1、人民卫生出版社人民卫生出版社第三十章第三十章免疫学检验的质量控制免疫学检验的质量控制人民卫生出版社人民卫生出版社1. 掌握免疫学检验质量控制的相关概念。掌握免疫学检验质量控制的相关概念。2. 掌握标准品的分类及基本条件。掌握标准品的分类及基本条件。3. 掌握定量、半定量和定性免疫检验的方法类型掌握定量、半定量和定性免疫检验的方法类型4. 熟悉室间质量评价的方式、评分及意义。熟悉室间质量评价的方式、评分及意义。5. 学会常用的免疫学质控图类型、结果判断及失控学会常用的免疫学质控图类型、结果判断及失控的处理程序。的处理程序。6. 熟练实验室确定人群中熟练实验室确定人群中Cutoff值的主要方法值的
2、主要方法本章要点本章要点人民卫生出版社人民卫生出版社返回总目录返回总目录目录目录 免疫学检验质量控制的概念免疫学检验质量控制的概念1免疫检验质量控制的特殊性免疫检验质量控制的特殊性2免疫学实验常用评价指标免疫学实验常用评价指标3室内质量控制室内质量控制 4室间质量评价室间质量评价5实验室质量控制数据的管理和信息系统实验室质量控制数据的管理和信息系统6人民卫生出版社人民卫生出版社 免疫学检验是临床检验中一大类重要的常规检查免疫学检验是临床检验中一大类重要的常规检查, ,对疾病的诊断、筛查、监测疾病的发展过程和观对疾病的诊断、筛查、监测疾病的发展过程和观察患者对治疗的反应等方面发挥着重要的作用。察
3、患者对治疗的反应等方面发挥着重要的作用。 如何保证检验结果的质量，在日常检测中如何贯如何保证检验结果的质量，在日常检测中如何贯彻实施质量保证是免疫学检验的一个重要内容。彻实施质量保证是免疫学检验的一个重要内容。 前前 言言人民卫生出版社人民卫生出版社第一节第一节 免疫学检验质量控制的概念免疫学检验质量控制的概念 免疫检验要保证检验结果的准确、可靠、及时、免疫检验要保证检验结果的准确、可靠、及时、有效，并尽可能使各实验室间检验结果有可比性，有效，并尽可能使各实验室间检验结果有可比性，这是免疫学检验质量控制的基本目的。这是免疫学检验质量控制的基本目的。 只有明确免疫学检验质量控制的有关概念，才能只
4、有明确免疫学检验质量控制的有关概念，才能真正理解免疫检验的质量控制，有助于准确、有真正理解免疫检验的质量控制，有助于准确、有效地完成质量控制工作。效地完成质量控制工作。 人民卫生出版社人民卫生出版社一、基本概念一、基本概念 准确度（准确度（accuracy） 待测物的测定值与其真值的一致性程度。待测物的测定值与其真值的一致性程度。 精密度（精密度（precision） 一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。性程度。 准确度好的实验，其精密度不一定好，反之亦然准确度好的实验，其精密度不一定好，反之亦然人民卫生出版社人民卫生出版社准确度好的实验
5、，其精密度不一定好；准确度好的实验，其精密度不一定好；准确度差的实验，其精密度则不一定差；反之亦然。准确度差的实验，其精密度则不一定差；反之亦然。 测定的精密度与准确度之间的关系测定的精密度与准确度之间的关系人民卫生出版社人民卫生出版社 偏倚（偏倚（biasbias） 待测物的测定值与可接受参考值之间的差异。可待测物的测定值与可接受参考值之间的差异。可分为批内偏倚和批间偏倚，计算公式如下：分为批内偏倚和批间偏倚，计算公式如下： 均值（均值（meanmean） 一组测定值中所有值的平均值。计算公式如下：一组测定值中所有值的平均值。计算公式如下： nxxi）均值（人民卫生出版社人民卫生出版社 标准
6、差（标准差（standard deviationstandard deviation，SDSD或或S S） 又称标准偏差，用来表示一组测定数据的分布情又称标准偏差，用来表示一组测定数据的分布情况，即离散度。它是反映一组数据的精密度和离况，即离散度。它是反映一组数据的精密度和离散程度的最主要指标。其计算公式如下散程度的最主要指标。其计算公式如下：数据的数据的分布情况。分布情况。 222)(1111)(iiixnxnSDnxxSD或人民卫生出版社人民卫生出版社 变异系数（变异系数（coefficient of variationcoefficient of variation，CVCV） 标准差与
