1、第八章第八章 土壤植物中微量元素的测定土壤植物中微量元素的测定进入授课教师：雷恩春授课教师：雷恩春学学 时：时：理论理论40学时、实验学时、实验40学时学时授课班级：授课班级：2006级工程级工程4、5班班授课学期：授课学期：2006-2007第二学期第二学期第八章第八章 土壤植物微量元素的测定土壤植物微量元素的测定进入返回第四节第四节 土壤和植物中钼的测定土壤和植物中钼的测定第六节第六节 土壤和植物中铁的测定土壤和植物中铁的测定第五节第五节 土壤和植物中锰的测定土壤和植物中锰的测定返回第四节第四节 土壤和植物中钼的测定土壤和植物中钼的测定v一、概述一、概述v二、土壤中有效钼的测定二、土壤中有
2、效钼的测定v三、土壤中全钼的溅定三、土壤中全钼的溅定v四、植物中钼的测定四、植物中钼的测定返回一、概述一、概述1 1、土壤和植物中钼的含量、土壤和植物中钼的含量 我国土壤中全钼含量很少，一般在我国土壤中全钼含量很少，一般在0.1-10mg kg-1，平均，平均2.0 mg kg-1。 植物含钼量一般在植物含钼量一般在0.10.5mg kg-1。 植物中钼含量可作为钼是否丰缺植物中钼含量可作为钼是否丰缺 的一个指标。的一个指标。 返回下一页1）水溶性钼：易吸收，含量少，）水溶性钼：易吸收，含量少，2.28.1mg/kg。2）代换性钼：为土壤胶体吸附。）代换性钼：为土壤胶体吸附。3）矿物态钼：溶解
3、度低，对植物无效。）矿物态钼：溶解度低，对植物无效。4）有机结合态钼：有机质矿化释放出来，为植物吸）有机结合态钼：有机质矿化释放出来，为植物吸收利用。收利用。2 2、钼、钼 的存在形态的存在形态有效性钼：有效性钼：水溶性钼、代换态钼水溶性钼、代换态钼 及有机结合态钼。易与游离氧及有机结合态钼。易与游离氧 化铁结合。化铁结合。返回下一页3 3、测定钼的方法、测定钼的方法1 1）钼的浸提）钼的浸提沸水浸提法：浸出量少，与植物相关沸水浸提法：浸出量少，与植物相关性高。性高。 Tamm Tamm溶液溶液草酸草酸- -草酸铵（草酸铵（pH pH 3.33.3） ：应用广泛。：应用广泛。 浸出的钼包括：水
4、溶性浸出的钼包括：水溶性MoMo、交换性、交换性MoMo、 Ca-MoCa-Mo、Fe-MoFe-Mo、Al-MoAl-Mo 浸提有效钼临界值为：浸提有效钼临界值为：0.1-0.20 mg kg-10.1-0.20 mg kg-1返回下一页v2 2）溶液中钼的测定：）溶液中钼的测定：v极谱法极谱法v ICP-AES ICP-AES法法等离子体发射光谱技术等离子体发射光谱技术 v AAS AAS法：法：v比色法：以硫氰酸盐比色法最为比色法：以硫氰酸盐比色法最为广泛，经典方法。广泛，经典方法。返回二、土壤中有效钼的测定二、土壤中有效钼的测定(硫氰化钾比色法硫氰化钾比色法)v（一）方法原理（一）方法
5、原理v（二）反应条件（二）反应条件v ( (三三) ) 操作步骤操作步骤v（四）注意事项（四）注意事项返回（一）方法原理（一）方法原理 在在H+%H+%条件下，有条件下，有KSCNKSCN存在下，用存在下，用SnClSnCl2 2还原还原MoMo，使，使MoMo还原成五价，使还原成五价，使MoMo5+5+与与KSCNKSCN反应生成橙黄色络合物，其呈色反应生成橙黄色络合物，其呈色的深浅与的深浅与MoMo的含量成正相关。的含量成正相关。本法本法灵敏度高灵敏度高，可测，可测0.040.043ppm3ppm的钼，一般测定在的钼，一般测定在0.10.12ppm2ppm范围内，范围内，颜色可在颜色可在9
6、090分钟内不变分钟内不变。返回（二）反应条件（二）反应条件1、酸度：、酸度：36%HCl酸度，最好在酸度，最好在5%。 酸度低，显色慢，酸度大，颜色不酸度低，显色慢，酸度大，颜色不 稳定，易褪为黄色溶液。稳定，易褪为黄色溶液。 2、显色剂、显色剂KSCN ：须加过量，应为：须加过量，应为 钼量的钼量的104105倍。否则会形成倍。否则会形成 吸光度低的吸光度低的MoO(SCN)5，使结，使结 果偏低。果偏低。返回下一页3、试剂加入顺序：先加、试剂加入顺序：先加KSCN， 后加后加SnCl2，严格遵守。，严格遵守。 否则形成否则形成K3(MoC16)K3(MoC16)、K2(MoOCl5)K2
