1、疟原虫的实验室检查 制作人:临床23班 余凡 徐流凤演讲人:赵鑫实验室诊断 临床诊断:疟疾发作史,在流行区留住史 病原学诊断:血涂片形态学检查 其他诊断: 免疫诊断,DNA诊断。(查抗原、查抗体;查核酸,扩增DNA) 血常规检查实验室诊断 血常规检查RBC、Hgb 、PLT WBC 正常或稍降低单核细胞分类嗜酸性粒细胞分类以上几种表现可能同时出现或者单一出现实验室诊断 血涂片形态学检查在RBC内发现疟原虫是确诊疟疾和鉴别虫种的重要依据 采血时间:l 恶性疟:发作时、查环状体,发作数小时后因晚期滋养体寄生虫的红细胞滞留皮下脂肪及内脏微血管中,不易查见。l间日疟和三日疟:发作后10小时内,太久后原
2、虫数量要下降。实验室诊断血涂片姬氏或瑞氏染色法:取外周血制成厚、薄血膜,经吉氏或瑞氏液染色后油镜检查瑞氏Wright或姬氏Giemsa染色:核染成紫红色,胞质呈兰色,疟原虫消化血红蛋白产物-疟色素呈棕黄色疟原虫基本构造相同-细胞膜、质、核疟原虫在RBC内各期形态各不相同,各型之间也有差异血涂片的制作 厚血膜涂片:原虫变形,且红细胞已溶,鉴别有困难,但原虫集中,易发现 (确诊疟疾,有没有) 薄血膜涂片:原虫形态结构完整,清晰,可辩认原虫的种类和各发育阶段的形态特征,适用于临床诊断,但虫数较少易漏检。 (鉴别虫种,哪一种)1.循环抗原检测 可诊断现症病人和带虫者。血中有疟原虫时才能查出其抗原,一旦
3、治愈,抗原在短期内即行消失。2.循环抗体检测 适用于多次寒热发作又未查明原因者。原虫血症后1周可查出抗体,故早期无诊断价值。间接荧光抗体试验(IFA)间接荧光抗体试验(IFA)经免疫荧光染色的裂殖体 经免疫荧光染色的裂殖体 分子生物学技术 疟原虫DNA扩增和特异性探针杂交等方法敏感性高,特异性强四型人体疟原虫生活史比较 间日疟原虫间日疟原虫恶性疟原虫恶性疟原虫三日疟原虫三日疟原虫卵形疟原虫卵形疟原虫红外发育时间(速发型)天天天天红外期裂殖子数目红内期发育周期小时小时小时小时红内期发育场所周围血环状体和配子体周围血液,其余各期在皮下脂肪及内脏毛细血管周围血周围血选择红细胞类型网织红细胞成熟及未成
4、熟红细胞较衰老红细胞网织红细胞无性体与配子体出现于周围血中的相隔时间天天天天复发、再燃复发、再燃有复发和再燃无复发,有再燃无复发,有再燃有复发和再燃被寄生红细胞变化被寄生红细胞变化滋养体期开始胀大,色淡,出现薛氏点大小正常或略小,紫蓝色边缘常皱缩,常见有粗大茂氏点大小正常,有时缩小,颜色无改变,偶可见齐氏点略胀大,色淡,薛氏点较间日疟的粗大,在环状体即出现蚊体内发育时间(2527)9天天天天 本次探讨间日疟和恶性疟这本次探讨间日疟和恶性疟这两种疟原虫的形态问题两种疟原虫的形态问题小滋养体 间日疟 恶性疟约为红细胞直径的约为红细胞直径的1/3,环较粗大;,环较粗大;1个核,个核,2个核和一个个核
5、和一个红细胞寄生红细胞寄生2个环状个环状体不如恶性疟原虫多体不如恶性疟原虫多见见约为红细胞的约为红细胞的1/6;环纤细,核环纤细,核1-2个;个;一个红细胞寄生一个红细胞寄生2个个环状体的常见环状体的常见间日疟间日疟恶性疟恶性疟双核双环状体恶性疟恶性疟大滋养体(环状体) 间日疟间日疟 恶性疟恶性疟虫体不规则,较大;阿虫体不规则,较大;阿米巴样空泡明显;疟色米巴样空泡明显;疟色素细小,黄褐色素细小,黄褐色体小,圆形;空泡小;体小,圆形;空泡小;早期疟色素细小,金黄早期疟色素细小,金黄色,晚期结成块状,黄色,晚期结成块状,黄褐色褐色间日疟间日疟恶性疟恶性疟间日疟间日疟间日疟间日疟恶性疟恶性疟裂殖体
6、 间日疟 恶性疟大于正常红细胞,裂殖大于正常红细胞,裂殖子子12-24个,通常个,通常16个,排列不规则,疟色个,排列不规则,疟色素常集于一侧,黄褐色素常集于一侧,黄褐色小于正常红细胞;裂小于正常红细胞;裂殖子较小,殖子较小,826个,个,通常通常8、18个,排列个,排列不规则,疟色素成团不规则,疟色素成团块状,黑褐色块状,黑褐色间日疟间日疟间日疟间日疟间日疟间日疟恶性疟恶性疟恶性疟恶性疟雌配子体雌配子体 间日疟 恶性疟大于正常红细胞,圆形;大于正常红细胞,圆形;核小致密,深红色,核小致密,深红色,偏于一侧,胞浆深蓝色;偏于一侧,胞浆深蓝色;疟色素散在疟色素散在新月形,两端较尖;核新月形,两端
7、较尖;核小,致密,深红色,位小,致密,深红色,位于中央;胞浆深蓝色;于中央;胞浆深蓝色;疟色素块围于核周疟色素块围于核周雄配子体雄配子体 间日疟间日疟 恶性疟恶性疟大于正常红细胞,圆形;大于正常红细胞,圆形;核大,疏松,浅红色,核大,疏松,浅红色,多位于中央;胞浆浅蓝多位于中央;胞浆浅蓝色或淡红色;疟色素散色或淡红色;疟色素散在在腊肠形,两端钝圆,核腊肠形,两端钝圆,核大,疏松,淡红色,位大,疏松,淡红色,位于中央;胞浆浅蓝色或于中央;胞浆浅蓝色或浅红色;疟色素围于核浅红色;疟色素围于核周周不同型疟原虫各个时期的形态间日疟间日疟间日疟间日疟间日疟间日疟恶性疟恶性疟恶性疟恶性疟2.流行环节传染源
8、:血液中有成熟配子体的现症病人和带虫者传播媒介:按蚊(雌)易感人群:非流行区人群、儿童。3.流行因素自然因素:气候、温度、湿度 和媒介种类等。社会因素:经济、卫生条件。1. 控制传染源 及时发现,彻底治疗病人和带虫者;加强流动人口管理。2. 蚊媒防制 改善环境卫生、排除积水、用杀蚊剂灭蚊、积极采用防蚊叮措施(如避免暴露皮肤、涂抹防蚊剂、用溴氰菊酯浸泡蚊帐等)。3. 保护易感人群 对于初次进入疫区者要提前进行预防性服药;加强疫苗研究。 杀灭红外期裂子体及休眠子的抗复发药:如伯氨喹; 杀灭红细内期裂体增殖的抗临床发作药:如氯喹、咯萘啶、青蒿素; 杀灭子孢子抑制蚊体内孢子增殖的药:如乙胺嘧啶。 对现症患者的治疗:间日疟原虫感染可用氯喹加伯氨喹;恶性疟原虫感染可单服氯喹。