7、平均值之比用百分比来表示，即为变异系标准差与平均值之比用百分比来表示，即为变异系数。数。CVCV是相对比，没有单位，更便于资料间的分析比是相对比，没有单位，更便于资料间的分析比较。较。 %100 xSDCV人民卫生出版社人民卫生出版社 误差（误差（errorerror） 待测物的测定值与客观存在的真值之间的差异。误待测物的测定值与客观存在的真值之间的差异。误差包括系统误差和随机误差。差包括系统误差和随机误差。 系统误差是实验过程中产生的误差，它的值恒定不变系统误差是实验过程中产生的误差，它的值恒定不变或遵循一定的变化规律，通常是由仪器、方法以及操或遵循一定的变化规律，通常是由仪器、方法以及操作
8、人员等因素引起。作人员等因素引起。 随机误差则是一类不恒定的，随机变化的误差，主要随机误差则是一类不恒定的，随机变化的误差，主要是由实验人员的操作等随机因素所致，该误差的出现是由实验人员的操作等随机因素所致，该误差的出现难以完全避免和控制。难以完全避免和控制。人民卫生出版社人民卫生出版社 重复性条件（重复性条件（repeatability conditionsrepeatability conditions） 在短的间隔时间内在短的间隔时间内, ,在同一实验室对相同的测定在同一实验室对相同的测定项目使用同一仪器设备，由相同的操作者获得相互项目使用同一仪器设备，由相同的操作者获得相互独立的测定结
9、果的条件。独立的测定结果的条件。 批（批（runrun） 在相同条件下所获得的一组测定。在相同条件下所获得的一组测定。人民卫生出版社人民卫生出版社 正态分布正态分布(gaussian distribution) (gaussian distribution) 又称高斯分布，指当一质控物用同一方法在不同又称高斯分布，指当一质控物用同一方法在不同的时间重复多次测定，当测定数据足够多时，以的时间重复多次测定，当测定数据足够多时，以横轴表示测定值，纵轴表示在大量测定中相应测横轴表示测定值，纵轴表示在大量测定中相应测定值的个数，则可得到一个两头低，中间高，中定值的个数，则可得到一个两头低，中间高，中为所
10、有测定值的均值，左右对称的为所有测定值的均值，左右对称的“钟形钟形”曲线曲线，亦即正态分布。，亦即正态分布。 正态分布的基本统计学含义正态分布的基本统计学含义 可用均数（可用均数（ ）、标准差（）、标准差（s s）和概率来说明，）和概率来说明，均数是位于曲线的正中线所对应的值。均数是位于曲线的正中线所对应的值。 X人民卫生出版社人民卫生出版社l正态分布正态分布是质量控制图的理论依据，也是许多统是质量控制图的理论依据，也是许多统计方法的理论基础，正常情况下测量（或实验）计方法的理论基础，正常情况下测量（或实验）误差服从正态分布。误差服从正态分布。 人民卫生出版社人民卫生出版社 二、质量保证的有关
11、概念二、质量保证的有关概念 质量保证（质量保证（quality assurancequality assurance，QAQA） 致力于为某一产品或服务满足特定的质量致力于为某一产品或服务满足特定的质量要求，提供充分可信性所要求的有计划和系要求，提供充分可信性所要求的有计划和系统的措施。统的措施。 人民卫生出版社人民卫生出版社 最佳变异条件最佳变异条件(optimal conditions variance，OCV) 是指在仪器、试剂和实验操作者等可能影响实验是指在仪器、试剂和实验操作者等可能影响实验结果的因素均处于最佳时，连续测定同一浓度同结果的因素均处于最佳时，连续测定同一浓度同一批号质控
12、物一批号质控物2020批次以上，即可得到一组质控数批次以上，即可得到一组质控数据，经计算可得到其均值据，经计算可得到其均值( )( )、标准差、标准差(s)(s)和变异和变异系数（系数（CVCV），此），此CVCV即为即为OCVOCV。X人民卫生出版社人民卫生出版社常规条件变异常规条件变异(routine conditions variance(routine conditions variance，RCV)RCV) 是指在仪器、试剂和实验操作者等可能影响实验结是指在仪器、试剂和实验操作者等可能影响实验结果的因素均处于通常的实验条件下时，连续测定同一果的因素均处于通常的实验条件下时，连续测定同
13、一浓度同一批号质控物浓度同一批号质控物2020批次以上，即可得到一组质控批次以上，即可得到一组质控数据，经计算可得到其均值数据，经计算可得到其均值( )( )、标准差、标准差(s)(s)和变异系和变异系数（数（CVCV），此批间），此批间CVCV即为即为RCVRCV。X人民卫生出版社人民卫生出版社 质控品（质控品（quality testing materislsquality testing materisls） 又称质控物，是指含量已知并处于与实际标本相同又称质控物，是指含量已知并处于与实际标本相同的基质当中特性明确的物质，这种物质通常与其他的基质当中特性明确的物质，这种物质通常与其他杂质
