1、案例：案例：v1970-1971年：美国败血症流行，年：美国败血症流行，7个州个州8家医家医院发现院发现350例败血症流行病，例败血症流行病，原因是一种静脉原因是一种静脉注射剂被细菌污染。注射剂被细菌污染。v德旺波特事件：英国德旺波特医院德旺波特事件：英国德旺波特医院输液灭菌输液灭菌过程局部灭菌不到位过程局部灭菌不到位，造成污染，导致，造成污染，导致6例败例败血症患者死亡。血症患者死亡。案例：案例：v“欣弗欣弗”事件事件v2006年，安徽华源生物药业有限公司生产的克林霉素磷酸酯年，安徽华源生物药业有限公司生产的克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液（欣弗）经检验，无菌检查和热原检查不符合葡萄糖注射液（欣弗
2、）经检验，无菌检查和热原检查不符合规定，导致规定，导致11人注射死亡。人注射死亡。v事件原因：在生产过程中违反规定，未按批准的工艺参数灭事件原因：在生产过程中违反规定，未按批准的工艺参数灭菌，降低灭菌温度，缩短灭菌时间，增加灭菌柜装载量，影菌，降低灭菌温度，缩短灭菌时间，增加灭菌柜装载量，影响了灭菌效果。响了灭菌效果。v事件处理：国家药监局撤销该公司事件处理：国家药监局撤销该公司药品药品GMP证书证书和和“欣弗欣弗”药品的批准文号，撤销总经理等药品的批准文号，撤销总经理等5人职务，并给予人职务，并给予安徽省药监局局长、阜阳市药监局局长和安监科科长记大过安徽省药监局局长、阜阳市药监局局长和安监科
3、科长记大过等行政处分，随后不到一月安徽华源总经理裘祖贻在家谢罪等行政处分，随后不到一月安徽华源总经理裘祖贻在家谢罪自杀。自杀。案例：案例：v2008年，黑龙江省完达山制药厂生产的刺五加注射液经检验年，黑龙江省完达山制药厂生产的刺五加注射液经检验显示显示被细菌污染被细菌污染，导致，导致3人注射死亡。卫生部、国药局联合人注射死亡。卫生部、国药局联合处理，吊销该厂处理，吊销该厂39个注射剂批准文号。个注射剂批准文号。v“毒黄瓜毒黄瓜”事件事件v2011年，德国市场的黄瓜年，德国市场的黄瓜遭受肠出血性大肠杆菌（遭受肠出血性大肠杆菌（EHEC） “污染污染”，截至目前已造成，截至目前已造成15人死亡，约
4、人死亡，约1400人受到感染。人受到感染。目前，在瑞典、挪威、丹麦、英国、荷兰、法国、瑞士、奥目前，在瑞典、挪威、丹麦、英国、荷兰、法国、瑞士、奥地利等国也都发现了病例或疑似病例，整个欧洲人人恐慌，地利等国也都发现了病例或疑似病例，整个欧洲人人恐慌，谈谈“瓜瓜”色变。色变。一切都是微生物惹得祸！药品生产过程中微生物控制非常重要v一、微生物学及其发展史一、微生物学及其发展史v二、微生物定义及特征二、微生物定义及特征v三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v四、微生物的种类四、微生物的种类v五、微生物的形态五、微生物的形态v六、微生物的结构六、微生物的结构v七、微生物的分布七、微生物的分布v八、
5、微生物的控制八、微生物的控制v九、药品微生物控制九、药品微生物控制一、微生物学及其发展史一、微生物学及其发展史v微生物学（微生物学（mocrobiology）就是研究那些小）就是研究那些小得必须借助显微镜才能看见的活生物体。得必须借助显微镜才能看见的活生物体。v我们研究微生物的生命活动，达到控制腐败我们研究微生物的生命活动，达到控制腐败微生物和病原微生物的活动，以防止食品、微生物和病原微生物的活动，以防止食品、药品变质和杜绝因其引起的病害。药品变质和杜绝因其引起的病害。一、微生物学及其发展史一、微生物学及其发展史v1、公元前二千多年夏禹时代，就有酿酒的记、公元前二千多年夏禹时代，就有酿酒的记载
6、，酿酒的记载，酿酒就必须有酵母菌参与。载，酿酒的记载，酿酒就必须有酵母菌参与。v2、十七世纪荷兰人吕文虎克，用自制显微镜、十七世纪荷兰人吕文虎克，用自制显微镜首先观察到微生物（细菌）。首先观察到微生物（细菌）。v3、十九世纪，法国科学家斯德，发现发酵和、十九世纪，法国科学家斯德，发现发酵和腐败是微生物的作用结果，为了防止酒类变腐败是微生物的作用结果，为了防止酒类变质，他创造加温处理方法质，他创造加温处理方法“巴氏消毒法巴氏消毒法”。二、微生物定义二、微生物定义 v微生物微生物(microorganism) 是指存在于自然界的一大群形体微小、结构是指存在于自然界的一大群形体微小、结构简单、进化低
7、级、肉眼直接看不见，必须借简单、进化低级、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。二、微生物的特征二、微生物的特征v小（形体微小）：小（形体微小）：m（微米）级在光学显微（微米）级在光学显微镜下可见、镜下可见、nm（纳米）级在电子显微镜下可（纳米）级在电子显微镜下可见见v简（结构简单）：单细胞、简单的多细胞、简（结构简单）：单细胞、简单的多细胞、非细胞非细胞v低（进化低级）：原核类、真核类、非细胞低（进化低级）：原核类、真核类、非细胞类类三、微生物的五大共性三、
