1、长春碱类长春碱类（抗癌药）（抗癌药）长春碱类基本信息：发现、基本信息：发现、性质、结构和来源性质、结构和来源功能作用、抗癌机制功能作用、抗癌机制临床问题：多药耐临床问题：多药耐药性和不良反应药性和不良反应剂型的创新剂型的创新结语结语发现 夹竹桃科长春花，通常为淡粉红色，花的中心有一暗紫色小点，别名日日新、雁来红、四时春。 原产地中海沿岸、印度、热带美洲。中国栽培长春花的历史不长，主要在长江以南地区栽培，广东、广西、云南等省（自治区）栽培较为普遍。 由于抗热性强，开花期长，色彩鲜艳，发展很快，在草本花卉中已占有一定位置。发现 在牙买加，长春花茶常被当地人用来治疗糖尿病，还能用来止血、止痛。 19
2、58年，Noble等人在长春花叶的提取物中首次分离出具有抗细胞增殖作用的天然生物碱-长春碱（最初命名为 长春花碱，VLB ），之后Eli Lilly 制药公司开始了此药物的生产。 1961年，Svoboda分离出长春新碱。 1980年，长春地辛（长春碱酰胺）在法国上市，长春碱半合成衍生物。 1989年，皮耳法伯制药Pierre Fabre公司开发的长春瑞宾（去甲长春花碱）首先在法国上市，它也是一种半合成的长春花属生物碱。 2009年，长春氟宁在欧洲上市，用于膀胱癌的治疗。性质长春碱长春碱二聚吲哚类生物碱。针状晶体，不溶于水、石油醚，溶于氯仿、丙酮和乙醇。 味苦，有引湿性，遇光或热变黄，故要密闭
3、、避光、凉暗处保存。熔点211216。折光率：+42（氯仿）。其硫酸盐为白色结晶性粉末，无臭，有引湿性，遇光或热变黄。易溶于水，溶于甲醇或氯仿，在乙醇中极微溶解。熔点284 285。结构长春酰胺去甲长春花碱长春碱长春新碱长春氟宁来源提取分离提取分离- -溶剂提取溶剂提取早期曾用乙醇提取，但发现长春碱在乙醇中溶解度小，提取率低。Jovanovics等改用甲醇水溶液浸取，提取率大幅提高，但甲醇极性较大，浸取液杂质较多，选择性不高。Gedeon等人使用含少量硫酸的90%甲醇水溶液提取，使之转化为硫酸盐的形式而更易提取。提取方法不断改进来源 高纯度长春碱的提取Atta-ur-Rahman等人 提取率较
4、高0.1%，总生物碱中长春碱质量分数为3% 缺点：步骤繁琐，耗用溶剂大，不适合工业生产，也不环保来源高效环保的长春碱提取方法Gunasekera等人提取率0.359%，总生物碱中长春碱含量为 8.29%，含量较高。评价：步骤简单，有机溶剂使用较少，毒性较小，提取率较高，适合工业生产，但酸水极性较大，选择性低，提取物中杂质较多，必须要有成熟高效的柱层析方法 进行后续操作，才能得到高质量产品。氨水调氨水调PH6-7乙酸水乙酸水浸取两次浸取两次二氯甲烷二氯甲烷萃取萃取蒸干溶剂蒸干溶剂总生物碱总生物碱来源提取分离提取分离超临界萃取法超临界萃取法 研究较少，最初研究表明在压力820MPa、提取温度40下
5、的萃取效果不佳，此条件下N2O萃取效果比CO2稍好。 Choi等研究发现，用二氧碳-甲醇-三乙胺以80 18 2的比例能有效提取长春花全草中的长春碱，超临界萃取中使用三乙胺等碱性改性剂后提取率大大提高。 评价：无毒、无污染，萃取所需时间短、能耗低。但是需要耐高压的设备，设备成本较高，进行大规模原料萃取从经济的角度看不太适用。来源 分离纯化分离纯化 将粗提后总生物碱中的长春碱、长春新碱、异长春碱以及一些结构性质比较相近的生物碱分开，使目标产品分离出来。 柱层析法：简单易行、成本低、处理量大，比较适合工业化生产。 制备型TLC法、制备型HPLC法和CPC(离心逆流色谱)法：分离量小、成本较高，不适
6、合工业生产来源化学合成（结构修饰）化学合成（结构修饰）长春碱和长春新碱虽广泛的用于治疗恶性肿瘤及白血病，但治疗毒性大，限制了其临床应用，人们开始寻找更高活性、更广抗瘤谱和更低毒性的结构类似物。以长春碱（左图化合物1）为原料，通过半合成得到长春碱酰胺（左图化合物长春碱酰胺（左图化合物3）、去甲长春碱（化合）、去甲长春碱（化合物物4）、长春氟宁（化合）、长春氟宁（化合物物5）等来源 化学合成化学合成- -长春碱酰胺（化合物长春碱酰胺（化合物（1），硫酸硫酸盐形式）盐形式）来源 化学合成化学合成- -去甲长春花碱（去甲长春花碱（ 1T 1T，其酒石酸盐），其酒石酸盐）功能作用 抗肿瘤抗肿瘤 体外细胞