14、混在一起，故质控品必须按患者标本一样对待杂质混在一起，故质控品必须按患者标本一样对待进行检测。进行检测。 1、室内质控品：、室内质控品：用于临床实验室标本检测误差的控制用于临床实验室标本检测误差的控制 2、室间质评样本：、室间质评样本： 评价实验室常规测定的准确度评价实验室常规测定的准确度 3、质控血清盘：、质控血清盘：用于特定的定性免疫测定试剂盒的评价用于特定的定性免疫测定试剂盒的评价人民卫生出版社人民卫生出版社第二节第二节 免疫检验质量控制的特殊性免疫检验质量控制的特殊性 免疫学检验方法的种类较多，其测定方法的灵敏免疫学检验方法的种类较多，其测定方法的灵敏度和特异性要比生化方法高得多，因此
15、进行质量度和特异性要比生化方法高得多，因此进行质量控制的手段不能照搬生化模式。控制的手段不能照搬生化模式。 免疫检验质量控制包括定量、半定量和定性免疫免疫检验质量控制包括定量、半定量和定性免疫检验三种类型。检验三种类型。 人民卫生出版社人民卫生出版社 标准品（标准品（standardstandard） 指含量明确的处于一定基质中其特性明确的物质，指含量明确的处于一定基质中其特性明确的物质，通常用于比较检测未知的物质或成分。通常用于比较检测未知的物质或成分。 标准品质量的优劣标准品质量的优劣 直接影响样品的测定结果。直接影响样品的测定结果。一、标准品一、标准品 （一）标准品的概念和分类（一）标准
16、品的概念和分类 人民卫生出版社人民卫生出版社 根据标准品性质的差异，可分为三级：根据标准品性质的差异，可分为三级： 一级标准品一级标准品二级标准品二级标准品 三级标准品三级标准品 为冻干品，内含为冻干品，内含载体蛋白，数量载体蛋白，数量有限，可使用有限，可使用10102020年。通常年。通常为国际标准品，为国际标准品，由由WHOWHO指定的实指定的实验室制备验室制备 即国家标准品，即国家标准品，是由国家的有关是由国家的有关权威机构制备，权威机构制备，供国家内部使用，供国家内部使用，其效价单位与国其效价单位与国际标准品一致际标准品一致 由二级标准品的由二级标准品的比对而来的，通比对而来的，通常由
17、实验室自己常由实验室自己或试剂生产厂家或试剂生产厂家制备。制备。 人民卫生出版社人民卫生出版社标准品标准品 IU / IU / 支支 建立的年份建立的年份 Mg / IU Mg / IU 类风湿关节炎血清类风湿关节炎血清 100 100 1965 1965 0.1710 0.1710 抗核抗体血清抗核抗体血清 ( ( 均质型均质型 ) ) 100 100 1970 1970 0.1860 0.1860 人血清人血清 IgG IgG 、 IgA IgA 、 IgM IgM 100 100 1970 1970 0.1847 0.1847 人血清人血清 IgD IgD 100 100 1971 19
18、71 0.8100 0.8100 人血清人血清 IgE IgE 11500 11500 1973 1973 0.06562 0.06562 人人 AFP AFP 100000 100000 1975 1975 0.001399 0.001399 人人 CEA CEA 100 100 1975 1975 0.0236 0.0236 FITC FITC 绵羊抗人绵羊抗人 Ig Ig 100 100 1976 1976 0.0594 0.0594 FITC FITC 绵羊抗人绵羊抗人 IgM IgM 链链 100 100 1978 1978 0.0447 0.0447 血清蛋白血清蛋白( (白蛋白、
19、白蛋白、 1- 1-抗胰蛋白酶、抗胰蛋白酶、 C3 C3 铜蓝蛋白、转铁蛋铜蓝蛋白、转铁蛋白白) ) 100 100 1978 1978 1.1140 1.1140 人补体成分人补体成分 (C4 (C4 、 C5 C5 、 Clq Clq 、 B B 因子因子 ) ) 100 100 1980 1980 1.1070 1.1070 FITC FITC 绵羊抗人绵羊抗人 IgG IgG 链链 100 100 1981 1981 0.0923 0.0923 过氧化物酶标记绵羊抗人过氧化物酶标记绵羊抗人 Ig Ig 100 100 1982 1982 0.0316 0.0316 抗抗 RNP RNP