8、微生物的五大共性v1、体积小，面积大、体积小，面积大 为五大共性的基础。小体积大面积系统必然有一个为五大共性的基础。小体积大面积系统必然有一个巨大的营养物吸收面、代谢废物的排泄面、环境信巨大的营养物吸收面、代谢废物的排泄面、环境信息的接收面。息的接收面。v2、吸收多，转化快、吸收多，转化快 为其高速生长繁殖和产生大量代谢产物提供了充分为其高速生长繁殖和产生大量代谢产物提供了充分的物质基础。的物质基础。v3、生长旺，繁殖快、生长旺，繁殖快 微生物具有极高的生长和繁殖速度。微生物具有极高的生长和繁殖速度。三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v4、适应强，易变异、适应强，易变异 微生物对环境条件
9、尤其是恶劣的微生物对环境条件尤其是恶劣的“极端环境极端环境”有惊人的适应能力有惊人的适应能力 ，堪称生物界之最。，堪称生物界之最。 微生物的个体一般都是单细胞、简单多细胞微生物的个体一般都是单细胞、简单多细胞或非细胞，通常都是单倍体，繁殖快与外界或非细胞，通常都是单倍体，繁殖快与外界环境直接接触，即使变异的频率特别低，也环境直接接触，即使变异的频率特别低，也可在短时间内产生大量变异的后代。最常见可在短时间内产生大量变异的后代。最常见的变异形式是基因突变。的变异形式是基因突变。三、微生物的五大共性三、微生物的五大共性v5、分布广，种类多、分布广，种类多 地球上除了火山的中心区域外，从土壤圈、地球
10、上除了火山的中心区域外，从土壤圈、水圈、大气圈直至岩石圈，到处都有微生物水圈、大气圈直至岩石圈，到处都有微生物的踪迹。的踪迹。 地球上有地球上有200万种生物，其中微生物有万种生物，其中微生物有20万万种之多。种之多。 四、微生物的种类四、微生物的种类v微生物根据其不同的进化水平和性状上的明微生物根据其不同的进化水平和性状上的明显差别可分为原核微生物、真核微生物和非显差别可分为原核微生物、真核微生物和非细胞微生物三大类群。细胞微生物三大类群。v原核微生物：细菌原核微生物：细菌(Bacteria)、放线菌、放线菌(Actinomyces)、蓝细菌、蓝细菌(Cyanobacteria)、立克次氏体
11、立克次氏体(Rickettsia)、支原体、支原体(Mycoplasm)、衣原体、衣原体(Chlamydia)、螺旋体、螺旋体(Spirochaeta)、蛭弧菌、蛭弧菌(Bdellovibrio)等等v真核微生物：霉菌真核微生物：霉菌(Mold)、酵母菌、酵母菌(Yeast)等等v非细胞类微生物：病毒非细胞类微生物：病毒(Virus) 个体微小，可个体微小，可通过细菌滤器通过细菌滤器 等等五、微生物的形态五、微生物的形态v细菌：细菌：是一类细胞细而短是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广
12、泛，主要有球状、杆，主要有球状、杆状和螺旋状三种形态。状和螺旋状三种形态。v真菌：是一类有细胞壁，无叶绿素，以寄生或腐生方式生存，真菌：是一类有细胞壁，无叶绿素，以寄生或腐生方式生存，少数为单细胞，多数为多细胞，能进行无性或有性繁殖的一少数为单细胞，多数为多细胞，能进行无性或有性繁殖的一类真核细胞型微生物。单细胞真菌呈圆形或卵圆形，称为酵类真核细胞型微生物。单细胞真菌呈圆形或卵圆形，称为酵母菌；多细胞真菌由菌丝和孢子组成，并交织成团，称丝状母菌；多细胞真菌由菌丝和孢子组成，并交织成团，称丝状菌或霉菌。菌或霉菌。v病毒病毒：属非细胞型微生物，在自然界分布非常广泛，可在属非细胞型微生物，在自然界分
13、布非常广泛，可在人、动物、植物、真菌和细菌中寄居并引起感染。病毒是体人、动物、植物、真菌和细菌中寄居并引起感染。病毒是体积最小、结构最简单的微生物，它仅有一种核酸（积最小、结构最简单的微生物，它仅有一种核酸（DNA或或RNA）作其遗传物质。）作其遗传物质。放线杆菌弧状菌酵母菌 葡萄球菌 乳酸杆菌 梭状芽孢杆菌 黑曲霉六、微生物的结构六、微生物的结构细菌的结构：细菌的结构：v基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核v特殊结构：荚膜、芽孢等特殊结构：荚膜、芽孢等细菌的结构：细菌的结构：v细胞壁：位于细胞表面，是一层较为坚韧、略具弹细胞壁：位于细胞表面，是一层
14、较为坚韧、略具弹性的结构。其功能是可以保护细胞免受机械或渗透性的结构。其功能是可以保护细胞免受机械或渗透压的破坏，维持细胞的外形。细胞壁是多孔性的，压的破坏，维持细胞的外形。细胞壁是多孔性的，具有一定的屏障作用，水和某些化学物质可以通过，具有一定的屏障作用，水和某些化学物质可以通过，但对大分子物质有阻拦作用。但对大分子物质有阻拦作用。v细胞膜：是外侧紧贴于细胞壁而内侧包围细胞质的细胞膜：是外侧紧贴于细胞壁而内侧包围细胞质的一层柔软而富有弹性的半透性薄膜。它是一个重要一层柔软而富有弹性的半透性薄膜。它是一个重要的代谢活动中心，具有多种新陈代谢所需的酶。的代谢活动中心，具有多种新陈代谢所需的酶。细