7、(MoOCl5)、K2(MoO2C13)K2(MoO2C13)等络合物，当加等络合物，当加KSCNKSCN时很难再转变成橙黄色的硫氰络合物，时很难再转变成橙黄色的硫氰络合物，而这就降低了溶液的颜色。而这就降低了溶液的颜色。返回下一页4 4、干扰离子：铁、铜、钨、铝等。、干扰离子：铁、铜、钨、铝等。 对于土壤植物中铜、钨和铝对于土壤植物中铜、钨和铝等含量很少，不致引起干扰。等含量很少，不致引起干扰。4 4、干扰离子：铁、铜、钨、铝等。、干扰离子：铁、铜、钨、铝等。返回下一页4 4、干扰离子：铁、铜、钨、铝等。、干扰离子：铁、铜、钨、铝等。 大量大量Fe3+Fe3+存在与存在与CNS-CNS-形成
8、红色的形成红色的硫氰酸铁，但少量铁存在时，加硫氰酸铁，但少量铁存在时，加SnCl2SnCl2还原后，还原后，Fe3+Fe3+被还原成被还原成Fe2+Fe2+，不但不，不但不干扰钼的测定，反而会使硫氢酸钼的干扰钼的测定，反而会使硫氢酸钼的颜色加深，并可增加五价钼的稳定性。颜色加深，并可增加五价钼的稳定性。4 4、干扰离子：铁、铜、钨、铝等。、干扰离子：铁、铜、钨、铝等。返回下一页4 4、干扰离子：铁、铜、钨、铝等。、干扰离子：铁、铜、钨、铝等。 铂的干扰是采用铂器皿时引铂的干扰是采用铂器皿时引入的，形成的铂氯酸再被还原呈入的，形成的铂氯酸再被还原呈黄色，故测定钼时应避免使用铂黄色，故测定钼时应避
9、免使用铂器皿。器皿。返回（三）操作步骤（三）操作步骤1 1、土壤有效钼的浸提、土壤有效钼的浸提2 2、土壤有效钼的测定、土壤有效钼的测定3 3、标准曲线绘制、标准曲线绘制返回 样品样品25.00g25.00g1 1、土壤有效钼的浸提、土壤有效钼的浸提蒸干蒸干灼烧灼烧加水溶解加水溶解过滤过滤草酸铵草酸铵草酸溶液草酸溶液振荡振荡8小时小时过滤过滤吸滤液吸滤液200ml200ml瓷蒸发皿瓷蒸发皿电热板电热板高温炉高温炉450冷却冷却加浓HC1 三角瓶三角瓶v 将浸提液移入分液漏斗中，加将浸提液移入分液漏斗中，加NaNO3NaNO3，摇，摇匀，加匀，加KSCN KSCN ，摇匀，摇匀， 加加SnCl2
10、SnCl2，摇匀，分两，摇匀，分两次加异戍醇，各摇次加异戍醇，各摇1 1分钟，每次静置分层后，分钟，每次静置分层后，放出水相，将二次有机相至离心管放出水相，将二次有机相至离心管离心离心5 5分钟，分钟，使水滴全部下沉。使水滴全部下沉。将有机相倾入具塞试管中，将有机相倾入具塞试管中，用塞子塞紧。用用塞子塞紧。用470nm470nm波长滤光片，波长滤光片，在在9090分钟分钟内比色完毕。内比色完毕。v 同时作空白试验。同时作空白试验。v 当温度当温度2020时，须将比色液浸于冷流水中时，须将比色液浸于冷流水中降温。降温。2、土壤有效钼的测定、土壤有效钼的测定返回3、标准曲线绘制、标准曲线绘制 吸取
11、吸取1ppm1ppm含含MoMo标准液标准液0 0，1.01.0，2.02.0，4.04.0，8.08.0毫升，分别加入毫升，分别加入5 5支分液漏斗中，加支分液漏斗中，加浓浓HClHCl 7 7毫升加水至毫升加水至5050毫升，再加入毫升，再加入NaNO31NaNO31毫升摇匀，加毫升摇匀，加1 1FeCl31FeCl31毫升（注毫升（注5 5），其余），其余步骤同上，比色测出吸收值。以吸收值步骤同上，比色测出吸收值。以吸收值A A为纵为纵座标，系列标准含座标，系列标准含Mo 0.0Mo 0.0，1.01.0，2.02.0，4.04.0，8.0ppm8.0ppm为横座标，绘制标准曲线。为横座
12、标，绘制标准曲线。返回（四）注意事项（四）注意事项 测定中，要求用全套玻璃蒸馏器将普通测定中，要求用全套玻璃蒸馏器将普通蒸馏水进行重蒸馏，不能用金属蒸馏器进行蒸馏水进行重蒸馏，不能用金属蒸馏器进行重蒸馏，因金属中含有少量的钼，而土壤中重蒸馏，因金属中含有少量的钼，而土壤中有效钼一般仅有有效钼一般仅有0.10.10.2ppm0.2ppm，易带来严重，易带来严重污染。并且一切器皿洗涤后都应用重蒸馏水污染。并且一切器皿洗涤后都应用重蒸馏水冲洗冲洗2 23 3次。次。返回下一页（四）注意事项（四）注意事项大批的蒸发时，由于蒸发皿较占大批的蒸发时，由于蒸发皿较占面积，也可用硬质的面积，也可用硬质的150
13、150毫升烧毫升烧杯代替，滤液分二次加入蒸发。杯代替，滤液分二次加入蒸发。返回下一页离心分离微小的水分，这一步骤很重要，离心分离微小的水分，这一步骤很重要，因静置时，微小的水漓不易全部很快从因静置时，微小的水漓不易全部很快从有机相中分离出来，结果增强了有机相有机相中分离出来，结果增强了有机相的浊度，给比色测定带来很大误差。的浊度，给比色测定带来很大误差。（四）注意事项（四）注意事项返回下一页（四）注意事项（四）注意事项显色后颜色稳定时间长久，各种资料记显色后颜色稳定时间长久，各种资料记载不一，经试验可以稳定载不一，经试验可以稳定90分钟。分钟。返回三、土壤中全钼的测定三、土壤中全钼的测定v（一
