1、 幽门螺旋杆菌幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）是革兰氏阴性、微需氧的细菌，生存于胃部及十二指肠的各区域内。它会引起胃黏膜轻微的慢性发炎，甚或导致胃及十二指肠溃疡与胃癌。超过80%的带原者并不会表露病征。幽门螺杆菌最初被命名为幽门弯曲菌，后为修正拉丁语语法错误而变为C. pylori。1989年，16SrRNA基因定序等研究显示其并不属于弯曲菌属，幽门螺杆菌便被独立归类至螺杆菌属。世界超过50%人口在消化系统上部带原有幽门螺杆菌。感染较盛行于发展中国家，而西方国家的影响范围也逐渐缩小。幽门螺杆菌的传染途径不明，但个体通常是于幼时被感染。幽门螺杆菌的螺旋状被认为是演化以通过胃黏
2、膜。中文名幽门螺杆菌分布区域生存于胃部及十二指肠的各区域内门变形菌门目弯曲菌目属螺杆菌属引发症状胃黏膜轻微的慢性发炎，甚或导致胃及十二指肠溃疡与胃癌外文名Helicobacter pylori界细菌界纲-变形菌纲科弯曲菌科种幽门螺杆菌中文学名幽门螺杆菌1综合概述研究表明，超过90%的十二指肠溃疡和80%左右的胃溃疡，都是由幽门螺杆菌感染所导致的。消化科医生可以通过内窥镜检查和呼气试验等诊断幽门螺杆菌感染。抗生素的治疗方法已被证明能够根治胃溃疡等疾病。病理学特征电子显微镜下，菌体的一端可伸出26条带鞘的鞭毛。在分裂时，两端均可见鞭毛。鞭毛特征鞭毛长约为菌体11.5倍。粗约为30nm。鞭毛的顶端有
3、时可见一球状物，实为鞘的延伸物。每一鞭毛根部均可见一个圆球状根基伸入菌体顶端细胞壁内侧。在其内侧尚有一电子密度降低区域。鞭毛作用鞭毛在运动中起推进器作用，在定居过程中起抛锚作用。生理学特征幽门螺旋杆菌幽门螺杆菌是微需氧菌，环境氧要求58%，在大气或绝对厌氧环境下不能生存。许多固体培养基可作幽门螺杆菌分离培养的基础培养基，布氏琼脂使用较多，但需加用适量全血或胎牛血清作为补充物方能生长。常以万古霉素、TMP、两性霉素B等组成抑菌剂防止杂菌生长。幽门螺杆菌对临床微生物实验中常用于鉴定肠道细菌的大多数经典生化实验不起反应。而氧化酶、触酶、尿素酶、碱性磷酸酶、r谷氨酰转肽酶、亮氨酸肽酶这七种酶反应是作为
4、幽门螺杆菌生化鉴定的依据。巴里马歇尔和罗宾沃伦喝了幽门螺杆菌的培养液，便于不久之后便得了胃病。分子生物学特征幽门螺杆菌的全基因序列已经测出，其中尿素酶基因有四个开放性读框，分别是UreA、UreB、 UreC 和UreD。UreA和UreB编码的多肽与尿素酶结构的两个亚单位结构相当。幽门螺杆菌的尿素酶极为丰富，约含菌体蛋白的15%，活性相当于变形杆菌的400倍。尿素酶催化尿素水解形成“氨云”保护细菌在高酸环境下生存。此外，尚有VacA基因和CagA基因，分别编码空泡毒素和细胞毒素相关蛋白。根据这两种基因的表达情况，又将幽门螺杆菌菌株分成两种主要类型：型含有CagA和VacA基因并表达两种蛋白，
5、型不含CagA基因，不表达两种蛋白，尚有一些为中间表达型，即表达其中一种毒力因子。现在多认为型与胃疾病关系较为密切。2发现历史发现人巴里马歇尔（Barry J. Marshall）和罗宾沃伦（J. Robin Warren）（由此二人获得2005年的诺贝尔生理学或医学奖）发现故事1875年，德国的科学家在人体的胃中发现一种螺旋细菌，但无法容器中培植，研究结果没有受到太大的重视。1979年，病理学医生Warren在慢性胃炎患者的胃窦黏膜组织切片上观察到一种弯曲状细菌，并且发现这种细菌邻近的胃黏膜总是有炎症存在，因而意识到这种细菌和慢性胃炎可能有密切关系。1981年，消化科临床医生Marshall
6、与Warren合作，他们以100例接受胃镜检查及活检的胃病患者为对象进行研究，证明这种细菌的存在确实与胃炎相关。此外他们还发现，这种细菌还存在于所有十二指肠溃疡患者、大多数胃溃疡患者和约一半胃癌患者的胃黏膜中。经过多次失败之后，1982年4月，Marshall终于从胃黏膜活检样本中成功培养和分离出了这种细菌。为了进一步证实这种细菌就是导致胃炎的罪魁祸首，Marshall和另一位医生Morris不惜喝下含有这种细菌的培养液，结果大病一场。基于这些结果，Marshall和Warren提出幽门螺杆菌涉及胃炎和消化性溃疡的病因学。1984年4月5号，他们的成果发表于在世界权威医学期刊柳叶刀（lance
