1、 扬州大学硕士学位论文答辩扬州大学硕士学位论文答辩论文题目：论文题目： 身体功能训练对体育院校武术套路学生相关身体功能训练对体育院校武术套路学生相关 身体素质及专项技术影响的实验研究身体素质及专项技术影响的实验研究 研研 究究 生：生： 宋远凤宋远凤 研究方向：民族传统体育科学研究方向：民族传统体育科学 指导教师：邱瑞瑯指导教师：邱瑞瑯 教授教授 20152015年年5 5月月 扬州扬州内容内容研究对象、方法与内容研究对象、方法与内容 31 选题依据选题依据4结论与结论与建议建议5致谢致谢研究对象研究目的与意义研究对象研究目的与意义2 据调查，成人的据调查，成人的NAFLD发病率为发病率为20
2、%33%，女性患者要，女性患者要明显高于男性，儿童患病率为明显高于男性，儿童患病率为2.6%，肥胖或，肥胖或 2型糖尿病患者中型糖尿病患者中NAFLD发病率达到发病率达到 75%，其中在肥胖的儿童中的患病率为，其中在肥胖的儿童中的患病率为52.8%，不同的人种的患病率也存在很大的差异。，不同的人种的患病率也存在很大的差异。 近年来，我国的近年来，我国的NAFLD发病率明显上升，已仅次于病毒性发病率明显上升，已仅次于病毒性肝炎成为第二大肝病，肝炎成为第二大肝病，NAFLD已经严重地影响到我国人民的健已经严重地影响到我国人民的健康和生活水平。康和生活水平。1.1.研究背景研究背景ANPANPANP
3、ANPANPANPANPANPANPANPANPANPANPANPANPANPANPANPANPANP肝脏脂肝脏脂肪代谢肪代谢障碍障碍ANP胰岛素抵胰岛素抵抗（抗（IRIR）ANP各种原因各种原因如肥胖如肥胖脂代谢脂代谢紊乱等紊乱等2 2型型糖尿病糖尿病游离脂肪游离脂肪酸增加酸增加肝细胞内肝细胞内TGTG增增加而输出量加而输出量又减少又减少肝细胞脂肪变性肝细胞脂肪变性二次打击二次打击目前对目前对NAFLDNAFLD研究很多，但其发病具体机制尚未清楚，目前对研究很多，但其发病具体机制尚未清楚，目前对NAFLDNAFLD发病机制主要的观点还是发病机制主要的观点还是 “ “二次打击假说二次打击假说”
4、为主。为主。 （1 1）二次打击假说：）二次打击假说： （2 2）非酒精性脂肪肝与胰岛素抵抗（）非酒精性脂肪肝与胰岛素抵抗（IRIR）：）： IRIR引起引起NAFLDNAFLD的主要原因是脂质过多和高胰岛素血症。的主要原因是脂质过多和高胰岛素血症。 发生发生IRIR时脂蛋白脂酶活性及脂肪合成能力减弱，导致脂肪时脂蛋白脂酶活性及脂肪合成能力减弱，导致脂肪组织分解释放出组织分解释放出FFAFFA增多，并进入肝脏组织，使得肝脏组织中增多，并进入肝脏组织，使得肝脏组织中TGTG的合成明显增多，的合成明显增多，TGTG在微粒体转运蛋白在微粒体转运蛋白( MTP)( MTP)催化的反应中，催化的反应中，
5、与载脂蛋白结合转化为与载脂蛋白结合转化为VLDL,VLDL,当当TGTG的形成超过其输出以及的形成超过其输出以及VLDLVLDL的的合成障碍时，就会影响其转运，过多的合成障碍时，就会影响其转运，过多的TGTG便蓄积在肝内，于是便蓄积在肝内，于是就形成脂肪肝。就形成脂肪肝。 （3 3）非酒精性脂肪肝与脂质代谢异常）非酒精性脂肪肝与脂质代谢异常 脂肪酸摄入肝脏内过多，而肝脏内合成脂蛋白代谢发生脂肪酸摄入肝脏内过多，而肝脏内合成脂蛋白代谢发生障碍，障碍，FFAFFA通过激活信号通路诱导肝细胞发生凋亡，使得肝通过激活信号通路诱导肝细胞发生凋亡，使得肝细胞的脂质排泄速度受限，脂质就会出现沉积，过多的脂质
