维生素D检测方法课件.ppt

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1、资料仅供参考,不当之处,请联系改正。2013-1-3 第1 页 2011 罗氏维生素维生素D定义与结构定义与结构维生素维生素D是一种激素源,而不是维生素是一种激素源,而不是维生素 维生素D是一种 脂溶性脂溶性类固醇,基本化学结构是胆固醇。1 主要形式是维生素维生素D2(钙化醇)与维生素维生素D3(胆骨化醇)。1维生素维生素D3 暴露于阳光阳光或人工光源紫外线B射线后在皮肤生成 天然形式见于动物来源食物(食物(深海鱼、蛋黄、肝脏) 用于食物强化强化(橙汁、牛奶)以及药物添加剂添加剂 (药丸、滴剂)维生素维生素D2 天然形式见于蔬菜来源食物食物 (蘑菇) 用于强化强化与补充补充CH2OHHCH3H

2、CH3CH3CH3OHVitamin D3 (25-OH)仅供内部使用仅供内部使用Standing Committee on the Scientific Evaluation of Dietary Reference Intakes, IOM, DRI for Calcium, Phosphorus, Magnesium, Vitamin D, and Fluoride, 1st edition, National Academies Press: Washington DC, 1999资料仅供参考,不当之处,请联系改正。2维生素维生素 D生物骨骼功能已众所周知 .维持正常血液钙与磷的浓度增

3、加小肠钙吸收支持类骨质与其他维生素、激素与矿物质的矿化 维生素 D 的浓度受 PTH 密切调节,PTH 可刺激肾小管对钙离子重吸收,并促进肾脏生成维生素 D 1,25-(OH)2 对于强壮骨骼的形成与维持非常重要资料仅供参考,不当之处,请联系改正。3维生素维生素 D 缺乏缺乏作用与后果骨骼骨骼佝偻病、软骨病佝偻病、软骨病骨质疏松、继发性甲状旁腺功能亢进症骨质疏松、继发性甲状旁腺功能亢进症肌肉功能肌肉功能衰弱、疼痛、失去平衡衰弱、疼痛、失去平衡 跌倒风险跌倒风险糖尿病胰岛素抵抗、胰岛素分泌减少免疫系统肺结核、I 型糖尿病、多发性硬化、Sjgren-综合症、RA、甲状腺炎、Crohn 氏病癌症浓度

4、低于 20 ng/ml 与结肠、前列腺、卵巢与乳腺癌以及非何杰金氏淋巴瘤的发病风险 30 至 50 % 的增加具有相关性心脏心肌梗死、充血性心衰、动脉粥样硬化、高血压神经系统抑郁、精神分裂症、孤独症、帕金森病、Alzheimer 氏病肾脏肾病综合症、蛋白尿、Hmodialysis妊娠子代出现胰岛自身抗体,增加先兆子痫风险资料仅供参考,不当之处,请联系改正。目前全球测定人血清目前全球测定人血清25OHD25OHD主要方法主要方法 放免法放免法RIA : DiaSorin公司公司 化学发光法化学发光法: DiaSorin- Liaison 电化学发光法电化学发光法:(Elecsys) Roche

5、色谱法色谱法-HPLC assays. 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。5Vitamin D total 罗氏诊断最新一代维生素罗氏诊断最新一代维生素 D检测检测较上一代Vitamin D3(25-OH)提供更全面的VitD检测检测指标检测指标检测意义检测意义Vitamin D3(25-OH)(25-OH) Vit D3最佳的反映体内维生素最佳的反映体内维生素 D水平的检测标志物水平的检测标志物可检测可检测可检测可检测(25-OH) Vit D2服用维生素服用维生素D2补充剂的患补充剂的患者需检测。例如完全素食者需检测。例如完全素食者可能相比维生素者可能相比维生素D3(动(动物源)更倾向于

6、服用维生物源)更倾向于服用维生素素D2(植物源)(植物源)可检测可检测不可检测不可检测资料仅供参考,不当之处,请联系改正。Vitamin D total 罗氏诊断最新一代维生素罗氏诊断最新一代维生素 D检测检测为补充Vit D的患者提供了监测手段一般患者一般患者补充补充Vit D3 患患者者补充补充Vit D2 患者患者体内可检测到的体内可检测到的内源性内源性Vit D(25-OH) D3(25-OH) D3(25-OH) D3+(25-OH) D2(25-OH) Vit D3测试测试可检测可检测可检测可检测可检测可检测D3不可检测不可检测D2 Vit D total 测试测试可检测可检测可检

7、测可检测可检测可检测D3+D2检测值比较和意检测值比较和意义义Vit D total 与与(25-OH) Vit D3 数值与意数值与意义相当义相当Vit D total 与与(25-OH) Vit D3 数值与意义相数值与意义相当当Vit D total检测值为检测值为D3+D2,数值上大于,数值上大于(25-OH) Vit D3 ,更全,更全面反应体内维生素状况面反应体内维生素状况*正常人体内Vit D2浓度无法检测到,除非补充Vit D2药物资料仅供参考,不当之处,请联系改正。目前常用的的维生素目前常用的的维生素 D 检测方法检测方法种类种类准确性准确性投入投入数据解读数据解读Elecs

8、ys (Roche)免疫法准确经济方便LC-MS/MS液相色谱-串联质谱准确昂贵复杂HPLC高效液相色谱法准确昂贵复杂资料仅供参考,不当之处,请联系改正。8Elecsys Vitamin D total 检测显示与检测显示与 LC-MS/MS 之间具有稳定相关性之间具有稳定相关性方法比较:方法比较:Elecsys Vitamin D total 对对 LC-MS/MS资料仅供参考,不当之处,请联系改正。与主要竞争方的比较与主要竞争方的比较标准化标准化性能特征性能特征AbbottSiemensDiaSorinIDSElecsys Vitamin D total标准化内部参考材料标准化(无详细信息

