中药中香豆素类化合物提取分离技术课件.ppt

1、山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院 山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院 山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院 山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院中药化学实用技术学习情景四中药中香豆素(Coumarin)类化学成分的提取分离技术学习情境四学习情境四 中药中香豆素类化合物的提取分离技术中药中香豆素类化合物的提取分离技术2掌握掌握秦皮中香豆素秦皮中香豆素的提取分离原理及的提取分离原理及操作技术；操作技术；熟悉蛇床子中香豆熟悉蛇床子中香豆素的提取分离原理素的提取分离原理及操作技术；及操作技术；了解前胡中香豆素了解前胡中香豆素的提取分离原理及的提取分

2、离原理及操作技术。操作技术。知识要求知识要求3能力要求能力要求学习目标学习目标1掌握中药中香豆素掌握中药中香豆素类化学成分的提取类化学成分的提取分离原理及操作技分离原理及操作技术。术。熟练进行秦皮、熟练进行秦皮、蛇床子中香豆素蛇床子中香豆素的提取分离操作；的提取分离操作；能进行前胡中香能进行前胡中香豆素的提取分离豆素的提取分离操作。操作。教学内容教学内容学习学习提示提示香豆素类化学成分的结构、性香豆素类化学成分的结构、性质及提取分离知识质及提取分离知识任务一任务一秦皮中香豆素类化合物的提取秦皮中香豆素类化合物的提取分离技术分离技术 秦皮中香豆素类成分的的提取秦皮中香豆素类成分的的提取分离及鉴定

3、分离及鉴定 学习提示学习提示香豆素的结构与特点香豆素的结构与特点一一二三三 香豆素的理化性质及检识香豆素的理化性质及检识 香豆素类化学成分的提取分离香豆素类化学成分的提取分离 命命 名名香豆素最早由豆香豆素最早由豆科植物香豆中提科植物香豆中提取获得，并且具取获得，并且具有芳香气味，故有芳香气味，故而命名为香豆素。而命名为香豆素。定定 义义是具有苯骈是具有苯骈-吡喃吡喃酮母核的一类天然酮母核的一类天然化合物的总称，在化合物的总称，在结构上可以看成是结构上可以看成是顺邻羟基桂皮酸失顺邻羟基桂皮酸失水而成的内酯。水而成的内酯。分布与活性分布与活性广泛分布于高等植广泛分布于高等植物中，特别在被子物中，

4、特别在被子植物如伞形科、芸植物如伞形科、芸香科、豆科等科中香科、豆科等科中多见。在某些真菌多见。在某些真菌中也发现有香豆素中也发现有香豆素成分的存在。成分的存在。香豆素有多方面的香豆素有多方面的生理活性，祖师麻生理活性，祖师麻中分离的瑞香素有中分离的瑞香素有抗炎和止痛作用；抗炎和止痛作用；蛇床子中分离出的蛇床子中分离出的蛇床子素能治疗脚蛇床子素能治疗脚癣、湿疹等病。癣、湿疹等病。香豆素香豆素顺式邻羟基桂皮酸 苯骈-吡喃酮一、一、 香豆素的香豆素的结构类型结构类型简单香豆素类简单香豆素类呋喃香豆素类呋喃香豆素类吡喃香豆素类吡喃香豆素类其他香豆素其他香豆素 简单香豆素简单香豆素 仅在苯核上具有取代

5、基的香豆素。常见取代基为仅在苯核上具有取代基的香豆素。常见取代基为羟基、甲氧基、亚甲氧基和异戊烯氧基等。这一类香羟基、甲氧基、亚甲氧基和异戊烯氧基等。这一类香豆素多数在豆素多数在C7C7位上连有含氧基团，位上连有含氧基团，7-7-羟基香豆素（伞羟基香豆素（伞形花内酯）可以认为是香豆素类成分的母体，其他如形花内酯）可以认为是香豆素类成分的母体，其他如在在C5C5、C6C6、C8C8位上也会有含氧基团取代。异戊烯基常位上也会有含氧基团取代。异戊烯基常连接在连接在C6C6和和C8C8上。上。OOHO 呋喃香豆素呋喃香豆素由香豆素核上的异戊烯基与邻位酚羟基环合而成。由香豆素核上的异戊烯基与邻位酚羟基环

6、合而成。成环后有时可因降解而失去成环后有时可因降解而失去3个个C原子。呋喃香原子。呋喃香豆素又分为线型和角型两种类型。豆素又分为线型和角型两种类型。1.线型分子线型分子 由由C6-异戊烯基与异戊烯基与C7-羟基环合而成（即羟基环合而成（即6，7-呋喃香呋喃香1.豆），豆），3个环是处于一直线上的；个环是处于一直线上的； 补骨脂内酯补骨脂内酯 花椒毒内酯花椒毒内酯 2.角形分子角形分子 由由C8-异戊烯基与异戊烯基与C7-羟基成环（即羟基成环（即7，8-呋喃香素），呋喃香素）， 三个环处在一折线上。三个环处在一折线上。OOOOOOOCH3OOOOCH3CH3OOOO 异补骨脂异补骨脂 茴芹内酯茴

7、芹内酯 吡喃香豆素吡喃香豆素由香豆素苯环上异戊烯基和邻位羟基环合形成由香豆素苯环上异戊烯基和邻位羟基环合形成2 2，2-2-二甲基二甲基- -吡喃环结构。吡喃环结构。同呋喃香豆素类似，也分成线型（6，7-吡喃香豆素）和角型（7，8-吡喃香豆素）两种类型根据酬和位置分。OOOOOO花椒内酯花椒内酯 邪蒿内酯邪蒿内酯 其他香豆素其他香豆素主要包括指在主要包括指在-吡喃酮环上有取代的一类香豆素（多在吡喃酮环上有取代的一类香豆素（多在C3C3或或C4C4上，例如上，例如calanolidecalanolide A A）；双香豆素类（双七叶内脂）；）；双香豆素类（双七叶内脂）；异香豆素类（茵陈内脂）。异