7、毒活性 大量研究显示，长春碱类药物在体外对多种人类肿瘤细胞株有明显抑制作用，包括：肺癌、白血病、乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤及中枢神经系统肿瘤等。 去甲长春花碱对非小细胞肺癌H522细胞毒性最强，对结肠癌DLD/1毒性最弱。 长春氟宁对上述瘤株的IC50为10-810-7与长春碱、长春新碱和去甲长春花碱相比，要低2到40倍。Barret等人实验发现它与顺铂、丝裂霉素C和喜树碱连用时具有协同增效作用，并与紫杉醇、鬼臼亚乙苷等联用时不会产生拮抗效应。功能作用 体内抗肿瘤毒性 50年代晚期，Noble和Svoboda分别从长春花中提取并发现长春碱和长春花碱对P1534小鼠白血病的疗效十分显著。 Cros
8、等人对接种B16黑色素瘤的小鼠注射去甲长春花碱，发现可延长生命率达100%，由于长春碱和长春花碱。 Kruczynski等人通过类似的实验，发现长春氟宁也有同样的作用，而且不引起主要的毒性反应。 进一步的研究表明去甲长春花碱的总体评价（抑瘤率、生存期和毒副作用）不如长春氟宁。功能作用降血糖、降压降血糖、降压氧长春碱、长春质碱、洛柯碱等有不同程度的降血糖作用，作用缓慢持久；总碱静脉注射，对麻醉猫、兔均有降压作用，血压下降速度快，与萝芙木总碱制剂的缓慢降压不同，且在降压同时伴有呼吸加深，幅度变大现象；切断迷走神经或用阿托品不影响其降压效果。 中华本草其他作用其他作用抗瘤机制1. 细胞周期特异性抗肿
9、瘤药，与微管蛋白 二聚体结合抑制微管聚合，使分裂的细胞不能形成纺锤体而使分裂停止于中期。不同化合物与微管蛋白的作用有差异，均呈浓度依赖性。Kruczynski通过研究指出几种长春花碱衍生物与微管蛋白的结合力：长春新碱长春碱去甲长春花碱长春氟宁。抗瘤机制 这方面的相关研究合理的解释了临床上这方面的相关研究合理的解释了临床上的一些现象：的一些现象： 长春新碱剂量较低，而去甲长春花碱剂量较高。 长春新碱会引起较为严重的神经毒性副作用，而其他几类同类药物则不会。抗瘤机制2. Hlowell和Hill等研究发现，长春碱、长春新碱和长春氟宁都具有抑制血管生成的作用。3. 长春新碱还可以干扰蛋白质代谢及抑制
10、RNA多聚酶的活力，并引起肿瘤细胞膜脂质的改变。4. 不同的长春花碱类抗肿瘤药物选择性地抑制和调控过度激活表达的癌基因从而起抗肿瘤的作用。多药耐药性 多药抗药性指癌细胞接触过一种抗癌药物后获得的针对多种天然抗癌药物的抗药性。 长春碱类抗肿瘤药都可引起由P-糖蛋白介导的交叉耐药性，导致细胞内药物浓度降低，从而降低药物细胞毒活性。 钙拮抗剂、利血平等药物可逆转其多药耐药性。不良反应1. 骨髓抑制 大多有不同程度的白细胞下降，停药后 可恢复2. 神经毒性 Binet等研究指出有丝分裂的抗微管活性与抗肿瘤活性有关，而轴突的抗微管活性与神经毒性有关。26剂型创新 长春新碱长春新碱-IgG-IgG结合物结
11、合物 余竹元等采用活性酯方法合成了长春新碱-IgG结合物，但由于只有游离物才能发挥作用，结合物需在溶酶体内代谢成小分子游离物，因此结合物作用较迟缓。27剂型创新 长春碱纳米粒长春碱纳米粒 刘玉梅等通过乳化聚合法制备长春碱聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒，该组细胞数量明显减少，凋亡细胞增多，表明PBCA-NP可作为肿瘤药物长春碱有效载体，增强其抗肿瘤活性。28剂型创新 控释膜控释膜 能使药物在病灶局部达到控制释放、提高局部药物浓度、增强药物疗效 由于药物能够缓慢释放，故可以减轻全身的毒副作用，对扩大长春碱类药物的临床应用有重要意义。29剂型创新 脂质体脂质体 赵妍等采用pH梯度法制备硫酸长春新碱脂质体，
