1、新药的临床前研究与评价新药的临床前研究与评价 Preclinical research and evaluation of new drugs 新药新药（New Drugs）指指化学结构化学结构、药品药品组成组成或药理或药理作用作用不同于不同于现有药品的药物。现有药品的药物。我国我国药品管理法药品管理法规定：规定：新药新药指指未曾未曾在在中国境内中国境内上市上市销售的药品。已生产的药品改销售的药品。已生产的药品改变剂型、改变给药途径、增加新的适应症或变剂型、改变给药途径、增加新的适应症或制成新的复方制剂的。制成新的复方制剂的。新药的分类新药的分类Classification of New Dr
2、ugsClassification of New Drugs按国家按国家新药审批办法新药审批办法规定分类规定分类:X中药（传统药中药（传统药,天然药物）天然药物）（traditional Chinese medicinetraditional Chinese medicine）X化学药品（西药、现代药）化学药品（西药、现代药）（western drugwestern drug、chemicalschemicals）X生物制品（生物制品（biologicalsbiologicals）药品注册管理办法（局令第28号）附录1新药注册分类：新药注册分类：9 9 类类1类：未在国内上市销售的从植物、动物
3、、矿物等物质中提取的有效成份及其制剂2类：新发现的药材及其制剂3类：新的中药材代用品4类：药材新的药用部位及其制剂5类：未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的有效部位及其制剂6类：未在国内上市销售的中药、天然药物复方制剂7类：改变国内已上市销售中药、天然药物给药途径的制剂8类：改变国内已上市销售中药、天然药物剂型的制剂9类：仿制药1 1类：未在国内外上市销售的药品：类：未在国内外上市销售的药品：（1 1）通过合成或者半合成的方法制得的原料药及其制剂；）通过合成或者半合成的方法制得的原料药及其制剂；（2 2）天然物质中提取或者通过发酵提取的新的有效单体及其制剂；）天然物质中提取或者通
4、过发酵提取的新的有效单体及其制剂；（3 3）用拆分或者合成等方法制得的已知药物中的光学异构体及其制剂；）用拆分或者合成等方法制得的已知药物中的光学异构体及其制剂；（4 4）由已上市销售的多组份药物制备为较少组份的药物；）由已上市销售的多组份药物制备为较少组份的药物；（5 5）新的复方制剂；）新的复方制剂；（6 6）已在国内上市销售的制剂增加国内外均未批准的新适应症。）已在国内上市销售的制剂增加国内外均未批准的新适应症。2 2类：改变给药途径且尚未在国内外上市销售的制剂。类：改变给药途径且尚未在国内外上市销售的制剂。3 3类：已在国外上市销售但尚未在国内上市销售的药品：类：已在国外上市销售但尚未
5、在国内上市销售的药品：（1 1）已在国外上市销售的制剂及其原料药，改变剂型，不改变给药途径制剂；）已在国外上市销售的制剂及其原料药，改变剂型，不改变给药途径制剂；（2 2）已在国外上市销售的复方制剂，改变剂型，不改变给药途径的制剂；）已在国外上市销售的复方制剂，改变剂型，不改变给药途径的制剂；（3 3）改变给药途径并已在国外上市销售的制剂；）改变给药途径并已在国外上市销售的制剂；（4 4）国内上市销售的制剂增加已在国外批准的新适应症。）国内上市销售的制剂增加已在国外批准的新适应症。4 4类：改变已上市销售盐类药物的酸根、碱基，但不改变其药理作用的原料药及其制剂。类：改变已上市销售盐类药物的酸根
6、、碱基，但不改变其药理作用的原料药及其制剂。5 5类：改变国内已上市销售药品的剂型，但不改变给药途径的制剂。类：改变国内已上市销售药品的剂型，但不改变给药途径的制剂。6 6类：已有国家药品标准的原料药或者制剂。类：已有国家药品标准的原料药或者制剂。新药注册分类：新药注册分类：6 6 类类药品注册管理办法（局令第28号）附录2药品注册管理办法（局令第28号）附录31类：未在国内外上市销售的生物制品2类：单克隆抗体3类：基因治疗、体细胞治疗及其制品4类：变态反应原制品5类：由人或动物组织或体液提取、或通过发酵制备的具有生物活性的多组份制品6类：由已上市销售生物制品组成新的复方制品7类：已在国外上市
7、销售但尚未在国内上市销售的生物制品8类：含未经批准菌种制备的微生态制品新药注册分类：新药注册分类：15 15 类类药品注册管理办法（局令第28号）附录31类：未在国内外上市销售的疫苗2类：DNA疫苗3类：已上市销售疫苗变更新的佐剂，偶合疫苗变更新的载体4类：由非纯化或全细胞(细菌、病毒等)疫苗改为纯化或者组份疫苗5类：采用未经国内批准的菌毒种生产的疫苗6类：已在国外上市销售但未在国内上市销售的疫苗7类：采用国内已上市销售的疫苗制备的结合疫苗或者联合疫苗8类：与已上市销售疫苗保护性抗原谱不同的重组疫苗新药注册分类：新药注册分类：15 15 类类天然化合物天然化合物合成化合物合成化合物生物产品生物
