1、不常见细菌耐药表型结果探讨胡付品华山医院抗生素研究所药物敏感性试验方法稀释法试管稀释法（肉汤稀释法）平板稀释法（琼脂稀释法）微量肉汤稀释法扩散法（纸片法）Kirby-bauer（K-B）法E-test自动化仪器纸片扩散法原理：将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，因此敏感细菌在纸片周围一定距离内的生长受到抑制。ColoniesLose ResistanceOne colonyPlasmidMultiplecolonies如何制备菌悬液？ May正确测量苯唑西林、万古霉素和利奈唑胺对葡萄球菌；以及万古霉素对肠球菌的抑菌圈直径不要用反射光要使用透射光大肠埃希菌污
2、染肠球菌；菌落再次纯分铜绿假单胞菌有耐药菌落抑菌圈内有菌落，怎么办 ?第 1问：如何解释阿米卡星对大肠埃希菌的抑菌现象？阿米卡星厄他培南J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131药物：青霉素 G细 菌 ： -溶 血 性 链 球 菌矛盾的现象 (Eagle现象 )指抗菌药物在高浓度的时候反而降低杀菌活性这种现象第一次由 Eagle和 Musselman两位科学家发现并报道。青霉素类抗菌药物在作用于葡萄球菌、 溶血性链球菌以及肠球菌时出现药物低浓度（仍超过MIC值）时抗菌活性好于高浓度。J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131表型结果克
3、林霉素报告红霉素耐药( R)阴性敏感 (S) 评论或解释：该菌不表现为体外诱导型克林霉素耐药。红霉素耐药( R)阳性耐药 (R) 评论或解释：该菌表现为体外诱导型克林霉素耐药，用克林霉素治疗可能无效。第 2问：金黄色葡萄球菌 D试验erm基因编码改变的核糖体结构 (23SrRNA甲基化 )，导致对大环内酯类和林可霉素类耐药。erm 基因需诱导，红霉素具诱导作用。若 出 现 红 霉 素 R而 克 林 霉 素 S， 但 D试 验阳性。若未进行 D试验，克林霉素很可能会被报告敏感而误导临床用药。第 3问：如何解释万古霉素 E-试验结果？万古霉 素依赖 的粪肠 球菌长期使 用包括 糖肽类 、氨基 糖肽
4、类 等抗生素 压力下 ，必须 依赖万 古霉素 才能生 长The change at the ninth codon resulted in theinactivation of the ddl gene andvancomycin-dependent growth.第 4问 ： 铜 绿 假 单 胞 菌 对 复 方 新 诺 明 天 然 耐 药 ？第 4问 ： 铜 绿 假 单 胞 菌 对 复 方 新 诺 明 天 然 耐 药 ？耐药率（）2011年 CHINET监测 6981株克雷伯菌属耐药率（ %）9.312.41924.727.534.894.72010304090807060501000亚胺培
5、南 阿米卡星 头孢西丁 头孢吡肟 环丙沙星 头孢他啶 头孢噻肟 氨苄西林抗菌药物肺炎克雷伯菌对氨苄西林 天然耐药 是 天然产 SHV型酶160株肺杆中20株对氨苄西林敏感19株细菌SHV基因出现“点突变”，mRNA 逆转录失败，无法翻译出由SHV基因正确编码的-内酰胺酶。第 6问 ： 大 肠 埃 希 菌 对 头 孢 噻 肟 的 耐 药 机 制 ？头孢呋 辛头孢唑 林第 7问：如何解释大肠埃希菌对头孢唑啉 S但头孢呋辛 R的现象？头孢呋辛酶 可水解 头孢呋辛但 不能水解 头孢唑啉第 8问：大肠埃希菌纸片法药敏结果，结果可能吗？头孢唑林 S头孢他啶 R2005 年，Ling Ma发现一株大肠埃希菌
6、具有特殊的耐药表型，该菌对氨苄西林和头孢他啶耐药，但对头孢西丁、头孢曲松、头孢噻肟、亚胺培南和头孢唑啉敏感。分子生物学试验研究结果证实，该菌产SHV-57 型ESBL第 9问 ： 这 株 大 肠 埃 希 菌 可 能 的 耐 药 机 制 是 什 么 ？第 10问：这株铜绿假单胞菌可能的耐药机制是什么？可能的 机制：1、 膜孔蛋白缺失：导致亚胺培南耐药2、 AmpC酶： 对头孢西丁耐药3、 ESBL： 对头孢他啶和头孢吡肟耐药产 ESBL菌株的检测含酶抑制剂复合制剂与相应单药抑菌圈直径相差 5mm，即判断该菌为产 ESBLs菌株头孢他啶：0.5g/mL头孢他啶/克拉维酸：0.19g/mL= 2.6