8、香豆素类（茵陈内脂）。OOOOOHOOHOHOCH2CCH3OOOHOHO Ocalanolide A茵陈内酯茵陈内酯紫苜蓿酚紫苜蓿酚 内酯环内酯环的水解的水解二、香豆素二、香豆素的理化性质的理化性质溶解性溶解性性状性状显色显色反应反应游离香豆素多为结晶性物质，有一游离香豆素多为结晶性物质，有一定熔点，多有芳香气味。分子量小定熔点，多有芳香气味。分子量小的有挥发性，能随水蒸气蒸出，并的有挥发性，能随水蒸气蒸出，并能升华。能升华。 香豆素苷多数无香味和挥香豆素苷多数无香味和挥发性，也不能升华。发性，也不能升华。、-不饱和内不饱和内酯环在稀碱液的酯环在稀碱液的条件下，可被水条件下，可被水解开环，生

9、成顺解开环，生成顺邻羟基桂皮酸盐，邻羟基桂皮酸盐，该盐经酸化即闭该盐经酸化即闭环恢复成原来的环恢复成原来的内酯结构，该性内酯结构，该性质可用于提取分质可用于提取分离。离。1.1.内酯的颜色反应内酯的颜色反应（异羟肟酸铁反（异羟肟酸铁反应应 ）2.2.酚羟基的颜色反酚羟基的颜色反应应3.Gibbs3.Gibbs反应反应 4.Emerson4.Emerson反应反应 游离香豆素能溶游离香豆素能溶于沸水，易溶于于沸水，易溶于甲（乙）醇、氯甲（乙）醇、氯仿、乙醚等，可仿、乙醚等，可溶于石油醚。溶于石油醚。 香香豆素苷类能溶于豆素苷类能溶于水、甲醇、乙醇，水、甲醇、乙醇，而难溶于乙醚、而难溶于乙醚、苯等

10、极性小的有苯等极性小的有机溶剂。机溶剂。荧光性荧光性香豆素母核本身无荧光，但香豆素母核本身无荧光，但羟基香豆素类化合物在紫外羟基香豆素类化合物在紫外光下大多显蓝色或蓝绿色荧光下大多显蓝色或蓝绿色荧光，在碱液中更加显著。香光，在碱液中更加显著。香豆素的荧光性质可用于香豆豆素的荧光性质可用于香豆素成分的检识鉴别。素成分的检识鉴别。色谱色谱检识检识1.1.薄层色谱法薄层色谱法2.2.纸色谱法纸色谱法内酯环的水解内酯环的水解 【注注】如果与碱液长时间加热，水解产物如果与碱液长时间加热，水解产物顺邻羟桂皮酸衍生物则转变为顺邻羟桂皮酸衍生物则转变为反邻羟基桂反邻羟基桂皮酸皮酸的衍生物，再经酸化也不能环合成

11、内的衍生物，再经酸化也不能环合成内酯，故提取时要注意碱的浓度与作用时间。酯，故提取时要注意碱的浓度与作用时间。内酯的颜色反应内酯的颜色反应 “异羟肟酸铁反应异羟肟酸铁反应” 在碱性条件下，内酯开环，在碱性条件下，内酯开环，与盐酸羟胺中的羟基缩合生成异羟肟酸，然后与盐酸羟胺中的羟基缩合生成异羟肟酸，然后在酸性条件下再与三价铁盐络合而显红色。在酸性条件下再与三价铁盐络合而显红色。 酚羟基的颜色反应酚羟基的颜色反应 三氯化铁反应三氯化铁反应 具有酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与具有酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与Fe3+络合而产生绿色至墨绿色沉淀。络合而产生绿色至墨绿色沉淀。重氮化反应重氮化反应

12、 若酚羟基的邻对位无取代时，可与重氮化试剂反若酚羟基的邻对位无取代时，可与重氮化试剂反应产生红色至紫红色。应产生红色至紫红色。 其他的颜色反应其他的颜色反应 Gibbs反应反应 香豆素类成分在碱性条件（香豆素类成分在碱性条件（pH 910）下内酯环水解生成酚羟）下内酯环水解生成酚羟基，如果其对位（基，如果其对位（6位）无取代，与位）无取代，与2，6二氯苯醌氯亚胺二氯苯醌氯亚胺（Gibbs试剂）反应显蓝色试剂）反应显蓝色。 Emerson反应反应与与Gibbs反应类似，香豆素类成分如在反应类似，香豆素类成分如在6位无取代，内酯环在位无取代，内酯环在碱性条件下开环后与碱性条件下开环后与4氨基安替比

13、林和铁氰化钾（氨基安替比林和铁氰化钾（Emerson试剂）显红色。试剂）显红色。 三三 香豆素的提取与分离香豆素的提取与分离溶剂提取法香香豆豆素素的的提提取取与与分分离离提取提取 分离分离 碱溶酸沉法水蒸气蒸馏法色谱法 酸碱分离法超临界流体萃取法分步结晶法真空升华或蒸馏法（一）香豆素的提取（一）香豆素的提取溶剂提取法：溶剂提取法： 香豆素类香豆素类成分的极性不成分的极性不同，各种溶剂同，各种溶剂都有提出该成都有提出该成分的可能。当分的可能。当利用极性由小利用极性由小到大的溶剂顺到大的溶剂顺次萃取时，各次萃取时，各萃取液浓缩后萃取液浓缩后都有可能获得都有可能获得结晶，再结合结晶，再结合其他分离方