8、产品试验动物试验动物毒理学毒理学药效学药效学药动学药动学剂型、剂型、处方处方研究研究人体试验人体试验药效学药效学药动学药动学临床临床 、期试验期试验临床临床期试验期试验药物不良反应药物不良反应药物再评价药物再评价临床试验临床试验临床应用临床应用药物药物上市上市临床药临床药理研究理研究药物制药物制剂研究剂研究药理学研究药理学研究 临床前试验临床前试验 活性物质活性物质 临床前试验临床前试验 II 期I 期III 期治疗使用临床前研究与发展临床前研究与发展药学与临床前药理药学与临床前药理动物药效学与药动学动物药效学与药动学动物毒理动物毒理急毒急毒长毒与特殊毒理长毒与特殊毒理临床前审评临床前审评新药
9、申请提出新药申请提出新药批准新药批准IV期临床不良反应、药品检验、抽样检查临床研究阶段临床研究阶段新药的申请审查新药的申请审查上市后监督上市后监督临床试验在新药研发过程中占70%70%费用费用和1/21/2时间时间，并且只有0.2%0.2%获得上市6.5年7年1.5年新药研究过程新药研究过程年年 新药（化合物）的开发过程新药（化合物）的开发过程 期期产品监督产品监督临床试验临床试验(人体）人体）临床前试验（动物）临床前试验（动物）合合 成成 检检 验验 与与 筛筛 选选 研研 究究 阶阶 段段 产品介绍产品介绍注册注册12-55-1010-20 化合物化合物10，000-30，000化合物化合
10、物11211109876543210 期期 期期 期期新药开发正如走万里长征新药开发正如走万里长征(耗时、耗力和耗财）耗时、耗力和耗财）进入临床试验的比率进入临床试验的比率1/1000-1500花费花费1010亿亿元美金元美金新药研发特点新药研发特点v 投资高v 周期长v 风险高v 利润高v 竞争激烈新药的临床前研究新药的临床前研究1.药学研究药学研究2.主要药效学研究主要药效学研究3.安全性研究安全性研究4.药动学研究药动学研究制备工艺研究制备工艺研究 质量标准、稳定性研究质量标准、稳定性研究有效性研究有效性研究新药发现、选题、设计处方新药发现、选题、设计处方 全身毒性、局部毒性研究全身毒性
11、、局部毒性研究特殊毒性研究特殊毒性研究安全性研究安全性研究 基础药动学研究基础药动学研究药效学研究药效学研究药学研究药学研究药学研究药学研究-新药发现新药发现Drug Discovery经验积累经验积累偶然发现偶然发现药物筛选药物筛选Drug Discovery老药新用老药新用综合改造综合改造定向设计定向设计药学研究药学研究-主要内容主要内容研究研究新药的结构、理化性质、鉴别、检查和含测方法等新药的结构、理化性质、鉴别、检查和含测方法等原料原料n 研制出可控、稳定和使用方便的新药研制出可控、稳定和使用方便的新药剂型剂型n 研制出研制出适合于工业化生产的原料及制剂的技术适合于工业化生产的原料及制
12、剂的技术工艺路线工艺路线n 研究原料和制剂的研究原料和制剂的稳定性稳定性n 制订原料药及其制剂的制订原料药及其制剂的质量标准质量标准n 提供临床前评价和临床试验所需的提供临床前评价和临床试验所需的药品药品v药学研究的意义药学研究的意义是新药评价的是新药评价的基础基础n 与新药的临床与新药的临床疗效和安全性疗效和安全性密切相关密切相关n 贯穿新药评价的全过程（临床前、临床、生产前）贯穿新药评价的全过程（临床前、临床、生产前）药学研究注意事项药学研究注意事项化学结构或组份明确化学结构或组份明确制备工艺相对稳定制备工艺相对稳定 制剂处方固定制剂处方固定质控方法可行质控方法可行 具有一定的化学稳定性具
13、有一定的化学稳定性 这样才能为药效毒理、药代、临床评价提供保证这样才能为药效毒理、药代、临床评价提供保证我是高血压老我是高血压老鼠，听说吃辣鼠，听说吃辣椒能降血压，椒能降血压，我来试试我来试试.动物药理试验（有没有效?）新药主要药效学研究新药主要药效学研究 新药主要药效学研究新药主要药效学研究 -新药的新药的有效性试验有效性试验评价化学物质的评价化学物质的生物活性和确定药物作用机理。生物活性和确定药物作用机理。1.体外细胞培养和酶系统体外细胞培养和酶系统2.离体动物组织试验离体动物组织试验3.整体整体动物试验（啮齿动物和非啮齿动物）动物试验（啮齿动物和非啮齿动物）1.1.受试药物受试药物：制备
