1、实验一 培养基的制备技术1.前期准备前期准备:1）确定）确定和选择配方和选择配方-MSM;LB细菌细菌真菌真菌放线菌放线菌实验一 培养基的制备技术一.一.培养基（培养基（medium,media,culture media）的制备）的制备 1.前期准备前期准备:2）准备试剂）准备试剂,器皿和设备等；器皿和设备等；常用试剂等材料常用试剂等材料:基本试剂基本试剂:牛肉膏；蛋白胨；琼脂；牛肉膏；蛋白胨；琼脂；NaCl；pH试纸；试纸；HCl和和 NaCl调整调整pH使用商品化干燥培养基：使用商品化干燥培养基：营养琼脂，细菌培养基等营养琼脂，细菌培养基等 玻璃器皿等玻璃器皿等试管；锥瓶；烧杯；培养皿；
2、量筒；玻棒；漏斗；铁支架；试管；锥瓶；烧杯；培养皿；量筒；玻棒；漏斗；铁支架；自制棉塞（纱布，棉花，自制棉塞（纱布，棉花，线）线）；角匙；标签纸或者记号笔；牛皮纸；角匙；标签纸或者记号笔；牛皮纸(或者报纸或者报纸)；锅（配置培养基，处理污；锅（配置培养基，处理污染物等）；染物等）；火柴火柴(打火机打火机)；接种环接种环；仪器等仪器等天平天平;电炉（电磁炉）；电炉（电磁炉）；高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器(锅锅)；电烘箱（干热灭菌箱）电烘箱（干热灭菌箱）；培养箱（后培养箱（后期培养时使用）；恒温水浴箱（培养基恒温）期培养时使用）；恒温水浴箱（培养基恒温）等；等；实验一 培养基的制备技术v2.基本流
3、程v(1)自行配置培养基v按照配方称取药品vv调pH pH7.2-7.4;用NaOH vv分装 按照规定量装入容器，例如试管，三角瓶，加棉塞(自己做）vv 包扎 牛皮纸（报纸等），线绳，橡皮筋等 vv 灭 菌v v 分装到培养皿、试管、小三角瓶vv摆斜面（试管）v v无菌检查/存放备用实验一 培养基的制备技术v3灭菌1）高压蒸汽灭菌器(锅)；v适用范围：配置的培养基，制备无菌水等的灭菌；v使用条件:恒温121.3，维持20min;v注意事项：高压容器注意安全操作；开始检查水位和密封圈；升至100，关掉出气阀门。实验一 培养基的制备技术v3灭菌灭菌2）干热灭菌（电烘箱）；v适用范围;玻璃器皿耐热
4、物体的灭菌;v使用条件:恒温160，维持2hr;恒温170,维持1hrv注意事项：高温设备，注意安全操作；实验一 培养基的制备技术v4 分装倒平板过程：v制备固体培养基；v培养基冷却到约50v倒平板持皿法：叠皿法：实验一 培养基的制备技术v4 分装液体培养分装过程：v制备培养基；v培养基冷却到约50v分装到小三角瓶第一部分 微生物培养技术实验二实验二接种和培养接种和培养（inoculation and cultivation)v试验前液体接种液培养：3个菌种，每种1瓶，1瓶3菌种种混合。每组一瓶；（共4个组，每组5个人）培养基准备：MSM培养基。每人2个培养皿（固体培养），2个三角瓶（液培）（
5、上个实验已经准备好的）v具体工作：给液体和固体培养基接种每天测定镜检，OD值测定v产出：菌种生长曲线（细菌个数，OD值）实验二 接种和培养1、平板培养接种1）平板划线(streak plate)；使用材料和用具：培养皿、酒精灯、接种环等：实验二接种和培养2）稀释涂布平板法(spread plate)：使用材料和用具：培养皿、酒精灯、涂布器（玻棒制作）等：实验二 接种和培养3）倒平板法用于菌浓度稀释的方法之一实验二 接种和培养2、液体培养接种1）菌块接种从平板培养中切下菌斑，放入三角瓶中2）孢子悬浮液接种实验二 接种和培养3、培养方法-impossible is nothing.试管(斜面)-静至于冰箱；用于菌种保存 培养皿（平板）-静至于一定温度；实验二 接种和培养3、培养方法-impossible is nothing.锥瓶（液体培养基）-震荡，一定温度；