14、）方法原理（一）方法原理v（二）操作步骤（二）操作步骤返回（一）方法原理（一）方法原理 将土壤用将土壤用HFH2SO4处理，加热处理，加热除去除去HF及及H2SO4后用后用HCl溶解残渣，溶解残渣，或者将土壤加或者将土壤加Na2CO3在高温熔融后，在高温熔融后，溶解于水中，然后同前用硫氰化钾溶解于水中，然后同前用硫氰化钾法测定。法测定。返回（二）操作步骤（二）操作步骤 1 1、HFHFH2SO4H2SO4法：法：将将1.00001.0000克土壤用克土壤用HFHFH2SO4H2SO4处理，蒸发除去处理，蒸发除去H2SO4H2SO4后，用后，用HClHCl溶解残渣溶解残渣( (加热加热5 510
15、10分钟分钟) )，加，加10101515毫升毫升水，加浓水，加浓HClHCl 7 7毫升，调节体积在毫升，调节体积在5050毫升，毫升，同前土壤中有效钼的测定，加试剂显色及同前土壤中有效钼的测定，加试剂显色及比色。比色。返回下一页 2 2、Na2CO3Na2CO3熔融法：熔融法：将将1.00001.0000克土壤与克土壤与Na2CO3Na2CO3混合后，在铁坩埚混合后，在铁坩埚( (不用铂坩埚，以不用铂坩埚，以免铂干扰钼的测定免铂干扰钼的测定) )熔融。加熔融。加HClHCl溶解熔融溶解熔融物并中和到物并中和到pH 7pH 7，煮沸除去，煮沸除去CO2CO2，冷却，加，冷却，加7 7毫升浓毫
16、升浓HClHCl，调节体积至，调节体积至5050毫升同上测定毫升同上测定MoMo。若含。若含MoMo量超过量超过10g10g时，可直接于水溶时，可直接于水溶液中测定，而不必用有机溶剂提取。液中测定，而不必用有机溶剂提取。返回四、植物中钼的测定四、植物中钼的测定v（一）硫氰化钾比色法（一）硫氰化钾比色法v（二）硫氰化钾比色滴定法（二）硫氰化钾比色滴定法返回（一）硫氰化钾比色法（一）硫氰化钾比色法1 1、方法原理、方法原理 同土壤中有效钼的测定。同土壤中有效钼的测定。返回下一页2、操作步骤、操作步骤v称称5.005.0010.0010.00克植物样本，在瓷蒸发皿或石克植物样本，在瓷蒸发皿或石英蒸发
17、皿中于低温初步灰化后移入高温电炉，英蒸发皿中于低温初步灰化后移入高温电炉，于于550550完成灰化。用完成灰化。用HClHCl溶解灰分，过滤，溶解灰分，过滤，将滤液在水浴上小心的蒸发至干，灼烧除去将滤液在水浴上小心的蒸发至干，灼烧除去残留的有机物，冷却后用残留的有机物，冷却后用5 57 7毫升浓毫升浓HClHCl溶解溶解残渣，加水使体积约为残渣，加水使体积约为5050毫升。毫升。v加入加入1 1毫升毫升NaNO3NaNO3摇匀，加摇匀，加2020KSCN 3KSCN 3毫升摇毫升摇匀，再加匀，再加1010SnCl2 2SnCl2 2毫升，混合均匀。由于毫升，混合均匀。由于植物样品中钼的含量较高
18、，也可以不必用有植物样品中钼的含量较高，也可以不必用有机试剂提取，直接于水溶液中比色测定。机试剂提取，直接于水溶液中比色测定。返回（二）硫氰化钾比色滴定法（二）硫氰化钾比色滴定法v 将已灰化好的滤液，使体积约为将已灰化好的滤液，使体积约为5050毫升。选择毫升。选择色泽相似大小完全相同的两只色泽相似大小完全相同的两只100100毫升烧杯，一只毫升烧杯，一只装此待测溶液，另一只加等量的无钼蒸馏水以代装此待测溶液，另一只加等量的无钼蒸馏水以代替待测液，同样加替待测液，同样加1 1毫升毫升NaNO3NaNO3溶液及溶液及2020KSCNKSCN溶液溶液3 3毫升，同样摇匀，再加毫升，同样摇匀，再加1
19、010SnCl22SnCl22毫升，仔毫升，仔细摇匀。细摇匀。 v 然后将两只烧杯并排放于一张白纸上，然后往然后将两只烧杯并排放于一张白纸上，然后往空白试样中逐滴加入空白试样中逐滴加入1ppm(1ppm(即即1 1微克毫升微克毫升) )钼的标钼的标准溶液，不停地搅拌，直至两只烧杯的颜色强度准溶液，不停地搅拌，直至两只烧杯的颜色强度相同为止。必要时可往试液中补加重蒸馏水，以相同为止。必要时可往试液中补加重蒸馏水，以使二杯溶液体积相同，以进行比色。使二杯溶液体积相同，以进行比色。返回第五节第五节 土壤和植物中锰的测定土壤和植物中锰的测定v一、概述一、概述v二、土壤中交换性锰的测定二、土壤中交换性锰
