1、药品标准及有关指导原则杨仲元（广州市药品检验所）2004年4月北京中华人民共和国药品管理法第十条规定：药品必须按照国家药品标准和国务院药品监督管理部门批准的生产工艺进行生产，生产记录必须完整准确。药品生产企业改变影响药品质量的生产工艺的，必须报原批准部门审核批准。一 关于药品标准的制定 药典中的药品质量标准称药典“正文”（monograph)，因为药典包括凡例，正文和附录等内容。其他的药品标准就称“药品标准”（Drug Standard)。 药典的修订（Revision)，包括制定新的正文和对已有的正文进行修订一 关于药品标准的制定 药品质量标准的格式应与药典正文的格式一致。 药典凡例规定：每
2、一正文品种项下根据品种和剂型的不同，按顺序可分别列有：品名（包括中文名、汉语拼音与英文名）、有机药物的结构式、分子式和分子量、来源或有机药物的化学名、含量或效价规定、处方、制法、性状、鉴别、检查、含量或效价测定、类别、规格、贮藏、制剂等一 关于药品标准的制定 （一）原料药（Drug Substance)药品标准 名称 正文品种的中文药品名称系按照中国药品通用名称推荐的名称及其命名原则命名，中国药典收载的中文药名均为法定名称；英文名除另有规定外，均采用国际非专利药名（INN）一 关于药品标准的制定 药品化学结构式采用世界卫生组织推荐的“药品化学结构式书写指南”书写 Guidelines for
3、the graphic representation of chemical formulae 刊登在世界卫生组织技术报告系列第863号（34th WHO EXPERT COMMITTEE ON SPECIFICATIONS FOR PHARMACEUTICAL PREPARATIONS)一 关于药品标准的制定 有机药物的化学名称应根据中国化学会编撰的有机化学命名原则命名，母体的选定应以国际纯粹与应用化学联合会（IUPAC）的命名系统一致。 The International Union of Pure and Applied Chemistry 的原则是：Each different com
4、pound should have a different name.一 关于药品标准的制定 分子式应能反映盐或含水物 如 盐酸多巴胺 C8H11NO2 . HCl 盐酸多西环素（为半乙醇半水合物） C22H24N2O8.1/2C2H5OH.1/2H2O一 关于药品标准的制定 含量或效价规定 原料药的含量（%），除另有注明者外，均按重量计。如规定上限为100%以上时，系指用本药典规定的分析方法测定时可能达到的数值，为药典规定的限度或允许偏差，并非真实含有量。如未规定上限时，系指不超过101.0%一 关于药品标准的制定 性状 中国药典性状项下记载药品的外观、臭、味、溶解度以及物理常数。 凡例指出
5、，外观性状是对药品的色泽和外表感观的规定。如物理状态（粉末、液体等），结晶结构（结晶、无定型）和颜色。 注意：外观性状应正确描述。一 关于药品标准的制定 性状项下的溶解度 是一种物理性质，正文项下选用部分溶剂及其在该溶剂中的溶解性能，可供精制或制备溶液时参考 对在指定溶剂中的溶解性能需作质量控制时，则在检查项下另作规定。 溶解度测定方法可参考药典凡例，一般做3-6个溶剂一 关于药品标准的制定 鉴别 鉴别项下规定的试验方法，仅用于反映该药品某些物理、化学或生物学特征，不代表对该药品的化学结构确证。 采用能明确进行鉴别的方法，如红外光谱法、质谱法。否则，建议用2个不同的鉴别方法，同时应有盐的鉴别。
6、一 关于药品标准的制定 鉴别反应的验证 主要是其专属性 有的鉴别试验还要验证其检测限一 关于药品标准的制定 鉴别中的红外光谱法 样品制备方法和操作条件，见药品红外光谱集各光谱图所规定的制备方法 如与之不同，则应另有规定，并在起草说明中说明，作验证，并附代表性图谱 如样品有多晶，应说明规定晶型或多晶的比例一 关于药品标准的制定 鉴别中的紫外光谱法 由于中国药典采用规定波长、规定吸收系数等规定值比对，所以，起草时应注意仪器的波长、吸光度精度应符合要求。 对于吸收带很窄的样品，应考虑仪器狭缝对测定结果的影响一 关于药品标准的制定 鉴别中的薄层色谱法 药典附录薄层色谱法作了修订，较详细 起草中应详细说
