1、负一楼动物房实验人员培训建设原因：1. 笼位紧张2. PI增加3. 学生增加保种区 区饲养实验区 区饲养实验区 区一一. 进入实验动物中心进行动物实验前必需履行的手续进入实验动物中心进行动物实验前必需履行的手续 二二. 实验动物中心标准操作规范实验动物中心标准操作规范 三三. 尊重动物的权利与福利尊重动物的权利与福利 四四. 常见违规现象和处罚措施常见违规现象和处罚措施五五. 动物数量登记动物数量登记 一. 进入实验动物中心进行动物实验前必需履行的手续 实验动物伦理委员会已经批准实验方案和使用动物的种类、数量等实验动物伦理委员会已经批准实验方案和使用动物的种类、数量等 实验人员接受实验动物中心
2、培训，并且考核合格实验人员接受实验动物中心培训，并且考核合格具体考核程序如下：具体考核程序如下：1.1.实验人员填写实验人员填写实验动物中心人员考核申请表实验动物中心人员考核申请表并提前交到并提前交到1005室同时室同时提供有关资料学习提供有关资料学习 , 另外所有申请人员必须提前去另外所有申请人员必须提前去129室询问下学院门禁卡室询问下学院门禁卡是否需要修改时间还有导师名字前加数字等问题否则考核通过后将无法授权是否需要修改时间还有导师名字前加数字等问题否则考核通过后将无法授权。2.按照申请表相应日期到场接受实验动物中心老师的培训并且通过闭卷考试按照申请表相应日期到场接受实验动物中心老师的培
3、训并且通过闭卷考试和现场模拟考试达到合格（闭卷考试分数不低于和现场模拟考试达到合格（闭卷考试分数不低于90分为合格，未通过者将继续分为合格，未通过者将继续学习并再另外安排时间重新考试，直至通过考核）。学习并再另外安排时间重新考试，直至通过考核）。3.考核通过的人员将有培训号，进入资格将直接授权在学院门禁卡上。考核通过的人员将有培训号，进入资格将直接授权在学院门禁卡上。(注意注意:如果是生命学院本科生或者是别的学院学生都需要在申请表上有导师签名如果是生命学院本科生或者是别的学院学生都需要在申请表上有导师签名后再递交后再递交) 。培训号： 进动物前已经预先签订并提交进动物前已经预先签订并提交动物实
4、验合作协议动物实验合作协议 提前！一周或3天提交,需要导师签字消毒液笼具、饮水、垫料动物的来源动物的来源 a. 从国内新引进的动物必须从具有实验动物生产许可证的大型实验动物供应基地购买，每批动物都附有实验动物质量合格证，可进入负一楼新动物房,区饲养或实验。名称地点上海斯莱克实验动物有限公司上海南京模式动物研究所南京军事医学科学院实验动物中心北京维通利华实验动物技术有限公司北京 湖南斯莱克景达实验动物有限公司长沙b. 从国外知名实验动物机构（如Jackson实验室）引进动物，必须附有该批动物的animal health report才可进入负一楼,区饲养。 二二. 实验动物中心标准操作规范实验动
5、物中心标准操作规范 获得授权入口刷卡换上鞋套更衣室更衣洁净通道饲养室或实验室离去通道缓冲间更衣出口换鞋出去1.1.人员进出负一层流程人员进出负一层流程 (1).1).所有人员必须经实验动物中心培训、考核，获得授权后方可进入。所有人员必须经实验动物中心培训、考核，获得授权后方可进入。(2).(2).人员进入：人员进入：在门口刷卡进入后脱鞋，穿上鞋套，进入走廊。在门口刷卡进入后脱鞋，穿上鞋套，进入走廊。在在、或或区的区的“人员入口人员入口”(一更门口一更门口)刷卡刷卡，进入，进入“男更衣室男更衣室”或或“女更衣室女更衣室”，穿上连体洁净服和手套等，进入穿上连体洁净服和手套等，进入“洁净通道洁净通道
