1、情境十二：药物制剂分析任务二：常用制剂的分析知识点：片剂和注射剂中药物的含量测定课程：药品检验技术常见干扰及排除 糖类 硬脂酸镁 抗氧剂 加入掩蔽剂 加酸分解 加入弱氧化剂氧化 利用主药和抗氧剂紫外吸收光谱的差异进行测定 溶剂油 有机溶剂稀释法 萃取法 柱色谱法糖类 淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等是固体制剂的稀释剂，具有还原性，干扰氧化还原滴定：高锰酸钾法、溴酸钾法等。7126O6126x5126OHCOHCOHC 分解）（(O)CHOHOOHOHOHCH2OHCOOHHOOHOHOHCH2OH糖类氧化剂氧化电位KMnO4+ 1.51 VCe(SO4)2+ 1.44 VHNO3+ 0.94 VFeC
2、l3+ 0.77 VI2+ 0.54 VFeSO4原料药采用KMnO4法FeSO4片剂 采用铈量法应用示例糖类【含量测定】取本品约0.5g，精密称定，加稀硫酸与新沸过的冷水各15ml溶解后，立即用高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)滴定至溶液显持续的粉红色。每1ml高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)相当于27.80mg的FeSO47H2O。 【含量测定】取本品10片，置200ml量瓶中，加稀硫酸60ml与新沸过的冷水适量，振摇使硫酸亚铁溶解，用新沸过的冷水稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸迅速滤过，精密量取续滤液30ml，加邻二氮菲指示液数滴，立即用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硫
3、酸铈滴定液(0.1mol/L)相当于27.80mg的FeSO47H2O。 硬脂酸镁固体制剂常用的润滑剂，以硬脂酸镁(C36H70O4Mg)和棕榈酸镁(C32H62O4Mg)为主的混合物。l 配位常数：被测离子-EDTA Mg2+-EDTA，不干扰l 调节pH或选择合适的指示剂l pH6.07.5，酒石酸(草酸)可掩蔽。Mg2+干扰EDTA配位滴定；硬脂酸根干扰高氯酸非水滴定。Na2MgEDTAMgNa2EDTA2干扰作用干扰消除方法硬脂酸镁硬脂酸根、苯甲酸盐、羧甲基纤维素钠干扰高氯酸滴定干扰消除方法l被测药物含量硬脂酸含量，干扰可以忽略；l 脂溶性有机碱性药物，碱化萃取分离后，滴定。 无水草酸
4、的醋酐溶液，与硬脂酸镁的镁离子形成沉淀，且游离的硬脂酸在醋酐溶液中不显酸性，以孔雀绿为指示剂，高氯酸为滴定液，适用于叔胺类药物或含氮杂环类药物的片剂测定。硬脂酸镁硫酸奎宁片【含量测定】取本品10片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于硫酸奎宁0.3g），置分液漏斗中，加氯化钠0.5g与0.1mol/L氢氧化钠溶液10ml，混匀，精密加氯仿50ml，振摇10分钟，静置，分取氯仿液，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液25ml，加醋酐5ml与二甲基黄指示液2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显玫瑰红色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相
5、当于19.57mg的(C20H24N2O2)2H2SO42H2O。应用示例【含量测定】取本品约2g，精密称定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酐5ml与结晶紫指示液12滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于24.90mg的 (C20H24N2O2)2H2SO4。抗氧剂 常用抗氧剂有亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠及维生素C等。 OSHSOSOOSHSOSOO碘量法溴量法铈量法亚硝酸钠法抗氧剂的消除加入掩蔽剂（丙酮或甲醛）NaHSO3COH3CH3CCH3CH3CSO3NaOHCOHHCHHS
6、O3NaOH3O2H522NaHSO2OSNa Na2SO3HAcCOH3CH3CCH3CH3CSO3NaOHNaAc维生素C注射液 Vitamin C Injection【含量测定】精密量取本品适量（约相当于维生素C 0.2g），加水15ml与丙酮2ml，摇匀，放置5分钟，加稀醋酸4ml与淀粉指示液1ml，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显蓝色并持续30秒钟不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6。安乃近注射液 Metamizole Sodium Injection【含量测定】 精密量取本品10ml，置100ml量瓶中，加乙醇80ml，再加水稀释