20、 抗体抗体 - - 1983 1983 - - 平滑肌抗体平滑肌抗体 - - 1983 1983 - - 线粒体抗体线粒体抗体 - - 1983 1983 - -免疫学检验质控常用国际标准品免疫学检验质控常用国际标准品人民卫生出版社人民卫生出版社（二）理想标准品的基本条件（二）理想标准品的基本条件 在规定保存条件下具有良好的稳定性在规定保存条件下具有良好的稳定性通常为含蛋白质的缓冲液，对测定结通常为含蛋白质的缓冲液，对测定结果无明显影响。果无明显影响。 无已知传染危险性，对已知的血液传无已知传染危险性，对已知的血液传播病原体必须做灭活处理。播病原体必须做灭活处理。标准品浓度在方法的测定范围即可
21、。标准品浓度在方法的测定范围即可。标准品浓度在方法的测定范围即可。标准品浓度在方法的测定范围即可。人民卫生出版社人民卫生出版社 定量免疫检验通常需要使用全自动免疫分析仪，定量免疫检验通常需要使用全自动免疫分析仪，在测定时须用校准品对仪器进行校准。在测定时须用校准品对仪器进行校准。 室内质控则应选择特定试剂盒或方法的测定范围室内质控则应选择特定试剂盒或方法的测定范围内的高、中和低三种浓度的质控品，内的高、中和低三种浓度的质控品， 以监测不同以监测不同浓度标本测定结果的变化。浓度标本测定结果的变化。 二、定量、半定量和定性免疫检验二、定量、半定量和定性免疫检验（一）定量免疫检验（一）定量免疫检验
22、人民卫生出版社人民卫生出版社 半定量实验在免疫检验中比较少用，此类实验主半定量实验在免疫检验中比较少用，此类实验主要有酶免疫试验、荧光免疫试验等，测定结果通要有酶免疫试验、荧光免疫试验等，测定结果通常以抗体的滴度、效价等表示。常以抗体的滴度、效价等表示。 半定量免疫检验质控要点在于在有阴性质控的前半定量免疫检验质控要点在于在有阴性质控的前提下，采用多个相应滴度或效价的抗体作为室内提下，采用多个相应滴度或效价的抗体作为室内质控品，与临床标本同时测定。质控品，与临床标本同时测定。（二）半定量免疫检验（二）半定量免疫检验 人民卫生出版社人民卫生出版社 定性免疫检验是免疫学检验的重点，其测定方法有很多
23、，定性免疫检验是免疫学检验的重点，其测定方法有很多，常以常以“有有”或或“无无”也即也即“阳性阳性”或或“阴性阴性”来表达测定来表达测定结果。结果。 定性测定的室内质控要点是控制测定下限，设置临界定性测定的室内质控要点是控制测定下限，设置临界cutoffcutoff值（值（COCO值）的低值弱阳性质控物是定性室内质控的值）的低值弱阳性质控物是定性室内质控的关键。关键。 应选择靶抗原或抗体浓度接近试剂盒或方法的测定下限的应选择靶抗原或抗体浓度接近试剂盒或方法的测定下限的质控品进行室内质量控制，并与临床标本的测定同时进行，质控品进行室内质量控制，并与临床标本的测定同时进行，这一点对于使用肉眼判定测
24、定结果的方法尤为重要这一点对于使用肉眼判定测定结果的方法尤为重要（三）定性实验（三）定性实验 人民卫生出版社人民卫生出版社 三、检测试剂的批间差异三、检测试剂的批间差异 利用可靠的定值血清对购入的试剂盒进行性能利用可靠的定值血清对购入的试剂盒进行性能检测和批间差异评价，只有质量符合实验质量检测和批间差异评价，只有质量符合实验质量要求的试剂盒方可用于临床实际检测工作。要求的试剂盒方可用于临床实际检测工作。人民卫生出版社人民卫生出版社 引起试剂盒批间变异原因是多方面的：引起试剂盒批间变异原因是多方面的： 1、试剂盒的原材料是依靠生物工程技术生产的，试剂盒的原材料是依靠生物工程技术生产的， 生产技术
25、生产技术要求难度大，工艺提纯方法不好掌握，要求难度大，工艺提纯方法不好掌握， 质量控制要求较高，质量控制要求较高，产品质量不易稳定，使每批原材料的纯度和活性都有所差别；产品质量不易稳定，使每批原材料的纯度和活性都有所差别； 2、用不同的提纯方法及不同批号的抗原或抗体所制备的试用不同的提纯方法及不同批号的抗原或抗体所制备的试剂质量不一样；剂质量不一样； 3、同一批号的原料，同一批号的原料， 不同组装工艺，不同组装工艺， 其结果也不尽一样；其结果也不尽一样； 4、组装工艺相同，组装工艺相同， 质量标准控制稍有欠缺，质量标准控制稍有欠缺， 其结果也会有其结果也会有所差异所差异。人民卫生出版社人民卫生