15、菌的结构：细菌的结构：v细胞质：无色透明，呈粘液状。其内含有某细胞质：无色透明，呈粘液状。其内含有某些结构和内含物。些结构和内含物。v细胞核：细菌的核位于细胞质内，没有核膜、细胞核：细菌的核位于细胞质内，没有核膜、核仁，没有固定形态，结构也很简单，因而核仁，没有固定形态，结构也很简单，因而称之为原核。称之为原核。v荚膜：有些细菌在一定营养条件下，可向细荚膜：有些细菌在一定营养条件下，可向细胞壁表面分泌一层松散透明、粘度极大、粘胞壁表面分泌一层松散透明、粘度极大、粘液状或胶质状的物质称为荚膜。液状或胶质状的物质称为荚膜。细菌的结构：细菌的结构：v芽孢：细菌在一定环境条件下或处在一定的芽孢：细菌在
16、一定环境条件下或处在一定的生活阶段，细胞质脱水浓缩，在菌体内形成生活阶段，细胞质脱水浓缩，在菌体内形成一个折光性圆形或椭圆形的个体。其对热力、一个折光性圆形或椭圆形的个体。其对热力、干燥、辐射、化学消毒等理化因素有强大的干燥、辐射、化学消毒等理化因素有强大的抵抗力。抵抗力。炭疽杆菌（芽孢形成 ）七、微生物的分布七、微生物的分布v（一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物v（二）土壤中的微生物（二）土壤中的微生物v（三）水中的微生物（三）水中的微生物v（四）空气中的微生物（四）空气中的微生物v（五）极端环境下的微生物（五）极端环境下的微生物（一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物v
17、植物体表面植物体表面 根系和叶面根系和叶面v动物体表面动物体表面 人体内外微生物的分布人体内外微生物的分布 1、皮肤、皮肤 2、口腔、口腔 3、上呼吸道、上呼吸道 4、下呼吸道、下呼吸道 5、胃肠道、胃肠道 6、泌尿生殖道、泌尿生殖道（一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物v人是洁净室中最大的污染源人是洁净室中最大的污染源 1、人在代谢过程中会释放和分泌污染物。、人在代谢过程中会释放和分泌污染物。 2、人体表面、衣服能沾染、携带污染物。、人体表面、衣服能沾染、携带污染物。3、人在洁净室内的各种动作也会产生微粒和、人在洁净室内的各种动作也会产生微粒和微生物。微生物。 （一）生物体内外的微
18、生物（一）生物体内外的微生物v在正常人体皮肤、粘膜及与外界相通的各种在正常人体皮肤、粘膜及与外界相通的各种腔道，存在着对人体无害的微生物群，包括腔道，存在着对人体无害的微生物群，包括细菌、真菌、螺旋体、衣原体等。习惯称之细菌、真菌、螺旋体、衣原体等。习惯称之为正常菌群。为正常菌群。v而身体的器官内部以及血液和淋巴系统内没而身体的器官内部以及血液和淋巴系统内没有微生物，如果在这些部位的任何一处发现有微生物，如果在这些部位的任何一处发现有相当数量的微生物，通常表明疾病状态。有相当数量的微生物，通常表明疾病状态。v因此，将在正常情况下，体表和体腔中所存因此，将在正常情况下，体表和体腔中所存在的一定种
19、类和数量的微生物称为人体的正在的一定种类和数量的微生物称为人体的正常微生物群落。常微生物群落。（一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物v所谓的正常菌群，实际上是相对的、可变的所谓的正常菌群，实际上是相对的、可变的和有条件的。和有条件的。v当机体防御机能减弱时，一部分正常菌群会当机体防御机能减弱时，一部分正常菌群会成为病原微生物。另一些正常菌群因其生长成为病原微生物。另一些正常菌群因其生长部位改变，也可引起疾病。部位改变，也可引起疾病。v还有一些正常菌群由于某些外界因素的影响，还有一些正常菌群由于某些外界因素的影响，破坏了其中各种微生物间的相互制约关系，破坏了其中各种微生物间的相互制约关
20、系，也能引起疾病。这种情况在长期服用抗生素也能引起疾病。这种情况在长期服用抗生素后尤为突出。这时，由于肠道内对药物敏感后尤为突出。这时，由于肠道内对药物敏感的细菌被抑制，而不敏感菌或耐药性菌就会的细菌被抑制，而不敏感菌或耐药性菌就会乘机大量繁殖，从而引起病变。乘机大量繁殖，从而引起病变。（一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物v1、皮肤：、皮肤： 皮肤上常见的主要有表皮葡萄球菌、白色葡皮肤上常见的主要有表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、八叠球菌属细菌、类白喉棒杆菌等，萄球菌、八叠球菌属细菌、类白喉棒杆菌等，它们组成皮肤上的正常微生物群落。有时也它们组成皮肤上的正常微生物群落。有时也有金黄色葡