14、工艺稳定，同一批号，质量标准相同，标示：制备工艺稳定，同一批号，质量标准相同，标示含量和来源明确。含量和来源明确。动物等级：健康洁净，符合国家要求（洁净级）动物等级：健康洁净，符合国家要求（洁净级）（医学实验动物合格证书，实验设施合格证书）（医学实验动物合格证书，实验设施合格证书）常用成年动物常用成年动物2.2.动物动物 年龄年龄 幼年动物（发育、内分泌）幼年动物（发育、内分泌）衰老动物，果蝇（抗衰老）衰老动物，果蝇（抗衰老）性别：雌雄不限，雌雄各半，单性别（热板法性别：雌雄不限，雌雄各半，单性别（热板法）体重：与年龄有关，体重相近体重：与年龄有关，体重相近 种属：家兔和小鼠（不宜用于呼吸循环
15、系统试验）种属：家兔和小鼠（不宜用于呼吸循环系统试验）阿片类（猴犬兔中枢抑制；猫小鼠中枢兴奋）阿片类（猴犬兔中枢抑制；猫小鼠中枢兴奋）品系：肿瘤试验（肝癌品系：肿瘤试验（肝癌DBA/2DBA/2；肺癌；肺癌C C5757）3.3.给药途径给药途径：宜与推荐：宜与推荐临床用药临床用药途径一致途径一致4.4.病理模型病理模型：成熟、规范：成熟、规范 反映临床病理生理过程，反映药理作用本质，尽可能用反映临床病理生理过程，反映药理作用本质，尽可能用自发性遗传性模型动物，如自发性高血压大鼠（自发性遗传性模型动物，如自发性高血压大鼠（SHRSHR）；自发）；自发性糖尿病大鼠（性糖尿病大鼠（BBBB）和小鼠
16、（）和小鼠（KKKK），避免用尚未被公认的技），避免用尚未被公认的技术或模型。同一指标用二种以上模型或方法验证。以整体动术或模型。同一指标用二种以上模型或方法验证。以整体动物（包括正常或模型动物）实验为主，辅以体外试验。物（包括正常或模型动物）实验为主，辅以体外试验。5 5观察指标观察指标：与：与疾病密切疾病密切相关的相关的客观指标客观指标，记录准确，指，记录准确，指标特异性和灵敏性高，重现性好，尽量用定量或半定量指标。标特异性和灵敏性高，重现性好，尽量用定量或半定量指标。剂量剂量范围范围6.6.剂量剂量文献资料查询文献资料查询试验摸索试验摸索按体表面积剂量呼应：成人剂量按体表面积剂量呼应：成
17、人剂量动物剂量动物剂量离体试验浓度离体试验浓度 参考药动学有效浓度参考药动学有效浓度 由分布容积估算最大浓度由分布容积估算最大浓度 最大浓度最大浓度=成人剂量成人剂量/最小分布容积（最小分布容积（15L15L）=动物剂量动物剂量 /（体重（体重4 4）1010-10-10、3 31010-10-10、1010-9-9、3 31010-9-9、1010-8-8、3 31010-8-8、1010-7-7、3 31010-7-7、1010-6-6剂量间隔剂量间隔：体内：一般：体内：一般3 3个剂量个剂量组，比值组，比值2.52.53.53.5（1/3/101/3/10）体外：体外：5 5个剂量个剂量
18、 尽量反映量效和或时效关系，大动物（猴、狗等）试尽量反映量效和或时效关系，大动物（猴、狗等）试验或在特殊情况下，可适当减少剂量组。验或在特殊情况下，可适当减少剂量组。包括：包括：正常动物空白对照组正常动物空白对照组 模型动物对照组模型动物对照组 阳性药物对照组阳性药物对照组 应选用正式批准生产的药应选用正式批准生产的药品，根据需要设一个或多个剂量组。品，根据需要设一个或多个剂量组。必要时增设溶媒或赋形剂对照组。必要时增设溶媒或赋形剂对照组。7.7.对照对照新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价听说，辣椒吃多了也听说，辣椒吃多了也会死人，到底吃多少会死人
19、，到底吃多少会死呢？我来试试吧，会死呢？我来试试吧，不过别忘了追认我为不过别忘了追认我为烈士呦！烈士呦！你们两个小家伙你们两个小家伙怎么能代表我的怎么能代表我的主人主人,我先吃上我先吃上6 6个月吧个月吧.我不下地狱，我不下地狱，谁下地狱谁下地狱新药安全性评价的重要性新药安全性评价的重要性X 反应停反应停:19561956年上市年上市,治疗妊娠呕吐，治疗妊娠呕吐，引起海豹畸形儿引起海豹畸形儿1200012000多人多人X 药物性耳聋：药物性耳聋：药物致耳聋者占药物致耳聋者占60%60%我国约我国约100100万人，每年万人，每年2 24 4万递增万递增 各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局（
20、药品监督管理局）、总后卫生部药品监督管理局：为贯彻实施药品管理法，国家食品药品监督管理局发布了药物非临床研究质量管理规范（简称GLP）、药物非临床研究质量管理规范检查办法（试行）等有关规定，并于2003年开始对药物非临床安全性评价研究机构进行GLP认证。目前已有部分药物非临床安全性评价的研究机构通过GLP认证。为进一步推进药物非临床研究实施GLP，从源头上提高药物研究水平，保证药物研究质量，经研究决定，自自20072007年年1 1月月1 1日起日起，未在国内上市销售的化学原料药及其制剂、生物制品；未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等物质中提取的有效成份、有效部位及其制剂和从中药、天然药物中