14、法其他分离方法进行分离。进行分离。碱溶酸沉法：碱溶酸沉法： 香豆素类香豆素类具有内酯结构，具有内酯结构，能溶于稀碱液能溶于稀碱液与脂溶性杂质与脂溶性杂质分离，再经酸分离，再经酸化使内酯环合，化使内酯环合，香豆素类成分香豆素类成分即可析出，也即可析出，也可用乙醚等有可用乙醚等有机溶剂萃取得机溶剂萃取得到。但在碱水到。但在碱水中加热的时间中加热的时间不可过长，以不可过长，以防香豆素开环防香豆素开环后发生异构化。后发生异构化。 水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏法：法： 小分子小分子的游离香豆的游离香豆素因具有挥素因具有挥发性，可用发性，可用水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏法进行提取法进行提取。超临界流体超临界流体提取法：提

15、取法： 超临界超临界流体提取新流体提取新技术已被广技术已被广泛应用于香泛应用于香豆素类成分豆素类成分的提取中。的提取中。极性小的游极性小的游离香豆素可离香豆素可直接提取，直接提取，而苷类则可而苷类则可通过加入乙通过加入乙醇等极性溶醇等极性溶剂作夹带剂剂作夹带剂来提取。来提取。（二）香豆素的分离（二）香豆素的分离酸碱分离法：酸碱分离法： 弱酸性和弱酸性和中性香豆素的中性香豆素的混合物，可利混合物，可利用碱水酸沉法用碱水酸沉法分离。分离。色谱法：色谱法： 柱色谱分柱色谱分离中多采用硅离中多采用硅胶吸附剂，慎胶吸附剂，慎用氧化铝，否用氧化铝，否则会使香豆素则会使香豆素结构发生变化。结构发生变化。此外

16、还可用葡此外还可用葡聚糖凝胶色谱聚糖凝胶色谱进行分离。进行分离。分步结晶法：分步结晶法： 该方法适该方法适用于含量较高用于含量较高的香豆素。可的香豆素。可利用含氧香豆利用含氧香豆素在石油醚中素在石油醚中溶解度小的特溶解度小的特点，在含香豆点，在含香豆素的乙醚提取素的乙醚提取液中，逐步加液中，逐步加人石油醚，使人石油醚，使香豆素逐步析香豆素逐步析出。出。真空升华或蒸真空升华或蒸馏法：馏法： 香豆素类香豆素类易升华的性质易升华的性质使之与不挥发使之与不挥发性成分分开。性成分分开。对于热稳定性对于热稳定性好的香豆素，好的香豆素，此法是非常方此法是非常方便实用的。但便实用的。但对于热不稳定对于热不稳定

17、的香豆素往往的香豆素往往会因此引起重会因此引起重排或降解。排或降解。 任务一任务一 秦皮中香豆素类化学成分的提取分离技术秦皮中香豆素类化学成分的提取分离技术 学习目标学习目标一一二三三秦皮中香豆素类化学成分的提取分离技术秦皮中香豆素类化学成分的提取分离技术必备知识五四六相关知识链接及拓展 课堂互动目标测试一一 学习目标学习目标2掌握秦皮中香豆素掌握秦皮中香豆素类化合物的提取、类化合物的提取、分离及鉴定技术。分离及鉴定技术。熟悉秦皮中香豆素熟悉秦皮中香豆素类化合物的结构及类化合物的结构及性质。性质。了解秦皮中香豆素了解秦皮中香豆素类化合物的存在及类化合物的存在及生物活性。生物活性。知识要求知识要

18、求3能力要求能力要求1掌握秦皮中香豆素掌握秦皮中香豆素类化学成分的提取类化学成分的提取分离原理及操作技分离原理及操作技术。术。 熟练进行秦皮中熟练进行秦皮中香豆素类化合物香豆素类化合物的提取、分离及的提取、分离及鉴定操作。鉴定操作。学会秦皮中香豆学会秦皮中香豆素类化合物的色素类化合物的色谱鉴定技术谱鉴定技术。学习目的二 秦皮中香豆素类化学成分的提取分离技术 秦皮为木犀科植物苦栎白蜡树秦皮为木犀科植物苦栎白蜡树Fraxiuusrhyuchophylla Hance.、白、白蜡树蜡树F. chinensis Roxb.、尖叶白蜡、尖叶白蜡树树F.chinensis Roxb. Var. acumi

19、nate Lingelsh. 或宿柱白蜡树或宿柱白蜡树F. stylosa Lingelsh. 的干燥枝皮或干皮。具有的干燥枝皮或干皮。具有清热燥湿、收涩、明目等功效。临清热燥湿、收涩、明目等功效。临床主治慢性菌痢，对慢性支气管炎床主治慢性菌痢，对慢性支气管炎亦有一定疗效。秦皮含有七叶内酯、亦有一定疗效。秦皮含有七叶内酯、七叶苷、秦皮素以及秦皮苷等香豆七叶苷、秦皮素以及秦皮苷等香豆素类化合物，此外还有鞣质、皂苷、素类化合物，此外还有鞣质、皂苷、树脂和脂溶性色素等成分。七叶内树脂和脂溶性色素等成分。七叶内酯和七叶苷为其主要成分，具有抗酯和七叶苷为其主要成分，具有抗炎、镇痛、止咳、祛痰与平喘等功炎