21、萄球菌，当皮肤受到损伤时，可有金黄色葡萄球菌，当皮肤受到损伤时，可引起化脓性感染。引起化脓性感染。 （一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物药品生产质量管理规范药品生产质量管理规范中明确规定：进中明确规定：进入洁净室（区）的人员不得化妆和佩带饰物，入洁净室（区）的人员不得化妆和佩带饰物，不得裸手直接接触药品。不得裸手直接接触药品。药品生产质量管理规范药品生产质量管理规范中明确规定：无中明确规定：无菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚部，菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物。并能阻留人体脱落物。 （一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物v2、口腔、口腔 口腔中有
22、很多微生物。常见的主要有唾液链口腔中有很多微生物。常见的主要有唾液链球菌、溶血链球菌、乳酸杆菌、流感杆菌、球菌、溶血链球菌、乳酸杆菌、流感杆菌、类白喉棒杆菌等，它们组成口腔内的正常微类白喉棒杆菌等，它们组成口腔内的正常微生物群落。生物群落。 （一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物v3、上呼吸道、上呼吸道 包括喉、鼻道和鼻咽。包括喉、鼻道和鼻咽。 存在甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流存在甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等微生物。大肠杆菌、变形杆菌等微生物。（一）生物体内外的微生物（一）
23、生物体内外的微生物v4、下呼吸道、下呼吸道 包括气管、支气管和肺包括气管、支气管和肺 。 健康人的下呼吸道是无菌的。健康人的下呼吸道是无菌的。 （一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物v5、胃肠道、胃肠道 胃酸具有杀菌作用，健康人的胃一般无菌。胃酸具有杀菌作用，健康人的胃一般无菌。 肠道内呈碱性，同时又有某些食物消化的产肠道内呈碱性，同时又有某些食物消化的产 物作为养料，这些都适于微生物的生长繁殖。物作为养料，这些都适于微生物的生长繁殖。因此肠道内含有大量的细菌。常见的主要有因此肠道内含有大量的细菌。常见的主要有大肠埃希氏菌、产气杆菌、变形杆菌、粪产大肠埃希氏菌、产气杆菌、变形杆菌、粪
24、产碱杆菌、粪链球菌、梭杆菌属、螺旋体属、碱杆菌、粪链球菌、梭杆菌属、螺旋体属、乳杆菌属、梭菌属、拟杆菌属中的一些种。乳杆菌属、梭菌属、拟杆菌属中的一些种。它们组成肠道内的正常微生物群落。它们组成肠道内的正常微生物群落。（一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物大肠埃希氏杆菌：大肠埃希氏杆菌： 在环境卫生和食品卫生学中，常用作被粪便在环境卫生和食品卫生学中，常用作被粪便 污染的检测指标，是粪便污染的指示菌。污染的检测指标，是粪便污染的指示菌。 平时生活中尤其在药品生产中，上完卫生间平时生活中尤其在药品生产中，上完卫生间之后一定要记住洗手。洗手程序及其注意事之后一定要记住洗手。洗手程序及其注
25、意事项在项在SOP中有详细规定。中有详细规定。 v大肠埃希杆菌，革兰染色 显示肠杆菌科典型的革兰阳性杆菌。（革兰染色，放大1000倍）在麦康基培养基上培养的大肠埃希杆菌 产生粉红色乳糖发酵菌落。麦康基培养基是肠道细菌的选择培养基，含胆盐、乳糖和pH指示剂中性红。乳糖发酵菌落产生酸，将指示剂变红。（麦康基琼脂，18小时，37） （一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物v作为粪便污染的指示菌，应具备以下条件：作为粪便污染的指示菌，应具备以下条件： 该指示菌在肠道内大量存在该指示菌在肠道内大量存在,，比其它病原微生物，比其它病原微生物多，对人、畜一般无致病性。多，对人、畜一般无致病性。 受人
26、畜粪便污染的供试品易检出本指示菌，未受污受人畜粪便污染的供试品易检出本指示菌，未受污染的供试品无本指示菌。染的供试品无本指示菌。 该指示菌在供试品中存活时间与其它病原微生物的该指示菌在供试品中存活时间与其它病原微生物的存活时间相当，且在供试品中不自行繁殖。存活时间相当，且在供试品中不自行繁殖。 该指示菌的性状稳定，检查方法简便、快速、准确。该指示菌的性状稳定，检查方法简便、快速、准确。（一）生物体内外的微生物（一）生物体内外的微生物v6、泌尿生殖道、泌尿生殖道 常见的有嗜酸乳杆菌、类白喉棒杆菌、葡萄常见的有嗜酸乳杆菌、类白喉棒杆菌、葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌。球菌、链球菌和大肠杆菌。 （二）土