6、细胞的脂质排泄速度受限，脂质就会出现沉积，过多的脂质沉积导致脂肪肝的发生。沉积导致脂肪肝的发生。（4 4）非酒精性脂肪肝与氧化应激和脂质过氧化损伤）非酒精性脂肪肝与氧化应激和脂质过氧化损伤 外源性高脂饮食使血清外源性高脂饮食使血清FFAFFA增加，使线粒体增加，使线粒体氧化速度氧化速度加快，进而增加了活性氧加快，进而增加了活性氧(ROS)(ROS)的产出。的产出。 当肝细胞内活性氧（当肝细胞内活性氧（ROSROS）的产生及其作用超过）的产生及其作用超过SODSOD、GSHGSH、维生素、维生素E E抗氧化体统清除自由基能力时，便产生氧应激抗氧化体统清除自由基能力时，便产生氧应激导致过氧化损伤，
7、当肝细胞氧化应激反应所产生的损害超过导致过氧化损伤，当肝细胞氧化应激反应所产生的损害超过肝脏自身防御能力时，会导致肝脏肝脏自身防御能力时，会导致肝脏NAFLDNAFLD的发生的发生 。 （5 5）其他因素对脂肪肝的影响：）其他因素对脂肪肝的影响： 经研究表明脂肪肝与人体的瘦素、脂联素、经研究表明脂肪肝与人体的瘦素、脂联素、 TNF-aTNF-a、细胞、细胞性内毒素等细胞因子有着密切的关系。性内毒素等细胞因子有着密切的关系。1.21.2有氧运动对非酒精性脂肪肝的影响和机制有氧运动对非酒精性脂肪肝的影响和机制 目前已有研究证明目前已有研究证明, ,耐力性运动对脂肪肝的预防和延缓具有耐力性运动对脂肪
8、肝的预防和延缓具有重要的作用。不同运动强度对肝脏脂质及脂肪病变的影响重要的作用。不同运动强度对肝脏脂质及脂肪病变的影响, ,有明有明显的预防效果。多数研究都集中在运动对脂肪肝预防作用方面显的预防效果。多数研究都集中在运动对脂肪肝预防作用方面, , 而运动对脂肪肝治疗方面的研究报道较少。而运动对脂肪肝治疗方面的研究报道较少。 （1 1）有氧运动对非酒精性脂肪肝的影响）有氧运动对非酒精性脂肪肝的影响 （2 2）有氧运动对改善非酒精性脂肪肝的机制）有氧运动对改善非酒精性脂肪肝的机制（3 3）有氧运动可以改善脂质代谢）有氧运动可以改善脂质代谢（4 4）有氧运动可以改善胰岛素抵抗）有氧运动可以改善胰岛素
9、抵抗 （5 5）有氧运动可以改善机体抗氧化能力）有氧运动可以改善机体抗氧化能力 1.41.4消脂散对非酒精性脂肪肝的影响和机制消脂散对非酒精性脂肪肝的影响和机制 （1 1）调节血脂代谢，改善）调节血脂代谢，改善IRIR。（2 2）降低血清和肝脏）降低血清和肝脏MDAMDA含量含量, , 增强红细胞和肝脏增强红细胞和肝脏SODSOD的活性的活性, , 同同时增强时增强GSHGSH的活性的活性, , 从而提高抗氧化能力从而提高抗氧化能力, , 抑制脂质过氧化物抑制脂质过氧化物, , 预防脂质代谢紊乱。预防脂质代谢紊乱。（3 3）保护）保护SODSOD活性和抑制氧化低密度脂蛋白的形成发挥减轻氧化活性
10、和抑制氧化低密度脂蛋白的形成发挥减轻氧化脂蛋白中的脂蛋白中的MDAMDA和氧化低密度脂蛋白对肝细胞损伤的作用。和氧化低密度脂蛋白对肝细胞损伤的作用。 1.5 PPAR-1.5 PPAR-在脂肪肝发病中的作用在脂肪肝发病中的作用 （1）降低中性脂质在高密度脂蛋白和极低密度脂蛋白之间的交换，促进低密度脂蛋白的清除；（2）增加脂蛋白酯酶的活性，促进TG的分解；（3）减少脂肪酸、甘油三酯和极低密度脂蛋白的产生；（4）调控氧化过程中脂肪酸代谢酶的基因转录，上调脂肪酸氧化相关蛋白的基因表达，下调脂质合成的基因； 2 2、研究对象与方法、研究对象与方法2.1 2.1 研究对象研究对象 选用清洁级选用清洁级5