7、明：溶液的制备、薄层板类型、展开系统、层析缸（色谱展开缸）的处理、检视方法等 在与有关物质检查同时进行的情况下，应验证其专属性 一般，薄层色谱鉴别应配上另一鉴别一 关于药品标准的制定 鉴别中的GC和HPLC 特别在用GC或HPLC做含量测定时，与对照品比对保留值 当杂质分析HPLC同时做主成分鉴别，应验证其专属性 由于不能提供确定的鉴别，采用GC或HPLC鉴别的同时，应另配一个鉴别法一 关于药品标准的制定 在用GC或HPLC鉴别时，应注意仪器的稳定性，足够的平衡时间，使保留时间稳定 药典GC和HPLC附录中，未叙述其鉴别应用一 关于药品标准的制定 盐类和某些特殊成分的鉴别可参考药典附录中的“一
8、般鉴别试验” 如与一般鉴别试验有不同，则应进行验证，在说明中应叙述可能的反应和结果、试剂的纯度要求、供试液的浓度、方法的专属性一 关于药品标准的制定 检查检查 凡例：检查项下包括反映药品的安全性与有效性的试验方法与限度、均一性与纯度等内容。对于规定中的各种杂质检查项目，系指按既定工艺进行生产和正常贮存过程中可能含有或产生，并需要控制的杂质（如残留溶剂，有关物质）一 关于药品标准的制定 供直接分装成注射用无菌粉剂的原料药，应规定注射剂项下的相应检查项 详见杂质分析指导原则和国家药品标准工作手册一 关于药品标准的制定 检查项中的有机杂质 常用色谱法检查有机杂质，一般GC和HPLC杂质检查定位和定量
9、用外标法，内标法可能会引进其他杂质 中国药典HPLC附录中的杂质的定量法、杂质分析指导原则中关于对照品或自身对照的应用，可供标准起草参考一 关于药品标准的制定 药典2005年版HPLC附录中补充了杂质测定的误差要求 通常，杂质低于0.5%的，峰面积RSD应小于10%， 杂质0.5-2%的，峰面积RSD应小于5%， 杂质大于2%的，峰面积RSD应小于2%，一 关于药品标准的制定 在起草说明中应详细叙述杂质分析方法验证 确定的系统适用性指标应能满足少量杂质的检测，一定浓度分离度测定溶液所测出的分离度，应能保证少量杂质的分离和测定，必要时可用少量杂质（相当于主成分量的1%或0.5%）的供试液进行分离
10、度测试一 关于药品标准的制定 含量测定含量测定 凡例：含量测定项下规定的试验方法，用于测定原料及制剂中有效成分的含量，可用化学、仪器、或生物测定方法 含量测定方法尽可能能反映稳定性，如不能反映稳定性，在确有杂质存在下，应有反映稳定性的杂质检查法一 关于药品标准的制定 含量测定中的滴定法 滴定法不一定专属，但测定的精度高，含量限度范围可定的较窄，在原料药含量测定中广为采用 滴定法如采取提高专属性的措施，应在说明中写明一 关于药品标准的制定 含量测定中的色谱法 随着HPLC进样精度的提高，较多采用外标法，虽然专属性较高，但测定精度不如滴定法一 关于药品标准的制定 （二）制剂质量标准 首先要有原料药
11、和辅料的质量标准 凡例：制剂中使用的原料药和辅料，均应符合本版药典的规定；本版药典未收载者，应符合国务院药品监督管理部门的有关规定。辅料应无害、不影响疗效和降低生物利用度，对药典规定的检验方法无干扰。一 关于药品标准的制定 制剂标准的检验项目 凡例：各类制剂，除另有规定外，均应符合制剂通则项下的有关各项规定。 2005年版中国药典的制剂通则修订内容较多。应认真阅读一 关于药品标准的制定 名称 按国家药品标准工作手册制剂编写细则要求进行命名。建议： 复方制剂宜按各成分名+剂型。大的复方制剂才用复方字样。少用简缩名+剂型。一 关于药品标准的制定 性状 应研究外观性状与内在质量的关系，规定外观性状
12、制剂如有包衣或外壳，还应规定内容物的外观性状一 关于药品标准的制定 鉴别 首先考虑采用原料药鉴别方法，前提是辅料不干扰鉴别或能与被测成分分离 色谱法在鉴别中用得较多，应验证其专属性一 关于药品标准的制定 也可考虑用IR鉴别。附录IR中写：“用于制剂鉴别时，品种正文中应明确规定供试品的处理方法。如处理后辅料无干扰，可直接与原料药的标准光谱进行比对，如辅料仍存在不同程度的干扰，则可参考原料药的标准光谱在指纹区内选择35个辅料无干扰的特征吸收峰，列出波数位置作为鉴别依据，误差0.5%一 关于药品标准的制定 鉴别中的色谱法鉴别中的色谱法 薄层色谱法 药典附录TLC中的测定法，鉴别，可采用与同浓度的对照
13、溶液，在同一块薄层板上点样、展开与检视，供试品溶液所显主斑点的颜色（或荧光）与位置（Rf）应与对照品溶液的主斑点一致，一 关于药品标准的制定 而主斑点的大小与颜色的深浅也应大致相同，或采用供试品溶液与对照品溶液等体积混合，应显示单一、紧密的斑点。 TLC鉴别，在作验证时就应“选择与供试品化学结构相似的药物对照品与供试品溶液的主斑点比较，两者Rf应不同，或将上述两种溶液等体积混合，应显示两个清晰分离的斑点。”一 关于药品标准的制定 色谱法鉴别色谱法鉴别 TLC、GC、HPLC验证时，应采用对照品比对，用不含被测成分的辅料作比对，并在色谱图上标明，以示专属性。一 关于药品标准的制定 检查检查 杂质