27、壤中的微生物（二）土壤中的微生物v土壤是微生物的大本营，有土壤是微生物的大本营，有“微生物天然培微生物天然培养基养基”的称号。的称号。 自然界中，土壤是微生物生活最适宜的环境，自然界中，土壤是微生物生活最适宜的环境，它具有微生物所需要的一切营养物质和微生它具有微生物所需要的一切营养物质和微生物进行生长繁殖及生命活动的各种条件。物进行生长繁殖及生命活动的各种条件。 （三）水中的微生物（三）水中的微生物v水体是微生物广泛分布的第二个天然环境。水体是微生物广泛分布的第二个天然环境。 v水中的细菌来自土壤、尘埃、污水、人畜排水中的细菌来自土壤、尘埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。泄物及垃圾等。 v药品生产
28、质量管理规范药品生产质量管理规范第四章第四章设备设备第三十四条中明确规定：纯化水、注射用水第三十四条中明确规定：纯化水、注射用水的制备、储存和分配应能防止微生物的滋生的制备、储存和分配应能防止微生物的滋生和污染。储罐和输送管道所用材料应无毒、和污染。储罐和输送管道所用材料应无毒、耐腐蚀。管道的设计和安装应避免死角、盲耐腐蚀。管道的设计和安装应避免死角、盲管。储罐和管道要规定清洗、灭菌周期管。储罐和管道要规定清洗、灭菌周期。（四）空气中的微生物（四）空气中的微生物v灰尘灰尘“微生物的飞行器微生物的飞行器”。v进入洁净室（区）的空气要经过空气净化系进入洁净室（区）的空气要经过空气净化系统的处理。统
29、的处理。v洁净室（区）要定期消毒。使用的消毒剂不洁净室（区）要定期消毒。使用的消毒剂不得对设备、物料和成品产生污染。消毒剂品得对设备、物料和成品产生污染。消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株种应定期更换，防止产生耐药菌株。（五）极端环境下的微生物（五）极端环境下的微生物v在自然界中，存在着一些可在绝大多数微生在自然界中，存在着一些可在绝大多数微生物所不能生长的高温、低温、高酸、高碱、物所不能生长的高温、低温、高酸、高碱、高盐、高压和高辐射强度等极端环境下生活高盐、高压和高辐射强度等极端环境下生活的微生物，如嗜热菌、嗜冷菌、嗜酸菌、嗜的微生物，如嗜热菌、嗜冷菌、嗜酸菌、嗜碱菌、嗜盐菌、嗜压菌、
30、耐辐射菌等，它们碱菌、嗜盐菌、嗜压菌、耐辐射菌等，它们被称为极端环境微生物。被称为极端环境微生物。八、微生物的控制八、微生物的控制v（一）（一）5个基本概念个基本概念v（二）消毒剂的种类（二）消毒剂的种类v（三）常用的消毒剂（三）常用的消毒剂v（四）四种灭菌的方法（四）四种灭菌的方法（一）（一）5个基本概念个基本概念v 抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。v 防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。使用同一种化学药品法。细菌一般不死亡。使用同一种化学药品在低浓度时为防腐剂，在高浓度时为消毒剂。在低浓度时为防
31、腐剂，在高浓度时为消毒剂。（一）（一）5个基本概念个基本概念v 消毒：杀灭物体上病原微生物的方法。并消毒：杀灭物体上病原微生物的方法。并不一定杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。不一定杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。用来消毒的药品叫消毒剂。一般消毒剂在常用来消毒的药品叫消毒剂。一般消毒剂在常用浓度下只对细菌的繁殖体有效，对其芽孢用浓度下只对细菌的繁殖体有效，对其芽孢则需提高消毒剂的浓度和延长作用时间。则需提高消毒剂的浓度和延长作用时间。（一）（一）5个基本概念个基本概念v 无菌：不存在活菌。无菌：不存在活菌。v 灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。比灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。比消毒要求高，它
32、杀灭了包括细菌芽孢在内的消毒要求高，它杀灭了包括细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微生物。全部病原微生物和非病原微生物。（一）（一）5个基本概念个基本概念v灭菌和消毒的比较：灭菌和消毒的比较：共性：杀灭微生物以控制其污染和防止传染。共性：杀灭微生物以控制其污染和防止传染。区别：区别：1、杀灭微生物完全性的差异。灭菌要求完全杀灭微生、杀灭微生物完全性的差异。灭菌要求完全杀灭微生物，灭菌后的药品不应含有活的微生物。而消毒不完物，灭菌后的药品不应含有活的微生物。而消毒不完全杀灭微生物，只能杀灭一部分微生物即病原微生物。全杀灭微生物，只能杀灭一部分微生物即病原微生物。这是相对的。因为强效消毒剂在适宜