11、 5周龄雄性周龄雄性SDSD大鼠（南京青山实验动大鼠（南京青山实验动物研究中心提供）物研究中心提供）6060只，只，体重体重140g-160g140g-160g。动物合格。动物合格证号为：证号为：SexkSexk( (浙浙20080033)20080033)2.2 2.2 运动方式运动方式 HEHE组与组与HZEHZE组大鼠每天进行组大鼠每天进行60min60min无负重有氧游泳运动，游无负重有氧游泳运动，游泳缸体积为泳缸体积为150150606070cm370cm3，水深，水深60cm, 60cm, 内壁光滑，水温内壁光滑，水温313111，HEHE组与组与HZEHZE组适应性游泳组适应性游
12、泳1 1周，第一天游泳周，第一天游泳10min10min，以，以后每天递增后每天递增10min10min至至60min60min，第二周开始每天游泳，第二周开始每天游泳60min60min，每周，每周6 6次，直至游满次，直至游满1010周。周。 2.3 高脂饲料与高脂饲料与“消脂散消脂散”的配方及用量的配方及用量 高脂饲料配方的组成高脂饲料配方的组成:80.5%:80.5%的基础饲料，的基础饲料，14%14%的猪油，的猪油，2%2%的的胆固醇，胆固醇，0.5%0.5%的胆盐，的胆盐，3%3%的麻油，购于南通立默生物科技有限的麻油，购于南通立默生物科技有限公司。公司。 消脂散配方的组成消脂散配
13、方的组成: :制何首乌、山楂、白术、泽泻、柴胡、制何首乌、山楂、白术、泽泻、柴胡、水侄（炒）、冬瓜皮、荷叶、决明子、生大黄、黄芪、三七。水侄（炒）、冬瓜皮、荷叶、决明子、生大黄、黄芪、三七。在每次训练的上午，对在每次训练的上午，对HZHZ组和组和HZEHZE组大鼠以组大鼠以1ml/100gBW1ml/100gBW（浓度为（浓度为0.8g/ml0.8g/ml）剂量的中药灌胃，其余各组灌服等量的生理盐水。）剂量的中药灌胃，其余各组灌服等量的生理盐水。2.3 2.3 生化指标测试生化指标测试 为避免急性运动的影响，大鼠运动后为避免急性运动的影响，大鼠运动后24小时后取样，取样前一天，大小时后取样，取
14、样前一天，大鼠均禁食鼠均禁食12小时，自由饮水。大鼠用小时，自由饮水。大鼠用2的戊巴比妥钠的戊巴比妥钠50mg/kg腹腔注射麻腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，各组大鼠取血后迅速取部分肝大叶组织，迅速放于经醉，腹主动脉取血，各组大鼠取血后迅速取部分肝大叶组织，迅速放于经0.1%DEPC处理的无处理的无RNA污染的去离子水中，漂洗去血渍，立即放入液氮污染的去离子水中，漂洗去血渍，立即放入液氮中冷冻，中冷冻，-70保存，预备测肝脏的各项指标和预备作保存，预备测肝脏的各项指标和预备作RT-PCR。 3 3 荧光定量荧光定量PCRPCR法测定大鼠肝脏法测定大鼠肝脏PPAR-mRNAPPAR-mRNA的表达的
15、表达 3.13.1肝脏组织总肝脏组织总RNARNA的制备的制备 1 0 0 m g 肝组织+ 适量氮液加入1 m L T R I z o l充分研磨加入1 / 5 体积氯仿移入1 . 5 m L E P 管中颠倒1 5 s 充分混匀室温静置2 - 3 m i n4 ，1 2 0 0 0 r / m i n离心1 5 m i n取上层水相移至另一E P 管中加等体积异丙醇室温静置1 0 m i n4 ，1 2 0 0 0 r / m i n离心1 0 m i n ，弃上清加7 5 % 乙醇1 m L提前预冷4 ，1 2 0 0 0 r / m i n离心5 m i n ，弃上清空气干燥2 - 5