14、检查，大多数用色谱法，应作 专属性、检测限验证，杂质定量测定时，还应作定量限验证 TLC，药典附录：通常应规定杂质斑点数和单一杂质量，采取系列自身稀释对照溶液时，也可规定估计的杂质总量。一 关于药品标准的制定 用目视法确定TLC杂质总量是不可行的。杂质分析指导原则中写明，在用TLC分析杂质时，可采用杂质对照品或主成分的梯度浓度溶液作比对，对杂质斑点进行半定量评估，质量标准中应规定杂质的个数及其限度。一 关于药品标准的制定 制剂质量标准中的杂质检查项，应根据原料药和制剂稳定性试验，检查降解产物和原料药中的毒性杂质。 色谱法检查杂质时，应通过试验确定系统适用性要求一 关于药品标准的制定 含量测定含
15、量测定 制剂含量测定方法应尽可能采用能反映稳定性的方法。含量限度，应考虑生产的变动性，制剂成分对测定的影响，测定误差，取样误差等，所以制剂的含量限度较宽，如为标示量的90.0110.0%等。含量限度的规定应说明理由。一 关于药品标准的制定 滴定法在制剂含量测定中的应用越来越少，色谱法的应用越来越多。 在起草说明中应写明柱子的牌号和规格，用不同牌号的同类柱子测定的结果，流动相和柱温要求，溶液的稳定性，系统适用性要求，并通过耐用性试验 说明方法的普遍适用性。一 关于药品标准的制定 制剂的特定检查制剂的特定检查 见有关制剂通则，不同剂型和规格，有不同的特定检查一 关于药品标准的制定 含量均匀度（药典
16、附录有较大修订）含量均匀度（药典附录有较大修订） “含量均匀度系指小剂量或单剂量固体制剂、半固体制剂和非均相液体制剂每片（个）含量偏离标示量的程度。除另有规定外，片剂、胶囊剂或注射用无菌粉剂，每片（个）标示量不大于10mg或主药含量小于每片（个）重量5%者，其他制剂每个标示量小于2mg或主药含量小于每个重量2%者，贴剂，均应检查含量均匀度。”一 关于药品标准的制定 增加了规定 “对于药物有效浓度与毒副反应浓度比较接近的品种或混匀工艺较困难的品种，每片（个）标示量不大于25mg者，也应检查含量均匀度。” 建议属上述情况的，应在起草标准时考虑，并规定在正文中一 关于药品标准的制定 有效性检查（pe
17、rformance test) 包括固体口服制剂的崩解时限、溶出度和释放度检查，透皮贴剂的释放度检查等 药典中的有效性检查仅仅是质量控制试验，只有在符合该制剂特性要求前提下，且成分、组方和工艺没有改变，此项检查与生物利用度和生物等效性有关一 关于药品标准的制定 关于崩解时限、融变时限、溶出度和释放度的应用原则，请见国家药品标准工作手册的“国家药典（二部）主要检测方法应用指导原则” 2005年版药典附录溶出度的修订较多，特别是判断标准与上版药典不同一 关于药品标准的制定 修订为 符合下列条件之一者，可判为符合规定 6个的溶出量按标示量计算，均不低于规定（Q） 6个中有1-2个低于Q，但不低于Q-
18、10%，且平均溶出量不低于Q 6个中有12个低于Q，其中仅有1个低于Q-10%，且不低于Q-20%，且平均溶出量不低于Q，另取6个复试。初复试的12个，有3个低于Q，其中1个低于Q-10%，且不低于Q-20%，且平均溶出量不低于Q一 关于药品标准的制定 符合下列条件之一者，可判为不符合规定 6个中有1个低于Q-20% 6个中有2个低于Q-10% 6个中有3个低于Q 初复试的12个中有4个低于Q 初复试的12个的平均溶出量低于Q二 杂质分析指导原则 药品杂质分析指导原则为中国药典2005年版二部新增指导性附录。本附录为药品质量标准中化学合成或半合成的有机原料药及其制剂杂质分析的指导原则,供药品研
19、究、生产、质量标准起草和修订参考。 先介绍本附录的起草说明二 杂质分析指导原则 药品的杂质分析，USP和BP均有相应的内容。USP对法定标准中的杂质定义较详细，BP对杂质的确定和测定方法说明比较具体。ICH对新药和新制剂中的杂质有协调了的文本。本附录系根据中国药典的具体情况和中国研制新药目前水平，参考ICH、USP、BP的有关内容而起草的。二 杂质分析指导原则 一开始就说明了质量标准中的杂质不包括掺入的或污染的外来物质，不包括变更生产工艺或变更原辅料而产生的新杂质。由于假劣药品的情况复杂，在本附录中说明了，必要时采用非法定方法予以检测。二 杂质分析指导原则 由于杂质分类方法较多，难以统一规定。