33、条件下可能达到这是相对的。因为强效消毒剂在适宜条件下可能达到灭菌效果；在不适宜条件下灭菌，有不完全杀灭微生灭菌效果；在不适宜条件下灭菌，有不完全杀灭微生物的可能。物的可能。2、方法上的差异：灭菌方法具有多样性，消毒常借助、方法上的差异：灭菌方法具有多样性，消毒常借助化学物质。化学物质。3、效果检查的差异：灭菌效果用无菌检查法检测，而、效果检查的差异：灭菌效果用无菌检查法检测，而消毒效果以消毒剂的效价来评定。消毒效果以消毒剂的效价来评定。（二）消毒剂的种类（二）消毒剂的种类v1、重金属及其化合物、重金属及其化合物v2、有机化合物、有机化合物v3、卤族元素及其化合物、卤族元素及其化合物v4、表面活
34、性剂、表面活性剂v5、染料、染料（三）常用的消毒剂（三）常用的消毒剂v洁净室（区）常用的消毒剂洁净室（区）常用的消毒剂v甲醛薰蒸（作用机制：阻抑菌细胞核蛋白质合成甲醛薰蒸（作用机制：阻抑菌细胞核蛋白质合成) 甲醛有挥发性，对眼睛、皮肤有刺激性，引起皮肤甲醛有挥发性，对眼睛、皮肤有刺激性，引起皮肤硬化或皱褶，不宜做皮肤消毒用。）硬化或皱褶，不宜做皮肤消毒用。）v 0.1%新洁尔灭溶液新洁尔灭溶液(作用机制：使蛋白质变性，破作用机制：使蛋白质变性，破坏细胞膜。坏细胞膜。)v75%酒精溶液（常用于皮肤消毒。能迅速杀死细菌酒精溶液（常用于皮肤消毒。能迅速杀死细菌繁殖体，对一般病毒有一定的消毒作用。）繁
35、殖体，对一般病毒有一定的消毒作用。） v5%来苏水来苏水(甲酚皂甲酚皂)溶液（溶液（作用机制：损伤细胞膜作用机制：损伤细胞膜 ）（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v1、热力灭菌、热力灭菌v2、气体灭菌、气体灭菌v3、辐射灭菌、辐射灭菌v4、过滤灭菌、过滤灭菌（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v1、热力灭菌：、热力灭菌： 主要是利用高温的致死作用，使微生物的蛋主要是利用高温的致死作用，使微生物的蛋白质和核酸等重要生物高分子发生变性、破白质和核酸等重要生物高分子发生变性、破坏，而导致细胞死亡。坏，而导致细胞死亡。 分为干热灭菌与湿热灭菌分为干热灭菌与湿热灭菌（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法(1)干热灭
36、菌：灼烧与火焰灭菌干热灭菌：灼烧与火焰灭菌 、干烤灭菌、干烤灭菌v灼烧主要用于接种工具灭菌，如接种针、接种环、灼烧主要用于接种工具灭菌，如接种针、接种环、刀、剪等在火焰上烧灼即可达到彻底灭菌。刀、剪等在火焰上烧灼即可达到彻底灭菌。v火焰灭菌是在无菌操作中，将试管口、玻璃瓶口、火焰灭菌是在无菌操作中，将试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反复通过火焰数次，利用火焰对管口硅氟塑料塞等反复通过火焰数次，利用火焰对管口等进行灭菌，防止管口污染，作为无菌操作过程中等进行灭菌，防止管口污染，作为无菌操作过程中的辅助灭菌手段。的辅助灭菌手段。 v干烤灭菌是利用热辐射及干热空气进行灭菌。干烤灭菌是利用热辐射及干热空
37、气进行灭菌。（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法(2)湿热灭菌法：通过热蒸汽或沸水使细菌蛋白质变性湿热灭菌法：通过热蒸汽或沸水使细菌蛋白质变性而杀灭微生物的方法。而杀灭微生物的方法。包括：煮沸灭菌、流通蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌包括：煮沸灭菌、流通蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌v煮沸灭菌：加热使水至沸而杀灭细菌的方法。凡不煮沸灭菌：加热使水至沸而杀灭细菌的方法。凡不适于高压蒸汽灭菌的物品可常压下在水中煮沸一段适于高压蒸汽灭菌的物品可常压下在水中煮沸一段时间达到灭菌目的。时间达到灭菌目的。v流通蒸汽灭菌：常压下，用蒸笼、蒸锅等在流通蒸汽灭菌：常压下，用蒸笼、蒸锅等在100灭菌。仅可杀死细菌繁殖体，不能完全杀灭芽