7、t）上。成果一经发表，立刻在国际消化病学界引起了轰动，掀起了全世界的研究热潮。世界各大药厂陆续投巨资开发相关药物，专业刊物螺杆菌杂志应运而生，世界螺杆菌大会定期召开，有关螺杆菌的研究论文不计其数。通过人体试验、抗生素治疗和流行病学等研究，幽门螺杆菌在胃炎和胃溃疡等疾病中所起的作用逐渐清晰，科学家对该病菌致病机理的认识也不断深入。2005年10月3日，瑞典卡罗林斯卡研究院宣布，2005年度诺贝尔生理学或医学奖授予这两位科学家以表彰他们发现了幽门螺杆菌以及这种细菌在胃炎和胃溃疡等疾病中的作用。医学界对该菌与胃部疾病关系的认知较为缓慢，他们一直认为没有任何细菌能够长时间在胃部强酸的环境下生存。及后经
8、过更详细的研究，包括马歇尔曾喝下试管内的杆菌得到胃炎，并以抗生素治疗，医学界才开始改变对胃病的看法。1994年，美国国立卫生研究院（NIH）提出大多数常见的胃炎疾病均由幽门螺杆菌所造成，在治疗过程应加入抗生素。在正确认识该细菌以前，胃溃疡病人通常会以中和胃酸及减少分泌的药物来治疗，但经此方法治疗后大多会复发。而胃炎患者则会服用碱式柳酸铋，这方法通常会见效，当时人们仍不知道其机制，后来才发现药物中的柳酸盐会杀死胃部的杆菌，可作为抗生素。现时，这类疾病会以抗生素来杀灭病菌。幽门螺杆菌是人类至今唯一一种已知的胃部细菌，其他种的螺杆菌也于部分哺乳动物及雀鸟体内找到。长期的溃疡，会导致癌症，因此WHO宣
9、布胃幽门杆菌为微生物型的致癌物质，也是第一个可致癌的原核生物。发现意义幽门螺旋杆菌大量研究表明，超过90%的十二指肠溃疡和80%左右的胃溃疡，都是由幽门螺杆菌感染所导致的。目前，消化科医生已经可以通过内窥镜检查和呼气试验等诊断幽门螺杆菌感染。抗生素的治疗方法已被证明能够根治胃溃疡等疾病。幽门螺杆菌及其作用的发现，打破了当时已经流行多年的人们对胃炎和消化性溃疡发病机理的错误认识，被誉为是消化病学研究领域的里程碑式的革命。由于他们的发现，溃疡病从原先难以治愈反复发作的慢性病，变成了一种采用短疗程的抗生素和抑酸剂就可治愈的疾病，大幅度提高了胃溃疡等患者获得彻底治愈的机会，为改善人类生活质量作出了贡献
10、。这一发现还启发人们去研究微生物与其他慢性炎症疾病的关系。人类许多疾病都是慢性炎症性疾病，如局限性回肠炎、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎、动脉粥样硬化。虽然这些研究目前尚没有明确结论，但正如诺贝尔奖评审委员会所说：“幽门螺杆菌的发现加深了人类对慢性感染、炎症和癌症之间关系的认识。”3主要危害深居胃黏膜兴风作浪的幽门螺杆菌（简称Hp），近年发现幽门螺杆菌并不那么老实，不仅与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌有关，还可引起其它器官和组织疾病，特别是心血管疾病、贫血以及特发性血小板减少性紫癜等。只要消灭Hp，这些疾病可意外改善或恢复。幽门螺杆菌感染是我国感染率最高的一种慢性疾病，是慢性胃炎的主要病因，它启动了
11、一系列致病事件，导致萎缩性胃炎、化生、异型增生和最终胃癌的发生。根除幽门螺旋杆菌可预防胃粘膜癌前变化（萎缩性胃炎、肠化生）的发生和发展。清除胃内幽门螺旋杆菌感染，可使胃癌前病变及胃癌的风险大大降低。幽门螺旋杆菌非常顽固，一旦感染，除非用正规的治疗方案，否则自愈率接近于零。注意：幽门螺杆菌原本就跟人类共生共存千百万年，研究显示不同种族也有不同的幽门螺杆菌，研究幽门螺杆菌的差异，还可以作部族迁移的证据。所以能够与人类共存共荣，一定有其必要性的一面。幽门螺杆菌的大量出现，是因为整个消化系统内在的平稳受到破坏，幽门螺杆菌才大量滋生，也才导致溃疡。所以不恢复整个消化系统的稳定，汲汲追求消灭幽门螺杆菌，难
12、免舍本逐末，最後还是没有能够完全解决问题。4细菌培养用于培养的胃粘膜活检标本应置于生理盐水、营养肉汤或20%葡萄糖中，然后立即转送到细菌室培养。如果标本不能在4个小时内培养，就应放在4保存，但不宜超过24小时。长期保存用于培养的活检标本的唯一方法是将其置于70。CO2或液氮之中。培养幽门螺杆菌的培养基包括非选择性及选择性两种。常用的非选择性培养基基础为脑心浸液琼脂、哥伦比亚琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂以及Wilkins-Chalgren琼脂。培养基中需加7%10%的去纤维蛋白马血。羊血、人血、马血清、氯化血红素、淀粉、胆固醇或环糊精（cyclodextrins）也可代替马血。选择培养基则是在上述 培