20、如USP的 “普通杂质”，正文和通法中均有“普通杂质”的规定。所以，本附录介绍的杂质分类，主要为ICH的分类。根据中国药典的特点，要求正文中有机杂质检查项目名称按照国家药典委员会组织编写的国家药品标准工作手册进行规范。二 杂质分析指导原则 质量标准中杂质检查项目的确定主要供新药的药学研究和质量标准建立参考。除按照我国药品审评有关要求外，写明也可参考ICH的文本Q3A和Q3B，并建议新药中发现的表观含量在0.1%及以上的杂质和降解产物，以及毒性杂质，应进行定性或确定结构，即至少要确定化学类别。仿制药品和变更工艺或原辅料产生的新杂质，也应这样进行研究。 对共存物质和对映体是否作为杂质进行了说明。二
21、 杂质分析指导原则 附录中建议了杂质检查分析方法要求，杂质对照品和自身对照的应用，包括色谱法定位和杂质定量计算的要求二 杂质分析指导原则 任何影响药品纯度的物质均称为杂质。药品质量标准中的杂质系指，在按照经国家有关药品监督管理部门依法审查批准的规定工艺和规定原辅料生产的药品中，由其生产工艺或原辅料带入的杂质，或经稳定性试验确证的在贮存过程中产生的降解产物。二 杂质分析指导原则 药品质量标准中的杂质不包括变更生产工艺或变更原辅料而产生的新的杂质，也不包括掺入或污染的外来物质。 药品生产企业变更生产工艺或原辅料，并因由此带进新的杂质对原质量标准的修订，均应依法向有关药品监督管理部门申报批准。二 杂
22、质分析指导原则 药品中不得掺入或污染药品或其组分以外的外来物质。对于假劣药品，必要时应根据各该具体情况，采用非法定分析方法予以检测。二 杂质分析指导原则 1杂质的分类及其在药品质量标准中的项目名称 按化学类别和特性，杂质可分为：有机杂质、无机杂质、有机挥发性杂质。按其来源，杂质可分为：有关物质（包括化学反应的前体、中间体、副产物、降解产物等）、其他杂质和外来物质等。 二 杂质分析指导原则 按结构关系，杂质又可分为：其他甾体、其他生物碱、几何异构体、光学异构体等。按其毒性，杂质又可分为毒性杂质和普通杂质等。普通杂质即为在存在量下无显著不良生物作用的杂质，而毒性杂质为具强烈不良生物作用的杂质。二
23、杂质分析指导原则 由于杂质的分类方法甚多，所以，药品质量标准中检查项下杂质的项目名称，应根据国家药典会编写的国家药品标准工作手册的要求进行规范。二 杂质分析指导原则 2. 质量标准中杂质检查项目的确定 新原料药和新制剂中的杂质，应按国家有关新药申报要求进行研究，也可参考ICH（人用药品注册技术要求国际协调会）的文本Q3A（新原料药中的杂质）和Q3B（新制剂中的杂质）进行研究，并对杂质和降解产物进行安全性评价。二 杂质分析指导原则 新药研制部门对在合成、纯化和贮存中实际存在的杂质和潜在的杂质，应采用有效的分离分析方法进行检测。二 杂质分析指导原则 对于表观含量在0.1%及其以上的杂质，以及表观含
24、量在0.1%以下的具强烈生物作用的杂质或毒性杂质，予以定性，或确证其结构。对在稳定性试验中出现的降解产物，也应按上述要求进行研究。二 杂质分析指导原则 新药质量标准中的杂质检查项目应包括经研究和稳定性考察检出的，并在批量生产中出现的杂质和降解产物，并包括相应的限度。除降解产物和毒性杂质外，在原料中已控制的杂质，在制剂中一般不再控制。原料药和制剂中的无机杂质，应根据其生产工艺、起始原料情况确定检查项目，但对于毒性无机杂质，应在质量标准中规定其检查项。二 杂质分析指导原则 在仿制药品的研制和生产中，如发现其杂质模式与其原始开发药品的不同，或与已有法定质量标准规定不同，需增加新的杂质检查项目的，应按
25、上述方法进行研究，申报新的质量标准或对原质量标准进行修订，并报有关药品监督管理部门审批。二 杂质分析指导原则 共存的异构体和抗生素多组分一般不作为杂质检查项目，作为共存物质，必要时，在质量标准中规定其比例，以保证生产用的原料药与申报注册时的一致性。但当共存物质为毒性杂质时，该物质就不再认为是共存物质。 二 杂质分析指导原则 单一对映体药物，其可能共存的其他对映体，应作为杂质检查。消旋体药物，当已有其单一对映体药物的法定质量标准时，应在该消旋体药物的质量标准中设旋光度检查项目。二 杂质分析指导原则BP2002左炔诺孕酮 levonorgestrelSpecific optical rotatio
26、n (2.2.7). Dissolve 0.200 g in chloroform R and dilute to 10.0 ml with the same solvent. The specific optical rotation is 30to 35二 杂质分析指导原则BP2002炔诺孕酮IDENTIFICATIONA. Dissolve 0.5 g in methylene chloride R and dilute to 10.0 ml with the same solvent. The angle of optical rotation (2.2.7) is +0.05to -