6、”。进入进入“饲养室饲养室”或或“动物实验室动物实验室”进行操作。进行操作。(3).(3).人员出去：人员出去：工作结束后，着连体洁净服，从工作结束后，着连体洁净服，从“饲养室饲养室”或或“动物实验室动物实验室”进入进入“离去走道离去走道”，从，从“缓冲间缓冲间”出去。出去。在在“缓冲间缓冲间”出口处脱下连体洁净服和手套等，返回走廊，在门口穿上自己鞋子等，走出实验动物中心。出口处脱下连体洁净服和手套等，返回走廊，在门口穿上自己鞋子等，走出实验动物中心。各区一更门口刷卡刷卡，换鞋套刷卡脱衣脱鞋套a.在门口在门口的鞋柜处脱下鞋子的鞋柜处脱下鞋子,放放入入鞋柜鞋柜，穿上鞋套。，穿上鞋套。b. 尽量穿
7、单薄的衣服进尽量穿单薄的衣服进入动物房入动物房,衣柜无锁衣柜无锁,请自己保管好物品。请自己保管好物品。更衣室空间小 c c. . 在更衣室在更衣室按下列顺序穿戴按下列顺序穿戴: :一更室取出超净一更室取出超净服，在二更室超净服放桌上后手消毒（服，在二更室超净服放桌上后手消毒（I I区区、区区男更衣室是拿超净服后手消毒再进二男更衣室是拿超净服后手消毒再进二更），站在更），站在红色警示线靠门一侧红色警示线靠门一侧打开超净服打开超净服外包装，外包装，戴戴帽子帽子, ,戴戴口罩口罩, ,戴手套戴手套, ,取出超净服取出超净服并在有箭头洁净一侧上方抖开，抬一只脚穿并在有箭头洁净一侧上方抖开，抬一只脚穿入
8、超净服并踏到有箭头的洁净的一侧随后再入超净服并踏到有箭头的洁净的一侧随后再穿好另一只脚并双脚站在有箭头的一边穿好另一只脚并双脚站在有箭头的一边注意注意不要再走回没有箭头的红色线进门的一边不要再走回没有箭头的红色线进门的一边, ,最最后用橡皮筋绑住袖口后用橡皮筋绑住袖口( (注意：注意：1010楼，楼，1111楼穿戴楼穿戴程序中没有手消毒和红色警示线）程序中没有手消毒和红色警示线） d. 进入实验室或饲养室进进入实验室或饲养室进行相应操作。行相应操作。e.经离去通道进入缓冲间经离去通道进入缓冲间3，脱下超净服和口罩帽子等脱下超净服和口罩帽子等注意注意: 进出时不得同时开启双门房间的两扇门进出时不
9、得同时开启双门房间的两扇门 口罩、帽、超净服、手套、鞋套要穿戴严实，尽量不露出口罩、帽、超净服、手套、鞋套要穿戴严实，尽量不露出自己的衣物和皮肤。自己的衣物和皮肤。 动物房内有固定电话，禁止使用手机。动物房内有固定电话，禁止使用手机。动物大型物品入口喷雾消毒饲养室离去通道出去2. 2. 动物进出流程动物进出流程 (1). 进入动物房的动物必须从正规的、有资质的实验动物供应基地购买，每批动物进入都必须具备实验动进入动物房的动物必须从正规的、有资质的实验动物供应基地购买，每批动物进入都必须具备实验动物质量合格证。物质量合格证。(2). 动物必须经妥善包装，动物包装箱破损或滤膜破损者不得进入洁净区。
10、动物必须经妥善包装，动物包装箱破损或滤膜破损者不得进入洁净区。(3). 动物进入：动物进入：将动物包装箱从外走廊端放入将动物包装箱从外走廊端放入“大型物品入口大型物品入口”，用百毒杀溶液喷雾消毒，将包装箱外表面喷一遍即，用百毒杀溶液喷雾消毒，将包装箱外表面喷一遍即可。可。从从“洁净通道洁净通道”端进入端进入“大型物品入口大型物品入口”拿到动物包装箱，进入拿到动物包装箱，进入“饲养室饲养室”，“饲养室饲养室”内的超净工内的超净工作台需预先紫外灯照射作台需预先紫外灯照射15分钟。分钟。在超净工作台内打开动物包装箱，取出动物放入饲养盒，加饮水、饲料，悬挂卡片等。将饲养盒装上在超净工作台内打开动物包装
11、箱，取出动物放入饲养盒，加饮水、饲料，悬挂卡片等。将饲养盒装上IVC笼架。笼架。废弃的动物包装箱推入废弃的动物包装箱推入“离去通道离去通道”，待工作人员处理。，待工作人员处理。(4).动物传出：动物传出：将动物连同笼盒从将动物连同笼盒从“离去通道离去通道”传至外面。传至外面。动物一旦敞露于非洁净区则不能再进入动物房。动物一旦敞露于非洁净区则不能再进入动物房。 注意注意： a.引进的小鼠必须是引进的小鼠必须是SPF级动物；且该单级动物；且该单位必须有该种动物的生产许可证；同时位必须有该种动物的生产许可证；同时附带实验动物质量合格证以及动物的品附带实验动物质量合格证以及动物的品系、性别、年龄等信息