20、、镇痛、止咳、祛痰与平喘等功效。效。秦皮中七叶内酯和七叶苷的提取分离工艺流程秦皮中七叶内酯和七叶苷的提取分离工艺流程 课课 堂堂 互互 动动 用95%乙醇回流提取和减压浓缩是各应注意什么问题?（三）秦皮中香豆素类的提取分离（三）秦皮中香豆素类的提取分离（二）秦皮中主要有效成分的性质（一）秦皮中主要有效成分及结构（一）秦皮中主要有效成分及结构三三 必备知识必备知识（一）秦皮中主要有效成分及结构 秦皮含有七叶内酯、秦皮含有七叶内酯、七叶苷、秦皮素以及秦皮七叶苷、秦皮素以及秦皮苷等香豆素类化合物，此苷等香豆素类化合物，此外还有鞣质、皂苷、树脂外还有鞣质、皂苷、树脂和脂溶性色素等成分。七和脂溶性色素等

21、成分。七叶内酯和七叶苷为其主要叶内酯和七叶苷为其主要成分，具有抗炎、镇痛、成分，具有抗炎、镇痛、止咳、祛痰与平喘等功效。止咳、祛痰与平喘等功效。 glc-O七叶内酯七叶内酯七叶苷七叶苷（二）秦皮中主要有效成分的性质（二）秦皮中主要有效成分的性质 七叶内酯七叶内酯(aescule-tin,七叶素）为无色或淡黄色针状结七叶素）为无色或淡黄色针状结晶，熔点晶，熔点276，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、稀碱水，略溶于水，难溶于氯仿等亲脂性有机溶剂；稀碱水，略溶于水，难溶于氯仿等亲脂性有机溶剂； 七叶苷七叶苷(aesculin)为无色或浅黄色针状结晶，熔点为无色或

22、浅黄色针状结晶，熔点206，溶于甲醇、乙醇、碱水或水，难溶于乙酸乙脂，不溶于氯溶于甲醇、乙醇、碱水或水，难溶于乙酸乙脂，不溶于氯仿。两者均显明显的蓝色荧光。仿。两者均显明显的蓝色荧光。（二）秦皮中主要有效成分的性质（二）秦皮中主要有效成分的性质 秦皮素秦皮素 (fraxetin) 分子式分子式C10H8O5，相对分子质量，相对分子质量208.16。片状结晶（乙醇水溶液），熔点。片状结晶（乙醇水溶液），熔点227228。溶。溶于乙醇及盐酸水溶液，微溶于乙醚和沸水。于乙醇及盐酸水溶液，微溶于乙醚和沸水。 秦皮苷秦皮苷 (fraxin) 分子式分子式C16 H18O10，相对分子质量，相对分子质量3

23、70.30。水合物为黄色针状结晶（水或稀乙醇溶液），无。水合物为黄色针状结晶（水或稀乙醇溶液），无水物熔点水物熔点205。微溶于冷水，易溶于热乙醇及热水。微溶于冷水，易溶于热乙醇及热水。OOORHOH3CO秦皮素秦皮素 R=H 秦皮苷秦皮苷 R=glu 12提取提取分离分离依据依据根据秦皮中七叶苷和七叶内酯均根据秦皮中七叶苷和七叶内酯均溶于热乙醇的性质，用乙醇为溶溶于热乙醇的性质，用乙醇为溶剂进行回流提取。剂进行回流提取。 利用七叶苷和七叶内酯均不溶于氯仿利用七叶苷和七叶内酯均不溶于氯仿的性质除去亲脂性杂质。利用在乙酸的性质除去亲脂性杂质。利用在乙酸乙酯中的溶解度差异分离二者。乙酯中的溶解度差

24、异分离二者。（三）秦皮中香豆素类成分的提取分离（三）秦皮中香豆素类成分的提取分离苦枥白蜡树中秦皮素、秦皮苷的提取分离四 知识拓展（一）白蜡树树皮中七叶素的提取分离（一）白蜡树树皮中七叶素的提取分离 索氏提取器内，用索氏提取器内，用95%乙醇回流提取，回收溶剂，浓缩物乙醇回流提取，回收溶剂，浓缩物加硫酸水浴加热后冷却过滤，滤液用乙醚萃取，回收乙醚，放置析加硫酸水浴加热后冷却过滤，滤液用乙醚萃取，回收乙醚，放置析晶，甲醇重结晶得七叶素。工艺流程如下：晶，甲醇重结晶得七叶素。工艺流程如下：白蜡树树皮干燥粗粉乙醇提取液浓缩浓缩物加硫酸水浴加热3小时，冷却，过滤杂质滤液等体积乙醚提取4次乙醚液回收乙醚、

25、放置过夜黄色结晶甲醇重结晶七叶素95%乙醇回流提取四 知识拓展（二）苦枥白蜡树中秦皮素、秦皮苷的提取分离工艺流程如下：（二）苦枥白蜡树中秦皮素、秦皮苷的提取分离工艺流程如下：苦枥白蜡树树皮粗粉95%乙醇回流提取乙醇提取液减压回收乙醇浸膏加水稀释，醋酸乙酯、正丁醇分别萃取水层醋酸乙酯层正丁醇层回收醋酸乙酯浸膏硅胶柱色谱，用氯仿-甲醇-甲酸不同比例洗脱第15、16份第19、20份回收至干，50%乙醇溶解，过滤回收至干，50%乙醇溶解，过滤滤液滤液冰箱中析晶冰箱中析晶秦皮素秦皮乙素四 知识拓展（三）白蜡树树皮中七叶素的提取分离工艺流程（三）白蜡树树皮中七叶素的提取分离工艺流程 白蜡树树皮干燥粗粉乙醇

