1、精卵结合精卵结合胚胚 胎胎细细 胞胞个个 体体显微操作仪显微操作仪 目目 录录一 核移植技术简介二 核移植的分类 核移植的应用四 展 望 定义定义 ：将供体细胞核移入：将供体细胞核移入去核的卵母细胞中去核的卵母细胞中,使后者不经使后者不经 精子穿透等有性过程即可被激精子穿透等有性过程即可被激活、分裂并发育活、分裂并发育,使得核供体的使得核供体的基因得到完全复制。基因得到完全复制。一 核 移 植 技 术 简 介 切开卵母细胞透明带切开卵母细胞透明带 挤出卵母细胞细胞核挤出卵母细胞细胞核 注入供体细胞核注入供体细胞核 电融合仪融合电融合仪融合培养培养供体细胞核的来源供体细胞核的来源体细胞核移植体细
2、胞核移植胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植胚胎干细胞核移植胚胎干细胞核移植供受体种间关系供受体种间关系异种核移植异种核移植同种核移植同种核移植核移植目的核移植目的生殖性克隆生殖性克隆治疗性克隆治疗性克隆二二 核核 移移 植植 分分 类类 生殖性克隆生殖性克隆 克克 隆隆 动动 物物 的的 鉴鉴 定定 指指 纹纹 ：指每个个体所特有的基因多态性：指每个个体所特有的基因多态性鉴定方法：鉴定方法： 微卫星微卫星 的鉴定：微卫星的鉴定：微卫星 绵绵 羊羊 小小 鼠鼠 牛牛 山山 羊羊 张张 涌涌 西北农林科技大学西北农林科技大学 猪猪 兔兔 大大 鼠鼠 周周 琪琪 中科院动物所中科院动物所 狗狗 已已 克克
3、 隆隆 的的 动动 物物 治治 疗疗 性性 克克 隆隆 细胞治疗细胞治疗 组织替代组织替代 器官移植器官移植 细胞治疗细胞治疗 异种器官移植异种器官移植 生产治疗性蛋白生产治疗性蛋白 保护濒危物种保护濒危物种 培育各种疾病动物模型培育各种疾病动物模型三三 核核 移移 植植 技技 术术 的的 应应 用用 细细 胞胞 治治 疗疗三三 核核 移移 植植 技技 术术 的的 应应 用用 定义定义 细胞移植可以治疗由于细胞功能缺陷所引起的各种疾细胞移植可以治疗由于细胞功能缺陷所引起的各种疾病，如糖尿病病，如糖尿病 ; 中枢神经系统疾病（帕金森，阿尔莫茨症）中枢神经系统疾病（帕金森，阿尔莫茨症）; 肝功能衰
4、肝功能衰竭竭 ; 甲状腺疾病。甲状腺疾病。 核移植核移植 消除免疫排斥消除免疫排斥 胚胎干细胞胚胎干细胞 提供细胞来源提供细胞来源三三 核核 移移 植植 技技 术术 的的 应应 用用 韩国科学家韩国科学家 黄禹锡应用体细胞核移植，从糖尿病；黄禹锡应用体细胞核移植，从糖尿病；脊索损伤；先天性低丙球蛋白血症病人的皮肤细胞脊索损伤；先天性低丙球蛋白血症病人的皮肤细胞中克隆出了早期胚胎，并成功提取出新的胚胎干细中克隆出了早期胚胎，并成功提取出新的胚胎干细胞系，胞系，突突 破破 克隆早期胚胎和提取干细胞的效率从克隆早期胚胎和提取干细胞的效率从 提提 高到高到 。 体细胞全部来自于患有各种疾病的病人体细胞
5、全部来自于患有各种疾病的病人 遗遗 传传 疾疾 病病 的的 治治 疗疗 异异 种种 器器 官官 移移 植植 可移植器官短缺可移植器官短缺 猪的器官大小、结构和功能上与人体器官相近猪的器官大小、结构和功能上与人体器官相近 急性免疫排斥反应急性免疫排斥反应 基因敲除半乳糖基转移酶基因敲除半乳糖基转移酶 核移植核移植 基因敲除克隆猪基因敲除克隆猪 器官移植器官移植三三 核核 移移 植植 技技 术术 的的 应应 用用 生生 产产 药药 用用 蛋蛋 白白 目目 的的 基基 因因 转基因细胞系转基因细胞系核核 移移 植植动动 物物 乳乳 腺腺 乳乳 液液 提提 取取 目目 的的 产产 物物基基 因因 打打
6、 靶靶 方方 法法三三 核核 移移 植植 技技 术术 的的 应应 用用 研研 究究 实实 例例 年底,英国 研究所和 公司通过克隆转基因体细胞，获得了只整合 或 和 基因绵羊,这标志着核移植介导的转基因技术成功问世。 年,英国公司将人 基因定点整合到胎儿成纤维细胞的 原胶原( ) 基因座位,而后用转基因细胞进行核移植,生产出世界首例基因打靶绵羊,其乳中 蛋白含量达到了 ,远高显微注射法 的水平。 年，台湾培育带有治疗血友病的“第八凝血因子”的体细胞克隆羊。 年，这只克隆羊产下一只同样带有第八凝血因子的公羊。三三 核核 移移 植植 技技 术术 的的 应应 用用 保保 护护 濒濒 危危 物物 种种
7、细胞核细胞核去核卵母细胞去核卵母细胞核移植重构胚核移植重构胚三三 核核 移移 植植 技技 术术 的的 应应 用用 培培 育育 各各 种种 疾疾 病病 动动 物物 模模 型型应用核移植技术可以培育基因完全一致的应用核移植技术可以培育基因完全一致的实验动物模型实验动物模型 ，为遗传学，病理学研究，为遗传学，病理学研究提供良好的实验材料。提供良好的实验材料。三三 核核 移移 植植 技技 术术 的的 应应 用用四四 展展 望望 虽然核移植技术有着广阔的应用前景，并且虽然核移植技术有着广阔的应用前景，并且已取得了一些进展如体细胞核移植等，但也存在已取得了一些进展如体细胞核移植等，但也存在着一些问题。主要
8、包括着一些问题。主要包括 核移植效率低，动物畸核移植效率低，动物畸形。这要求研究人员进一步了解核质作用机理，形。这要求研究人员进一步了解核质作用机理，改进培养方式。改进培养方式。, ., , ., , . (). . , . , ., , ., , . (). . , . , . ., , . . (). . , . , ., , . (). . , . , . . (). . , . , ., , . (). . ! , . , . ., , ., , . (). . , . 基本参考文献基本参考文献 谢谢 谢谢 敬敬 请请 批批 评评 指指 正正三三 目目 前前 存存 在在 的的 问问 题题 及及 原原 因因 核移植效率低核移植效率低 存存 在在 的的 问问 题题 1.2 克克 隆隆 动动 物物 异异 常常 胎儿或新生儿死亡率极高胎儿或新生儿死亡率极高, 极少数能全程发育的个体也表现为超重、呼吸系统疾病等异常表型极少数能全程发育的个体也表现为超重、呼吸系统疾病等异常表型, 个别表型正常者也存在有免疫缺陷、关节炎或肾、脑畸形等问题个别表型正常者也存在有免疫缺陷、关节炎或肾、脑畸形等问题,导致克导致克 隆动物后期死亡隆动物后期死亡