7、至刻度，摇匀，立即精密量取10ml，置锥形瓶中，加乙醇2ml、水6.5ml与甲醛溶液0.5ml，放置1分钟，加盐酸溶液(91000)1.0ml，摇匀，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定（控制滴定速度为每分钟35ml），至溶液所显的淡黄色在30秒钟内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于17.57mg的C13H16N3NaO4SH2O。加酸分解 Na2S2O3 + 2HCl 2NaCl + H2S2O3(加热) SO2 + H2O NaHSO3+HCl NaCl + H2SO3 (加热) SO2 + H2O磺胺嘧啶钠注射液本品为磺胺嘧啶钠的灭菌水溶液。 【规格】 (1)2ml0.4g
8、(2)5ml1g 【含量测定】 精密量取本品适量(约相当于磺胺嘧啶钠0.6g)，照永停滴定法(附录A)，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于27.23mg的C10H9N4NaO2S。加入弱氧化剂氧化(H202和HNO3)264424O232323OSHSOSOOS2HSOSO弱 要求加入的弱氧化剂能将抗氧剂(亚硫酸盐等)氧化，而不氧化被测药物，不消耗滴定液。UV吸收谱差消除干扰柱色谱法USP测定丙酸睾酮注射液油溶液反相正相丙酸睾酮，甾醇，三萜类丙酸睾酮乙醇稀释紫外测定（一）盐酸苯海拉明制剂的含量测定盐酸苯海拉明 Diphenhydramin
9、e Hydrochloride本品为N,N-二甲基-2-(二苯基甲氧基)乙胺盐酸盐。含量测定方法剂型原料片剂2000版Ch.P2005版Ch.P注射液 2000版Ch.P2005版Ch.P阴离子表面活性剂滴定法高效液相色谱法含量测定方法高氯酸非水滴定法酸性染料比色法高效液相色谱法1.原料药测定【含量测定】取本品约0.2g，精密称定，加冰醋酸20ml与醋酐4ml溶解后，再加醋酸汞试液4ml与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于29.18 mg的C17H21NOHCl。 按干燥品计算，
10、含C17H21NOHCl不得少于99.0%。2.片剂含量测定2.1 酸性染料比色法 (2000版Ch.P)原理 碱性药物在酸性条件下与酸性染料溴甲酚绿结合生成有色的离子对，经氯仿提取后，在415nm波长处有最大吸收，利用比色法测定含量。【性状】本品为糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后显白色【规格】25 mg 含量要求：本品含盐酸苯海拉明(C17H21NOHCl)应为标示量的93.0%107.0%。【含量测定】对照品溶液的制备精密称取盐酸苯海拉明对照品50mg，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备取本品10
11、片，除去糖衣后精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸苯海拉明50mg)置100ml量瓶中，加水适量使盐酸苯海拉明溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置另一100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。溴甲酚绿溶液的制备 取溴甲酚绿50mg，加0.1mol/L氢氧化钠溶液0.7ml溶解后，加0.1mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液50ml，0.1mol/L盐酸溶液3.5ml，加水稀释成100ml，摇匀，滤过，pH值为3.8。测定法精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml，分别置分液漏斗中，各加水5ml与溴甲酚绿溶液3.0ml，摇匀，分别精密加氯仿10ml，振摇提取3分钟，静置分层后
12、，分取氯仿液至具塞离心管中，离心(2500转/分)10分钟，取澄清的氯仿液，照分光光度法(附录 B)，在415nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。片标示量标示量100)/mg(WAWmA(%)RRX2.2 高效液相色谱法 (2005版Ch.P)【含量测定】照高效液相色谱法(附录D)测定 色谱条件与系统适用性试验 用氰基键合相硅胶为填充剂；以乙腈-水-三乙胺(50:50:0.5)（用冰醋酸调节pH值至6.5）为流动相；检测波长为258 nm。理论塔板按盐酸苯海拉明峰计算不低于5000。盐酸苯海拉明峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。 测定法 取本品20片，除去包衣后精密称定，研细，精密称取适量