16、 m i n去离子甲酰胺溶解- 2 0 冻存备用提前预冷SYBR Green I 染料法染料法作用机理作用机理2.4 2.4 PPAR-扩增引物设计扩增引物设计 2.5 反转录反应反转录反应 2.6 2.6 实时荧光定量实时荧光定量PCRPCR反应反应 实事荧光定量实事荧光定量PCRPCR反应按照反应按照TaKaRaTaKaRa公司生产的公司生产的SYBRSYBRPremix Premix Ex TapTMEx TapTM要求进行，具体反应体系如下（要求进行，具体反应体系如下（20l20l）：）：2.7 2.7 RNA的提取结果的提取结果 RNA的提取结果如图所示，通过甲醛变性胶检测后，提取的
17、提取结果如图所示，通过甲醛变性胶检测后，提取的的RNA完整性好，没有降解，可以进行下一步操作。完整性好，没有降解，可以进行下一步操作。3.1 103.1 10周实验前后周实验前后4 4组大鼠体重变化组大鼠体重变化3 3、研究结果与讨论、研究结果与讨论 通过双因素方差分析，从第通过双因素方差分析，从第2 2周开始一直到第周开始一直到第5 5周，周，HFHF组体重均高于组体重均高于C C组，组，但是从第但是从第5 5周开始，周开始，HFHF组体重均低于组体重均低于C C组，在组，在6-96-9周龄运动可以显著降低大鼠周龄运动可以显著降低大鼠体重，而体重，而“消脂散消脂散”以及有氧运动联合消脂散可以
18、降低大鼠体重，但是差以及有氧运动联合消脂散可以降低大鼠体重，但是差异不显著异不显著。3.2 103.2 10周实验前后周实验前后4 4组组实验大鼠肝脏重量和肝指数实验大鼠肝脏重量和肝指数 与与C C组相比高脂膳食组使得大鼠肝脏重量显著增加。而有氧运动和组相比高脂膳食组使得大鼠肝脏重量显著增加。而有氧运动和“消脂消脂散散”均能有效地抑制大鼠肝脏重量的增加并且有氧运动和均能有效地抑制大鼠肝脏重量的增加并且有氧运动和“消脂散消脂散”有明显的有明显的交互作用。交互作用。 与与C C组相比，高脂膳食使得大鼠肝体比（肝体比肝脏质量体重）增大组相比，高脂膳食使得大鼠肝体比（肝体比肝脏质量体重）增大显著显的。
19、而单独有氧运动、服用显著显的。而单独有氧运动、服用“消脂散消脂散”以及有氧运动联合以及有氧运动联合“消脂散消脂散”均均能明显抑制大鼠肝体比的增加，并且有明交互作用。能明显抑制大鼠肝体比的增加，并且有明交互作用。3.3 3.3 实验大鼠肝功能指标的变化实验大鼠肝功能指标的变化 HF HF组大鼠血清组大鼠血清ALTALT水平有上升的趋势显著；且水平有上升的趋势显著；且HFHF组大鼠血清组大鼠血清ASTAST和和LDHLDH活性活性显著升高。有氧运动或显著升高。有氧运动或“消脂散消脂散”均可以显著地降低高脂饮食大鼠血清均可以显著地降低高脂饮食大鼠血清ASTAST、ALT ALT 和和LDHLDH的活
20、性，而且有氧运动和服用的活性，而且有氧运动和服用“消脂散消脂散”对于降低高脂饮食大鼠血对于降低高脂饮食大鼠血清清ALTALT和和LDHLDH活性均具有显著的交互作用，从而使它们的活性进一步降低。活性均具有显著的交互作用，从而使它们的活性进一步降低。3.4实验大鼠血清中实验大鼠血清中TC、TG和和FFA水平的影响水平的影响 与与C C组相比，高脂饲料使得组相比，高脂饲料使得HFHF组大鼠血清组大鼠血清TGTG、TCTC水平明显增高；有氧运动或水平明显增高；有氧运动或“消脂散消脂散”均能显著地降低高脂饮食大鼠血清均能显著地降低高脂饮食大鼠血清TGTG、TCTC的水平，而且有氧运动和的水平，而且有氧
21、运动和“消脂散消脂散”对降低高对降低高脂饮食大鼠血清脂饮食大鼠血清TGTG、TCTC水平具有显著的交互作用水平具有显著的交互作用 与与C C组相比，组相比，HFHF组大鼠血清组大鼠血清FFAFFA水平明显增高；在高脂饮食的同时进行有氧运动训练水平明显增高；在高脂饮食的同时进行有氧运动训练或服用或服用“消脂散消脂散”能够显著地降低高脂饮食大鼠血清中能够显著地降低高脂饮食大鼠血清中FFAFFA含量，同时有氧运动联合含量，同时有氧运动联合“消消脂散脂散”对进一步降低肝组织中对进一步降低肝组织中FFAFFA水平具有显著的交互作用。水平具有显著的交互作用。 3.5实验大鼠肝脏中实验大鼠肝脏中TC、TG和