13、养基中添加一定的抗菌药物，如万古霉素、啶酸、二性霉素B、多粘菌素B以及甲氧苄氨嘧啶（TMP）。常用的有Skirrow 配方及Dent 配方。前者原用于弯曲菌的培养，亦可用于幽门螺杆菌培养。后者为前者的改良，即将多粘菌素用头孢磺啶取代，因为少数（5%左右）幽门螺杆菌菌株对多粘菌素敏感。Drnt配方为万古霉素（10mg/L）、头孢磺啶（5mg/L）、TMP（5mg/L）以及二性霉素B（5mg/L）。有报道指出，部分菌株对啶酸敏感，因而培养基中应尽量避免作用该抗生素。5传播途径传播途径一：口口传播：中国保守的喂养方式，家长将食物嚼碎之后再喂给孩子，如果家长患有慢性胃炎，就会将病菌通过口口喂养的方式污
14、染给孩子。传播途径二：恋人之间的亲吻：幽门螺旋杆菌广泛存在于感染者的唾液、牙菌斑中。接触感染者的唾液、食用受幽门螺旋杆菌污染的食物均可造成传染。6致病机理1、Hp感染诱导产生特异性细胞和体液免疫，并诱发机体的自身免疫反应，损害胃肠黏膜。黏膜损伤后，从炎症到癌变的过程可能是：慢性胃炎萎缩性胃炎肠上皮化生不典型增生癌变。研究提示根除Hp后可以阻止这一过程的发展。2、感染Hp后大多数患者表现隐匿，无细菌感染的全身症状，也常无胃炎的急性期症状，临床上患者往往以慢性胃炎、消化性溃疡等表现就诊。从吞食活菌自愿者试验结果可见，感染先引起急性胃炎，未治疗或未彻底治疗，而发展为慢性胃炎。3、急性感染潜伏期27天
15、，胃镜下表现为胃窦急性充血糜烂，组织学检查黏膜层有充血、水肿及中性粒细胞浸润，症状可表现为腹痛、腹胀、晨起恶心、反酸、嗳气、饥饿感，重者出现呕吐。现已有足够证据表明，Hp是引起慢性胃炎的主要原因。7感染途径幽门螺旋杆菌专家指出，正常情况下，胃壁有一系列完善的自我保护机制（胃酸、蛋白酶的分泌功能，不溶性与可溶性粘液层的保护作用，有规律的运动等），能抵御经口而入的千百种微生物的侵袭。自从在胃粘膜上皮细胞表面发现了幽门螺杆菌以后，才认识到幽门螺杆菌几乎是能够突破这一天然屏障的唯一元凶。goodwin把幽门螺杆菌对胃粘膜屏障在破坏作用比喻作对“屋顶”的破坏给屋内造成灾难那样的后果，故称为“屋漏”学说。
16、目前对幽门螺旋杆菌的感染途径的研究能归入这一学说的资料最多。主要包括：使幽门螺杆菌穿透粘液层在胃上皮细胞表面定居的因素;对胃上皮细胞等起破坏作用的毒素因子；各种炎症细胞及炎症介质;免疫反应物质等。这些因素构成幽门螺旋杆菌感染途径的基本病理变化，即各种类型的急、慢性胃炎。其中近年来得到最重要关注的是空泡毒素vaca、细胞毒素相关蛋白质caga，和尿素酶等的作用及其分子生物学研究。Hp进入胃后，借助菌体一侧的鞭毛提供动力穿过黏液层。研究表明，Hp在粘稠的环境下具有极强的运动能力，强动力性是Hp致病的重要因素。Hp到达上皮表面后，通过粘附素，牢牢地与上皮细胞连接在一起，避免随食物一起被胃排空。并分泌
17、过氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶，以保护其不受中性粒细胞的杀伤作用。Hp富含尿素酶，通过尿素酶水解尿素产生氨，在菌体周围形成“氨云”保护层，以抵抗胃酸的杀灭作用。 以下原因可以引起Hp感染。刺激性食物由于刺激性食物容易刺激胃粘膜，致使胃的体抗力低下，从而容易导致幽门螺旋杆菌的入侵。所以刺激性食物对于幽门螺旋杆菌抗体的感染，虽然不是立竿见影的，但却不可忽视。生吃幽门螺旋杆菌是胃病的高发因素，而感染幽门螺旋杆菌的频繁途径之一就是生吃膳食。西餐中牛排七分熟甚至三分熟的习惯使然，或者打火锅时肉都还没烫熟，却早已吃得不亦乐乎，这些都有可能存在感染幽门螺旋杆菌的安全隐患。共餐这是得了幽门螺旋杆菌的重要