26、出版社 质量控制质量控制要求较高要求较高 每批原材每批原材料的纯度料的纯度和活性都和活性都有所差别有所差别 引起试剂引起试剂盒批间变盒批间变异原因是异原因是多方面的多方面的 提纯方法提纯方法不好掌握不好掌握产品质量产品质量不易稳定不易稳定 人民卫生出版社人民卫生出版社 四、检测试剂的稳定性四、检测试剂的稳定性 稳定性是体外检测诊断试剂随时间推移保持特性稳定性是体外检测诊断试剂随时间推移保持特性一致性的能力，是试剂必须具有的基本属性，是一致性的能力，是试剂必须具有的基本属性，是确保体外检测诊断试剂使用过程中安全有效的重确保体外检测诊断试剂使用过程中安全有效的重要指标。要指标。 检测试剂的稳定性研
27、究的类型一般分为保存期稳检测试剂的稳定性研究的类型一般分为保存期稳定性研究、使用期稳定性研究及运输模拟研究。定性研究、使用期稳定性研究及运输模拟研究。人民卫生出版社人民卫生出版社 保存期稳定性研究主要用于确定体外诊断试剂在规保存期稳定性研究主要用于确定体外诊断试剂在规定的保存条件下最终包装内的有效期，一般至少使定的保存条件下最终包装内的有效期，一般至少使用用3 3批产品建立保存期要求。批产品建立保存期要求。 使用期稳定性研究是指产品投入使用后产品保持活使用期稳定性研究是指产品投入使用后产品保持活性的时间段，可以使用单一产品批号建立此类保存性的时间段，可以使用单一产品批号建立此类保存期要求。期要
28、求。人民卫生出版社人民卫生出版社 运输模拟研究是将样本暴露于预先设定的改变的环境条件下运输模拟研究是将样本暴露于预先设定的改变的环境条件下用于模拟产品在到达消费者前的过程中所能忍受的最坏的环用于模拟产品在到达消费者前的过程中所能忍受的最坏的环境条件，此研究结果用于确定检测试剂最适宜的运输和保存境条件，此研究结果用于确定检测试剂最适宜的运输和保存条件，要求检测试剂至少有条件，要求检测试剂至少有1 1个产品批号通过这种测试。个产品批号通过这种测试。 目前欧盟有关体外检测诊断试剂的法规规定：目前欧盟有关体外检测诊断试剂的法规规定： 对于长期稳定性研究，应采用对于长期稳定性研究，应采用3 3个批次产品
29、；个批次产品； 对于模拟运输条件下的稳定性研究，可采用对于模拟运输条件下的稳定性研究，可采用1 1个批次产品；个批次产品； 对于延长保存期限的稳定性研究，应采用对于延长保存期限的稳定性研究，应采用3 3个批次产品；个批次产品； 对于可能影响稳定性的变更，可采用对于可能影响稳定性的变更，可采用1 1个批次的产品。个批次的产品。人民卫生出版社人民卫生出版社 由于所用的仪器种类繁多，试剂盒品牌不一，由于所用的仪器种类繁多，试剂盒品牌不一，实验室工作人员业务能力的差异等，造成不同实验室工作人员业务能力的差异等，造成不同实验室间的测定结果差异较大。实验室间的测定结果差异较大。 人民卫生出版社人民卫生出版
30、社 临床免疫检验试剂盒保质期一般为临床免疫检验试剂盒保质期一般为6 6个月以上，有个月以上，有些检验机构为了节约成本，分数次使用试剂盒，势些检验机构为了节约成本，分数次使用试剂盒，势必会使酶标抗原处于溶解状态，影响试验结果。必会使酶标抗原处于溶解状态，影响试验结果。 试剂盒抗体储存容器应由不吸附蛋白质的材料制成试剂盒抗体储存容器应由不吸附蛋白质的材料制成 抗体浓度越高（浓度大于抗体浓度越高（浓度大于10mg/ml10mg/ml），越稳定，易），越稳定，易保存；浓度低时，应加保存；浓度低时，应加0.1%0.1%1.5%1.5%的牛血清白蛋白的牛血清白蛋白作保护剂。作保护剂。 酶标记抗体在应用防腐
31、剂时要注意不能用酶标记抗体在应用防腐剂时要注意不能用NaNNaN3 3。 抗体浓缩液应在抗体浓缩液应在-20-20保存，避免反复冻融。保存，避免反复冻融。 人民卫生出版社人民卫生出版社35第三节第三节 免疫学实验常用评价指标免疫学实验常用评价指标 临床上实验室免疫学检验的方法越来越多，如何临床上实验室免疫学检验的方法越来越多，如何对各种免疫学实验的进行对比，以评价各种检测对各种免疫学实验的进行对比，以评价各种检测方法的优劣，这需要通过一些有效的评价指标来方法的优劣，这需要通过一些有效的评价指标来鉴定。鉴定。 人民卫生出版社人民卫生出版社 诊断敏感性（诊断敏感性（sensitivity of d