38、孢。灭菌。仅可杀死细菌繁殖体，不能完全杀灭芽孢。（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v高压蒸汽灭菌：通过加压提高蒸汽温度，穿透高压蒸汽灭菌：通过加压提高蒸汽温度，穿透力强、温度高、灭菌效果最好。是最可靠最适力强、温度高、灭菌效果最好。是最可靠最适用最广泛的灭菌方法，凡耐高温和潮湿的物品用最广泛的灭菌方法，凡耐高温和潮湿的物品可应用本法灭菌。可应用本法灭菌。v注意事项：完全排出高压灭菌器内的冷空气。注意事项：完全排出高压灭菌器内的冷空气。（冷空气存在时，同一表压下所达到的温度值（冷空气存在时，同一表压下所达到的温度值偏低，不符合规定的要求，灭菌就不彻底。）偏低，不符合规定的要求，灭菌就不彻底。）（四
39、）灭菌的方法（四）灭菌的方法v2、气体灭菌：利用化学消毒剂形成的气体来杀灭微生、气体灭菌：利用化学消毒剂形成的气体来杀灭微生物。物。v臭氧杀菌消毒臭氧杀菌消毒v广泛存在于自然界中，雷雨过后的空气有一种清新的感广泛存在于自然界中，雷雨过后的空气有一种清新的感觉，是因为空中放电产生臭氧，消灭了空气中的微生物，觉，是因为空中放电产生臭氧，消灭了空气中的微生物，净化了空气。净化了空气。v臭氧具有强烈的杀菌消毒作用。其杀菌消毒原理是：臭臭氧具有强烈的杀菌消毒作用。其杀菌消毒原理是：臭氧在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧氧在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧和单个氧分子，后者具有很强
40、的活性，对细菌具有很强和单个氧分子，后者具有很强的活性，对细菌具有很强的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌内氧化葡萄糖所必需的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌内氧化葡萄糖所必需的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则会自行重新结合成为普通氧分子，不存在任何有毒残留会自行重新结合成为普通氧分子，不存在任何有毒残留物，故称为无污染消毒剂。不但对各种细菌（包括肝炎物，故称为无污染消毒剂。不但对各种细菌（包括肝炎病毒、大肠杆菌、绿脓杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能病毒、大肠杆菌、绿脓杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能力，且对杀死霉菌也很有效。力，且对杀死霉菌也很有效
41、。 （四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v3、辐射灭菌、辐射灭菌 （1）电离辐射）电离辐射:用引起电离的用引起电离的X射线、射线、射线灭菌。射线灭菌。 电离辐射对微生物的致死作用，主要是细胞内生物电离辐射对微生物的致死作用，主要是细胞内生物化学的变化所致。化学的变化所致。 辐射的药品、食品的安全问题：辐射灭菌用于药品辐射的药品、食品的安全问题：辐射灭菌用于药品或食品都应经过安全试验，完全有必要进行科学全或食品都应经过安全试验，完全有必要进行科学全面的评价，高剂量的辐射更应慎重。面的评价，高剂量的辐射更应慎重。（2）电磁波辐射（包括紫外线）电磁波辐射（包括紫外线波长波长190350nm、红外线红外线
42、波长波长0.771000m、微波、微波波长波长11000mm）。）。（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v紫外线灭菌紫外线灭菌1、 紫外线辐射的穿透力很弱，因此主要用于无菌室、某些工紫外线辐射的穿透力很弱，因此主要用于无菌室、某些工作区的空气灭菌、物体表面灭菌。作区的空气灭菌、物体表面灭菌。2、实践工作中在无菌室无菌柜净化工作台工作室及车间安装、实践工作中在无菌室无菌柜净化工作台工作室及车间安装紫外灯，一般仅起杀死空气中部分微生物的作用，而不能起紫外灯，一般仅起杀死空气中部分微生物的作用，而不能起到完全灭菌的作用。到完全灭菌的作用。3、紫外线消毒方法验证中紫外灯需确认的参数主要有紫外线、紫外线消毒
43、方法验证中紫外灯需确认的参数主要有紫外线的波长、紫外线强度、灯管的寿命。的波长、紫外线强度、灯管的寿命。4、紫外灯消毒的效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度、紫外灯消毒的效果与紫外线强度、照射时间、温度与湿度等因素有关，还需通过验证来确定。等因素有关，还需通过验证来确定。5、注意事项：紫外线直射对眼、皮肤有损害。紫外线照射过、注意事项：紫外线直射对眼、皮肤有损害。紫外线照射过程中产生臭氧，臭氧过多对眼及鼻腔有刺激，产生头晕、胸程中产生臭氧，臭氧过多对眼及鼻腔有刺激，产生头晕、胸闷、血压降低，所以无菌室及净化工作台紫外线照射停止后，闷、血压降低，所以无菌室及净化工作台紫外线照射停止后，请稍等片