22、和FFA水平的影响水平的影响 与与C C组相比较，组相比较，HFHF组大鼠肝组织内组大鼠肝组织内TCTC和和TGTG水平显著升高；有氧运动或服用水平显著升高；有氧运动或服用“消脂散消脂散”均能显著地降低高脂膳食大鼠肝脏组织内均能显著地降低高脂膳食大鼠肝脏组织内TCTC和和TGTG水平，而且有氧运动和水平，而且有氧运动和“消脂散消脂散”对降对降低高脂膳食大鼠肝脏中低高脂膳食大鼠肝脏中TCTC和和TGTG水平具有明显的交互作用。水平具有明显的交互作用。 与与C C组相比，组相比，HFHF组大鼠肝内组大鼠肝内FFAFFA水平明显增高；在高脂膳食的同时进行有氧运动训练水平明显增高；在高脂膳食的同时进行
23、有氧运动训练或服用或服用“消脂散消脂散”能够显著地降低高脂饮食大鼠肝组中能够显著地降低高脂饮食大鼠肝组中FFAFFA含量，同时有氧运联合含量，同时有氧运联合“消脂消脂散散”对进一步降低肝组织中对进一步降低肝组织中FFAFFA水平具有显著的交互作用。水平具有显著的交互作用。3.6实验大鼠肝脏中实验大鼠肝脏中SOD和和MDA含量以及含量以及 SOD/MDA变化的影响变化的影响 与与C C组相比，组相比，HFHF组大鼠肝组织中组大鼠肝组织中SODSOD活力下降显著，且活力下降显著，且MDA MDA 含量显著上升，从而导致含量显著上升，从而导致SOD/MDASOD/MDA显著降低。有氧运动运动或服用显
24、著降低。有氧运动运动或服用“消脂散消脂散”均能使高脂饮食大鼠肝组织中均能使高脂饮食大鼠肝组织中SODSOD活活性显著升高，性显著升高，MDAMDA含量显著降低，从而使含量显著降低，从而使SOD/MDASOD/MDA显著升高；而且有氧运动训练联合显著升高；而且有氧运动训练联合“消消脂散脂散”对高脂膳食大鼠肝组织中对高脂膳食大鼠肝组织中SODSOD活性进一步升高，活性进一步升高，MDAMDA含量进一步降低，具有显著的含量进一步降低，具有显著的交互作用。交互作用。 3.7目的基因和内参基因的扩增曲线目的基因和内参基因的扩增曲线 PPAR-PPAR-和和-actin-actin基因的扩增曲线。由图可知
25、，两个基因的溶解曲线只有基因的扩增曲线。由图可知，两个基因的溶解曲线只有单峰，说明引物的特异好，没有非特异性扩增和引物二聚体的形成。单峰，说明引物的特异好，没有非特异性扩增和引物二聚体的形成。3.8目的基因和内参基因的溶解曲线目的基因和内参基因的溶解曲线 PPAR- PPAR-和和-actin-actin基因的扩增曲线。由图可知，两个基因的溶解曲线只有基因的扩增曲线。由图可知，两个基因的溶解曲线只有单峰，说明引物的特异好，没有非特异性扩增和引物二聚体的形成。单峰，说明引物的特异好，没有非特异性扩增和引物二聚体的形成。3.9 目的基因和内参基因的标准曲线及表达量目的基因和内参基因的标准曲线及表达
26、量 目的基因目的基因PPAR-PPAR-的标准曲线为：的标准曲线为：Y=-2.997X+20.554Y=-2.997X+20.554，拟合度，拟合度R2=0.9932R2=0.9932，扩增效率，扩增效率E=115.61%E=115.61%，-actin-actin的标准曲线为：的标准曲线为：Y=-Y=-3.181X+16.0503.181X+16.050，拟合度，拟合度R2=0.9949R2=0.9949，扩增效率，扩增效率E=106.23%E=106.23%。目的基。目的基因与内参基因的扩增效率基本一致。因与内参基因的扩增效率基本一致。 3.9实验大鼠肝脏中实验大鼠肝脏中PPAR-mRNA