32、iagnosissensitivity of diagnosis） 是指将实际患病者正确判断为真阳性的百分率是指将实际患病者正确判断为真阳性的百分率，该指标值越大，则漏检的可能性愈小。，该指标值越大，则漏检的可能性愈小。 一、诊断敏感性、特异性和正确诊断指数一、诊断敏感性、特异性和正确诊断指数 %100FNTPTP诊断敏感性 本指标本指标可用于评价测定方法的临床应用价值，理可用于评价测定方法的临床应用价值，理想测定方法的诊断敏感性为想测定方法的诊断敏感性为100%100%。 人民卫生出版社人民卫生出版社 诊断特异性（诊断特异性（specificity of diagnosisspecifici
33、ty of diagnosis） 是指将实际无病者正确判断为真阴性的百分率，是指将实际无病者正确判断为真阴性的百分率，该指标值越大，则误诊的可能性越小。该指标值越大，则误诊的可能性越小。 %100FPTNTN诊断特异性 本指标本指标是用于评价测定方法的临床应用价值，理是用于评价测定方法的临床应用价值，理想测定方法的诊断特异性应为想测定方法的诊断特异性应为100%100%。 人民卫生出版社人民卫生出版社 正确诊断指数（正确诊断指数（Youden indexYouden index） 又称约登指数，是指比较两个试验方法时，单独又称约登指数，是指比较两个试验方法时，单独使用灵敏性或特异性，可能会出现
34、一个实验方法使用灵敏性或特异性，可能会出现一个实验方法的灵敏度高、特异性低；另一个试验方法的灵敏的灵敏度高、特异性低；另一个试验方法的灵敏度低、特异性高，从而提出灵敏性和特异性之和度低、特异性高，从而提出灵敏性和特异性之和减去减去1 1，大小范围从，大小范围从0 0到到1 1 正确诊断指数愈大，实验的真实性亦愈好正确诊断指数愈大，实验的真实性亦愈好 理想实验方法的正确诊断指数为理想实验方法的正确诊断指数为1 1。 人民卫生出版社人民卫生出版社 诊断效率诊断效率 （efficiency of diagnosisefficiency of diagnosis） 诊断效率是指能准确区分患者和非患者的
35、能力。理想测定诊断效率是指能准确区分患者和非患者的能力。理想测定方法的诊断效率应为方法的诊断效率应为100%100%。其计算公式为：。其计算公式为：%100FNTNFPTPTNTP诊断效率人民卫生出版社人民卫生出版社 阳性预测值（阳性预测值（positive predictive value, positive predictive value, PPVPPV） 指特定试验方法测定得到的阳性结果中真阳性的比率。理指特定试验方法测定得到的阳性结果中真阳性的比率。理想测定方法的阳性预测值应为想测定方法的阳性预测值应为100%100%，亦即没有假阳性。，亦即没有假阳性。 阴性预示值（阴性预示值（ne
36、gative predictive value, negative predictive value, NPVNPV） 指特定试验方法测定得到的阴性结果中真阴性的比率。理指特定试验方法测定得到的阴性结果中真阴性的比率。理想测定方法的阴性预示值应为想测定方法的阴性预示值应为100%100%，亦即没有假阴性。，亦即没有假阴性。人民卫生出版社人民卫生出版社 CutoffCutoff值值即临界值，是指被检测分析物的量值，用于确定结即临界值，是指被检测分析物的量值，用于确定结果高于还是低于临床或分析的决断点。对于大多数免疫分析果高于还是低于临床或分析的决断点。对于大多数免疫分析来说，来自感染和非感染人群
37、的标本之间有一个检测结果的来说，来自感染和非感染人群的标本之间有一个检测结果的重叠区，这就说明一个实验方法一般不大可能有重叠区，这就说明一个实验方法一般不大可能有100%完全完全的敏感性、特异性或预测值。因此，在选则的敏感性、特异性或预测值。因此，在选则Cutoff 值和报告值和报告检测结果时应该考虑哪个评价指标更重要检测结果时应该考虑哪个评价指标更重要 。 选择选择CutoffCutoff值和报告检测结果值和报告检测结果时应该考虑敏感性和特异性哪时应该考虑敏感性和特异性哪个更重要。个更重要。 理想的理想的CutoffCutoff值值是实验室自己在的人群中确定。是实验室自己在的人群中确定。 二
38、、二、CutoffCutoff值值人民卫生出版社人民卫生出版社 大多数免疫分析大多数免疫分析，来自感染和非感染人群的标本，来自感染和非感染人群的标本之间有一个检测结果的重叠区，即之间有一个检测结果的重叠区，即“灰区灰区” 人民卫生出版社人民卫生出版社 通过阴性血清测定结果均值通过阴性血清测定结果均值: 使用阴性血清测定结果均值的使用阴性血清测定结果均值的2 2或或3 3倍作倍作为阳性判断值。为阳性判断值。 使用正常人血清样本的均值和标准差使用正常人血清样本的均值和标准差: 测定大量正常人血清样本，然测定大量正常人血清样本，然后将所得到的吸光度均值增加后将所得到的吸光度均值增加2 2或或3 3个