44、刻，让臭氧消散，方可进行实验操作。请稍等片刻，让臭氧消散，方可进行实验操作。（四）灭菌的方法（四）灭菌的方法v4、过滤灭菌：以物理的方法除去介质中的微、过滤灭菌：以物理的方法除去介质中的微生物。常将空气或液体中的微生物及杂质用生物。常将空气或液体中的微生物及杂质用不同材料制成的薄膜滤器过滤得到无菌、无不同材料制成的薄膜滤器过滤得到无菌、无杂质的空气或液体。杂质的空气或液体。v滤过病毒的滤膜孔径为滤过病毒的滤膜孔径为25 100nm；滤过细滤过细菌的滤膜孔径为菌的滤膜孔径为0.220.45m。九、药品微生物的控制九、药品微生物的控制v为什么要对药品生产进行微生物控制？为什么要对药品生产进行微生物
45、控制？v（1）有些微生物可以致病有些微生物可以致病。我们绝不能让我们的。我们绝不能让我们的顾客有感染致病微生物的潜在危险顾客有感染致病微生物的潜在危险。（2）微生物对药物的影响）微生物对药物的影响v药物物理形状的改变：药物的物理形状可因染菌而药物物理形状的改变：药物的物理形状可因染菌而改变。改变。v1）固体制剂（如片剂、丸剂等）表面湿润或粘滑这是由微生物大量繁）固体制剂（如片剂、丸剂等）表面湿润或粘滑这是由微生物大量繁殖所致；呈现出绿色、桃红、褐色、黄或黑色等各种颜色，这是由带色殖所致；呈现出绿色、桃红、褐色、黄或黑色等各种颜色，这是由带色菌落所产生的色素所致。口服后会使使用者引起感染症和痢疾
46、等。菌落所产生的色素所致。口服后会使使用者引起感染症和痢疾等。v2）液体制剂、增稠剂和悬浮剂受微生物污染后可产生解聚作用，粘度）液体制剂、增稠剂和悬浮剂受微生物污染后可产生解聚作用，粘度降低、悬浮物质沉降、乳剂腐败变块状或砂粒状，甚至分离成两相，变降低、悬浮物质沉降、乳剂腐败变块状或砂粒状，甚至分离成两相，变成水和油乳状。成水和油乳状。v3）注射剂被污染后，注射剂会浑浊、有沉淀或有悬浮物、变色等，滴）注射剂被污染后，注射剂会浑浊、有沉淀或有悬浮物、变色等，滴注会出现发烧和败血症，肌注会引起局部感染或溃烂。滴眼剂被污染后，注会出现发烧和败血症，肌注会引起局部感染或溃烂。滴眼剂被污染后，滴眼剂也会
47、浑浊、有沉淀或有悬浮物、变色等，使用后会引起感染症、滴眼剂也会浑浊、有沉淀或有悬浮物、变色等，使用后会引起感染症、溃疡、结膜炎等。溃疡、结膜炎等。v药物化学成份的变化药物化学成份的变化v微生物几乎具有降解所有有机物的能力，这种降解过程是在微生物几乎具有降解所有有机物的能力，这种降解过程是在温和条件下发生的，它较非生物学过程的工业反应容易得多。温和条件下发生的，它较非生物学过程的工业反应容易得多。各种物质的降解率依其化学结构、产品的物理化学性质、微各种物质的降解率依其化学结构、产品的物理化学性质、微生物的种类及污染程度等而定。生物的种类及污染程度等而定。v药品疗效的变化药品疗效的变化v某些微生物
48、有很强的降解力。因此许多药物可被降解而失效某些微生物有很强的降解力。因此许多药物可被降解而失效或显著地改变疗效。或显著地改变疗效。v污染污染：指当某物与不洁净的或腐坏物接触或混合在一起使指当某物与不洁净的或腐坏物接触或混合在一起使该物变的不纯净或不适用时，即受污染。药品的微生物污染该物变的不纯净或不适用时，即受污染。药品的微生物污染也称染菌。也称染菌。v简单的说当一个产品中存在不需要的物质时，他即受到了污简单的说当一个产品中存在不需要的物质时，他即受到了污染。染。v交叉污染：主要不同类别药物之间的交叉污染、人流和物流交叉污染：主要不同类别药物之间的交叉污染、人流和物流的交叉污染以及空气之间的交
49、叉污染等。的交叉污染以及空气之间的交叉污染等。v防止防止污染和污染和交叉污染交叉污染 v有需要有需要时需时需洗手及消毒洗手及消毒v尽量减少尽量减少直接以直接以双手接触药双手接触药品品v接触药品接触药品的表面及用具的表面及用具 用用后后清洗清洗 转换产品时转换产品时清洗清洗 v手的卫生：手的卫生：v每只手可携带每只手可携带40万个细菌；刚洗过的手，每平方厘万个细菌；刚洗过的手，每平方厘米也可检验出米也可检验出3200个细菌个细菌 。v洗手的重要性洗手的重要性:v用流水（如自来水）洗手，能使手上的致病微生物用流水（如自来水）洗手，能使手上的致病微生物减少减少80%。v用皂液充分洗手，再用自来水冲洗
50、能使致病微生物用皂液充分洗手，再用自来水冲洗能使致病微生物减少减少95%。v洗手后正确使用消毒剂能使致病微生物减少到洗手后正确使用消毒剂能使致病微生物减少到99%。更衣着衣种类着衣种类 测定日期测定日期 细菌数（细菌数（cfu）/100cm2上衣内侧上衣内侧 使用五日后使用五日后 300 外侧外侧 使用五日后使用五日后 200裤子内侧裤子内侧 使用五日后使用五日后 450 外侧外侧 使用五日后使用五日后 70帽子内侧帽子内侧 使用五日后使用五日后 100 外侧外侧 使用五日后使用五日后 150口罩内侧口罩内侧 使用一日后使用一日后 22000 外侧外侧 使用一日后使用一日后 100袜子内侧袜子