12、经实验动物中心系、性别、年龄等信息经实验动物中心工作人员审查后方可准备进入动物房。工作人员审查后方可准备进入动物房。 b.动物运输时必须有合格的运输盒动物运输时必须有合格的运输盒,清洁级和清洁级和SPF级的动级的动物运输盒必须以高效滤膜封闭窗口，同时以胶带封口，物运输盒必须以高效滤膜封闭窗口，同时以胶带封口，封口破损或滤膜破损者不能进入屏障系统。封口破损或滤膜破损者不能进入屏障系统。 喷雾消毒a. 将包装箱移入用紫外灯预先将包装箱移入用紫外灯预先照射照射15min的超净工作台中的超净工作台中b. 在超净台内去封条并用在超净台内去封条并用消毒过的大消毒过的大镊子镊子或用或用75%酒精酒精喷洒过的
13、带着手喷洒过的带着手套的双手，捏住动物尾根套的双手，捏住动物尾根,将动物移将动物移入入IVCc.加饲料和饮水后将加饲料和饮水后将IVC笼盒放在笼盒放在IVC架上固定位置，最后填写并悬挂卡架上固定位置，最后填写并悬挂卡片片,注意卡片上最后一行需要标记位注意卡片上最后一行需要标记位置置,请按照笼架上横坐标和纵坐标相请按照笼架上横坐标和纵坐标相对应的字母进行标记对应的字母进行标记,这样每个笼盒这样每个笼盒都有自己的位置不至于乱放都有自己的位置不至于乱放,方便同方便同学做实验和工人师傅换笼学做实验和工人师傅换笼外来引进动物放进外来引进动物放进IVC程序：程序：动物拿出实验的特殊情况：动物拿出实验的特殊
14、情况：1111楼进行辐照：动物始终处于辐照筒中，可以继续放到负楼进行辐照：动物始终处于辐照筒中，可以继续放到负一楼一楼、区饲养。区饲养。1010楼小动物成像仪检测：运输过程中始终放在楼小动物成像仪检测：运输过程中始终放在IVC笼盒内，笼盒内，检测时短时间敞露在屏障环境中。检测时短时间敞露在屏障环境中。 3 3天内的短期观察不再放到负一层动物房内饲养，如果长期天内的短期观察不再放到负一层动物房内饲养，如果长期观测可以继续放到观测可以继续放到1010楼动物房楼动物房DIRTY ROOMDIRTY ROOM饲养。饲养。1010楼现设楼现设有有DIRTY ROOMDIRTY ROOM动物一旦进行了敞露
15、在外界的实验，则不能放回负一层动物房动物一旦进行了敞露在外界的实验，则不能放回负一层动物房饲养！饲养！注意注意: a. 包装盒或滤膜是否破损，如有破损绝不能进入动物房，将有动物房工包装盒或滤膜是否破损，如有破损绝不能进入动物房，将有动物房工作人员予以监督。作人员予以监督。 b. 注意动物进入时的卫生消毒注意动物进入时的卫生消毒。小型物品传递窗紫外线消毒饲养室实验室离去通道出去需高压灭菌物品双扉高压灭菌器饲养室实验室离去通道出去仪器设备大型物品入口 紫外线消毒饲养室实验室离去通道出去3.3.物品进出流程物品进出流程 (1). 所有物品进入洁净区内都要经过消毒、灭菌。物品进入通道有三：所有物品进入
16、洁净区内都要经过消毒、灭菌。物品进入通道有三：“传递窗传递窗”、“大型物品大型物品入口入口”和和“高压灭菌器高压灭菌器”。洁净物品传出通道有二：。洁净物品传出通道有二：“传递窗传递窗”和和“离去通道离去通道”。(2). 所有物品必须走单独的进出通道，不得跟随人员进入。所有物品必须走单独的进出通道，不得跟随人员进入。(3). 以下列举常用物品进入、传出程序，其他物品可参照执行。以下列举常用物品进入、传出程序，其他物品可参照执行。小型物品如小型物品如注射器和手术器械进入：在注射器和手术器械进入：在“外准备间外准备间”放入放入“传递窗传递窗”紫外灯照射紫外灯照射15分钟分钟后，从后，从“内准备间内准