21、提取的有效成份及其制剂；中药注射剂的新药非临床安全性评价研究必须在经过必须在经过GLP认证认证，符合GLP要求的实验室进行。否则，其药品注册申请将不予受理。2007年1月以前已开展的上述药物的非临床安全性评价研究，其药品注册申请资料可予以受理。请各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局（药品监督管理局）加强对辖区内药物非临床安全性评价研究的监督管理，并通知本辖区内药物非临床安全性评价研究机构和相应药品研发机构按照以上要求，严格执行GLP。国家食品药品监督管理局 二六年十一月二十日药品临床前试验管理规范药品临床前试验管理规范（good laboratory practicegood laborat
22、ory practice，GLPGLP）vGLPGLP是对从事实验研究的是对从事实验研究的规划设计规划设计、执行实施执行实施、管理监督管理监督和和记录报告记录报告等实验室组织管理、工作方法等实验室组织管理、工作方法和有关条件所提出的法规性文件。和有关条件所提出的法规性文件。v它主要是针对有关它主要是针对有关药品药品、食品添加剂食品添加剂、农药农药、化化学试剂学试剂、化妆品及其他医用物品化妆品及其他医用物品的动物试验。的动物试验。也称药物非临床研究质量管理规范也称药物非临床研究质量管理规范 药品临床前试验管理规范药品临床前试验管理规范（GLP）为毒性评价而制定的法规，为毒性评价而制定的法规，目的
23、在于严格控制药品目的在于严格控制药品安全性评价的各个环节，安全性评价的各个环节，包括严格控制可能影响实验结包括严格控制可能影响实验结果准确性的各种主、客观因素，如保证实验研究人员具果准确性的各种主、客观因素，如保证实验研究人员具备一定素质、实验设计慎密合理、各种实验条件合格、备一定素质、实验设计慎密合理、各种实验条件合格、数据完整准确数据完整准确以及总结以及总结资料科学真实资料科学真实等。等。X药物药物剂量与毒性剂量与毒性作用的相关性作用的相关性X毒性作用的毒性作用的性质和选择性性质和选择性X安全剂量安全剂量范围范围新药非临床安全性评价新药非临床安全性评价目的与意义为预测药物临床应用安全性评价
24、提供科学依据为预测药物临床应用安全性评价提供科学依据 全身性毒性试验全身性毒性试验 局部毒性试验局部毒性试验 药物特殊毒性试验药物特殊毒性试验 药物依赖性试验药物依赖性试验 一般药理学试验一般药理学试验 急性毒性试验急性毒性试验 长期毒性试验长期毒性试验 刺激试验刺激试验 过敏试验过敏试验 溶血试验溶血试验 致畸、致癌、致突变试验致畸、致癌、致突变试验 免疫毒性试验免疫毒性试验 生殖毒性试验生殖毒性试验 精神药理学试验精神药理学试验 躯体依赖性试验躯体依赖性试验 精神依赖性试验精神依赖性试验新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 广义上是指广义上是指主要药效学以外主要药效学以外所进行的广泛的
25、药理学研究，所进行的广泛的药理学研究，包括：安全药理学（包括：安全药理学（Safety PharmacologySafety Pharmacology）研究）研究 次要药效学（次要药效学（Secondary PharmacodynamicSecondary Pharmacodynamic）研究。）研究。检测药物对正常检测药物对正常清醒动物清醒动物以下三个系统的影响以下三个系统的影响中枢神经系统中枢神经系统心血管系统心血管系统呼吸系统的影响呼吸系统的影响新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -一般药理学研究一般药理学研究 狭义上主要是安全药理学（狭义上主要是安全药理学（Safety Phar
26、macologySafety Pharmacology）研究）研究 单剂量和单剂量和/或或2424小时内多剂量给药。给药剂量小时内多剂量给药。给药剂量向一定范围增加，以确定试验化合物不产生毒性向一定范围增加，以确定试验化合物不产生毒性的最大剂量、发生严重毒性的剂量水平及中等毒的最大剂量、发生严重毒性的剂量水平及中等毒性剂量水平。性剂量水平。新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -急性毒性试验急性毒性试验 单次或多次给药单次或多次给药 连续观察连续观察1414天天 LD50LD50，最大耐受量最大耐受量(最大给药量）最大给药量）一般先于药效学试验，为药效学试验提供剂量依据一般先于药效学试验，