27、0.05二 杂质分析指导原则 有机挥发性杂质，应根据生产工艺中所用有机溶剂及其残留情况，确定检查项目。可参考本药典关于有机挥发性杂质的要求，或参考ICH文本Q3C（残留溶剂指导原则）。对残留的毒性溶剂,应规定其检查项目。二 杂质分析指导原则 3. 杂质检查分析方法和杂质的限度 杂质检查分析方法应专属、灵敏。杂质检查应尽量采用现代分离分析手段，主成分与杂质和降解产物均能分开，其检测限应满足限度检查的要求，对于需作定量检查的杂质，方法的定量限应满足相应的要求。 二 杂质分析指导原则 杂质检查分析方法的建立应按本药典的要求作方法验证。在研究时，应采用几种不同的分离分析方法或不同测试条件 以便比对结果
28、，选择较佳的方法作为质量标准的检查方法。杂质检查分析方法的建立，应考虑普遍适用性，所用的仪器和试材应容易获得。对于特殊试材，应在质量标准中写明。二 杂质分析指导原则 新药研究中的杂质和降解产物，或在非新药中发现的新杂质和新降解产物，应进行分离纯化制备，或合成制备，以供进行安全性和质量研究。对确实无法获得的杂质和降解产物，研制部门应在申报资料和质量标准起草说明中写明理由。二 杂质分析指导原则 在用现代色谱技术对杂质进行分离分析的情况下，对已知杂质和毒性杂质，应使用杂质对照品进行定位，如无法获得该对照品时，可用相对保留值进行定位。应使用多波长检测器研究杂质在不同波长下的检测情况，并求得在确定的一个
29、波长下，已知杂质，特别是毒性杂质对主成分的相对响应因子。 二 杂质分析指导原则 已知杂质或毒性杂质对主成分的相对响应因子在0.91.1范围内时，可以用主成分的自身对照法计算含量，超出0.91.1范围时，宜用对照品对照法计算含量。也可用经验证的相对响应因子进行校正后计算。 二 杂质分析指导原则 未知杂质的定量可用主成分自身对照法进行计算。杂质定量计算方法应明确规定在质量标准中。一般，质量标准中还应有单个杂质限量和总杂质限量的规定。 由于色谱法杂质限度检查受色谱参数设置值的影响较大，有关操作注意事项应在起草说明中写明，必要时，可在质量标准中予以规定。二 杂质分析指导原则 质量标准中杂质检查项下的杂
30、质总量不适用于薄层色谱法 因为薄层色谱法的斑点比对为定性和半定量的 对此, BP的补充附录“杂质检查”有解释二 杂质分析指导原则 Total impurity limits This procedure is rarely adopted in thin-layer chromatographic tests, because of the semi-quantitative nature of estimating individual spots and resulting imprecision in expression of results for the totals. This
31、apparent drawback to the use of thin-layer chromatography is largely overcome by means of two- and three-level tests 解决办法为采用2个或3个对照浓度二 杂质分析指导原则 control is often provided by a two-level test requiring, say, not more than one related substance at a nominal concentration of up to 0.5% and any others at
32、 nominal concentrations of up to 0.1%. 即限度0.5%的不得过1个,其他均不得过0.1%,实际限度还要依据在符合GMP条件下生产批的数据和剂量二 杂质分析指导原则 如:Any secondary spot in the chromatogram obtained with solution (1) is not more intense than the spot in the chromatogram obtained with solution (2) ( 0.5%) and not more than one such spot is more in