18、途径之一。就像感冒一样，“一人生病全家吃药”的现象十分普遍，所以建议居家中最好搞好卫生，食用公筷等。另外，经常在外就餐的人被感染的机率也会大大增加，频繁出差的人须多加注意。在牙齿繁殖传播幽门螺旋杆菌可在牙菌斑和龋齿上生长繁殖。所以要严格刷牙，做好对幽门螺旋杆菌繁殖的隔离工作。接吻研究表明，唾液中有幽门螺杆菌，如果情侣深度接吻，幽门螺旋杆菌的传播将自然畅通无阻，所以接吻是感染幽门螺旋杆菌最直接的途径。8临床症状1）幽门螺杆菌感染的症状主要是反酸、烧心以及胃痛、口臭。这主要是由于幽门螺杆菌诱发胃泌素疯狂分泌，而发生发酸烧心，而具有胃溃疡疾病的患者，幽门螺杆菌更是引起了主要症状胃痛的发生，口臭最直接
19、的病菌之一就是幽门螺杆菌了。2）幽门螺旋杆菌能够引起慢性胃炎。所发生的主要临床表现有：上腹部不适、隐痛，有时发生嗳气、反酸、恶心、呕吐的症状，病程较为缓慢，但是容易反复发作。3）患者感染幽门螺杆菌后产生多种致病因子，从而引起胃黏膜损害，临床疾病的发生呈现多样性，而且患者多会出现反酸、嗳气、饱胀感等等，均是感染幽门螺杆菌的患者比没有感染幽门螺杆菌的患者多数倍。4）幽门螺杆菌感染有时也没有特别明显的症状，这时一般是通过检查来判断有无幽门螺杆菌感染的，幽门螺杆菌这种致病菌，很容易诱发胃肠疾病的发生。9引发病症研究发现，幽门螺杆菌感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤和
20、胃癌的主要致病因素。1994年世界卫生组织/国际癌症研究机构(WHO/IARC)将幽门螺杆菌定为类致癌原。Hp与胃炎正常情况下，胃壁有一系列完善的自我保护机制（胃酸、蛋白酶的分泌功能，不溶性与可溶性粘液层的保护作用，有规律的运动等），能抵御经口而入的千百种微生物的侵袭。自从在胃粘膜上皮细胞表面发现了Hp以后，才认识到hp几乎是能够突破这一天然屏障的唯一元凶。goodwin把Hp对胃粘膜屏障在破坏作用比喻作对“屋顶”的破坏给屋内造成灾难那样的后果，故称为“屋漏”学说。对hp感染的研究能归入这一学说的资料最多。主要包括：使hp穿透粘液层在胃皮细上胞表面定居的因素；对胃上皮细胞等起破坏作用的毒素因子
21、；各种炎症细胞及炎症介质；免疫反应物质等。这些因素构成hp感染的基本病理变化，即各种类型的急、慢性胃炎。其中近年来得到最重要关注的是空泡毒素vaca、细胞毒素相关蛋白质caga，和尿素酶等的作用及其分子生物学研究。1Hp与消化性溃疡幽门螺旋杆菌幽门螺杆菌感染明显地增加了发生十二指肠和胃溃疡的危险性。大约1/6 幽门螺杆菌感染者可能发生消化性溃疡病。治疗幽门螺杆菌感染可加速溃疡的愈合和大大降低溃疡的复发率。不用抑酸剂，单用抗幽门螺杆菌药物治疗，表明也能有效地治愈胃和十二指肠溃疡。幽门螺杆菌感染已经与一些引起溃疡病的原因找到了联系。例如：胃酸增加、十二指肠胃化生、粘膜屏障性质的改变、胃窦粘膜产生炎
22、症代谢产物等。这些患者中的发现已在动物实验中得到初步证明。实际上消化性溃疡涉及几个复杂的相互作用的机制。如细菌的毒力因素（vaca和caga等），宿主的反应性（例：如易感性的遗传、十二指肠上皮的胃化生、粘膜屏障和炎症的相互作用、泌酸反应、神经调节作用）和环境因素（例如饮食、获得感染的年龄）的综合作用导致溃疡的最后结果。过去临床上对溃疡的发生有一句谚语，叫“no acid,no ulcer”。现在，从现代理论来看，“no hp,no ulcer”应得到更多地强调。消化性溃疡（包括胃溃疡和十二指肠球部溃疡）病因，长期以来认为与遗传、胃酸过多、胆汁返流、吸烟等多种因素有关，其中尤以胃酸被认为是发病的
23、主要因素。近80年来，胃酸一直被认为是胃溃疡形成的原因，所以，有了“无酸无溃疡”的传统说法。消化性溃疡的传统治疗方法是中和胃酸或抑制胃酸分泌。过去沿用碱性药物，目前常用Hz受体抑制剂或其他胃酸分泌抑制剂。应用这些抗酸抑酸药物，确实有利于溃疡的愈合，但是这些药物有一共同缺点，一旦停药，不久溃疡便又复发。因此，有些病人要间断性服药，有的则需长期服用维持剂量。还有不少病人溃疡病却屡愈屡发。通过胃液分析发现，十二指肠溃疡病人，胃酸分泌过高；而胃溃疡病人中胃酸分泌增加者仅16%，而许多病人胃酸分泌正常，有的甚至低于正常。由此可见胃酸分泌的多少，并非是胃溃疡发病的重要因素，而胃粘膜防御能力降低，使胃酸等攻