26、提取液浓缩浓缩物加硫酸水浴加热3小时，冷却，过滤杂质滤液等体积乙醚提取4次乙醚液回收乙醚、放置过夜黄色结晶甲醇重结晶七叶素95%乙醇回流提取任务二任务二 蛇床子中香豆素类化学成分的提取分离蛇床子中香豆素类化学成分的提取分离 学习目标学习目标一一二三三蛇床子中香豆素类化学成分的提取分离蛇床子中香豆素类化学成分的提取分离必备知识五四六相关知识链接及拓展 课堂互动目标测试一一 学习目标学习目标2掌握蛇床子中香豆掌握蛇床子中香豆素类化合物的提取、素类化合物的提取、分离及鉴定技术。分离及鉴定技术。熟悉蛇床子中香豆熟悉蛇床子中香豆素类化合物的结构素类化合物的结构及性质。及性质。了解蛇床子中香豆了解蛇床子中

27、香豆素类化合物的存在素类化合物的存在及生物活性。及生物活性。知识要求知识要求3能力要求能力要求1掌握蛇床子中香豆掌握蛇床子中香豆素类化学成分的提素类化学成分的提取分离原理及操作取分离原理及操作技术。技术。 熟练进行蛇床子熟练进行蛇床子中香豆素类化合中香豆素类化合物的提取、分离物的提取、分离及鉴定操作。及鉴定操作。学会蛇床子中香学会蛇床子中香豆素类化合物的豆素类化合物的色谱鉴定技术色谱鉴定技术。学习目的二 蛇床子中香豆素类化学成分提取分离技术 蛇 床 子 为 伞 形 科 植 物蛇 床 子 为 伞 形 科 植 物Cnidium monnieri(L.)Cuss的的果实果实 。主产于河北、山东、。主

28、产于河北、山东、江苏等地。具有温肾助阳，祛江苏等地。具有温肾助阳，祛风燥湿，杀虫的功能，用于男风燥湿，杀虫的功能，用于男子阳痿，阴囊湿痒，女子带下子阳痿，阴囊湿痒，女子带下阴痒、宫寒不孕、风湿痹痛、阴痒、宫寒不孕、风湿痹痛、疥癣湿疮等的治疗。疥癣湿疮等的治疗。蛇床子中蛇床子素和欧前胡素的提取分离工艺流程蛇床子中蛇床子素和欧前胡素的提取分离工艺流程 蛇床子果实粗粉乙醇浸泡 2 次，合并乙醇液减压浓缩油层水层石油醚萃取，放置析晶放置后凝固，少量乙醇热溶，放置析晶结晶结晶无水乙醇反复重结晶无水乙醇反复重结晶结晶结晶蛇床子素欧前胡素（三）蛇床子中（三）蛇床子中主要有效成分的提取分离的提取分离（二）蛇床

29、子中主要有效成分的性质（一）蛇床子中主要有效成分及结构（一）蛇床子中主要有效成分及结构三三 必备知识必备知识（一）蛇床子中主要有效成分 蛇床子主含挥发油和香豆素类成分。果实蛇床子主含挥发油和香豆素类成分。果实含挥发油含挥发油1.3%1.3%。香豆素类成分包括蛇床子素。香豆素类成分包括蛇床子素( (ostholeosthole) )、欧前胡、欧前胡( (imperatorineimperatorine) )、佛手柑内、佛手柑内酯酯( (bergaptenbergapten) )、异虎耳草、异虎耳草( ( isopimpinellineisopimpinelline ) )等成分。等成分。（二）蛇

30、床子中香豆素类成分的结构、性质（二）蛇床子中香豆素类成分的结构、性质OOH3CO 蛇床子素蛇床子素 棱柱状结晶（乙醚），针状结晶（稀乙醇），熔点棱柱状结晶（乙醚），针状结晶（稀乙醇），熔点8384，溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、乙酸乙酯和沸石油醚，溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、乙酸乙酯和沸石油醚，不溶于水和冷石油醚。不溶于水和冷石油醚。 欧前胡素欧前胡素 棱柱结晶（乙醚），长细针晶（热水），熔点棱柱结晶（乙醚），长细针晶（热水），熔点102 ，不溶于水，易溶于沸水，易溶于氯仿、溶于苯、乙醇、乙，不溶于水，易溶于沸水，易溶于氯仿、溶于苯、乙醇、乙醚、石油醚和碱性氢氧化物。醚、石油醚和碱性氢氧化物。O

31、OOOCHCH3C(CH3)2 佛手柑内酯佛手柑内酯 白色带丝光的针状结晶，熔点白色带丝光的针状结晶，熔点188190 ，易溶，易溶于氯仿，微溶于苯、乙酸乙酯和乙醇，不溶于水，具有升华性。于氯仿，微溶于苯、乙酸乙酯和乙醇，不溶于水，具有升华性。 异虎耳草素异虎耳草素 淡黄色结晶，熔点淡黄色结晶，熔点189191。OOOOCH3OCH3OOOCH3O课课 堂堂 互互 动动 蛇床子中化学成分的溶解性有什么特点？如何利用其特点进行提取分离？抗心律失抗心律失常作用常作用（三）蛇床子中香豆素类成分的生物活性（三）蛇床子中香豆素类成分的生物活性生物活性生物活性抗菌、抗抗菌、抗病毒作用病毒作用抗变态反应抗变