17、备间”拿入。拿入。小型物品的拿出：从离去通道跟随人员一起出去。小型物品的拿出：从离去通道跟随人员一起出去。细胞或需要避光的药物进入：通过细胞或需要避光的药物进入：通过75%酒精擦拭容器表面后经酒精擦拭容器表面后经“传递窗传递窗”进入。进入。细胞或药物容器拿出：从离去通道跟随人员一起出去。细胞或药物容器拿出：从离去通道跟随人员一起出去。小型仪器的进入：从外走廊推入小型仪器的进入：从外走廊推入“大型物品入口大型物品入口”，经里面的，经里面的紫外灯照射紫外灯照射30分钟分钟，从，从“洁净走洁净走道道”拿入。拿入。小型仪器的传出：小型仪器的传出：从从“动物实验室动物实验室”推入推入“离去通道离去通道”
18、，从，从“缓冲间缓冲间”拿出。拿出。紫外消毒 注意：不准将物品直接从缓冲间和注意：不准将物品直接从缓冲间和更衣室随人带入动物房！更衣室随人带入动物房！ IVC(Individually Ventilated Cages)是独立通风笼盒的简称.它的特点是具有一定的密闭性,同时让经主机中HEPA过滤的洁净空气流入盒内,使盒内保持正压,减少了可能的感染来源,适合于饲养SPF级动物,以及一些免疫缺陷动物IVC的操作要点和操的操作要点和操作程序作程序操作要点操作要点: 对对IVC中的动物进行的中的动物进行的一切操一切操作作均在均在动物超净工作台动物超净工作台中进中进行行操作程序操作程序：a.使用超净工作
19、台前使用超净工作台前15min用用75%酒酒精精喷雾工作台内表面，同时放入经表喷雾工作台内表面，同时放入经表面消毒的各种灭菌物料和实验用品，面消毒的各种灭菌物料和实验用品，并打开紫外灯和风机并打开紫外灯和风机 b.15min后用后用75%酒精酒精喷雾喷雾IVC的外的外表面、工作车、双手手套，将笼盒移表面、工作车、双手手套，将笼盒移入工作台后进行换窝，喂饲，喂水，入工作台后进行换窝，喂饲，喂水，实验等工作实验等工作注意注意:把把IVC笼盒放回笼架固定位置的时候要检查下笼架上红色指示物是否消笼盒放回笼架固定位置的时候要检查下笼架上红色指示物是否消失失。4.动物处死、解剖和取样动物处死、解剖和取样1
20、0楼或楼或11楼在楼在1004房间或动物房内实验室进行房间或动物房内实验室进行。不准带到不准带到PI实验室解剖和取样实验室解剖和取样!特殊实验需向实验动物中心申报特殊实验需向实验动物中心申报（如动物在大型仪器上的活体观测）（如动物在大型仪器上的活体观测）负一楼在动物房内实验室进行或到负一楼在动物房内实验室进行或到1004房间房间。小动物麻醉机二氧化碳处死装置负一楼动物房配备冷冻离心机冰箱动物尸体处理动物尸体处理 动物尸体和动物器官应和实验卡或繁殖卡一起密封在塑料袋动物尸体和动物器官应和实验卡或繁殖卡一起密封在塑料袋中，中，塑料袋口要扎紧塑料袋口要扎紧。 放到动物太平间的冰柜中。放到动物太平间的
21、冰柜中。动物实验废弃物品的处理动物实验废弃物品的处理垫料等废弃物与动物笼盒一起从离垫料等废弃物与动物笼盒一起从离去通道去通道出系统出系统小的注射器连同针头小的注射器连同针头套上套子套上套子放入放入空的酒精瓶空的酒精瓶, ,大的注射器的针头大的注射器的针头单单独套上套子独套上套子放入空的酒精瓶放入空的酒精瓶, ,针管针管可扔到小垃圾桶可扔到小垃圾桶, ,其他小刀片等尖其他小刀片等尖锐物品也放入空的酒精瓶以防刺伤锐物品也放入空的酒精瓶以防刺伤工作人员工作人员, ,酒精瓶满后盖上盖子待酒精瓶满后盖上盖子待工作人员清理工作人员清理动物房内动物房内无排水系统无排水系统, ,液体废弃物液体废弃物请传出系统
22、后再处理请传出系统后再处理废弃的动物包装盒从灭菌系统推入废弃的动物包装盒从灭菌系统推入离去通道传出去离去通道传出去口罩、手套、帽子、鞋套为一次性口罩、手套、帽子、鞋套为一次性物品物品, ,用过后就应丢弃用过后就应丢弃, ,灭菌工作服灭菌工作服可放在缓冲间可放在缓冲间,中心工作人员会中心工作人员会对其进行处理。对其进行处理。The Three Rs: Replacement: Substitution of non-living material (i.e. tissue cultures) or methods (i.e. computer modeling) for animals, or