24、击作用相对增加，可能是形成胃溃疡的主要原因。Hp与胃癌从对Hp感染的大量研究中提出了许多Hp致胃癌的可能机制：细菌的代谢产物直接转化粘膜；类同于病毒的致病机制，hpdna的某些片段转移入宿主细胞，引起转化；hp引起炎症反应，其本身具有基因毒性作用。10流行病学研究表明，幽门螺杆菌感染了世界范围内一半以上的人口，其发病率各个国家不同，甚至同一国家的各个地区也不相同。发病率的高低与社会经济水平，人口密集程度，公共卫生条件以及水源供应有较密切的关系。也有报道指出，Hp的感染有明显的季节分布特征，以78月份为高峰。在亚洲地区，中国内地、中国香港、越南、印度等少年幽门螺杆菌的感染率分别60%、50%、4
25、0%、70%。慢性胃炎患者的胃粘膜活检标本中Hp检出率可达80%90%，而消化性溃疡患者更高，可达95%以上，甚至接近100%。胃癌由于局部上皮细胞已发生异化，因此检出率高低报道不一。在自然人群中初出生的新生儿血清中抗Hp-IgG水平很高，接近成人水平，可能从母体获得被动免疫抗体之故。半年后迅速下降。在我国及大多数发展中国家中阳性率待降至10%20%后又迅速回升。大约在10岁以后即迅速上升达到或接近成人阳性检出率水平。中国及大多数发展中国家人群Hp感染因地区有所不同。低达20%，高达90%，人群中总感染率高于发达国家。这些基本资料说明了如下几个问题：1、胃病患者中Hp检出率远高于人群中总的检出
26、率，这说明Hp感染者并不都得胃病。这可能还蕴藏着与致病有关的其他因素，特别是遗传因素（宿主的易感性和菌株的型别差异等）；2、人群中的Hp感染率与胃病的发生率，发展中国家高于发达国家。这又与社会经济、卫生状况有关。特别是现已证明胃癌高发区不仅与该地区人群中Hp感染率高有关外，还与人群中Hp的早发感染有关；3、人类一旦感染Hp后，若不进行治疗，几乎终身处于持续感染中。因此感染率总的讲来随着年龄增长而增长。多数学者认为“人人”“粪口”是主要的传播方式和途径，亦可通过内镜传播，而且Hp感染在家庭内有明显的聚集现象。父母感染了Hp其子女的感染机会比其它家庭高得多。对感染Hp的家庭调查提示，有Hp感染者家
27、庭中的“健康人”，Hp抗体阳性率为64%，明显高于同年龄组无Hp感染患者家庭的“健康人”（13%）。11诊断方法市场上有一种是用唾液作为检测样本的，诊断口腔幽门螺旋杆菌的方法，取样方便，没有副作用，适合各年龄段人群检查，为幽门螺杆菌的全面诊断和治疗提供检测平平台。自1983年通过胃镜取活检标本分离培养成功以来，对Hp感染的诊断已发展出了许多方法，包括有细菌学、病理学、血清学、同位素示踪、分子生物学等。但总的讲来，从标本采集角度看，可以分为侵袭性和非侵袭性两大类。侵袭性方法主要指必需通过胃镜取活检标本检查的方法，是目前消化病学科的常规方法。它包括细菌的分离培养和直接涂片、快速尿素酶试验，药敏试验
28、。非侵袭性方法主要指不通过胃镜取活检标本诊断Hp标本感染的方法。这类方法包括血清学和同位素踪两大类。12检测方法常规检测方法1、呼气检测仪检查：这是幽门螺杆菌检测的最先进设备之一，不需插管，只须轻轻吹一口气，就能查出胃病致病“元凶”幽门螺旋杆菌（HP）的感染例。简便、快速、准确性高，无创伤、无交叉感染。2、免疫学检测：通过测定血清中的幽门螺杆菌抗体来检测幽门螺杆菌感染，包括补体结合试验、凝集试验、被动血凝测定、免疫印迹技术和酶联合吸附测定等。3、细菌的直接检查：通过胃镜检查钳取胃粘膜作直接涂片、染色，组织切片染色及细菌培养来检测幽门螺旋杆菌。侵入性检测方法幽门螺旋杆菌1.细菌培养:将胃粘膜活检
29、标本做微需氧环境下培养，如培养出幽门螺杆菌即可诊断为幽门螺杆菌感染。因其特异性高达100%，常被视为幽门螺杆菌感染诊断的”金标准”。可用于验证其它诊断性实验，亦可用于药敏试验、细菌分型、致病基因的研究等。但它是幽门螺杆菌诊断试验中技术要求最高的一种方法，需要经费、时间和人力均较多，因此限制了其临床使用，主要用于科学研究。还应注意，胃粘膜组织中细菌量过少，细菌繁殖能力差等因素可能会影响幽门螺杆菌的培养而导致假阴性。2. 快速尿素酶试验(RUT)幽门螺杆菌产生的尿素酶，可分解尿素产生NH3和CO2，NH3的产生可使pH值升高，胃粘膜组织呈碱性，据此原理可通过加入pH指示剂通过颜色的改变判断有无幽门