32、态反应 蛇床子素蛇床子素对须发藓菌有对须发藓菌有较强抑制作用，较强抑制作用，花椒毒酚则具花椒毒酚则具有显著的抗霉有显著的抗霉菌作用。菌作用。 蛇床子总香豆素蛇床子总香豆素能直接扩张豚鼠器官能直接扩张豚鼠器官平滑肌，对豚鼠吸入平滑肌，对豚鼠吸入致痉剂所致的药物性致痉剂所致的药物性哮喘有明显的保护作哮喘有明显的保护作用，在体外能拮抗组用，在体外能拮抗组织胺、慢反应物质引织胺、慢反应物质引起的肠肌收缩，对小起的肠肌收缩，对小鼠被动性皮肤过敏反鼠被动性皮肤过敏反应有抑制作用，同时应有抑制作用，同时有一定的祛痰作用。有一定的祛痰作用。抗炎作用抗炎作用 蛇床蛇床子素具有子素具有钙拮抗剂钙拮抗剂的作用。的作

33、用。 蛇床子总香蛇床子总香豆素对角叉菜胶豆素对角叉菜胶和鸡蛋清引起的和鸡蛋清引起的大鼠足趾肿胀均大鼠足趾肿胀均有明显的抑制作有明显的抑制作用。用。 。四 知识拓展 蛇床子膏的制备工艺流程蛇床子膏的制备工艺流程 蛇床子粗粉用蛇床子粗粉用70%乙醇浸提乙醇浸提3次，合并提取液，减压回收乙醇，次，合并提取液，减压回收乙醇，得稠膏。然后加稠膏得稠膏。然后加稠膏3倍量的氯仿回流提取，过滤，减压回收氯仿，倍量的氯仿回流提取，过滤，减压回收氯仿，得含蛇床子素的干膏。工艺流程如下：得含蛇床子素的干膏。工艺流程如下：任务三任务三 前胡中香豆素类化学成分的提取分离前胡中香豆素类化学成分的提取分离 学习目标学习目标

34、一一二三三前胡中香豆素类化学成分的提取分离前胡中香豆素类化学成分的提取分离必备知识五四六相关知识链接及拓展 课堂互动目标测试一一 学习目标学习目标2掌握前胡中香豆素掌握前胡中香豆素类化合物的提取、类化合物的提取、分离及鉴定技术。分离及鉴定技术。熟悉前胡中香豆素熟悉前胡中香豆素类化合物的结构及类化合物的结构及性质。性质。了解前胡中香豆素了解前胡中香豆素类化合物的存在及类化合物的存在及生物活性。生物活性。知识要求知识要求3能力要求能力要求1掌握前胡中香豆素掌握前胡中香豆素类化学成分的提取类化学成分的提取分离原理及操作技分离原理及操作技术。术。 熟练进行前胡中熟练进行前胡中香豆素类化合物香豆素类化合

35、物的提取、分离及的提取、分离及鉴定操作。鉴定操作。学会前胡中香豆学会前胡中香豆素类化合物的色素类化合物的色谱鉴定技术谱鉴定技术。学习目的二 前胡中香豆素类化学成分提取分离技术 前胡为伞形科植物白花前胡为伞形科植物白花前 胡前 胡 ( P e u c e d a n u m praeruptorum Dunn.）的干燥）的干燥根。具有散风清热、降气化痰根。具有散风清热、降气化痰的功效，用于风热咳嗽痰多、的功效，用于风热咳嗽痰多、痰热喘满、咯痰黄稠等症。主痰热喘满、咯痰黄稠等症。主产于浙江、江西、四川等省。产于浙江、江西、四川等省。白花前胡成分白花前胡丙素的提取分离工艺流程白花前胡成分白花前胡丙素

36、的提取分离工艺流程前胡粗粉水提取3 次水提液减压浓缩水浸膏60%乙醇沉淀滤液回收乙醇，石油醚萃取石油醚萃取物硅胶柱色谱，石油醚-醋酸乙酯（8515）洗脱白花前胡丙素粗品反复重结晶白花前胡丙素（三）前胡中（三）前胡中主要有效成分的提取分离的提取分离（二）前胡中主要有效成分的性质（一）前胡中主要有效成分及结构（一）前胡中主要有效成分及结构三三 必备知识必备知识（一）前胡中主要有效成分 前胡中主要含有香豆素类化合物，主要有效成分为前胡中主要含有香豆素类化合物，主要有效成分为白花前胡丙素（白花前胡丙素（PraeruptorinPraeruptorin C C）。白花前胡丙素和其）。白花前胡丙素和其消旋

37、体白花前胡甲素为其主要活性成分，研究表明白花消旋体白花前胡甲素为其主要活性成分，研究表明白花前胡丙素与其消旋体白花前胡甲素前胡丙素与其消旋体白花前胡甲素( (praeruptorinpraeruptorin A ) A )具有相似的药理作用。此外，前胡中还含有白花前胡乙具有相似的药理作用。此外，前胡中还含有白花前胡乙素（素（PraeruptorinPraeruptorin B B）、白花前胡丁素）、白花前胡丁素（PraeruptorinPraeruptorin D D）、白花前胡戊素（）、白花前胡戊素（PraeruptorinPraeruptorin E E）等成分。等成分。（二）前胡中香豆素

38、类成分的性质、结构（二）前胡中香豆素类成分的性质、结构 (1) 白花前胡甲素白花前胡甲素 分子式分子式C20 H22O5，相对分子质量，相对分子质量342.40。 (2) 白花前胡丙素白花前胡丙素 分子式分子式C21H22 O7，相对分子质量，相对分子质量386.41。白色针晶，熔点白色针晶，熔点136138。 (3) 白花前胡丁素白花前胡丁素 分子式分子式C24 H26 O7 ,相对分子质量相对分子质量426。无色。无色针晶，熔点针晶，熔点174176。 (4) 白花前胡戊素白花前胡戊素 分子式分子式C24 H28O7，相对分子质量，相对分子质量428.46。OOOOHHOOOOOOOO 白

