1、球菌球菌coccus1第1页，共108页。SPA的定义及生物学功能；的定义及生物学功能；链球菌的分型，甲型链球菌与肺炎链球菌的分型，甲型链球菌与肺炎 链球菌的鉴别要点；链球菌的鉴别要点；抗抗O试验的原理及用途；试验的原理及用途；脑膜炎球菌和淋病奈瑟菌的微生物脑膜炎球菌和淋病奈瑟菌的微生物 学检查。学检查。主主 要要 内内 容容2第2页，共108页。G+与与G-球菌球菌球菌球菌(coccus):个体形状呈球形或椭圆形个体形状呈球形或椭圆形的一大类细菌。的一大类细菌。3第3页，共108页。化脓性球菌化脓性球菌(pyogenic coccus)少数对人类有致病性的球菌，能引起机体化脓性炎少数对人类有
2、致病性的球菌，能引起机体化脓性炎症。症。根据革兰染色不同分两类：根据革兰染色不同分两类：G 球菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等球菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等 G球菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等球菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等4第4页，共108页。第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属 (staphylococcus)5第5页，共108页。1.形态与染色形态与染色:G、球形、葡萄串状排列、无鞭毛和芽胞。、球形、葡萄串状排列、无鞭毛和芽胞。一、一、生物学性状生物学性状6第6页，共108页。2.培养特性培养特性 易培养易培养:普通平板中生长良好、血平板生长更佳；普通平板中生长良好、血平板生长更佳
3、；产色素产色素:金黄色、白色、柠檬色（脂溶性）金黄色、白色、柠檬色（脂溶性）中等大，突起，中等大，突起，有色素，有色素，S S型菌落。型菌落。7第7页，共108页。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌（金黄色）（金黄色）表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌（白色）（白色）腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌（柠檬色）（柠檬色）8第8页，共108页。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌有透明溶血环。有透明溶血环。表皮葡萄球菌无表皮葡萄球菌无溶血环。溶血环。9第9页，共108页。3.抗原构造抗原构造葡萄球菌葡萄球菌A蛋白蛋白(staphylococcus A protein,SPA):细胞壁表面细胞壁表面的一种单链多肽，具有多种生物学作
4、用。的一种单链多肽，具有多种生物学作用。SPAcapsuleteichoic acidpeptidoglycan10第10页，共108页。SPASPA的应用：协同凝集试验的应用：协同凝集试验SPASPA与与IgGIgG分子分子 的的FcFc段结合段结合抗原抗原葡萄球菌聚集在一起葡萄球菌聚集在一起出现凝集现象出现凝集现象11第11页，共108页。金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(S.aureus)表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌(S.epidermidis)腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)性状性状金葡菌金葡菌表皮葡菌表皮葡菌腐生葡菌腐生葡菌菌落色素菌落色素 金黄色金黄色 白色白色白
5、色或柠白色或柠檬色檬色发酵甘露醇发酵甘露醇 +-凝固酶凝固酶 +-溶血性溶血性 溶血溶血 不溶血不溶血不溶血不溶血耐热核酸酶耐热核酸酶 +-SPA +-致病性致病性强强弱弱无无4.分类分类据色素、生化反应据色素、生化反应12第12页，共108页。5.抵抗力抵抗力 无芽胞菌中抵抗力最强，无芽胞菌中抵抗力最强，耐干燥耐干燥，对石炭酸、龙胆紫等敏，对石炭酸、龙胆紫等敏感。感。易产生易产生耐药性耐药性，特别对青霉素，特别对青霉素G的耐药菌株高达的耐药菌株高达90%以上。以上。由于抗生素的广泛应用，耐药菌株逐渐增多，尤其是由于抗生素的广泛应用，耐药菌株逐渐增多，尤其是耐甲氧耐甲氧西林金黄色葡萄球菌西林金