27、的表达的表达 与与C C组相比，高脂膳食组大鼠肝组织中组相比，高脂膳食组大鼠肝组织中PPAR-mRNAPPAR-mRNA表达量显著降低，有氧表达量显著降低，有氧运动和运动和“消脂散消脂散”均能使高脂饮食大鼠肝组织中均能使高脂饮食大鼠肝组织中PPAR-mRNAPPAR-mRNA表达量显著升高，表达量显著升高，而且有氧运动联合而且有氧运动联合“消脂散消脂散”使高脂饮食大鼠肝组织中使高脂饮食大鼠肝组织中PPAR-mRNAPPAR-mRNA表达量升高表达量升高有明显的交互作用。有明显的交互作用。 4.1 实验证实实验证实10周的高脂饮食成功地复制出大鼠非酒精性脂肪肝模周的高脂饮食成功地复制出大鼠非酒精
28、性脂肪肝模型。型。4.2 有氧运动和有氧运动和“消脂散消脂散”对高脂饮食大鼠脂肪肝的形成具有显著对高脂饮食大鼠脂肪肝的形成具有显著的干预作用，且两者具有明显的交互作用。的干预作用，且两者具有明显的交互作用。4.3 脂肪肝的形成与脂肪代谢紊乱有关，有氧运动和脂肪肝的形成与脂肪代谢紊乱有关，有氧运动和“消脂散消脂散”通通过显著改善高脂饮食大鼠的脂肪代谢来干预脂肪肝的形成。过显著改善高脂饮食大鼠的脂肪代谢来干预脂肪肝的形成。4.4 有氧运动和有氧运动和“消脂散消脂散”可以改善高脂饮食大鼠肝组织中氧自由可以改善高脂饮食大鼠肝组织中氧自由基代谢，预防肝细胞的损伤，从而起到保护肝脏功能的作用。基代谢，预防
29、肝细胞的损伤，从而起到保护肝脏功能的作用。4.5有氧运动和有氧运动和“消脂散消脂散”可以有效地提高高脂膳食大鼠肝脏中可以有效地提高高脂膳食大鼠肝脏中PPAR -mRNA表达量，同时有氧运动和表达量，同时有氧运动和“消脂散消脂散”对高脂膳食对高脂膳食大鼠肝组织中大鼠肝组织中PPAR-mRNA表达量升高有显著的交互作用。表达量升高有显著的交互作用。4 4、结论、结论 首先，我要衷心地感谢导师李宁川教授。三年来，李老师首先，我要衷心地感谢导师李宁川教授。三年来，李老师无论在学习还是生活上都给我无微不至的帮助和关怀。在此，无论在学习还是生活上都给我无微不至的帮助和关怀。在此，谨以此文，向恩师致以我最衷
30、心的感谢和崇高的敬意！在本论谨以此文，向恩师致以我最衷心的感谢和崇高的敬意！在本论文完成过程中，感谢扬州大学体育学院金其贯教授和施洪飞教文完成过程中，感谢扬州大学体育学院金其贯教授和施洪飞教授对我实验的指导和关心。授对我实验的指导和关心。 同时感谢动物科学与技术学张根喜老师、赵秀华博士和魏同时感谢动物科学与技术学张根喜老师、赵秀华博士和魏岳博士在岳博士在RT-PCR实验时的帮助；以及体育学院的潘缈琛、陈实验时的帮助；以及体育学院的潘缈琛、陈小燕、李玲、徐惠、陈慧和周盛强等同学在整个动物实验、样小燕、李玲、徐惠、陈慧和周盛强等同学在整个动物实验、样本处理和生化指标测试过程中给予的帮助。在此，谨以此文，本处理和生化指标测试过程中给予的帮助。在此，谨以此文，向他们致以深深的谢意！向他们致以深深的谢意！ 在研究生的三年学习期间，感谢体育学院各位领导和老师在研究生的三年学习期间，感谢体育学院各位领导和老师给予我的帮助和指导。给予我的帮助和指导。 感谢我的家人、朋友和同学们对我的支持！感谢我的家人、朋友和同学们对我的支持！ 最后，感谢所有和我共同生活学习的老师、同学和朋友，最后，感谢所有和我共同生活学习的老师、同学和朋友，愿我们的明天更加辉煌灿烂！愿我们的明天更加辉煌灿烂！致谢致谢谢谢谢谢