39、花前胡甲素 白花前胡丙素课课 堂堂 互互 动动 根据白花前胡丙素的提取分离工艺分析白花前胡丙素的溶解性特点。四四 知识链接知识链接白花前胡成分提取分离白花前胡成分提取分离 白花前胡粗粉石油醚回流提取石油醚提取液减压浓缩至小体积冷藏放置粗结晶用苯溶解。中性氧化铝柱色谱以苯、乙醚洗脱流份7流份2326流份2734流份3542流份4347重结晶重结晶重结晶重结晶重结晶白花前胡丁素 母液（白花前胡乙素白花前胡丙素白花前胡甲素白花前胡丙素 白花前胡甲素母液（白花前胡丙素）白花前胡甲素五 知识拓展 商品前胡的药用原植物还有紫花前胡，但是商品前胡的药用原植物还有紫花前胡，但是2005版药典未收版药典未收载。

40、紫花前胡中主要含有的香豆素类成分有紫花前胡素载。紫花前胡中主要含有的香豆素类成分有紫花前胡素D、紫花前、紫花前胡素胡素F、Pd-C-、Pd-C-、（、（+）-3/ S-decursinol等成分。等成分。OOOOR2R1O紫花前胡素紫花前胡素D R1=H R2=当归当归酰基酰基紫花前胡素紫花前胡素F R1=乙酰基乙酰基 R2=H紫花前胡粗粉氯仿渗滤提取，回收溶剂提取物反复上硅胶柱，石油醚-醋酸乙酯梯度洗脱，合并相同流分组分1组分2组分3组分4组分5反复柱色谱化合物化合物化合物化合物化合物化合物化合物紫花前胡素紫花前胡素D 化合物化合物紫花前胡素紫花前胡素F 化合物化合物Pd-C- 化合物化合物

41、Pd-C- 化合物化合物（+）-3/ S-decursinol学学 习习 小小 结结 香豆素类化合物香豆素类化合物提取、分离提取、分离性状、溶解性、荧光反应、内酯环性状、溶解性、荧光反应、内酯环的碱水解的碱水解简单香豆素简单香豆素 、呋喃香豆素、吡、呋喃香豆素、吡喃香豆素、其他香豆素喃香豆素、其他香豆素 紫外、红外、核磁、质谱紫外、红外、核磁、质谱秦皮、蛇床子、前胡秦皮、蛇床子、前胡显色反应显色反应色谱检识色谱检识 （一）学习内容（一）学习内容（二）学习方法与体会（二）学习方法与体会 香豆素类化合物由于结构特殊，既具香豆素类化合物由于结构特殊，既具有酯类化合物的某些特性，也具有苷类化有酯类化合

42、物的某些特性，也具有苷类化合物的特性。在学习过程中要重点掌握香合物的特性。在学习过程中要重点掌握香豆素的结构特点和理化性质，以及提取分豆素的结构特点和理化性质，以及提取分离和鉴定方法。通过理论学习和实训操作离和鉴定方法。通过理论学习和实训操作使学生达到能灵活运用掌握的知识分析提使学生达到能灵活运用掌握的知识分析提取分离工艺流程的原理。具有用化学方法取分离工艺流程的原理。具有用化学方法鉴别香豆素类化合物的能力，能设计简单鉴别香豆素类化合物的能力，能设计简单的提取分离流程。的提取分离流程。六六 目目 标标 检检 测测一、选择题一、选择题（一）单项选择题（一）单项选择题1 1、下列化合物具有强烈天蓝

43、色荧光的是、下列化合物具有强烈天蓝色荧光的是A.A.七叶内酯七叶内酯 B.B.大黄素大黄素 C.C.大豆皂苷大豆皂苷 D.D.甘草酸甘草酸2 2、异羟肟酸铁反应的现象是、异羟肟酸铁反应的现象是A.A.绿色绿色 B.B.蓝色蓝色 C.C.红色红色 D.D.黑色黑色3 3、FeCl3FeCl3试剂反应的条件是试剂反应的条件是A.A.内酯环内酯环 B.B.酚羟基酚羟基 C.C.芳环芳环 D.D.甲氧基甲氧基4 4、异羟肟酸铁反应作用的基团是、异羟肟酸铁反应作用的基团是A. A. 酚羟基酚羟基 B. B. 芳环芳环 C. C. 甲氧基甲氧基 D. D. 内酯环内酯环5 5、秦皮中的七叶内酯属于下列哪类

44、香豆素成分、秦皮中的七叶内酯属于下列哪类香豆素成分A.A.异香豆素异香豆素 B.B.简单香豆素简单香豆素 C.C.吡喃香豆素吡喃香豆素 D.D.呋喃香豆素呋喃香豆素6 6、香豆素的基本母核是、香豆素的基本母核是A.A.苯丙素苯丙素 B.B.顺式邻羟基桂皮酸顺式邻羟基桂皮酸 C.C.苯并苯并-吡喃酮吡喃酮 D.D.桂皮酸衍生物桂皮酸衍生物7 7、下列化合物脱水后能生成香豆素的是、下列化合物脱水后能生成香豆素的是A. A. 桂皮酸衍生物桂皮酸衍生物 B. B. 苯并苯并-吡喃酮吡喃酮 C. C. 顺式邻羟基桂皮酸顺式邻羟基桂皮酸 D. D. 苯丙素苯丙素8 8、游离香豆素可溶于热的氢氧化钠水溶液是