30、螺杆菌感染存在。目前已有多种尿素酶试剂盒或试纸可供临床使用，因其操作简便、费用低、省时，成为侵入性检测方法的首选。快速尿素酶试验己有许多方法的改进，如应用化学发光pH指示剂，使结果出现更快。在内镜检查时使用幽门螺杆菌敏感化学感受检测器，需时仅1min。采用定标的快速尿素酶试验，可测定幽门螺杆菌定植密度，根据黄、绿、淡蓝反应，可对结果进行分级。3. 胃粘膜组织切片染色镜检:将胃粘膜活检组织标本固定、脱水后常规石腊包埋、切片染色、镜下观察，根据幽门螺杆菌的形态学特征进行检测和分折，可以直接观察胃粘膜表面定植的幽门螺杆菌。其染色方法有W-S银染、改良Giemsa染色、甲苯胺蓝染色、免疫组化染色等。因
31、染色方法的不同，各有不同的特点，其中免疫组化染色是一个高敏感和特异的染色方法，它是组织学检测的“金标准”。4.胃粘膜直接涂片染色镜检:即将胃粘膜组织直接涂于玻璃片，一般用Gram染色后相差显微镜下观察幽门螺螺杆菌。Piccolomini等报道了用Leifson鞭毛染色法诊断幽门螺杆菌感染，用Leifson鞣酸一品红染色法来做胃活检标本印片细菌学检查，以显示幽门螺杆菌的鞭毛，并与组织学检查、快速尿素酶试验和细菌培养等方法进行比较。Leifson染色法15分可完成，其特异性和敏感性与其它检查方法无显著性差异(P0.05)。因比，Leifson染色法具有快速、敏感、可回顾性分析等优点，是一种非常有用
32、的侵入性试验方法。5.聚合酶链反应试验(PCR检测技术):利用与幽门螺杆菌功能基因分布有关的核酸片段设计PCR引物或探针，依次进行体外基因扩增或杂交，通过对该菌DNA的测定而诊断有否感染幽门螺杆菌。目前幽门螺杆菌的多种基因，如尿素酶(A、B、C、D)基因、16S-rDNA基因、VacA及CagA基因均已克隆成功，根据幽门螺杆菌不同的耙基因，设计不同的引物，从而建立不同的PCR系统，用来检测幽门螺杆菌都取得了成功。用作PCR的胃粘膜标本应作匀浆处理和/或用特殊缓冲液溶解，以便获取足够的DNA。反应混合物中含有耐热DNA聚合酶、核苷酸、引物以及用来测定幽门螺杆菌DNA的胃粘膜标本。在PCR仪上经过
33、3040个扩增循环后，扩增产物可经凝胶电泳分析。如果在电泳中出现与引物相符的DNA带，可判断为阳性。现在常用来识别幽门螺旋杆菌DNA的引物来自尿素酶基因(UreA)和16S-rDNA基因。PCR目前主要是用作分子生物学及分子流行病学研究，尤其是用于菌株的DNA分型。幽门螺杆菌基因组DNA203bpPCR产物的单链构象多态(SSCP)也可用于分析和鉴定临床分离的幽门螺杆菌菌株。SSCP-PCR不仅可以用于大规模的幽门螺杆菌流行病学调查，而且能正确评估根除治疗后再现的幽门螺杆菌是复发还是再感染。该方法简单快速、敏感性强，易于比较。但PCR方法应用于胃活检组织诊断幽门螺杆菌感染，与细菌培养和组织学染
34、色镜检比较无明显优越性。现在PCR可通过鼻胃管收集5ml胃液作PCR检测。采用胶囊包裹的尼龙线取胃液标本的方法，使这一诊断性试验的侵入性更小。胃液PCR检测幽门螺杆菌敏感性高，但存在引物特异性问题，如针对尿素酶基因的引物，可能与口腔和胃内其它尿素酶阳性菌丛起交叉反应。非侵入性检测方法1. C13和C14尿素呼气试验(UBT) 幽门螺杆菌产生的尿素酶可将内源性或外源性尿素分解成NH3和CO2，后者在小肠上段吸收，进入血后随呼气排出。口服一定量的C13和C14尿素后，通过高灵敏度质谱仪或液闪仪分别测定呼气中C13和C14的量可判断有无幽门螺杆菌感染。C13为稳定同位素，无放射性，但价格昂贵；C14
35、为放射性同位素，辐射量较小，也有较高的安全性，其价格较廉，但孕妇及儿童仍不宜采用，且大规模使用可能给环境污染带来隐患。尿素呼气试验突出的优点是: (1) 无创、方法简便，不需要通过内镜获取标本；(2) 克服了胃内幽门螺杆菌“灶性分布”及取材局限的缺点，能反映“全胃”情况，并可对胃内幽门螺杆菌的感染密度作半定量评估。尿素呼气试验有较高的敏感性和特异性，但仍受诸如药物、上消化道出血、胃内其它产生尿素酶细菌等因素影响，可能出现假阴性或假阳性。该法还受临界值高低的影响，因此临界值的确定非常重要；此外，也受服药至呼气收集间隔时间长短的影响，得到被检者的配合亦很重要。2. 15N尿氨排泄试验:口服含15N