33、tense than the spot in the chromatogram obtained with solution (3) (0.1%). 二 杂质分析指导原则 杂质限度的制订应考虑如下因素：杂质及含一定限量杂质的药品的毒理学研究结果；给药途径；每日剂量；给药人群；杂质药理学可能的研究结果；原料药的来源；治疗周期；在保证安全有效的前提下，药品生产企业对生产高质量药品所需成本和消费者对药品价格的承受力。二 杂质分析指导原则 4美国药典修订正文对杂质分析的要求 美国药典修订正文对杂质分析的要求可供参考。美国药典正文修订用的术语解释可参考ICH Q3A（R）二 杂质分析指导原则已知杂质：已
34、确定结构特征的杂质。未知杂质：结构特征未确定，仅能用定性分析特征（如色谱保留时间）确定的杂质。二 杂质分析指导原则指定杂质：在新原料药质量标准中单独列出并规定特定限度的杂质。指定杂质可以是已知或未知的。二 杂质分析指导原则非指定杂质：新原料药质量标准中以一般判断标准予以限量而不是单独列出并规定特定限度的杂质。二 杂质分析指导原则 USP原料药中的杂质原料药中的杂质 原料药中的杂质检查，对指定杂质（specified impurities）应规定限量，并且对所有非指定杂质（unspecified impurities）的限量为0.10%。新的正文要求用表1中的命名。二 杂质分析指导原则 USP正
35、文原料药仅检查实际存在的杂质，不检查理论存在的。如果采用不同的合成工艺，由此产生不同的杂质，则需要用不同的杂质检查方法，并在包装中标明可行的检查方法。如果杂质的毒性已经FDA评价过，则在修订报告中应包括毒性数据。二 杂质分析指导原则 有机杂质常用液相和气相法检查，对杂质鉴别和定量，最好用外标法，而不用内标法，用内标法可能混入其他杂质。 有机杂质的定量应与药品的对照品或杂质对照品比对，对检出的杂质进行定量时，用USP指定杂质对照品。二 杂质分析指导原则 在修订报告中，应列出全部指定杂质的名称，相对保留时间，相对响应因子，限度，定量限，检测限和结构。修订报告中还应写明系统适用性，以保证色谱系统的效
36、能。 二 杂质分析指导原则 有机杂质的检查方法，应包括全部分析参数，如分析柱，流动相流速，流动相梯度或温度梯度，检测器类型和相关设定（如波长，阴极和阳极电压等），注样体积，样品浓度，样品的制备，对照品的应用，并应符合方法验证的要求。在修订报告中应附标准溶液和供试溶液的色谱图（通常3批），用加入法或原料确定产品中的起始原料，副产物和中间体，用强制降解（forced degradation）溶液确定潜在的降解产物（potential degradants） 二 杂质分析指导原则 限度判断应符合ICH Q3A的要求，对指定杂质，非指定杂质和总杂质，规定限度，限度应适合货架效期全过程二 杂质分析指导原
37、则 无机杂质，采用几种不同方法测定。 重金属和其他残留金属，已有重金属检查通法。修订报告中应包括所用的方法，限度，验证数据。检查方法的验证应包括检测限和专属性。如果用的方法不同于，则应完整叙述，分析的方法学，样品的制备，操作，限度和验证。 二 杂质分析指导原则 其他残留金属，检查通法有：铝，铁，铅，汞，硒，锌的测定法。修订报告中应写明验证数据，以表明方法具有一定的选择性和定量限，保证限度的检出。也可用其他方法，如原子吸收法等，但应有充分理由和方法验证。 二 杂质分析指导原则 无机盐，一般用炽灼残渣限度检查，应测定具代表性的3批。一般为定性或半定量，不要求定量。 残留溶剂，按ICH检查1，2，3
38、类。详见有机挥发性杂质，如果方法和限度不同于，则应经验证。 二 杂质分析指导原则 USP制剂中的杂质制剂中的杂质 制剂正文中杂质检查，仅对在货架效期内增加的指定杂质制订限度，对全部非指定杂质，其限度按（）的要求。即不得过0.10%。二 杂质分析指导原则为每日给药剂量，报告限高的应有科学说明，如果杂质毒性很强，报告限应降低。二 杂质分析指导原则 用稳定性试验认定杂质。新制剂的杂质，按表1进行命名，重点为降解产物。不同组方产生不同杂质时，应采用不同方法检查，在修订报告中应写明将在产品标记上的该检查方法。二 杂质分析指导原则 制剂中的有机杂质，常用液相或气相色谱法，有的辅料在色谱上会误为杂质，所以在
39、修订报告中应有用辅料配方的色谱，加主成分和不加主成分的，还有空白溶液的色谱图。 二 杂质分析指导原则 修订报告中应列出全部依据稳定性试验认定的确实在货架效期会增多的指定杂质，列出名称，相对保留时间，相对响应因子，限度，定量限，检测限。应提供系统适用性，以保证色谱系统有效。二 杂质分析指导原则 还应提供相关信息，如：柱，流动相流速，流动相梯度，温度梯度，检测器类型及相关设定（如波长，电极电压等），注样量，溶液的浓度，样品的制备，对照品的应用，对照溶液色谱和样品溶液（3批）的色谱图，强制降解的色谱图以显示潜在的降解产物。三 分析方法验证指导原则 药品质量标准分析方法验证是中国药典2000年版新增的