45、由于其结构中存在、游离香豆素可溶于热的氢氧化钠水溶液是由于其结构中存在A.A.酚羟基对位的活泼氢酚羟基对位的活泼氢 B.B.酮基酮基 C.C.甲氧基甲氧基 D.D.内酯环内酯环9 9、异补骨酯素属于、异补骨酯素属于A. A. 呋喃香豆素呋喃香豆素 B.B.简单香豆素简单香豆素 C.C.吡喃香豆素吡喃香豆素 D. D. 异香豆素异香豆素1010、七叶内酯具有、七叶内酯具有A.A.升华性升华性 B.B.香味香味 C.C.两者均无两者均无 D.D.两者均有两者均有（二）多项选择题（二）多项选择题1 1、含有香豆素的中药有、含有香豆素的中药有A.A.秦皮秦皮 B.B.厚朴厚朴 C.C.五味子五味子 D

46、.D.补骨脂补骨脂 E.E.大黄大黄 2 2、游离的小分子香豆素提取可用、游离的小分子香豆素提取可用A.A.碱溶酸沉淀法碱溶酸沉淀法 B.B.水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法 C.C.色谱法色谱法 D.D.升华法升华法 E.E.有机溶剂法有机溶剂法3 3、提取游离香豆素的方法有、提取游离香豆素的方法有A.A.酸溶碱沉法酸溶碱沉法 B. B. 乙醚提取法乙醚提取法 C. C. 碱溶酸沉淀法碱溶酸沉淀法 D.D.热水提取法热水提取法 E.E.乙醇提取法乙醇提取法4 4、蛇床子中主要含有的化学成分有、蛇床子中主要含有的化学成分有A. A. 槲皮素槲皮素 B.B.蛇床子素蛇床子素 C.C.欧前胡素欧前胡素 D

47、.D.佛手柑内醋佛手柑内醋 E.E.大黄素大黄素5 5、前胡中主要含有的化学成分有、前胡中主要含有的化学成分有A.A.白花前胡甲素白花前胡甲素 B.B.白花前胡戊素白花前胡戊素 C.C.白花前胡丙素白花前胡丙素 D. D. 欧前胡素欧前胡素 E.E.花色素花色素（三）简答题（三）简答题1.1.香豆素类化合物具有哪些理化性质？香豆素类化合物具有哪些理化性质？2.2.简述薄层色谱中展开剂的简述薄层色谱中展开剂的pHpH值对弱酸性香豆素值对弱酸性香豆素RfRf值的影响离？值的影响离？实训实训 秦皮中七叶苷和七叶内酯的提取、分离和鉴定秦皮中七叶苷和七叶内酯的提取、分离和鉴定【实训目的实训目的】1.1.

48、能够运用回流和连续回流法、减压浓缩法对秦皮中能够运用回流和连续回流法、减压浓缩法对秦皮中七叶苷和七叶内酯进行提取和精制。七叶苷和七叶内酯进行提取和精制。2.2.会用显色反应、色谱法进行香豆素类成分的检识。会用显色反应、色谱法进行香豆素类成分的检识。【化学成分概述化学成分概述】秦皮为木樨科植物白蜡树、苦枥白蜡树、尖叶白蜡秦皮为木樨科植物白蜡树、苦枥白蜡树、尖叶白蜡树、宿柱白蜡树的干燥枝皮或干皮。秦皮主要含七树、宿柱白蜡树的干燥枝皮或干皮。秦皮主要含七叶内酯、七叶苷、秦皮素、秦皮苷等，结构见前述。叶内酯、七叶苷、秦皮素、秦皮苷等，结构见前述。【实训原理实训原理】本实验是根据秦皮中的七叶内酯、七叶苷

49、均能溶于沸本实验是根据秦皮中的七叶内酯、七叶苷均能溶于沸乙醇，可用沸乙醇将两者提取出来，然后利用两者在乙醇，可用沸乙醇将两者提取出来，然后利用两者在醋酸乙酯中的溶解度不同进行分离。醋酸乙酯中的溶解度不同进行分离。【设备、仪器及药品设备、仪器及药品】索氏提取器、分液漏斗、索氏提取器、分液漏斗、50ml50ml圆底烧瓶、冷凝圆底烧瓶、冷凝 管、水浴锅、硅胶管、水浴锅、硅胶G G薄层板、紫外光灯薄层板、紫外光灯 （254nm254nm）、）、95%95%乙醇、氯仿、醋酸乙酯、盐酸、乙醇、氯仿、醋酸乙酯、盐酸、 盐酸羟胺、甲醇、氢氧化钠、三氯化铁、正丁盐酸羟胺、甲醇、氢氧化钠、三氯化铁、正丁 醇、醋酸

50、、秦皮苷标准品。醇、醋酸、秦皮苷标准品。【操作步骤操作步骤】1、七叶内酯、七叶苷的提取分离 秦皮粗粉150g置索氏提取器中，用乙醇回流提取4次，减压浓缩，回收乙醇，得浓缩物。浓缩物用水温热溶解加等体积氯仿萃取2次，除去非极性杂质。水液挥取残留的氯仿，加等体积的醋酸乙酯萃取2次合并萃取液。水液浓缩析晶滤过，甲醇、水反复重结晶得七叶苷。醋酸乙酯液加无水硫酸钠脱水，减压蒸干，残留物用甲醇溶解，适当浓缩后放置过夜析晶滤过，水、甲醇反复重结晶的七叶素。2、鉴定 （1）荧光：取样品少量，加入乙醇0.5ml ，用毛细管滴于滤纸上，在紫外灯下观察。 （2）三氯化铁反应：取样品少量，加入乙醇0.5ml ，加入1