9、),LC-MS/MS作为参考方法是用。内部标准标准化,可追溯至LC/MS/MS。 UV可追溯至UV 定量检测,通过与已出版LC-MS/MS方法比较进行验证。LC-MS/MS标准化,可标准化至NIST 标准。Elecsys Vitamin D total检测是唯一的已进行检测是唯一的已进行LC-MS/MS标准化的检测方法,可标准化的检测方法,可追溯至追溯至NIST标准参考材料。标准参考材料。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。罗氏的电化学发光法总维生素D测试,全面,快速,准确,是目前先进的检测方法10小结小结资料仅供参考,不当之处,请联系改正。 维生素 D缺乏: 10 ng/ml 100 ng/

10、ml 250 nmol/L临床临床(25-OH) VitD3水平判读水平判读目前没有官方的指南,也没有被广泛认可的目前没有官方的指南,也没有被广泛认可的VDVD判读水平判读水平多家检测试剂说明书都建议如下判读水平(罗氏雅培索灵)多家检测试剂说明书都建议如下判读水平(罗氏雅培索灵)骨质疏松患者适宜的维生素骨质疏松患者适宜的维生素D浓度考量标准浓度考量标准有效抑制有效抑制PTH有效预防骨折有效预防骨折有效预防跌倒有效预防跌倒抗骨松药效发挥最佳疗效抗骨松药效发挥最佳疗效资料仅供参考,不当之处,请联系改正。有效抑制有效抑制PTHPTHPrevalence of Vitamin D Insufficie

11、ncy in an Adult Normal Population Osteoporos Int (1997) 7:439443法国1569名患者 506岁765男性(45岁-65岁)804女性(35岁-60岁)抑制抑制PTH 临界值临界值 VD=31.2ng/ml(78nmol/l)资料仅供参考,不当之处,请联系改正。有效抑制有效抑制PTHPTH 387位患者 年龄70.8 4.51岁男性181位,年龄70.7 4.64 岁女性206位,年龄70.8 4.41岁抑制PTH 临界值 (three phase) phase 1-2 13.2ng/ml phase 2-3 28.8ng/mlThr

12、ee-Phase Model Harmonizes Estimatesof the Maximal Suppression of ParathyroidHormone by 25-Hydroxyvitamin D in Persons65 Years of Age and Older, The Journal of Nutrition Nutritional Epidemiology资料仅供参考,不当之处,请联系改正。有效预防骨折有效预防骨折 Meta 分析 防骨折12RCTs 患者42,279例 ; 防髋部骨折8RCTs 患者40,886例 有效降低骨折风险需达到的维生素D浓度:29.6ng

13、/ml(74nmol/L)有效降低髋部骨折风险需达到的维生素D浓度:31ng/ml(78nmol/L)Bischoff-Ferrari HA et al (2009) Prevention of nonvertebral fractures with oral vitamin D and dose dependency: a recta- analysis of randomized controlled trials. Arch Intern Med 169 (6):551-561 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。有效预防跌倒有效预防跌倒 Meta 分析 8RCTs 患者2,426名;

14、年龄65岁以上维生素D浓度24ng/ml(60nmol/L)有效降低跌倒风险23%PR=0.77 (95%CI 0.65-0.90)维生素D浓度33ng/ml能够使得双磷酸盐治疗效果最大化。(治疗无效人数最少)治疗无应答标准治疗无应答标准经过2年双磷酸盐治疗后,腰椎, 股骨颈, 髋关节,大转子T值仍3.0%(超过18个月,腰椎, 股骨颈, 髋关节,大转子DEXA) 超过12个月双磷酸盐治疗后仍发生骨折 比值比 置信区间 P值 资料仅供参考,不当之处,请联系改正。IOF的立场的立场 如何设定合适的25-OHD水平? 血血PTH被抑制最低水平时的被抑制最低水平时的25-OHD值值 取决于统计方法取

15、决于统计方法 抑制PTH 临界值 (three phase) phase 1-2 13.2ng/ml phase 2-3 28.8ng/mlIOF position statement: vitamin Drecommendations for older adultsOsteoporos Int (2010) 21:11511154资料仅供参考,不当之处,请联系改正。IOF的立场的立场 合适的25-OHD补充剂量补充剂量800 到 1,000 IU/day 是向老年人推荐的剂量此补充剂量能确保大多数老年人的VD浓度达到30 ng/ml(75 nmol/L ) IOF position sta

16、tement: vitamin Drecommendations for older adultsOsteoporos Int (2010) 21:11511154资料仅供参考,不当之处,请联系改正。推荐1 、服用前检测VD水平2、 补充VD应确保患者达到目标浓度30 ng/ml(75 nmol/L ) (补充(补充VD剂量换算剂量换算 100IU 升高升高 1ng/ml)3、三个月后需重复检测VD状态,确保VD浓度达标IOF的立场的立场 合适的25-OHD补充剂量补充剂量IOF position statement: vitamin Drecommendations for older adultsOsteoporos Int (2010) 21:11511154资料仅供参考,不当之处,请联系改正。从各方面文献考量,适宜骨质疏松患者的VD浓度应在30 ng/ml(75 nmol/L ) 之上补充维生素D要有的放矢,服用VD前要检测VD状态,确定补充剂量,服用VD三月后要要复测VD状态,观察是否达到目标维生素D浓度。20小结小结

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