激光扫描共聚焦显微课件.ppt

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3、科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。激光扫描共聚焦显微镜荧光显微镜文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。激光扫描共聚焦显微镜中常见的激光器文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。Leica DM IRBE 倒置荧光显微镜文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。LSCM物镜的重要参数 NA文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作

4、为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。 4x 20 x 10 x 40 x 60 x 100 x 文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。分析软件控制软件+文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删

5、除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。图1. 共聚焦显微镜简化原理图 用于激发荧光的激光束用于激发荧光的激光束(Laser)透过入射小孔透过入射小孔(light source pinhole)被二向色镜被二向色镜(Dichroic mirror)反射,通过显微物镜反射,通过显微物镜(Objective lens)汇聚后入射于待观察的标本汇聚后入射于待观察的标本(specimen)内部焦点内部焦点(

6、focal point)处。激光照射所产生的荧光处。激光照射所产生的荧光(fluorescence light)和少和少量反射激光一起,被物镜重新收集后送往二向色镜。其中携带图像信息的荧光由于量反射激光一起,被物镜重新收集后送往二向色镜。其中携带图像信息的荧光由于波长比较长,直接通过二向色镜并透过出射小孔波长比较长,直接通过二向色镜并透过出射小孔(Detection pinhole)到达光电探测到达光电探测器器(Detector)(通常是光电倍增管(通常是光电倍增管(PMT)或是雪崩光电二极管()或是雪崩光电二极管(APD),变成),变成电信号后送入计算机。而由于二向色镜的分光作用,残余的激光

7、则被二向色镜反射,电信号后送入计算机。而由于二向色镜的分光作用,残余的激光则被二向色镜反射,不会被探测到。不会被探测到。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。共轭文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。ZXYXY平面文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。Optical sections collected simultaneously at three different excitation wav

8、elengths (488, 568, and 647 nanometers). The specimen is the fruit fly third instar wing imaginal disk. XYXY平面文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。XYXY平面timeTime-lapse imaging of a living fruit fly embryo injected with calcium green is presented in Figure 2. The series of images shows the change i

9、n distribution of the fluorescent probe over time. 0 s10 s20 s30 s文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。Peripheral nervous system of a fruit fly embryo ZXYXY平面文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有

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12、。Xenopus oocytes文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。Calcium green用细胞内液稀释Calcium green导入微注射器以20nL/oocyte注射卵母细胞18C避光放置40分钟共聚焦显微镜观察文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。文档仅供参考,不能作为科学

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