13、(约相当于盐酸苯海拉明50 mg)，置100 ml量瓶中，加水适量使盐酸苯海拉明溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液20l，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸苯海拉明对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1 ml中约含有0.5 mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。3.注射剂含量测定【性状】本品为无色的澄明液体【规格】1ml:20 mg 含量要求：本品含盐酸苯海拉明(C17H21NOHCl)应为标示量的95.0%105.0%。 阴离子表面活性剂滴定法（两相滴定法） (2000版Ch.P) 反相高效液相色谱法 (2005版Ch.P)3.1 阴离子表面活性剂（烷基磺酸盐）
14、滴定法 原理 使用阴离子表面活性剂溶液作为滴定剂的方法。常用于呈阳离子态的有机碱性药物的含量测定。终点前终点时有机相33SORBHSORBH)(SORInHSORInH33变色有机相【含量测定】精密量取本品适量(约相当于盐酸苯海拉明20mg)，置具塞锥形瓶中，加水20ml，加氯仿50ml与稀硫酸5ml，再加二甲基黄-溶剂蓝19混合指示液1ml，用磺基丁二酸钠二辛酯试液滴定，至近时强力振摇，继续滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密称取盐酸苯海拉明对照品约20mg，照上述方法自“置具塞锥形瓶中”起，依法测定，根据二者消耗磺基丁二酸钠二辛酯试液的量(ml)的比值计算，即得。阴离子表面活性剂滴定法测
15、定的其它药物 克霉唑软膏、栓、溶液 盐酸胺碘酮片 硝酸益康唑软膏 盐酸氯丙那林片(含量及均匀度) 盐酸苯海索片(含量及均匀度) 盐酸苯海索片【含量测定】取本品25片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸苯海索20mg)，置具塞锥形瓶中，加水8ml、稀硫酸3ml和氯仿25ml，再加二甲基黄-亚甲蓝混合指示液0.5ml，用0.25磺基丁二酸钠二辛酯溶液滴定，至近终点时强力振摇，继续滴定至氯仿层由绿色转变为红灰色；另精密称取盐酸苯海索对照品20mg，照上述方法自“置具塞锥形瓶中”起，依法测定，根据二者消耗0.25磺基丁二酸钠二辛酯溶液的量(ml)的比值计算，即得。（二）盐酸吗啡制剂的含量测定盐
16、酸吗啡本品为17-甲基-3-羟基-4,5-环氧-7,8-二脱氢吗啡喃-6-醇盐酸盐三水合物。（三）阿片中吗啡的含量测定阿 片本品为罂粟科植物罂粟的未成熟蒴果被划破后渗出的乳状液经干燥制成。其主要成份为吗啡、可待因、罂粟碱、那可汀、蒂巴因。【性状】本品为棕色或暗棕色膏状物。新鲜品略柔软，存放日久，则变坚硬或脆。臭特殊，味即苦。含量限度： 含吗啡按无水吗啡(C17H19NO3)计算，不得少于9.5%。【含量测定】照高效液相色谱法(附录D)测定 色谱条件与系统适用性试验 用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-0.0025mol/L庚烷磺酸钠水溶液-乙腈(5:5:2)为流动相
17、；检测波长为220 nm。理论塔板按吗啡峰计算不低于1000。固相萃取柱色谱适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充物；以测定法中相同的处理条件和洗脱条件试验。精密量取浓度为每1ml中含0.5mg的吗啡对照品0.5ml，置处理后的固相萃取柱上，同法洗脱，用5ml量瓶收集至刻度，摇匀。分别精密量取该洗脱液与含量测定项下的对照品溶液各10l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。洗脱液与对照品色谱图中吗啡峰面积的比值应在0.971.03之间。测定法 (SPE柱准备)取固相萃取柱一支，依次用甲醇-水(3:1)与水5ml冲洗，再用pH值约为9的氨水溶液冲洗至流出液pH值约为9(碱性)，待用。(供试品溶液的制备)取本品约5g，研细(过五号筛)，精密称取约1g,置200ml量瓶中，加5%醋酸溶液适量，超声处理30分钟使吗啡溶液，取出，放至室温，用5%醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液0.5ml，置上述固相萃取柱上，加氨溶液(12)2滴(调pH9)，摇匀(碱化供试液上SPE柱)，待溶剂滴尽后，用水20ml冲洗，加含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脱，收集洗脱液5.0ml，摇匀，精密吸取洗脱液10l，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取吗啡对照品适量，精密称定，用含20%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀释成每1ml约含吗啡0.05mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。