40、附录，作为指导原则，不作为法定要求。2005年版中国药典作了修订。美国药典，英国药典和日本药局方均有收载。美国药典的通则信息（General Information）中收载有“药典方法验证”（ Validation of Compendial Methods）；英国药典第二卷的补充通则(Supplementary Chapters)项下“药典正文的建立”(Monograph Development)中收载有“分析方法”；日本药局方的“参考情报”项下收载有“分析方法验证”(分析法-)。三 分析方法验证指导原则 关于分析方法验证的目的，中国药典为“证明采用的方法适合于相应检测要求，在起草药品质量标
41、准时，分析方法需要验证；在药物生产方法变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，则质量标准分析方法也需进行验证。方法验证过程和结果均应记载在药品标准起草说明中”；三 分析方法验证指导原则 ICH的方法验证有8个内容：准确度（accuracy）、精密度（precision）包括重复性（repeatability）、中间精密度（intermediate precision）和重现性（reproducibility）、专属性（specificity）、检测限（detection limit）、定量限（quantitation limit）、线性（linearity）、范围（range）、耐用性（r
42、obustness）。 三 分析方法验证指导原则 中国药典对方法验证的具体要求： 需验证的分析项目有：鉴别试验，杂质定量检查或限度检查，原料药或制剂中有效成分含量测定，以及制剂中的其他成分（如防腐剂等）的测定。药品溶出度、释放度等功能检查中，其溶出量等的测试方法也应作必要验证三 分析方法验证指导原则 验证内容有：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。视具体方法拟订验证的内容。附表中列出的分析项目和相应的验证内容可供参考。三 分析方法验证指导原则 一. 准确度 准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。
43、准确度应在规定的范围内测试。三 分析方法验证指导原则 .含量测定方法的准确度 原料药可用已知纯度的对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定结果进行比较。 制剂可用含已知量被测物的各组分混合物进行测定。如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定结果进行比较。 如该分析方法已经测试并求出了精密度、线性和专属性，准确度有时也可推算出来，可不必再做。三 分析方法验证指导原则 .杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如不能得到杂质或降解产物，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较，如药
44、典标准方法或经过验证的方法。在不能测得杂质或降解产物的响应因子或对原料药的相对响应因子情况下，可用原料药的响应因子。应明确表明单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比（%）或面积比（%）。三 分析方法验证指导原则 .数据要求 在规定范围内，至少用9个测定结果进行评价，例如，设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试溶液，进行测定。应报告已知加入量的回收率（%），或测定结果平均值与真实值之差及其可信限。三 分析方法验证指导原则 注意 准确度测定的范围，如制剂的含量测定，其准确度试验应覆盖含量限度的范围。一般稍微放宽，约为中值的20%。 加样回收，在制剂辅料能获得的情况下，一般做模拟回收。三 分析
