1、l实验一实验一 植物种子萌发和根尖取材固定植物种子萌发和根尖取材固定 l实验二实验二 植物染色体制片及有丝分裂的观察植物染色体制片及有丝分裂的观察 l实验三实验三 减数分裂制片技术及蝗虫精巢细胞显微观减数分裂制片技术及蝗虫精巢细胞显微观察察l实验四实验四 果蝇培养、麻醉及雌雄鉴别果蝇培养、麻醉及雌雄鉴别l实验五实验五 果蝇唾腺染色体制备果蝇唾腺染色体制备l实验六实验六 果蝇单因子杂交果蝇单因子杂交/ /伴性遗传伴性遗传l实验七实验七 染色体组型分析染色体组型分析l实验八实验八 果蝇基因组果蝇基因组DNADNA提取提取l实验九实验九 人类巴氏小体的观察人类巴氏小体的观察l实验十实验十 果蝇单因子
2、杂交果蝇单因子杂交/ /伴性遗传数据分析伴性遗传数据分析l实验十一实验十一 Hardy-WeinbergHardy-Weinberg遗传平衡定律的检验遗传平衡定律的检验 l实验十二实验十二 人类性状特征的遗传分析人类性状特征的遗传分析什么是巴氏小体？什么是巴氏小体？巴氏小体，又叫巴尔体（巴氏小体，又叫巴尔体（Barr bodyBarr body），指），指雌性哺乳动物体细胞间期，一块染色很深的染雌性哺乳动物体细胞间期，一块染色很深的染色质。巴氏小体色质。巴氏小体实际上是浓缩了的实际上是浓缩了的X X染色体染色体，其，其上的基因基本不转录。上的基因基本不转录。巴氏小体位于细胞中的什么位置？巴氏小
3、体位于细胞中的什么位置？在细胞内的在细胞内的位置位置：核膜边缘或靠近内侧核膜边缘或靠近内侧 形状形状：半圆形、三角形、卵形、短棒：半圆形、三角形、卵形、短棒 形及双球形形及双球形 大小大小：直径约为：直径约为1 1微米微米l19491949年年 加拿大学者加拿大学者BarrBarr在在雌猫雌猫神经原细胞核神经原细胞核 中发现。中发现。l19551955年年BarrBarr在在女性女性口腔细胞中发现口腔细胞中发现Barr bodyBarr body。l19591959年人们把性染色体异常造成的畸形与巴氏年人们把性染色体异常造成的畸形与巴氏 小体的研究联系起来。小体的研究联系起来。l1971197
4、1年年Barr bodyBarr body被命名为被命名为x x染色质染色质。 食管癌病人巴氏小体出现率低于食管癌病人巴氏小体出现率低于1010； 正常人细胞出现率为正常人细胞出现率为20204545。l一一 实验目的实验目的l二二 实验原理实验原理 （掌握）（掌握）l三三 实验材料实验材料l四四 实验仪器及用具实验仪器及用具l五五 药品和试剂药品和试剂l六六 实验步骤实验步骤 （理解）（理解）l七七 作业作业 1 1 通过实验学会巴氏小体检查方法，掌握观察与通过实验学会巴氏小体检查方法，掌握观察与鉴别鉴别X X染色质的简易方法；染色质的简易方法； 2 2 了解人类男女性别性染色体的功能差异；
5、并为了解人类男女性别性染色体的功能差异；并为了解人体染色体的畸变与疾病提供参考条件了解人体染色体的畸变与疾病提供参考条件. . 胚胎发育早期未分化的性腺是中性的。胚胎发育早期未分化的性腺是中性的。性性 腺腺外部皮质外部皮质内部髓质内部髓质发育为雄性生发育为雄性生殖腺（睾丸）殖腺（睾丸）XYXY染色体染色体发育为雌性生发育为雌性生殖腺（卵巢）殖腺（卵巢）XXXX染色体染色体XXYXXY型染色体，皮质、髓质同时发育。型染色体，皮质、髓质同时发育。二、实验原理二、实验原理 哺乳动物的雌性细胞有两条哺乳动物的雌性细胞有两条X X染色体，其中一条染色体，其中一条来自母方，另一条来自父方，在胚胎发育的早期