39、个SDSD作为阳性判断值。作为阳性判断值。 通过大量正常人血清样本和阳性血清样本通过大量正常人血清样本和阳性血清样本: 在测定大量正常人血清样在测定大量正常人血清样本的同时，测定大量阳性血清样本，根据测定值为正态分布确定。本的同时，测定大量阳性血清样本，根据测定值为正态分布确定。 通过测定转化型血清样本通过测定转化型血清样本: 在的基础上加测转化型血清样本，取假在的基础上加测转化型血清样本，取假阳性和假阴性发生率最低，且能区别抗原转化至抗体出现点的吸光度阳性和假阴性发生率最低，且能区别抗原转化至抗体出现点的吸光度值作为阳性判断值。值作为阳性判断值。 通过通过ROC曲线曲线: ROC曲线上在患病
40、率接近曲线上在患病率接近50%时，最接近左上角的时，最接近左上角的那一点，可定为那一点，可定为Cutoff值。值。CutoffCutoff值的确定值的确定 人民卫生出版社人民卫生出版社 ROC曲线 是以灵敏度为纵坐标，假阳性率（1-特异度）为横坐标绘制所得的曲线，又称受试者操作特性曲线。 ROCROC曲线在曲线在CutoffCutoff值中的应用值中的应用人民卫生出版社人民卫生出版社 应用应用 ROCROC曲线不仅可用于不同检验方法之间的比较，曲线不仅可用于不同检验方法之间的比较，而且可用于对检验项目临床准确性的评价以及决而且可用于对检验项目临床准确性的评价以及决定正常和异常的分界点（即定正常
41、和异常的分界点（即CutoffCutoff值）。值）。 意义意义 它表示灵敏度与特异度之间的相互关系，若在患它表示灵敏度与特异度之间的相互关系，若在患病率接近病率接近50%50%时，最接近左上角的那一点，可定为时，最接近左上角的那一点，可定为CutoffCutoff值，其假阳性率和假阴性率之和最小。值，其假阳性率和假阴性率之和最小。 人民卫生出版社人民卫生出版社第四节第四节 室内质量控制室内质量控制 室内质量控制（室内质量控制（internal quality controlinternal quality control，IQCIQC）由实验室工作人员采取一定的方法和步骤，连续评由实验室工作
42、人员采取一定的方法和步骤，连续评价本实验室从收取样本至获得测定结果，并对结果价本实验室从收取样本至获得测定结果，并对结果进行分析的整个测定过程可靠性程度的措施。旨在进行分析的整个测定过程可靠性程度的措施。旨在监测和控制本室常规工作的精密度，提高本室常规监测和控制本室常规工作的精密度，提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性，以确定测定工作中批内、批间样本检验的一致性，以确定测定结果是否可靠、可否发出报告的一项工作。结果是否可靠、可否发出报告的一项工作。人民卫生出版社人民卫生出版社一、室内质量控制系统的要求一、室内质量控制系统的要求（一）确定分析方法（一）确定分析方法 可靠性可靠性 方法具有
43、良好的特异性、灵敏性、稳定性。方法具有良好的特异性、灵敏性、稳定性。 实用性实用性 检测快速、微量、技术要求不高、影检测快速、微量、技术要求不高、影响因素易控制。响因素易控制。人民卫生出版社人民卫生出版社（二）建立标准化操作及流程（二）建立标准化操作及流程 免疫测定影响因素免疫测定影响因素 试剂准备、加样、温育、洗板、显色和测定试剂准备、加样、温育、洗板、显色和测定 标准操作规程（标准操作规程（SOPSOP文件）文件） 仪器使用和维护、分析项目操作手册、仪器使用和维护、分析项目操作手册、质控品和标准品的使用、实验室工作流质控品和标准品的使用、实验室工作流程。程。人民卫生出版社人民卫生出版社（三
44、）仪器的校准和校准验证（三）仪器的校准和校准验证 仪器、试剂盒和检测系统的测试和调整仪器、试剂盒和检测系统的测试和调整 校准检测程序和靶物质之间的关系校准检测程序和靶物质之间的关系 使用校准品按照日常检测标本程序测定使用校准品按照日常检测标本程序测定 验证仪器、试剂盒及检测系统的检测结果验证仪器、试剂盒及检测系统的检测结果 日常所用的器材的校准日常所用的器材的校准 温箱、水浴箱、冰箱、微量加样器、标准滴管等温箱、水浴箱、冰箱、微量加样器、标准滴管等人民卫生出版社人民卫生出版社（四）标准品和质控品的使用（四）标准品和质控品的使用 标准品和质控品是保证质控工作的重要物质基础标准品和质控品是保证质控