45、方法验证指导原则 二 精密度 精密度系指在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。精密度一般用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。 在相同条件下，由一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性；在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果之间的精密度，称为中间精密度；在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的精密度，称为重现性。 含量测定和杂质的定量测定应考虑方法的精密度。三 分析方法验证指导原则 .重复性 在规定范围内，至少用9个测定结果进行评价，例如，设计3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试溶液，进行测定。或100%的浓度水平，用至少测定6次的结果
46、进行评价。三 分析方法验证指导原则 .中间精密度 为考察随机变动因素对精密度的影响，应设计方案进行中间精密度试验。变动因素为不同日期、不同分析人员、不同设备。三 分析方法验证指导原则 .重现性 当分析方法将被法定标准采用，应进行重现性试验，例如，建立药典分析方法时通过协同检验得出重现性结果。协同检验的目的、过程和重现性结果均应记载在起草说明中。应注意重现性试验用的样品本身的质量均匀性和贮存运输中的环境影响因素，以免影响重现性结果。三 分析方法验证指导原则 .数据要求 均应报告标准偏差、相对标准偏差和可信限。 注意 中间精密度和重现性是对同一批样品不同条件下测定的比较。药典标准修订一定要求做重现
47、性，一定是同一批均匀样品。三 分析方法验证指导原则 三三 专属性专属性 专属性系指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在下，采用的方法能正确测定出被测物的特性。鉴别反应、杂质检查、含量测定方法均应考察其专属性。如方法不够专属，应采用多个方法予以补充。三 分析方法验证指导原则 .鉴别反应 应能与可能共存的物质或结构相似化合物区分。不含被测成分的样品，以及结构相似或组分中的有关化合物，应均呈负反应。 注意：中药分析的鉴别，样品应与对照一致，但阴性和样品的结果应有显著差异，否则不专属。三 分析方法验证指导原则 .含量测定和杂质测定 色谱法和其他分离方法，应附代表性图谱，以说明方法的专属性，并
48、应标明诸成分在图中的位置。色谱法中的分离度应符合要求。三 分析方法验证指导原则 在杂质可获得的情况下，对于含量测定，试样中可加入杂质或辅料，考察测定结果是否受干扰，并可与未加杂质或辅料的试样比较测定结果。对于杂质测定也可向试样中加入一定量的杂质，考察杂质能否得到分离。三 分析方法验证指导原则 在杂质或降解产物不能获得的情况下，可将含有杂质或降解产物的试样进行测定，与另一个经验证了的或药典方法比较结果。用强光照射，高温，高湿，酸、碱水解，或氧化的方法进行加速破坏，以研究可能的降解产物和降解途径。含量测定方法应比对二法的结果，杂质检查应比对检出的杂质个数，必要时可采用二极管阵列检测和质谱检测，进行
49、纯度检查。三 分析方法验证指导原则 专属性注意： 研究时应采用不同方法和条件，便于选择更专属的方法。杂质分析指导原则中已有叙述 在杂质分析指导原则中说到stability-indicating ，在有降解产物存在时，方法应经选择，再进行验证三 分析方法验证指导原则 四 检测限 检测限系指试样中被测物能被检测出的最低量。药品的鉴别试验和杂质检查方法，均应通过测试确定方法的检测限。常用的方法如下： 1. 非仪器分析目视法 用已知浓度的被测物，试验出能被可靠地检测出的最低浓度或量。三 分析方法验证指导原则 2. 信噪比法 用于能显示基线噪音的分析方法，即把已知低浓度试样测出的信号与空白样品测出的信号
50、进行比较，算出能被可靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比为3：1或2：1时相应浓度或注入仪器的量确定检测限。 3. 数据要求 应附测试图谱，说明测试过程和检测限结果。三 分析方法验证指导原则 五 定量限 定量限系指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。杂质和降解产物用定量测定方法研究时，应确定方法的定量限。 常用信噪比法确定定量限。一般以信噪比为 10：1时相应浓度或注入仪器的量确定定量限。三 分析方法验证指导原则 六 线性 系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。 应在规定的范围内测定线性关系。可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样