6、（来自母方，另一条来自父方，在胚胎发育的早期（1616天），这两条天），这两条X X染色体中的一条染色体中的一条随机随机浓缩形成巴氏小体，浓缩形成巴氏小体，（袋鼠例外：总是来自父方的袋鼠例外：总是来自父方的x x染色体失活）。染色体失活）。雌雌性哺乳动性哺乳动物的体细胞物的体细胞雄雄性哺乳动性哺乳动物的体细胞物的体细胞一个巴氏小体一个巴氏小体一条能转录的一条能转录的X X染色体染色体一条能转录的一条能转录的X X染色体染色体一条能转录的一条能转录的Y Y染色体染色体l从从X X、Y Y染色体自身的特点来考虑染色体自身的特点来考虑基因的剂量补偿效应基因的剂量补偿效应【重点【重点】l 雌性雌性xx
7、xx两条染色体上基因两条染色体上基因剂量有剂量有2 2份，失活份，失活1 1份，使份，使x x连连锁性状的表现在雌雄个体间无锁性状的表现在雌雄个体间无差异。差异。l 在失活的在失活的x x染色体上染色体上x x染色染色质并不缺失，其上的质并不缺失，其上的某些基因某些基因如如xgxg血型基因、类固醇硫酸酯血型基因、类固醇硫酸酯基因并不失活。基因并不失活。理论解释理论解释1)1)雌性动物体细胞雌性动物体细胞X X染色体只有一条是有活性个的，那染色体只有一条是有活性个的，那么雌雄个体么雌雄个体X X染色体上的基因效果相当染色体上的基因效果相当2)2)X X染色体的失活是随机的，即雌性动物的染色体角度
8、染色体的失活是随机的，即雌性动物的染色体角度看是嵌合体看是嵌合体3)3)失活发生在胚胎发育的早期，已失活细胞分裂产生失活发生在胚胎发育的早期，已失活细胞分裂产生的细胞群遗传结构相同。的细胞群遗传结构相同。4)4)雌性动物伴性基因的作用产生嵌合体雌性动物伴性基因的作用产生嵌合体性染色体模式性染色体模式【了解【了解】临床意义在于：临床意义在于： 1 1 胎儿性别鉴定胎儿性别鉴定：从胎儿羊水中取得脱落的细：从胎儿羊水中取得脱落的细 胞检查，如有巴氏小体，胎儿为女性，如果胞检查，如有巴氏小体，胎儿为女性，如果 细胞中无巴氏小体，胎儿为男性。细胞中无巴氏小体，胎儿为男性。 2 2 成人性别鉴定成人性别鉴
9、定：变性男运动员参加女子项目，可通：变性男运动员参加女子项目，可通 过检查其白细胞中有无巴氏小体而确定其性别。过检查其白细胞中有无巴氏小体而确定其性别。 3 3 性别畸形的判断性别畸形的判断：是否缺失或者多出巴氏小体。：是否缺失或者多出巴氏小体。 巴氏小体的巴氏小体的临床意义临床意义有哪些有哪些？三、实验材料三、实验材料 男、女性口腔颊部粘膜细胞。男、女性口腔颊部粘膜细胞。四、实验仪器及用具四、实验仪器及用具 显微镜、载玻片、盖玻片、牙签，离心管显微镜、载玻片、盖玻片、牙签，离心管五、药品和试剂五、药品和试剂 GiemsaGiemsa染液，固定液，染液，固定液， 5 mol/L HCl5 mo