27、为药效学试验提供剂量依据新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -急性毒性试验急性毒性试验X 最大耐受量最大耐受量（Maximal tolerance dose,MTD）：）：不引起受不引起受试对象死亡的最高剂量。试对象死亡的最高剂量。X 最小致死剂量最小致死剂量（Minimal lethal dose,MLD）：）：引起个别受引起个别受试动物出现死亡的剂量试动物出现死亡的剂量 。X 半数致死量半数致死量（Median lethal dose,LD50）：）：在一定试验条在一定试验条件下引起件下引起50%50%动物死亡的剂量。该值是经统计学处理所得动物死亡的剂量。该值是经统计学处理所得的结果
28、。的结果。X 未见反应剂量未见反应剂量（No observed effect level,NOEL）或未见或未见不良反应剂量（不良反应剂量（No observed adverse effect level,NOAEL）X 近似致死量（近似致死量（Approximate lethal dose,ALD)基本原则基本原则:执行执行GLP GLP 随机、对照、重复随机、对照、重复 动物动物:获得尽量多信息前提下，使用获得尽量多信息前提下，使用尽量少尽量少动物动物 啮齿类啮齿类-小鼠或大鼠小鼠或大鼠 非啮齿类非啮齿类-犬或猴犬或猴二种动物二种动物(啮齿类及非啮齿类啮齿类及非啮齿类)小鼠小鼠18-22g
29、;18-22g;大鼠大鼠120-150g;120-150g;犬用成年犬犬用成年犬 初始体重不应超过或低于平均体重的初始体重不应超过或低于平均体重的20%20%各半各半 新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -急性毒性试验急性毒性试验受试物受试物:工艺稳定、工艺稳定、符合临床用质量标准符合临床用质量标准标明名称、来源、批号、含量（或规格）、保存条件标明名称、来源、批号、含量（或规格）、保存条件及配制方法等，附质检报告及配制方法等，附质检报告辅料、溶剂、试剂等应标明批号、规格和生产厂家，辅料、溶剂、试剂等应标明批号、规格和生产厂家，符合试验要求符合试验要求 例如：例如：原料药原料药 临床拟用剂
30、型临床拟用剂型复方制剂：复方复方制剂：复方+拆方拆方(增毒？新毒？增毒？新毒？)易降解：含降解产物量最高的受试物进行急毒试验，易降解：含降解产物量最高的受试物进行急毒试验，并与临床样品的急毒试验结果比较并与临床样品的急毒试验结果比较新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -急性毒性试验急性毒性试验给药途径：给药途径：u临床拟用途径临床拟用途径+原型药物较完全进入循环途径（如静原型药物较完全进入循环途径（如静脉注射）脉注射）u啮齿类啮齿类igig给药前应禁食给药前应禁食12h12h，不禁水，不禁水剂量和分组剂量和分组u给药剂量：未见毒性量给药剂量：未见毒性量严重毒性量严重毒性量u设空白和设空白
31、和/或溶媒（辅料）对照或溶媒（辅料）对照u小动物小动物4-64-6个剂量组个剂量组,组距组距0.65-0.85,0.65-0.85,求求LDLD5050u大动物可用大动物可用50%50%等量递升法等量递升法(近似致死剂量法近似致死剂量法),),求出求出ALDALD和和MTDMTD，不必达到致死量，不必达到致死量新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -急性毒性试验急性毒性试验给药容积：给药容积：不等浓度等容量给药不等浓度等容量给药动物动物给药途径给药途径 给药量给药量 小鼠小鼠 ig0.2-1.0 ml/10giv、ip、sc0.1-0.5 ml/10g大鼠大鼠 ig1.0-2.0 ml/1
32、00giv、ip、sc0.5-1.0 ml/100g静脉注射静脉注射(iv)(iv)；腹腔注射；腹腔注射(ip)(ip)；口服；口服(po)(po)；皮下注射；皮下注射(sc)(sc)；灌胃；灌胃(ig)(ig)新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -急性毒性试验急性毒性试验观察指标及时间观察指标及时间药后药后4h4h内详观内详观,后每天上下午各一后每天上下午各一,观察观察14d14d记录毒性反应、死亡情况记录毒性反应、死亡情况,中毒症状、发生时中毒症状、发生时间、持续时间、严重程度、恢复期及动物最短、间、持续时间、严重程度、恢复期及动物最短、最长死亡时间最长死亡时间其它指标：一般指标、体