45、工作的重要物质基础 建立质控标准，常规工作基础上评价检测结果的精建立质控标准，常规工作基础上评价检测结果的精密度和准确性密度和准确性 采用临界值血清，连续测定采用临界值血清，连续测定2020次，作质控图次，作质控图 人民卫生出版社人民卫生出版社（五）保证试剂质量（五）保证试剂质量 不同检测项目的试剂应严格要求使用国家药不同检测项目的试剂应严格要求使用国家药监局正式批准生产文号及卫生部监局正式批准生产文号及卫生部“批批检批批检”合格产品或同意进口的试剂盒合格产品或同意进口的试剂盒 对所有的试剂品牌、规格、批号、效期作记对所有的试剂品牌、规格、批号、效期作记录，以备质量评价。录，以备质量评价。人民
46、卫生出版社人民卫生出版社（六）实验室的环境、设施及设备（六）实验室的环境、设施及设备 充分的空间、良好的照明和空调设备充分的空间、良好的照明和空调设备 使实验室仪器设备保养良好，定期校准使实验室仪器设备保养良好，定期校准 1 1、极易出现问题的区域，如探针、洗涤区、极易出现问题的区域，如探针、洗涤区 2 2、洗板机注意加注洗液的探针孔堵塞问题及液体吸、洗板机注意加注洗液的探针孔堵塞问题及液体吸 加的有效性加的有效性 3 3、ELISAELISA测定孔的非特异性显色问题等测定孔的非特异性显色问题等人民卫生出版社人民卫生出版社二、常用的免疫学统计质控图二、常用的免疫学统计质控图（一）室内质控规则的
47、表达方式及定义（一）室内质控规则的表达方式及定义 质控规则的表达方式质控规则的表达方式 质控规则以符号质控规则以符号A AL L来表示，其中来表示，其中A A为质控测定中超出质量控制为质控测定中超出质量控制限的测定值的个数，限的测定值的个数，L L为控制限，通常为控制限，通常 用用 或或 1 13s3s来表来表示。当质控测定值超出控制限示。当质控测定值超出控制限L L时，即可将该批测定判定为失时，即可将该批测定判定为失控。例如常用的控。例如常用的l3sl3s质控规则，其中质控规则，其中l l为原式中的为原式中的A A，3s3s为原式为原式中的的中的的L L，其确切的含义为：在质控测定值中，如果
48、有一个测，其确切的含义为：在质控测定值中，如果有一个测定值超出定值超出3s3s的范围，即可将该批次判定为失控。的范围，即可将该批次判定为失控。XX人民卫生出版社人民卫生出版社 质控规则的符号及定义质控规则的符号及定义 符号符号定义定义l2s一个质控测定值超出一个质控测定值超出2s控制限时即失控控制限时即失控l3s一个质控测定值超出一个质控测定值超出3s控制限时即失控控制限时即失控22s两个连续的质控测定值同时超出两个连续的质控测定值同时超出+2s或或-2s控制限时即失控控制限时即失控R4s同一批测定中，两个不同浓度质控物的测定值之间的差值超出同一批测定中，两个不同浓度质控物的测定值之间的差值超
49、出4s控制限时即失控控制限时即失控31s三个连续的质控测定值同时超出三个连续的质控测定值同时超出+1s或或-1s控制限时即失控控制限时即失控41s四个连续的质控测定值同时超出四个连续的质控测定值同时超出+1s或或-1s控制限时即失控控制限时即失控7X七个连续的质控测定值同时处于均值七个连续的质控测定值同时处于均值的同一侧时即失控的同一侧时即失控7T七个连续的质控测定值呈现一个向上或向下的趋势变化七个连续的质控测定值呈现一个向上或向下的趋势变化时即失控时即失控8X八个连续的质控测定值同时处于均值八个连续的质控测定值同时处于均值的同一侧时即失控的同一侧时即失控9X九个连续的质控测定值同时处于均值九
50、个连续的质控测定值同时处于均值的同一侧时即失控的同一侧时即失控10X十个连续的质控测定值同时处于均值十个连续的质控测定值同时处于均值的同一侧时即失控的同一侧时即失控人民卫生出版社人民卫生出版社（二）常用质控图的选择、绘制及结果判断（二）常用质控图的选择、绘制及结果判断 Levey-JenningsLevey-Jennings质控图法质控图法 基本特点是：基本特点是： 根据均值（根据均值（ ）和标准差（）和标准差（s s）确定质控限，以确定质控限，以 2 2s s为告警限，为告警限， 3 3s s为失控限判断质控结果为失控限判断质控结果 对待质控品应如同病人标本一样同等对待，不能进行特殊处理对待