20、的测定v三、土壤中易还原态锰的测定三、土壤中易还原态锰的测定v四、植物中锰的测定四、植物中锰的测定返回一、概述一、概述v土壤中全锰含量比较丰富，有土壤中全锰含量比较丰富，有2050000ppm，一般在，一般在0.1以下。以下。v一般植物含锰量约为一般植物含锰量约为10150ppm，酸性土上的植物含锰量较其它生态类酸性土上的植物含锰量较其它生态类型的植物高，约型的植物高，约200500ppm。返回下一页v 土壤中的锰包括水溶性锰、交换性锰、土壤中的锰包括水溶性锰、交换性锰、易还原态锰、惰性锰及有机络合等多种形态。易还原态锰、惰性锰及有机络合等多种形态。水溶性和交换态锰是作物最容易吸收利用的水溶性
21、和交换态锰是作物最容易吸收利用的锰。锰。v 各种形态的锰处于动态平衡中，这平衡各种形态的锰处于动态平衡中，这平衡受土壤通气状况，有机质含量和土壤酸度的受土壤通气状况，有机质含量和土壤酸度的影响，尤以土壤酸度影响最大，增加影响，尤以土壤酸度影响最大，增加pHpH，降，降低锰的有效性，降低低锰的有效性，降低pHpH，则增加锰的有效性。，则增加锰的有效性。返回下一页v有效锰的提取剂可以是有效锰的提取剂可以是1mol/LNH4OAc和和NH4OAc加对苯二酚溶液；稀盐酸加对苯二酚溶液；稀盐酸硫酸硫酸双酸法；磷酸等。双酸法；磷酸等。v提取液中锰可采用提取液中锰可采用ICP-AES、AAS，v常用的是常用
22、的是KMnO4比色法。比色法。返回二、土壤中交换性锰的测定比色法v（一）方法原理（一）方法原理 v（二）操作步骤（二）操作步骤返回（一）方法原理（一）方法原理v 以以NHNH4 4OACOAC中的中的NHNH4 4+ +将土壤胶体上的将土壤胶体上的MnMn2+2+交换下来进入溶液，交换下来进入溶液，MnMn2+2+在酸性条在酸性条件下，用适当强度的氧化剂氧化为红色件下，用适当强度的氧化剂氧化为红色的的MnOMnO4 4- -后进行比色测定。后进行比色测定。返回下一页v锰的氧化可采用高碘酸钾或高硫酸铵。锰的氧化可采用高碘酸钾或高硫酸铵。v高碘酸钾比色法测定锰的原理，是利用高碘高碘酸钾比色法测定锰
23、的原理，是利用高碘酸钾在热的酸性溶液中，将酸钾在热的酸性溶液中，将MnMn2+2+氧化成氧化成MnOMnO4 4- -，反应式如下，反应式如下 v2Mn2Mn2+2+5IO+5IO4 4+3H+3H2 2O O v 2MnO 2MnO4 4+5IO+5IO3 3+6H+6H+ +返回下一页v以上反应在含有以上反应在含有H H2 2SOSO4 4、H H3 3POPO4 4，H H2 2SiOSiO3 3的的酸性溶液中进行酸性溶液中进行很快。很快。v当锰的浓度小时，须酸度为当锰的浓度小时，须酸度为2mol/l2mol/l，锰，锰含量增高后须含量增高后须3.5 mol/l3.5 mol/l的酸度。
24、但酸度的酸度。但酸度过高，紫色又将减褪而具微黄色。过高，紫色又将减褪而具微黄色。v本法测定范围在本法测定范围在0.18ppm0.18ppm。返回下一页v溶液中含有溶液中含有FeFe2+2+、硫化物、亚硝酸盐、硫化物、亚硝酸盐、溴化物、氯化物、碘化物、草酸盐以及溴化物、氯化物、碘化物、草酸盐以及其它的其它的还原性物质还原性物质，则须事先，则须事先加加HNOHNO3 3或或HNOHNO3 3和和H H2 2SOSO4 4的混合酸蒸发的混合酸蒸发，以去，以去除或分解这些物质。除或分解这些物质。v当有大量当有大量三价铁三价铁时，则可时，则可加入磷酸加入磷酸，H H3 3POPO4 4能与能与FeFe3
25、+3+结合成无色的络合物结合成无色的络合物FeFe（PO4PO4）2 23- 3-，从而防止过碘酸高，从而防止过碘酸高铁的沉淀。铁的沉淀。返回下一页 高硫酸铵同高碘酸钾同样亦可作为高硫酸铵同高碘酸钾同样亦可作为氧化剂使锰显色，其与高碘酸钾不同之氧化剂使锰显色，其与高碘酸钾不同之处，即须加处，即须加AgNO3AgNO3为接触剂。本法的优为接触剂。本法的优点是更适于含锰量低时点是更适于含锰量低时(5(55050微克微克) )显色显色迅速。迅速。返回（二）操作步骤（二）操作步骤v1、称取土壤样品、称取土壤样品10.00克，加克，加1mol/l NH4OAC溶液溶液l00毫升，在振荡机上摇动毫升，在振