33、重变化等其它指标：一般指标、体重变化等新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -急性毒性试验急性毒性试验新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -急性毒性试验急性毒性试验结果处理结果处理：实验资料计算实验资料计算LD50LD50。必要时求不同性别。必要时求不同性别LD50LD50剂量反应、时间反应关系剂量反应、时间反应关系反应可能涉及组织、器官或系统反应可能涉及组织、器官或系统肉眼病变和组织病检，初步判断毒性靶器官肉眼病变和组织病检，初步判断毒性靶器官病检报告应附：病检者签名病检报告应附：病检者签名+单位盖章单位盖章+病理照片病理照片 确定确定NOAELNOAEL、MTDMTD、ALDAL
34、D etc etc，初步判断受试物的安全，初步判断受试物的安全范围范围 新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -急性毒性试验急性毒性试验新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -急性毒性试验急性毒性试验新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验 用于用于人体一周或以上人体一周或以上的药物，必须要有的药物，必须要有9018090180天天的动物试验表明其安全性；若是用于慢性疾病治的动物试验表明其安全性；若是用于慢性疾病治疗，必须进行一年或更长的动物试验。疗，必须进行一年或更长的动物试验。指反复多次给药于动物，观察药物对动物的毒指反复多次给药于动物，观察药物对动物的
35、毒性反应，一般是指连续给药性反应，一般是指连续给药1414天以上。天以上。给药期限：给药期限：实验周期为临床给药周期的实验周期为临床给药周期的3-4倍倍X 给药期限为给药期限为2 2周周的的长期毒性研究通常可支持长期毒性研究通常可支持临床疗程临床疗程1-31-3天天的药物进行临床试验和生产；的药物进行临床试验和生产；X 给药期限为给药期限为1 1个月个月的长期毒性研究通常可支持临的长期毒性研究通常可支持临床疗程床疗程22周周的药物；的药物；X 给药期限为给药期限为3 3个月个月的长期毒性研究通常可支持的长期毒性研究通常可支持临床疗程临床疗程4 4周周的药物；的药物；X 给药期限为给药期限为6
36、6个月个月的长期毒性研究通常可支持临床疗程的长期毒性研究通常可支持临床疗程1 1月以上月以上的药物。的药物。新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验给药频率：给药频率：原则上长期毒性研究中动物应原则上长期毒性研究中动物应每天给药每天给药；但给药周期为但给药周期为3 3个月或个月或3 3个月以上：可采取一个月以上：可采取一周周6 6天给药。天给药。新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验基本原则基本原则执行执行GLP GLP 整体性整体性研究结果与其它药理毒理试验互为印证、说明研究结果与其它药理毒理试验互为印证、说明和补充和补充 随机、对照
37、、重复随机、对照、重复 新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验动物动物 理想动物理想动物 对受试物生物转化与人体相近对受试物生物转化与人体相近 对受试物敏感对受试物敏感 已有大量历史对照数据已有大量历史对照数据 二种动物，啮齿类首选大鼠，非啮齿类用二种动物，啮齿类首选大鼠，非啮齿类用BeagleBeagle犬犬,必要时用猴、猪等必要时用猴、猪等 来源、品系、遗传背景清楚，符合等级要求来源、品系、遗传背景清楚，符合等级要求,有动物质量合格证有动物质量合格证 大鼠大鼠6-9 w6-9 w，Beagle Beagle犬犬6-12 m,6-12 m,体重体重CV20CV2
38、0 各半各半,大鼠为各大鼠为各10-3010-30只，只，BeagleBeagle犬或猴为各犬或猴为各3-63-6只。只。必要时，可用疾病模型动物进行试验必要时，可用疾病模型动物进行试验 Duration 6m,natural death(rat:1y-15%,1.5y-50%,2y-70-80Duration 6m,natural death(rat:1y-15%,1.5y-50%,2y-70-80%)%)新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验给药途径给药途径与临床用药途径一致与临床用药途径一致临床临床iv,iv,大鼠给药大鼠给药1 1月，月，ipip代替代替i