23、substitution of a lower species, which might be less sensitive to pain and distress, for a higher species. For example using brain tissue slices in culture for studying neuro-epileptic agents. Reduction: Reductions in the numbers of animals used to obtain information as achieved by statistical analy
24、sis. Refinement: Decrease in the incidence or severity of pain and distress in those animals that are used. For example using inhalant anesthesia instead of injectable so that animals recover consciousness more rapidly.三三. 尊重动物的权利与福利尊重动物的权利与福利 四四.常见违规现象以及惩罚措施常见违规现象以及惩罚措施 常见违规现象常见违规现象：1. 未经实验动物中心工作人员
25、审核就直接引进动物，所有动物进入未经实验动物中心工作人员审核就直接引进动物，所有动物进入必须有工作人员在场审核签字后才能进入。必须有工作人员在场审核签字后才能进入。2. 有进入资格的同学带领没有资格的同学进入，或一人刷卡多人进入。有进入资格的同学带领没有资格的同学进入，或一人刷卡多人进入。3. 被取消资格的同学取别人的卡进入。被取消资格的同学取别人的卡进入。4. 每笼的小鼠超过每笼的小鼠超过5只（哺乳期除外只（哺乳期除外,哺乳期为哺乳期为4周）。周）。5. 没有每没有每2天探视动物一次。天探视动物一次。6. 将动物拿出试验后又放入动物房饲养（特殊试验除外，如将动物拿出试验后又放入动物房饲养（特
26、殊试验除外，如小动物成像仪长期观测试验，观测后可放于小动物成像仪长期观测试验，观测后可放于10楼动物房内饲楼动物房内饲养，但不能放到负一楼动物房饲养）。养，但不能放到负一楼动物房饲养）。7. 小物品未经传递窗消毒进入动物房小物品未经传递窗消毒进入动物房。8. 进入更衣室未按正确顺序穿戴或者未穿洁净服进入动物房。进入更衣室未按正确顺序穿戴或者未穿洁净服进入动物房。9.把把IVC笼盒带出动物中心。笼盒带出动物中心。10.有咳嗽、打喷嚏、呕吐、腹泻症状者及皮炎、传染病活动有咳嗽、打喷嚏、呕吐、腹泻症状者及皮炎、传染病活动期患者期患者仍然仍然进入动物房进入动物房。惩罚措施惩罚措施1.人员第一次违规人员
27、第一次违规应做出深刻检讨，并从发现当天起应做出深刻检讨，并从发现当天起取消进取消进入动物房实验资格入动物房实验资格2周，到动物中心义务劳动周，到动物中心义务劳动2周。周。2.人员第二次违规从发现当天起取消进入动物房实验资格人员第二次违规从发现当天起取消进入动物房实验资格2个月期满后重新参加实验动物中心培训考核直至考核通过。个月期满后重新参加实验动物中心培训考核直至考核通过。3.人员第三次违规从发现当天起，无限期取消进入动物房实人员第三次违规从发现当天起，无限期取消进入动物房实验资格。验资格。对于接到动物中心通知未及时整改的，动物中心有权自行处对于接到动物中心通知未及时整改的，动物中心有权自行处理，对于其它特殊违规情况将视其情节严重程度给予相应惩理，对于其它特殊违规情况将视其情节严重程度给予相应惩罚罚1 5