10、l/L HCl，低渗液，低渗液（一）直接涂片法：（一）直接涂片法：（每组（每组2-32-3张女生口腔细胞涂片张女生口腔细胞涂片,1,1张男生口腔细胞涂片。）张男生口腔细胞涂片。）1 1 涂片涂片：受检者用自来水漱口，用牙签轻轻刮取口腔上皮细胞（腮：受检者用自来水漱口，用牙签轻轻刮取口腔上皮细胞（腮 帮子处），将刮取物帮子处），将刮取物均匀涂布均匀涂布于载玻片上，于载玻片上，晾干晾干。2 2 固定固定：将涂片放入：将涂片放入9595的乙醇中固定的乙醇中固定30 min30 min，取出，取出晾干晾干。3 3 水解水解：将涂片放入：将涂片放入5 mol HCl5 mol HCl中室温下水解中室温下
11、水解10min10min，自来水缓缓，自来水缓缓冲冲 洗洗。4 4 染色染色：用用GimsaGimsa染液染色染液染色8-108-10分钟，勿干燥，用水分钟，勿干燥，用水冲洗冲洗后晾干镜检。后晾干镜检。5 5 镜检镜检：从低倍镜到高倍镜依次观察。：从低倍镜到高倍镜依次观察。红色字体为注意事项！红色字体为注意事项！红色字体为注意事项！红色字体为注意事项！漱漱 口口刮取刮取涂布涂布固定固定晾干晾干取样步骤取样步骤（二）滴片法：（二）滴片法：l1 1取材：取材：受检者用自来水漱口，用牙签轻轻刮取口腔上受检者用自来水漱口，用牙签轻轻刮取口腔上l 皮细胞，将刮取物涮于装有皮细胞，将刮取物涮于装有1ml1
12、ml生理盐水的离心生理盐水的离心l 管中。管中。l2 2离心：离心：离心离心1010分钟（分钟（50005000转转/ /分），弃上清液。分），弃上清液。l3 3低渗：低渗：加加1ml1ml低渗液混匀，低渗液混匀，3737度度低渗低渗6 6分钟，离心分钟，离心1010分分l 钟，弃上清液。钟，弃上清液。l4 4固定：固定：加固定液加固定液9595的乙醇的乙醇1ml1ml，室温固定，室温固定1010分钟，离心，分钟，离心，l 弃上清。弃上清。l5 5滴片：滴片：加加200ul200ul固定液与沉淀物混成固定液与沉淀物混成细胞悬液细胞悬液，用滴管，用滴管l 吸取细胞悬液，滴于洁净载玻片上，吸取细胞
13、悬液，滴于洁净载玻片上，晾干晾干。l6 6水解：水解：5mol HCl5mol HCl水解水解1010分钟。自来水冲洗。分钟。自来水冲洗。l7 7染色：染色：GiemsaGiemsa染色染色8 8分钟，冲去染液，干后镜检。分钟，冲去染液，干后镜检。l直接涂片法直接涂片法操作简单，但口腔上皮细胞不易操作简单，但口腔上皮细胞不易分散，细胞常重叠，而且标本上涂大量细胞分散，细胞常重叠，而且标本上涂大量细胞才能满足计数的需要。才能满足计数的需要。l滴片法滴片法稍繁琐，离心收集细胞较难，但细胞稍繁琐，离心收集细胞较难，但细胞分散均匀，细胞经低渗后核膜膨胀，巴氏小分散均匀，细胞经低渗后核膜膨胀，巴氏小体增大，利于辨认。体增大，利于辨认。两种方法的比较两种方法的比较七、作业：七、作业：1.1.分别观察分别观察5050个男、女性可数的细胞，计算各个男、女性可数的细胞，计算各自的巴氏小体细胞所占的百分比。自的巴氏小体细胞所占的百分比。2.2.在观察中画出在观察中画出2 23 3个典型细胞，标明巴氏小体个典型细胞，标明巴氏小体的部位。的部位。思考题：思考题：1 1 男性没有巴氏小体的理论基础。男性没有巴氏小体的理论基础。2 2 男变女的变性手术后，该女性有无巴氏小体？男变女的变性手术后，该女性有无巴氏小体？3 3 性别畸形的染色体模式可能有几种？性别畸形的染色体模式可能有几种？