39、mim或或scsc应变换注射部位应变换注射部位必要时改变给药途径但应说明原因必要时改变给药途径但应说明原因新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验分组分组三个给药组三个给药组,单位：单位：mg(ml,IUmg(ml,IU)/kg)/kg 或或 /m/m2 2不等浓度等容量给药不等浓度等容量给药低剂量组低剂量组高于有效剂量高于有效剂量，不出现毒性，不出现毒性中剂量组中剂量组轻微或中等度轻微或中等度毒性毒性高剂量组高剂量组明显明显/严重毒性严重毒性，或个别动物死亡，或个别动物死亡空白对照溶媒或赋形剂空白对照溶媒或赋形剂溶媒或赋形剂有毒性时则增加正常对照组溶媒或赋形剂有毒
40、性时则增加正常对照组阳性对照阳性对照新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验测试次数测试次数:能反映动态变化能反映动态变化 u一般行为、食量每天观察记录一般行为、食量每天观察记录u大鼠体重每周一次大鼠体重每周一次u大动物生理指标每半月一次大动物生理指标每半月一次u大动物大动物ECG ECG 导联，给药前、给药期间、停药导联，给药前、给药期间、停药及恢复期均要检测及恢复期均要检测u发现有阳性指标应加大观察密度发现有阳性指标应加大观察密度 新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验综合评价长毒结果综合评价长毒结果结合药学，药理学、结合药学，药理
41、学、PKPK、TK TK和其它毒理学研和其它毒理学研究究(+(+临床研究临床研究)，综合评价，综合评价 找到：不良反应找到：不良反应(T&D&R)(T&D&R)、毒性靶器官、毒性靶器官(O)(O)、安全范围安全范围(S)(S)、临床需重点检测指标、临床需重点检测指标()及临及临床监护或解救措施床监护或解救措施(A)(A)新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验检测指标检测指标 X常规指标：常规指标：一般症状、体重、摄食量一般症状、体重、摄食量X血液学指标血液学指标：10项（项（红、白细胞计数，凝血时间等红、白细胞计数，凝血时间等）X血液生化学指标血液生化学指标：12
42、项（非啮齿类项（非啮齿类16项）项）ASTAST、ALTALT等等X尿液分析指标：尿液分析指标：9项（非啮齿类）项（非啮齿类）pH pH 值，尿糖，尿蛋白等值，尿糖，尿蛋白等 X体温、血压、呼吸、心电图及眼科检查（非啮体温、血压、呼吸、心电图及眼科检查（非啮 齿类）齿类）X组织病理学检查组织病理学检查脏器系数：脏器系数：12项项（心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、胸腺、睾丸、子宫、脑和前列腺）腺、胸腺、睾丸、子宫、脑和前列腺）组织学检查组织学检查：一般要求提供重要脏器一般要求提供重要脏器(心、肝、脾、肺、心、肝、脾、肺、肾、脑肾、脑)和靶器官及有病理损伤的照片
43、。和靶器官及有病理损伤的照片。长期毒性试验长期毒性试验 恢复期观察恢复期观察 方法方法：最后一次给受试物后最后一次给受试物后24 h24 h每组每组活杀活杀2/31/22/31/2动物检测各项指标，留下动物检测各项指标，留下l/31/2l/31/2动物继续观察动物继续观察2424周，周，再活杀检查。在此时间，除不给受试物外，再活杀检查。在此时间，除不给受试物外，其他观察内容与给受试物期间相同。引起不可逆其他观察内容与给受试物期间相同。引起不可逆损伤者要慎重考虑临床试验问题。损伤者要慎重考虑临床试验问题。新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验恢复期观察恢复期观察意义
44、：意义：了解毒性反应的了解毒性反应的可逆程度可逆程度和可能出现的和可能出现的延迟延迟性毒性性毒性反应。应根据受试物的代谢动力学特点、反应。应根据受试物的代谢动力学特点、靶器官或靶组织的毒性反应和恢复情况确定恢复靶器官或靶组织的毒性反应和恢复情况确定恢复期的长短。期的长短。新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验检测指标的时间检测指标的时间u大鼠大鼠3 3个月以内个月以内，一般在最后一次给药后，一般在最后一次给药后24h24h和和恢恢复期复期结束各进行一次。必要时中间可插一次；大结束各进行一次。必要时中间可插一次；大鼠鼠3 3个月以上，可在试验中间活杀少量动物个月以上