26、荡机上摇动30分钟。以后在分钟。以后在6小时内间歇摇动，过滤于干三小时内间歇摇动，过滤于干三角瓶中。角瓶中。返回下一页v2、吸取滤液、吸取滤液2050毫升（约含锰毫升（约含锰0.010.3毫克，即使在毫克，即使在50毫升容量瓶中显色时锰的浓毫升容量瓶中显色时锰的浓度在度在0.26ppm范围内）放入范围内）放入100毫升烧杯毫升烧杯中，在电热板上蒸干。待中，在电热板上蒸干。待NH4OAC烟雾不再烟雾不再发生为止。取下烧杯放冷，加浓发生为止。取下烧杯放冷，加浓HNO35毫升毫升和和30H2O22毫升，加盖表面皿后于水浴上毫升，加盖表面皿后于水浴上加热加热30分钟，以氧化有机质。然后取下表面分钟，以
27、氧化有机质。然后取下表面皿蒸发溶液使干，加水皿蒸发溶液使干，加水20毫升，浓毫升，浓HNO32毫毫升，升，85H3PO42毫升和毫升和KIO40.3克，加盖克，加盖再在电热板上加热煮沸再在电热板上加热煮沸5分钟，使完全显色，分钟，使完全显色，通过小漏斗倒入通过小漏斗倒入50毫升容量瓶中，并用少量毫升容量瓶中，并用少量水洗净烧杯，冷却后，定容混匀后在水洗净烧杯，冷却后，定容混匀后在540nm波长下进行比色测定。波长下进行比色测定。返回下一页绘制标准曲线绘制标准曲线 吸取吸取20ppm20ppm标准锰液标准锰液2.52.5，5.05.0，10.010.0，15.015.0，20.020.0毫升于毫
28、升于5050毫升容量瓶中，同上加毫升容量瓶中，同上加水水2020毫升，浓毫升，浓HNO32HNO32毫升，毫升，8585H3PO4 2H3PO4 2毫升毫升KIO40.3KIO40.3克各试剂后加热显色。定容。制得含克各试剂后加热显色。定容。制得含锰锰1 1、2 2、4 4、6 6、8ppm8ppm标准溶液。用标准溶液。用540nm540nm滤光滤光片测得吸收值后绘制标准曲线。片测得吸收值后绘制标准曲线。返回三、土壤中易还原态锰的测定比色法v（一）方法原理（一）方法原理 v（二）操作步骤（二）操作步骤返回（一）方法原理（一）方法原理原理同交换性锰原理同交换性锰返回（二）操作步骤（二）操作步骤v
29、 将已测定交换性锰的土壤样品移入原三将已测定交换性锰的土壤样品移入原三角瓶中，加角瓶中，加1mol/lNH4OAC+0.21mol/lNH4OAC+0.2对苯二酚溶对苯二酚溶液液100100毫升，放置毫升，放置6 6小时，并不断摇动悬浮液小时，并不断摇动悬浮液以使完全平衡，然后过滤于干的三角瓶中。以使完全平衡，然后过滤于干的三角瓶中。吸取吸取10201020毫升滤液毫升滤液( (同上要求含锰约同上要求含锰约0.010.010.30.3毫克范围内毫克范围内) )于烧杯中，加入浓于烧杯中，加入浓HNO310HNO310毫毫升，蒸发至干以破坏对苯二酚等还原性物质，升，蒸发至干以破坏对苯二酚等还原性物
30、质，以下加试剂显色与交换性锰测定相同。以下加试剂显色与交换性锰测定相同。返回四、植物中锰的测定四、植物中锰的测定v（一）方法原理（一）方法原理v（二）操作步骤（二）操作步骤v（三）注意事项（三）注意事项返回（一）方法原理（一）方法原理v原理同土壤中交换性锰原理同土壤中交换性锰返回v1 1、干灰化法、干灰化法v 称取经烘干磨细植物样品称取经烘干磨细植物样品5.0005.000克，置于瓷坩埚克，置于瓷坩埚中，先在低温下炭化，然后将瓷蒸发皿放高温炉中，中，先在低温下炭化，然后将瓷蒸发皿放高温炉中，在在550550一一600600温度灼烧至得到白色的灰分。冷却温度灼烧至得到白色的灰分。冷却后加数滴浓后
31、加数滴浓HNO3HNO3润湿灰分，加水润湿灰分，加水1212毫升，加热毫升，加热溶解，再加入溶解，再加入1 1：1H2SO4121H2SO412毫升，蒸发至冒白烟。毫升，蒸发至冒白烟。v 将蒸发皿中沉淀溶解于水，然后洗入将蒸发皿中沉淀溶解于水，然后洗入5050毫升容毫升容量瓶中，若有少量沉淀则滤入容量瓶，滤纸须预先量瓶中，若有少量沉淀则滤入容量瓶，滤纸须预先用用0.05mol/l0.05mol/l硫酸洗净，滤纸上的沉淀用少量硫酸洗净，滤纸上的沉淀用少量0.05mol/lH2SO40.05mol/lH2SO4洗涤。以下可用高碘酸钾比色法测洗涤。以下可用高碘酸钾比色法测锰锰( (见土壤交换性锰的测