12、研究结果表明硫酸长春新碱脂质体降低药物释放度,提高药效。剂型创新 传递体传递体 在普通脂质体磷脂双分子层中加入了表面活性剂，如胆酸钠等。 具有与皮肤亲和力好、安全无毒等普通脂质体的优点外，还具有高度柔韧性及高效渗透性，药物能大量透过皮肤角质层到达深部真皮，进入淋巴管发挥治疗作用。结语结语谢谢！谢谢！参考文献1C.E.M.Gidding , S.J.Kellie , W.A.Kamps,etal. VincristinerevisitedJ. Oncology Hematology, 1999,29:267-287.2马彦.长春花碱类长肿瘤药物的研究进展J.中山大学研究生学刊（自然科学、医学版）
13、， 2004,25（3）：30-39.3 Jovanovies, Karola, Szasz, Kalman.Isolation of vinblastine and leurosineP, Hung :154715, APr.30，1968.4李晓蕾.抗肿瘤药长春碱的提取分离工艺研究D.杭州:浙江大学，2004.5习利平，宋新波，张丽娟.长春碱类抗肿瘤药的研究进展J.药物评价研究,2011,34(1):59-626肖亮，全海天，徐永平，等.长春氟宁抗肿瘤作用的研究J.中国药理学通报,2007,23(4):507-511.7Kruczynski A, Colpact F, Tarayre J-
14、P, etal. Preclinical in vivo antitumour activity of vinflunine, a novel fluorinated Vinca alkaloid. Cancer Chemother Phamaclo. 1998,41:437-447.8Kruczynski A, Barret J-M, Etievant C, etal. Antimitotic and tubulin interacting properities of vinflunine, a novel fluorinated Vinca alkaloid. Biochem Pharm
15、acol. 1998,55:908-915.9Binet S, Chaincau E, Fellous A, etal. Immunofluorescence study of the action of navelbine, vincristine and vinblastine on mitotic and axonal microtubules. Int J Cancer. 1990,15,46(2):262-266. 10 余竹元,马瑾瑜.长春新碱-抗体结合物的抗肝癌作用J.肿瘤,1989,9(4):154.11 刘玉梅，欧阳五庆，马淑燕，等.长春碱纳米粒的制备及其抗肿瘤活性J. 上海
16、交通大学学报(农业科学版),2008,26(3):228-232.12 赵妍,于彬,邓意辉,等.主动载药法制备硫酸长春新碱脂质体及其包封率的测定J.中国药学杂 志,2005,40(20):1559-1562. 结束语当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的，所以不要放弃，坚持就是正确的。When You Do Your Best, Failure Is Great, So DonT Give Up, Stick To The End感谢聆听不足之处请大家批评指导Please Criticize And Guide The Shortcomings演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
