分裂：干细不对称分裂：干细胞胞 干细胞干细胞分化细胞分化细胞分裂分裂4干细胞的可塑性干细胞的可塑性(1)干细胞的横向分化干细胞的横向分化：在干细胞移植时，供体干细
3、胞在受体中通在干细胞移植时，供体干细胞在受体中通常分化为常分化为与其组织来源一致的细胞与其组织来源一致的细胞。但有。但有时供体干细胞会分化出时供体干细胞会分化出与其组织来源不一与其组织来源不一致的其它细胞致的其它细胞，这种现象称，这种现象称干细胞横向分干细胞横向分化化(trans-differentiation)。5干细胞横向分化表明成体干细胞被移植干细胞横向分化表明成体干细胞被移植入受体中具有很强的可塑性。为干细胞入受体中具有很强的可塑性。为干细胞治疗提供了可能。治疗提供了可能。(2)实验实验：小鼠肌肉干细胞小鼠肌肉干细胞体外培养体外培养5天少量间天少量间质细胞质细胞 接受致死量辐射的小鼠中
4、接受致死量辐射的小鼠中 各种血细胞系。各种血细胞系。植入植入分化分化6(3)横向分化的调控机制横向分化的调控机制：与干细胞的微环境有关。与干细胞的微环境有关。干细胞进入新的微环境后，对分化信号干细胞进入新的微环境后，对分化信号的反应受到周围正在进行分化细胞的影的反应受到周围正在进行分化细胞的影响，从而对新的微环境中的调节信号做响，从而对新的微环境中的调节信号做出反应。出反应。7干细胞向不同组织器官分化图示干细胞向不同组织器官分化图示8自我复制干细胞与间质干细胞高度增殖多向分化9脐带间充质干细胞脐带间充质干细胞(MSCs）n脐带间充质干细胞（脐带间充质干细胞（Mesnchymal Stem Ce
5、lls，MSCs）是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功）是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，具有广能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。阔的临床应用前景。nMSCs具有较高的分化潜能，可向多个方向进行分具有较高的分化潜能，可向多个方向进行分化。它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、化。它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景。有报道从人脐带中分离出应用前景。有报道从人脐带中分离出MSCs，且细，且细胞含量、增殖能力优于骨髓胞含量、增殖能力优于骨髓M
6、SCs，免疫原性比骨，免疫原性比骨髓髓MSCs低低 ，并且具有取材方便，无伦理学争议，并且具有取材方便，无伦理学争议等优点。等优点。10脐带间充质干细胞的特点脐带间充质干细胞的特点n极低免疫原性，无需进行极低免疫原性，无需进行配型实验配型实验n多能干细胞，能够分化成多能干细胞，能够分化成多种组织细胞。目前在国多种组织细胞。目前在国内分别用于肝硬化、脑损内分别用于肝硬化、脑损伤、系统性红斑狼疮、股伤、系统性红斑狼疮、股骨头坏死、骨头坏死、1型糖尿病、型糖尿病、帕金森、肾衰竭（或肾功帕金森、肾衰竭（或肾功能受损）的治疗能受损）的治疗n具有分化成受损组织器官具有分化成受损组织器官细胞的趋向性细胞的趋
7、向性11脐带间充质干细胞的用途脐带间充质干细胞的用途n具有较强的免疫调节作用，可用于治疗红斑狼疮、硬皮具有较强的免疫调节作用，可用于治疗红斑狼疮、硬皮病、肝硬化、肾衰竭等自身免疫性疾病或与自身免疫有病、肝硬化、肾衰竭等自身免疫性疾病或与自身免疫有关的疾病，降低细胞或器官移植后的免疫排斥反应，提关的疾病，降低细胞或器官移植后的免疫排斥反应，提高细胞或器官移植的成功率；高细胞或器官移植的成功率；n能促进造血恢复功能，与单一造血干细胞移植比较，间能促进造血恢复功能，与单一造血干细胞移植比较，间充质干细胞和造血干细胞共移植能显著提高白血病和难充质干细胞和造血干细胞共移植能显著提高白血病和难治性贫血等疾
8、病的治疗效果；治性贫血等疾病的治疗效果；n修复损伤或病变的组织器官，用于治疗骨和肌肉衰退性修复损伤或病变的组织器官，用于治疗骨和肌肉衰退性疾病、心脑血管疾病、肝病、脑及脊髓神经损伤、老年疾病、心脑血管疾病、肝病、脑及脊髓神经损伤、老年性痴呆和老年痴呆等。性痴呆和老年痴呆等。12肝纤维化核心问题 ？肝硬化患者围手术期易于感染的原因肝硬化患者围手术期易于感染的原因Kupffer细胞吞噬功能障碍细胞吞噬功能障碍肝硬变假小叶中缺乏正常的肝血窦结构肝硬变假小叶中缺乏正常的肝血窦结构自发性门体分流自发性门体分流Kupffer细胞被短路细胞被短路肝脏坏死组织、病毒产生的抗原物质过肝脏坏死组织、病毒产生的抗原