32、定步骤见土壤交换性锰的测定步骤) )。 （二）操作步骤（二）操作步骤返回下一页v2 2、湿灰化法、湿灰化法v称取称取2.52.5克经烘干磨细的植物样品放入克经烘干磨细的植物样品放入250250毫升开氏毫升开氏瓶中，加浓瓶中，加浓HNO32HNO32毫升，毫升，6060过氯酸过氯酸1 1毫升和浓硫毫升和浓硫酸酸5 5毫升，混合均匀后在电炉上加热，至开始出现毫升，混合均匀后在电炉上加热，至开始出现棕色烟雾后移下开氏瓶。放置棕色烟雾后移下开氏瓶。放置1515分钟左右使剧烈分钟左右使剧烈反应停止，继续加热到出现反应停止，继续加热到出现H2SO4H2SO4的白色烟。待的白色烟。待溶液清亮后继续加热溶液清
33、亮后继续加热2323分钟，放冷。仔细地洗分钟，放冷。仔细地洗入入5050毫升容量瓶中，加毫升容量瓶中，加8585H3PO42H3PO42毫升，加水使毫升，加水使约达约达45474547毫升，然后加入毫升，然后加入KIO40.3KIO40.3克，于水浴上克，于水浴上煮沸显色（也可用高硫酸铵法）。冷却，定容后煮沸显色（也可用高硫酸铵法）。冷却，定容后用用540nm540nm滤光片进行比色测定，同时配制系列标准滤光片进行比色测定，同时配制系列标准溶液，绘制标准曲线。溶液，绘制标准曲线。返回（三）注意事项（三）注意事项 当样品中含钙较多时，则不加硫当样品中含钙较多时，则不加硫酸，而将残留物蒸干酸，而将
34、残留物蒸干2323次，而且次，而且每次加入少量硝酸。每次加入少量硝酸。返回下一页 若在酸溶液中不溶解的沉淀量相当若在酸溶液中不溶解的沉淀量相当大时，则须加大时，则须加HFHF酸处理。为此加数毫升酸处理。为此加数毫升HFHF及数滴硫酸，而将混合酸蒸发至及数滴硫酸，而将混合酸蒸发至H2SO4H2SO4蒸气出现，溶解残留物于少量稀蒸气出现，溶解残留物于少量稀H2SO4H2SO4中，将溶液过滤入中，将溶液过滤入5050毫升容量瓶毫升容量瓶中，而在此溶液中测定锰。中，而在此溶液中测定锰。返回第六节第六节 土壤和植物中铁的测定土壤和植物中铁的测定v一、概述一、概述v二、土壤中有效铁的测定二、土壤中有效铁的
35、测定v三、石灰性土壤中有效铁的测定（一）三、石灰性土壤中有效铁的测定（一）v四、石灰性土壤中有效铁的测定（二）四、石灰性土壤中有效铁的测定（二）v五、植物中铁的测定五、植物中铁的测定返回一、概述一、概述v土壤中有效铁的含量不一，在石灰性土壤中土壤中有效铁的含量不一，在石灰性土壤中有效铁含量只有几个有效铁含量只有几个mg/kg，往往不能满足，往往不能满足作物需要而出现缺铁症状。作物需要而出现缺铁症状。v植物中含铁量约在植物中含铁量约在7一一1300ppm，通常在，通常在100500ppm，但钙质土和盐渍土上植物的，但钙质土和盐渍土上植物的含铁量含铁量(200500ppm)一般可较酸性土稍高一般可
36、较酸性土稍高一些。一些。返回下一页v浸出液中微量铁的测定方法较多，有邻啡浸出液中微量铁的测定方法较多，有邻啡啰啰啉比色法，啉比色法，联吡啶比色法，以及氢硫基联吡啶比色法，以及氢硫基醋酸的比色法和原子吸收分光光度法。醋酸的比色法和原子吸收分光光度法。返回二、土壤中有效铁的测定二、土壤中有效铁的测定v（一）方法原理（一）方法原理v（二）操作步骤（二）操作步骤v（三）注意事项（三）注意事项返回（一）方法原理（一）方法原理 用用1mol/l NH4OAC1mol/l NH4OAC（pH4.8pH4.8）浸提土壤中）浸提土壤中有效铁，用邻啡啰啉比色法测定。邻啡啰啉有效铁，用邻啡啰啉比色法测定。邻啡啰啉为
37、与亚铁反应为与亚铁反应 ，生成，生成(C12H8N2)3Fe2+(C12H8N2)3Fe2+红色红色稳定的络合物，在含铁量为稳定的络合物，在含铁量为0.16ppm0.16ppm范围内范围内符合比尔定律。符合比尔定律。返回（二）操作步骤（二）操作步骤v1、称取、称取12.5克风干土壤放入克风干土壤放入250毫升三角瓶毫升三角瓶中，加入中，加入NH4OAC浸提剂浸提剂50毫升，加上塞子，毫升，加上塞子，置振荡机上摇动置振荡机上摇动30分钟，每次作不加土而加分钟，每次作不加土而加其它试剂的空白试验。其它试剂的空白试验。v2、过滤或离心得到澄清的滤液，吸取此清液、过滤或离心得到澄清的滤液，吸取此清液1
38、0毫升二份放入比色管中，将第一管中加入毫升二份放入比色管中，将第一管中加入10盐酸羟胺盐酸羟胺2毫升，混合均匀，再加入邻啡毫升，混合均匀，再加入邻啡啰啉试剂啰啉试剂2毫升，在第二管中加入毫升，在第二管中加入10盐酸羟盐酸羟胺胺2毫升及水毫升及水2毫升。毫升。返回下一页v3 3、将未加邻啡啰啉试剂的溶液于光电比、将未加邻啡啰啉试剂的溶液于光电比色计或分光光度计上用色计或分光光度计上用510nm510nm波长测定波长测定之。将此作为之。将此作为100100透光度即在零点上。透光度即在零点上。然后将已加显色剂试管的溶液在比色计然后将已加显色剂试管的溶液在比色计上读取吸收值。从标准曲线上查得上读取吸收