36、尿素后，利用15N尿素可被幽门螺杆菌产生的尿素酶分解产生NH3和CO2， NH3经吸收在肝脏代谢而经尿中排出的原理，通过色质联用仪器检测尿中15N尿氨而判断有否幽门螺杆菌感染。该法无创、无放射性，敏感性和特异性高，但检测结果受机体吸收、代谢、排泄等众多因素干扰，且设备昂贵，临床应用受到一定限制。幽门螺旋杆菌3. 粪便幽门螺杆菌抗原检测:由于定居在胃上皮细胞表面的幽门螺杆菌，随着胃粘膜上皮的快速更新脱落，幽门螺杆菌也随之脱落，并通过胃肠道从粪便排出。幽门螺杆菌粪便抗原检测试检采用酶联免疫分析双抗体夹心法，能够特异性诊断人体内幽门螺杆菌感染。该方法操简便、省时、不需昂贵仪器，适用于婴幼儿、儿童幽门
37、螺杆菌感染的检测，幽门螺杆菌根治疗效评价，以及幽门螺杆菌感染的流行病学调查等。4. 血清及分泌物抗体检测:幽门螺杆菌菌体表面存在多种抗原成分，如尿素酶、脂多糖、粘附素等成分，这些抗原均可刺激宿主产生免疫反应，产生IgG、IgA、IgM抗体，传统的血清学检测主要是检测可长期存在于血清中的IgG抗体。常用的方法主要有酶联免疫吸附法、免疫酶试验、免疫印迹技术、胶乳凝集试验等。酶联免疫吸附法(ELISA)是目前最常选用的定性或定量的检测幽门螺杆菌抗体IgG的方法。但由于常选用活体细菌、福尔马林处理过的细菌、酸性甘氨酸抽取物等制备物作为抗原，与其它的细菌间可能发生交叉反应，影响检测结果。近年来应用纯化尿
38、素酶作为抗原来检测抗体，提高了特异性；新型血清抗体的检测方法，如快速免疫色层法(Flexpact，TMHp)该法是根据反向免疫色层法原理，快速、定性测定血清Hp-IgG抗体；Hp快速检测试检(CIMtest)，它利用免疫层析技术检测全血、血浆或血清中的幽门螺杆菌特异抗体，该方法敏感性和特异性较高，只需采末稍血用试剂盒检测，15分便可得到结果。由于幽门螺杆菌感染数周后才出现特异性抗体，幽门螺杆菌阴性者血中也可存在交叉反应性抗体(如空肠弯曲菌)，且幽门螺杆菌根除治疗后68个月内甚至几年可持续在阳性水平，故血清学阳性不能完全肯定患者有活动性感染，阴性也不能排除初期的感染。因此，血清学检测不宜作为现症
39、感染或根除疗效评估的标准，主要用于易感人群的筛查及流行病学调查。CIM 试剂盒含有一个基于高度保守的重组抗原，故可以区分现症感染或既往感染。尿液、唾液等分泌物抗体检测方法，取样简便，无痛苦，其敏感性、特异性与血清学试验相似，结果也可受某些因素影响。最新检查手段诊断工具：尿素13C/14C呼气试验。整个试验过程只需30分钟，无其他任何不适。该方法使众多高血压、心脏病及对胃镜过敏的患者避免了做胃镜的不适感，是目前理想的检测方法之一。其他检测方法幽门螺旋杆菌感染的检查方法很多，主要包括细菌的直接检查、尿毒酶活性测定、免疫学检测及聚合酶链反应等方法。细菌的直接检查是指通过胃镜检查钳取胃粘膜（多为胃窦粘
40、膜）作直接涂片、染色，组织切片染色及细菌培养来检测幽门螺旋杆菌。其中胃粘膜细菌培养是诊断幽门螺旋杆菌最可靠的方法，可作为验证其他诊断性试验的“金标准”，同时又能进行药敏试验，指导临床选用药物。尿毒酶检查因为幽门螺旋杆菌是人胃内唯一能够产生大量尿毒酶的细菌，故可通过检测尿毒酶来诊断幽门螺旋杆菌感染。尿毒酶分解胃内尿毒生成氨和二氧化碳，使尿素浓度降低、氨浓度升高。基于此原理已发展了多种检测方法：胃活检组织尿毒酶试验；呼吸试验；胃液尿素或尿素氮测定；15N-尿素试验。免疫学检测目前已有多种免疫学检测方法，通过测定血清中的幽门螺旋杆菌抗体来检测幽门螺旋杆菌感染，包括补体结合试验、凝集试验、被动血凝测定
41、、免疫印迹技术和酶联合吸附测定（ELISA）等。抗体检测幽门螺旋杆菌抗体检测是利用胶体金技术定性检测人血清、血浆或全血中抗胃幽门螺旋杆菌抗体。在检测条中硝酸纤维薄膜的测试区包被有胃幽门螺旋杆菌抗原，1质控区标有胃幽门螺旋杆菌特异性单克隆抗体。在样品端的玻璃纤维纸上固定有胃幽门螺旋杆菌抗原胶体金颗粒。检测时，加入的样品首先与包被抗原的胶体金颗粒混匀，并因毛细管作用混合液将沿膜向检测区移动。当病人样品中含有胃幽门螺旋杆菌特异性抗体时，即与检测线（T线）上的抗原形成抗原-抗体-抗原胶体金颗粒复合物，并显示出红线。检测区不出现颜色带，表明阴性结果。质控区总会有一条色带形成，该色带出现表明加样量充足及试