9、物质过多，多，Kupffer细胞吞噬功能相对不足细胞吞噬功能相对不足肠源菌产生的大量抗原入血肠源菌产生的大量抗原入血图示肝硬变时增生结节广泛形成，图示肝硬变时增生结节广泛形成，肝小叶内肝窦、中心静脉等正常结肝小叶内肝窦、中心静脉等正常结构 消 失 ， 细 胞 排 列 杂 乱 无 章构 消 失 ， 细 胞 排 列 杂 乱 无 章 肝纤维化的核心问题肝纤维化的核心问题 间充质干细胞间充质干细胞(MSCs) 给治疗带来了希望给治疗带来了希望硬化的肝脏 肝细胞数量进行性肝细胞数量进行性 纤维组织进行性纤维组织进行性13141516干细胞转化为肝细胞干细胞转化为肝细胞17乙肝病人乙肝病人MSCs的特性的
10、特性18重要发现重要发现:乙肝肝硬化患者乙肝肝硬化患者MSC增殖能力下降增殖能力下降, 细胞细胞容易老化与凋亡，细胞表面生长因子受体表达下降容易老化与凋亡，细胞表面生长因子受体表达下降 乙肝肝硬化患者MSC的累积扩增率低于正常健康人（P 0.001）乙肝肝硬化患者MSC的S期比例与低于正常健康人(P 0.05) 乙肝肝硬化患者MSC凋亡细胞比例明显高于健康人(P 0.05)乙肝肝硬化患者MSC表面生长因子受体表达低于健康人(P0.05)19MSC对病毒不易感对病毒不易感2021移植途径选择移植途径选择22肝动脉介入肝动脉介入MSCs23移植前后白蛋白变化移植前后白蛋白变化24移植前后胆碱脂酶的
11、变化移植前后胆碱脂酶的变化25移植后PTA的变化26272829MSCs治疗效果治疗效果303132沈阳军区总医院疗效分析沈阳军区总医院疗效分析n肝炎后肝硬化肝炎后肝硬化82例，例，自身免疫性肝病自身免疫性肝病6例，例，酒精性肝硬化酒精性肝硬化13例，例，血吸虫性肝硬化血吸虫性肝硬化1例。例。n均为肝硬化患者，其中术前合并肝癌均为肝硬化患者，其中术前合并肝癌4例。例。n两次以上干细胞移植两次以上干细胞移植39例例33一、指标变化一、指标变化1. 血浆白蛋白血浆白蛋白 移植前后对比，血清白蛋白变化最为明移植前后对比，血清白蛋白变化最为明显，于第一周即可见升高，第显，于第一周即可见升高，第4周明显
12、升周明显升高，统计学高，统计学P0.01，有明确意义，有明确意义。34352. 凝血酶原时间（凝血酶原时间（PT）干细胞移植后，干细胞移植后，PT明显下降，第明显下降，第4周统周统计结果显示计结果显示P0.05，有明显意义，有明显意义363. 纤维蛋白原（纤维蛋白原（FIB）移植后纤维蛋白原明显升高，至第移植后纤维蛋白原明显升高，至第4周统周统计计P0.01，有显著意义。，有显著意义。374. ALT和和AST 102例患者，例患者，51%术前术前ALT、AST异常者，异常者，术后第术后第4周明显下降。周明显下降。P0.05，有显著意义，有显著意义383940表表1 102肝硬化患者移植前后实
13、验室指标变化肝硬化患者移植前后实验室指标变化血清白蛋白血清白蛋白(g/L)(g/L)谷丙转氨酶谷丙转氨酶(U/L)(U/L)谷草转氨酶谷草转氨酶(U/L)(U/L)总胆红素总胆红素(mol/L)(mol/L)凝血酶原时间凝血酶原时间( (秒秒) )纤维蛋白原纤维蛋白原(g/L)(g/L)移植前移植前28.2728.274.294.29109.17109.1789.7489.7494.5794.5753.2853.2837.3937.3926.8726.8718.2318.234.584.581.961.960.890.89移植后移植后37.0937.096.156.1577.2777.2719
14、.5719.5760.0760.0717.3817.3835.8135.8123.9023.9016.7216.724.334.332.422.421.011.01P值值P P0.010.01P P0.050.05P P0.050.05P P0.050.05P P0.050.05P P0.010.0141表表2 移植前与移植前后肝功能变化移植前与移植前后肝功能变化项目项目术前（术前（n=45)术后术后2周（周（n=45)术后术后4周（周（n=45)术后术后8周（周（n=42)血清总蛋白血清总蛋白(g/L)31.705.2733.194.9736.946.6137.025.42血清白蛋白血清白蛋
15、白(g/L)31.705.27107.31103.7275.2053.3934.0024.18谷丙转氨酶谷丙转氨酶(U/L)36.946.6175.3017.5756.5215.6533.2321.83谷草转氨酶谷草转氨酶(U/L) 75.2053.3967.3120.1456.5215.65 52.3416.18总胆红素总胆红素(mol/L)34.0024.1834.0922.0433.2321.8334.1221.93总胆汁酸总胆汁酸(mol/L)59.4421.1541.1922.0939.4925.0440.1927.22 碱性磷酸酶（碱性磷酸酶（U/L） 152.7350.17 149.8852.17150.3353.05 148.6549.3442