39、值。从标准曲线上查得Fe Fe ppmppm数，计算得到土壤中含有效铁量。数，计算得到土壤中含有效铁量。（二）操作步骤（二）操作步骤返回下一页标准曲线的绘制标准曲线的绘制v 取取6 6只只5050毫升容量瓶，分别用吸管加入毫升容量瓶，分别用吸管加入0 0、5 5、1010、1515、2020、2525毫升的毫升的10ppm10ppm铁标准溶液，铁标准溶液，然后各加然后各加1010盐酸羟胺溶液盐酸羟胺溶液4 4毫升，摇匀，加毫升，摇匀，加邻啡啰啉试剂邻啡啰啉试剂4 4毫升，滴加毫升，滴加1N NaOAc1N NaOAc直至鲜直至鲜亮橙红色或红色出现，再加入亮橙红色或红色出现，再加入1 mol/l
40、 1 mol/l NaOAC5NaOAC5毫升加水至刻度摇匀，此即为毫升加水至刻度摇匀，此即为0 0，1 1，2 2，3 3，4 4，5ppm5ppm系列标准铁溶液。系列标准铁溶液。v 将上述溶液移入比色杯中，用将上述溶液移入比色杯中，用5tOnm5tOnm波长波长测定之。用空白调节透光度为测定之。用空白调节透光度为100100，读取系，读取系列标准铁溶液的吸收值，绘制标准曲线。列标准铁溶液的吸收值，绘制标准曲线。返回（三）注意事项（三）注意事项1、首先须加入盐酸羟胺为还原剂，将铁、首先须加入盐酸羟胺为还原剂，将铁还原为二价亚铁还原为二价亚铁(Fe2+)。 2、颜色稳定须于、颜色稳定须于pH
41、29范围内，但当有范围内，但当有大量钙、磷离子时，为防大量钙、磷离子时，为防CaHPO42H2O沉沉淀的形成，最好在偏酸的淀的形成，最好在偏酸的pH条件下显色。条件下显色。返回下一页3 3、测定微量的铁，必须作空白试验，因、测定微量的铁，必须作空白试验，因许多试剂以及仪器皆极易污染铁元素，许多试剂以及仪器皆极易污染铁元素，所以须有空白试验，较为准确。所以须有空白试验，较为准确。（三）注意事项（三）注意事项返回三、石灰性土壤中有效铁的测定（一）三、石灰性土壤中有效铁的测定（一）v（一）方法原理（一）方法原理v（二）操作步骤（二）操作步骤返回（一）方法原理（一）方法原理v用用0.005mol/lD
42、TPA(二乙三胺五乙酸二乙三胺五乙酸)0.1mol/lTEA0.01mol/lCaCl2pH7.3溶液浸提溶液浸提石灰性土壤。石灰性土壤。vDTPA螯合剂与土壤中金属离子产生螯合平衡。加螯合剂与土壤中金属离子产生螯合平衡。加入入CaCl2减小土壤中减小土壤中CaCO3的溶解度。浸提液中加的溶解度。浸提液中加入入TEA缓冲液控制缓冲液控制pH值，用以防止过量的铁和锰溶值，用以防止过量的铁和锰溶解。解。vDTPA浸提剂可浸出土壤有效铁在浸提剂可浸出土壤有效铁在0.110ppm范围范围内，浸出后用原子吸收法测定，也可用邻啡啰啉比内，浸出后用原子吸收法测定，也可用邻啡啰啉比色法测定。色法测定。返回（二
43、）操作步骤（二）操作步骤 称取风干、经磨细过称取风干、经磨细过2020目筛孔的土壤目筛孔的土壤1.00002.00001.00002.0000克，放入克，放入150150毫升三角瓶毫升三角瓶中，加中，加DTPADTPA浸提剂浸提剂2020毫升，在振荡机毫升，在振荡机上摇动上摇动2 2小时小时( (振荡速度振荡速度180180次分次分) )，过滤，过滤于干净瓶中，滤液中铁用邻啡啰啉比色于干净瓶中，滤液中铁用邻啡啰啉比色法测定或用原子吸收法测定。法测定或用原子吸收法测定。返回四、石灰性土壤中有效铁的测定（二）四、石灰性土壤中有效铁的测定（二）（氢硫基醋酸浸提及显色比色测定法）（氢硫基醋酸浸提及显色
44、比色测定法） v（一）方法原理（一）方法原理v（二）操作步骤（二）操作步骤返回（一）方法原理（一）方法原理v 石灰性土壤中有效铁用氢硫基醋酸石灰性土壤中有效铁用氢硫基醋酸浸提，其可与土壤中大部分的可溶性铁浸提，其可与土壤中大部分的可溶性铁反应，包括磷酸高铁，新生成的反应，包括磷酸高铁，新生成的Fe(OH)3Fe(OH)3和腐殖质中铁，然后在氢氧化铵碱性条和腐殖质中铁，然后在氢氧化铵碱性条件下，铁与氢硫基醋酸生成紫红色络合件下，铁与氢硫基醋酸生成紫红色络合物，颜色与物，颜色与pHpH试剂浓度无关，并可稳定试剂浓度无关，并可稳定6 6小时，根据所生成颜色，进行比色测定，小时，根据所生成颜色，进行比