7、3头孢他啶：32g/mL头孢他啶/克拉维酸：0.19g/mL= 168第11问：该菌一定为产ESBL菌株？MIC比值假阳性结果第 12问：如何解释这株大肠埃希菌的药敏结果？耐药阿莫西林、哌拉西林、头孢噻吩、头孢呋辛、头孢哌酮阿莫西林 /克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮 /舒巴坦敏感头孢噻肟、头孢他啶第 12问：如何解释这株大肠埃希菌的药敏结果？ESBL确证试验阴性本株细菌产生 TEM-1型 内酰胺酶、膜孔蛋白缺失。头孢西丁的耐药性可能是由膜孔蛋白缺失所致，而非 -内酰胺酶Pa/Pb调控 TEM-1b高表达所致，强启动子 Pa/Pb是由弱启动子 P3经 32C T突变而成第 13问：肠杆菌
8、科细菌对头孢西丁耐药就表示细菌产 AmpC 酶吗？肠杆菌科细菌对头孢西丁耐药只能表示该菌是产 AmpC 的可疑菌株。某些类型的 ESBL 也能水解头孢西丁123412312 4342009年 14家医院大肠埃希菌的耐药率（ %）（ CHINET监测）耐药率耐药率抗 菌 药物阿 米 卡星庆 大 霉素哌 拉 西林哌 拉 西 林 /他 唑 巴 坦头 孢 唑林头 孢 呋辛头 孢 噻肟头 孢 他啶产 ESBL(4515株 )10.161.897.85.098.498.085.831.2非产 ESBL(3477株 )4.340.349.54.126.416.510.46.4抗 菌 药物头 孢 吡肟头 孢
9、哌 酮 /舒 巴 坦头 孢 西丁亚 胺 培南美 罗 培南厄 他 培南环 丙 沙星复 方 磺 胺 甲 噁唑产 ESBL(4515株 )36.97.413.20.20.30.571.074.0非产 ESBL(3477株 )6.52.47.20.60.51.142.456.1第 14问：改良 Hodge试验阳性就是产 KPC酶？改良 Hodge试验检测假阳性结果Figure 1. Phenotypic carbapenemase detection by MHT1、 K. pneumoniae ATCC BAA-1705, positive result2、 K. pneumoniae ATCC B
10、AA-1706, negative result3、 CTX-M-producing K. pneumoniae clinical isolate4、 KPC-producing K. pneumoniae clinical isolateETPMEM改良 Hodge试验检测假阴性结果第 15问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？1. 厄他培南：13 mm2. 厄他培南 +APB14 mm3. 厄他培南 +EDTA14 mm4. 亚胺培南：30 mm5. 头孢吡肟：12 mm第 16问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？1. 厄他培南：13 mm2. 厄他培南 +APB
11、+EDTA14 mm3. 美罗培南：28 mm4. 法罗培南：23 mm5. 法罗培南 +APB23 mm第 16问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？1、 头 孢 美 唑 ：26 mm2、 头 孢 噻 肟 ：11 mm3、 头 孢 噻 肟 /克 拉 维 酸 ：30 mm4、 头 孢 他 啶 ：22 mm5、 头 孢 他 啶 /克 拉 维 酸 ：30 mm6、 头 孢 噻 肟 /硼 酸 ：13 mm第 16问：这株大肠埃希菌对厄他培南可能的耐药机制是什么？小结细菌耐药越来越严重，需加强检测表型、基因型做好细菌药敏试验不容易且做且珍惜常规和科研是兄弟常规输送炮弹科研推进常规？不当之处，请批评指正！