45、，可在试验中间活杀少量动物(高剂高剂量组和对照组量组和对照组)检测指标。检测指标。u犬的长期毒性试验则应有犬的长期毒性试验则应有正常值正常值2 2次次，即未给药时，即未给药时，给药后给药后11.511.5月月测一次，停药一次，恢复期结束一测一次，停药一次，恢复期结束一次。次。新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -长期毒性试验长期毒性试验（一）刺激性试验（一）刺激性试验 刺激性是指刺激性是指非口服给药制剂非口服给药制剂给药后对给药部位产生的可逆性炎症反应，给药后对给药部位产生的可逆性炎症反应，若给药部位产生了不可逆性的组织损伤则称为腐蚀性。刺激性试验是观察若给药部位产生了不可逆性的组织损伤
46、则称为腐蚀性。刺激性试验是观察动物的血管、肌肉、皮肤、粘膜等部位接触受试物后是否引起红肿、充血、动物的血管、肌肉、皮肤、粘膜等部位接触受试物后是否引起红肿、充血、渗出、变性或坏死等局部反应。渗出、变性或坏死等局部反应。（二）过敏性试验（二）过敏性试验 过敏性又称超敏反应，指机体受同一抗原再刺激后产生的一种表现为组过敏性又称超敏反应，指机体受同一抗原再刺激后产生的一种表现为组织损伤或生理功能紊乱的织损伤或生理功能紊乱的特异性免疫反应特异性免疫反应，是异常或病理性免疫反应。，是异常或病理性免疫反应。（三）溶血性试验（三）溶血性试验 溶血性是指药物制剂引起的溶血性是指药物制剂引起的溶血和红细胞凝聚溶
47、血和红细胞凝聚等反应。溶血性反应包等反应。溶血性反应包括免疫性溶血与非免疫性溶血。括免疫性溶血与非免疫性溶血。新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -局部毒性试验局部毒性试验新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -特殊毒性试验特殊毒性试验致癌试验包括长期动物和体外细胞转化试验。致癌试验包括长期动物和体外细胞转化试验。致畸型试验指有害因素施于亲体，观察子代胎儿致畸型试验指有害因素施于亲体，观察子代胎儿畸型或死亡。畸型或死亡。致突变试验指遗传物质的损伤和改变：致突变试验指遗传物质的损伤和改变：致畸、致癌、致突变试验致畸、致癌、致突变试验新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价 -药物依赖性
48、试验药物依赖性试验新药临床前安全性评价新药临床前安全性评价局限性局限性种属差异种属差异：假阳性或假阴性：假阳性或假阴性实验动物实验动物数量有限数量有限：发生率低的毒性反应很难发现：发生率低的毒性反应很难发现 发生率为发生率为5%5%，需动物，需动物5858只只 发生率为发生率为1%1%或或0.1%0.1%，需动物分别为，需动物分别为299299及及29952995只只健康状态不同：健康状态不同：不同生理病理状态对药物反应不同不同生理病理状态对药物反应不同研究研究方法的局限方法的局限新药基础药物动力学研究新药基础药物动力学研究 在在动物体内动物体内系统开展药物的吸收、分布、代谢、系统开展药物的吸
49、收、分布、代谢、排泄（排泄（ADMEADME）等研究。）等研究。新药基础药物动力学研究新药基础药物动力学研究药代动力学(PK)药效学(PD)吸收分布消除ADME研究X血药浓度时间曲线下面积（血药浓度时间曲线下面积（AUC）X 半衰期（半衰期（t1/2）X吸收速率常数（吸收速率常数（Ka）X消除速率常数（消除速率常数（Ke）X峰浓度（峰浓度（Cmax）X达峰时间（达峰时间（Tmax）X表观分布容积（表观分布容积（Vd）X清除率（清除率（CL）X生物利用度（生物利用度（F）主要药代动力学参数主要药代动力学参数v血药浓度时间曲线血药浓度时间曲线药代动力学参数的估算药代动力学参数的估算v药物的吸收药物
50、的吸收v药物的分布药物的分布v药物的排泄药物的排泄尿粪排泄尿粪排泄胆汁排泄胆汁排泄v药物与血浆蛋白的结合药物与血浆蛋白的结合v代谢转化试验代谢转化试验v对药物代谢酶活性的影响对药物代谢酶活性的影响具体研究项目具体研究项目 两种动物种属两种动物种属 受试药物动物选择受试药物动物选择剂量选择给药途径剂量选择给药途径 啮齿啮齿 非啮齿非啮齿血管外：血管外：低中高低中高 低低 中中 高高 (n=5)(n=5)(n=5)(n=5)(n=5)(n=5)(n=5)(n=5)(n=5)(n=5)(n=5)(n=5)血管外：血管外：中中 中中 (n=5)(n=5)(n=5)(n=5)(第第1 1、2 2末次连续