45、色测定，此中氢硫基醋酸此中氢硫基醋酸( (又称乙硫醋酸又称乙硫醋酸) )既是浸提既是浸提剂又是显色剂。剂又是显色剂。返回（二）操作步骤（二）操作步骤v称取称取1.0001.000克风干土壤于三角瓶或大试管中，加克风干土壤于三角瓶或大试管中，加(1 (1：50)50)含含CaCO3CaCO3的氢硫基醋酸浸提剂的氢硫基醋酸浸提剂1010毫升，加塞，用毫升，加塞，用力摇力摇2323秒钟，继续轻轻摇动秒钟，继续轻轻摇动1 1分钟，立即过滤。分钟，立即过滤。v吸取滤液吸取滤液5 5毫升于毫升于5050毫升容量瓶中，加水毫升容量瓶中，加水2020毫升，加毫升，加(1 (1：10)10)氢硫基醋酸显色剂氢硫
46、基醋酸显色剂1 1毫升和浓毫升和浓NH4OH 56NH4OH 56滴，滴，定容。混合均匀后比色，使用定容。混合均匀后比色，使用540nm540nm滤光片进行比滤光片进行比色。色。v标准曲线的绘制：分别吸取含铁标准曲线的绘制：分别吸取含铁5 5，1010，2020，3030，4040，60ppm60ppm的标准溶液的标准溶液1 1毫升。按上述步骤比色得铁标准毫升。按上述步骤比色得铁标准曲线，其浓度分别为曲线，其浓度分别为0.10.1，0.20.2，0.40.4，0.80.8，及，及1.2ppm 1.2ppm FeFe。返回五、植物中铁的测定五、植物中铁的测定v（一）方法原理（一）方法原理v（二）
47、操作步骤（二）操作步骤返回（一）方法原理（一）方法原理v将植物进行干灰化，加少量酸溶解，然后将植物进行干灰化，加少量酸溶解，然后用盐酸羟胺将高价铁用盐酸羟胺将高价铁(Fe3+)(Fe3+)还原为二价铁还原为二价铁(Fe2+)(Fe2+)，在，在pH3.58.8pH3.58.8时，时，Fe2+Fe2+与与联吡啶生成红色络合物，进行比色测定，联吡啶生成红色络合物，进行比色测定，测定范围为测定范围为5050毫升溶液中含有毫升溶液中含有550550微克铁微克铁( (即相当即相当0.11ppmFe)0.11ppmFe)，除，除FeFe以外，试剂几以外，试剂几不与其他金属反应。在过量试剂存在下，不与其他金
48、属反应。在过量试剂存在下，在在pH3.58.5pH3.58.5间颜色无变化，测定最好在间颜色无变化，测定最好在醋酸盐缓冲溶液中进行。醋酸盐缓冲溶液中进行。返回（二）操作步骤（二）操作步骤v1 1、干灰化、干灰化v准确称取经烘干磨细通过准确称取经烘干磨细通过6060目筛子的植目筛子的植株样品约株样品约1.00002.00001.00002.0000克于瓷坩埚中先克于瓷坩埚中先进行炭化，再于进行炭化，再于600600高温炉中灰化，高温炉中灰化，至得到白色灰分。至得到白色灰分。v用水溶解灰分，加入少量用水溶解灰分，加入少量1 1：1HCI1HCI以助以助溶解完全，再洗入溶解完全，再洗入5050毫升容
49、量瓶中，使毫升容量瓶中，使体积约为体积约为2525毫升，按湿灰化后中和及显毫升，按湿灰化后中和及显色进行测定。色进行测定。返回下一页v2 2、湿灰化、湿灰化v称取样品约称取样品约2.00002.0000克，放入三角瓶中，加浓克，放入三角瓶中，加浓HNO325HNO325毫升，在通风厨中放置过夜，于电热板上毫升，在通风厨中放置过夜，于电热板上低温（低温（200200左右）加热左右）加热3030分钟，冷却后加分钟，冷却后加6060HClO45HClO45毫升，放置稍久，然后在电热板上继续加毫升，放置稍久，然后在电热板上继续加热，逐渐提高温度，待消化物残留较少，消化液热，逐渐提高温度，待消化物残留较
50、少，消化液呈白色透明时，再升高温度使高氯酸分解，冒白呈白色透明时，再升高温度使高氯酸分解，冒白色浓烟，约色浓烟，约2323分钟即可分解完全，此时约剩有分钟即可分解完全，此时约剩有溶液溶液2323毫升毫升( (注意，勿烧干注意，勿烧干) )，冷却后洗入，冷却后洗入5050毫升毫升容量瓶中，加容量瓶中，加0.20.22 2，6 6二硝基酚指示剂二硝基酚指示剂1212滴，滴，用用1mol/lNaOH1mol/lNaOH中和至微黄色，再滴加中和至微黄色，再滴加0.1mol/lHCl0.1mol/lHCl溶液，使黄色恰好消褪，加入溶液，使黄色恰好消褪，加入1 1盐酸羟胺盐酸羟胺1 1毫升毫升摇匀。再加入