42、剂盒工作系统正常。聚合酶链反应技术正常胃粘膜很少检出幽门螺旋杆菌（06%），慢性胃炎患者幽门螺旋杆菌的检出率很高，约50%80%，慢性活动性胃炎患者幽门螺旋杆菌检出率则更高，达90%以上。唾液法测定幽门螺杆菌只需要收集4滴唾液即可检测，没有任何毒副作用。该方法适合各年龄段人群的检测，特别是老人、孕妇和儿童。针对口腔幽门螺杆菌的敏感性96%，特异性97-100%。若配合胃部幽门螺杆菌检测，行共同诊断和治疗，可根除人体幽门螺杆菌。有文献报道通过牙周治疗去除龈上和龈下菌斑，可有效破坏龈下生物膜结构，从而彻底有效地去除胃内和口腔内的HP，减少HP再感染机会。从而大大降低HP的再感染或高发率。 注：慢性
43、胃炎患者口腔幽门螺杆菌对胃幽门螺杆菌根除率的影响中华消化杂志2010年9月第30卷第9期尿素呼气试验Hp具有较强的内源性尿素酶，能分解胃内及核素标记的尿素，产生CO2和NH3，CO2被吸收后经肺呼出，因此只需分析呼气中的14C或13C即可诊断Hp的存在。尿素呼气试验原理是HP在体内产生尿素酶，用13C或14C标记的尿素由受试者服下后，即分解产生带同位素标记的二氧化碳，收集呼气标本，用液体闪烁计数器或用气体核素质谱仪检测标记的二氧化碳，灵敏度极高，可定量，患者无创伤无痛苦，方法简单快速，对检测HP是否根治十分可靠。敏感性95%,特异性95%-100%。13治疗方法治疗方案的选择原则治疗方案的选择
44、原则是：采用联合用药方法+卫舒元复合益生菌；hp的根除率80%，最好在90以上；无明显副作用，病人耐受性好；病人经济上可承受性。判断hp感染的治疗效果应根据hp的根除率，而不是清除率。根除是指治疗终止后至少在一个月后，通过细菌学、病理组织学或同位素示踪方法证实无细菌生长。药物治疗幽门螺旋杆菌hp感染现在主要靠抗hp药物进行治疗。尽管hp在体外对许多抗菌药物都很敏感，但是在体内用药并不那样如意。这是因为hp主要寄生在粘液层下面，胃上皮细胞表面。注射途径用药，对它无作用，经口局部又因为胃酸环境粘液层的屏障及胃的不断排空作用，使药效也大大地受到了限制。再加上有些药长期应用易产生严重的副作用或耐药菌株
45、等问题。因此hp感染引起的急慢性胃炎消化性溃疡等疾病，本来看起来很容易治疗的问题，实际上效果并不总是很理想。何况目前缺乏合适的hp感染的动物模型，可供帮助制订有效的治疗方案。因此目前的治疗方案几乎全凭临床经验制订，有很大的局限性（因地区、人群的差异）。总的讲来，目前不提倡用单一的抗菌药物，因为它的治愈率较低，一般80%，最好在90%以上。无明显副作用，病人耐受性好。病人经济上可承受性。判断hp感染的治疗效果应根据hp的根除率，而不是清除率。根除是指治疗终止后一年内，通过细菌学、病理组织学或同位素示踪方法证实无细菌生长。预防策略目前国内外常用的抗hp药物有羟氨苄青霉素、甲硝唑、克拉霉素、四环素、
46、强力霉素、呋喃唑酮、有机胶态铋剂（de-nol等）、胃得乐（胃速乐）、乐得胃、西皮氏粉和胃舒平等。溃疡病患者尚可适当结合应用质子泵抑制剂或h2受体拮抗剂加上两种抗菌素，或者质子泵抑制剂（如奥美拉唑）加上一种抗菌素。疗程一般为两个星期。由于治疗hp感染抗菌方案的广泛应用，有可能扩大耐药性问题的产生。因此，将来替换性的治疗或预防策略，如疫苗预防或免疫治疗的研究是值得重视的。某些益生菌如卫舒元复合益生菌也是目前国内外常用的对抗幽门螺杆菌最有效的非药物新型制剂，可单独使用。治疗误区一、用药单一，难根除顽固细菌通俗地说，幽门螺杆菌是一种相当顽固的病菌。人们因肠炎、气管炎等大多服过一些抗生素，有的甚至还造
47、成了细菌的抗（耐）药性。在实验室里，50多种抗生素及药物对该细菌有作用，但一到人体内，有效的抗生素就所剩无几了，而且作用微乎其微，远不足杀灭它。没有任何单一的抗生素能担负起根除幽门螺杆菌的重任，所以必须联合作战。另一缺点就是容易造成幽门螺杆菌的抗药性。二、静脉给药，绕道无功距近10年来国内外，有关治疗幽门螺杆菌的文献约235篇，发现所用药物一律是口服给药，而不采用静脉点滴或肌肉注射的，这当然决非偶然。幽门螺杆菌虽然紧紧贴附在胃黏膜细胞上，但毕竟离胃腔近，离供应胃黏膜的血管(位于黏膜下层)远。其次，药物浓度相去甚远，进入胃内的药物，特别是在质子泵抑制剂配合下，在胃腔内杀菌的有效浓度成百倍提高，如果改用静脉给药，药物要经过处理掉一部分，然后再循环分布到全身，且无质子泵抑制剂的大力协助，有效浓度难以和胃腔内相比。治愈经验治疗第一步更换牙刷，对病人的杯洗具按时用巴氏消毒，早晚使用漱口水。漱口水要有杀菌功效，即其配方为化学药剂，如主要成份度米酚，麝香草酚或复方替硝唑液。中草药成份漱口水无效。