6、黄色葡萄球菌(MRSA)已成为医院感染最常见的致已成为医院感染最常见的致病菌。病菌。13第13页，共108页。长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或有长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或有伤口的病人及与伤口的病人及与MRSA定植或感染的病人接触定植或感染的病人接触都是造成都是造成院内院内MRSA流行的危险因素。流行的危险因素。MRSA定植或感染的人员定植或感染的人员及院内环境污染是引起院内流行的主要来源。及院内环境污染是引起院内流行的主要来源。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）14第14页，共108页。MRSA超级细菌？超级细菌？2007年年11月：月：J
7、AMA刊登美国政府调查报告，被称为刊登美国政府调查报告，被称为“超级病菌超级病菌”MRSA正在美国国内蔓延，每年预计有正在美国国内蔓延，每年预计有超过超过9万人感染这一病菌，被列为世界三大最难解决感染性万人感染这一病菌，被列为世界三大最难解决感染性疾患第疾患第1位，位，年致死的人数可能超过艾滋病年致死的人数可能超过艾滋病1978年，医务人员在上海抽检了年，医务人员在上海抽检了200株金黄色葡萄球菌株金黄色葡萄球菌，分离出的，分离出的MRSA还不到还不到5%。2007年年11月：北京市卫生局关于印发月：北京市卫生局关于印发对耐甲氧西林金对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌病例监测与控制方案黄色葡萄球菌病例
8、监测与控制方案的通知的通知2010年，年，MRSA在医院内感染的分离率已高达在医院内感染的分离率已高达60%以上以上。15第15页，共108页。二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性1.致病物质 金黄色葡萄球菌产生多种侵袭性酶与外毒素。侵袭性酶：凝固酶；外毒素：葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1(TSST-1);表面结构或蛋白：如粘附素、荚膜、肽聚糖和SPA等。16第16页，共108页。使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类。耐热，使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类。耐热，100，30min或高压灭菌后仍保持部分活性；但易被旦白酶破坏。或高压灭菌后仍保持部分活
9、性；但易被旦白酶破坏。凝固酶（凝固酶（coagulase）17第17页，共108页。分类分类：A：游离凝固酶，分泌至菌体外：游离凝固酶，分泌至菌体外 B：结合凝固酶：结合凝固酶/凝聚因子，结合于菌体表面不释放，利于凝聚因子，结合于菌体表面不释放，利于细菌凝集。细菌凝集。凝固酶原物质凝固酶原物质凝固酶样物质凝固酶样物质纤维旦白原纤维旦白原 （液态）（液态）纤维旦白纤维旦白（固态）（固态）血浆凝固血浆凝固协同因子协同因子18第18页，共108页。致病机理：致病机理：A：使周围血液使周围血液/血浆中的纤维旦白沉积于菌体表面，阻血浆中的纤维旦白沉积于菌体表面，阻碍吞噬细胞的吞噬或胞内消化作用；碍吞噬细
10、胞的吞噬或胞内消化作用；B：集聚在细菌四周，保护病菌不受血清中杀菌物质的集聚在细菌四周，保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏；破坏；C：细菌不易扩散，使感染易于局限化和形成血栓。细菌不易扩散，使感染易于局限化和形成血栓。意义：意义：鉴别有无致病性的重要指标。鉴别有无致病性的重要指标。19第19页，共108页。葡萄球菌溶素（葡萄球菌溶素（staphylolysin）损伤细胞膜的毒素，主要是损伤细胞膜的毒素，主要是 溶素；溶素；对多种哺乳动物对多种哺乳动物RBC有溶血作用有溶血作用，对白细胞、血小板、，对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有损伤作用；肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细
11、胞等均有损伤作用；溶素是一种外毒素，具有良好的抗原性；经甲醛液溶素是一种外毒素，具有良好的抗原性；经甲醛液脱毒后可制成类毒素；脱毒后可制成类毒素；作用机制为毒素分子插入细胞膜疏水区，破坏膜的完整作用机制为毒素分子插入细胞膜疏水区，破坏膜的完整性导致细胞溶解。性导致细胞溶解。20第20页，共108页。杀白细胞素（杀白细胞素（leukocidin）只攻击只攻击中性粒细胞和巨噬细胞中性粒细胞和巨噬细胞；与细胞膜受体结合，使细胞膜发生构型变化，膜通透与细胞膜受体结合，使细胞膜发生构型变化，膜通透性增高，细胞浆内的颗粒排除，细胞死亡；性增高，细胞浆内的颗粒排除，细胞死亡；在抵抗宿主吞噬细胞，增强病菌侵袭
12、力方面有意义。在抵抗宿主吞噬细胞，增强病菌侵袭力方面有意义。21第21页，共108页。肠毒素（肠毒素（enterotoxin）约约50%临床分离金黄色葡萄球菌可产生；临床分离金黄色葡萄球菌可产生；耐热，抗胃肠液中蛋白酶的水解作用；耐热，抗胃肠液中蛋白酶的水解作用；产毒菌株产毒菌株污染牛奶、肉类等食物污染牛奶、肉类等食物，经，经10h便产生大量便产生大量肠毒素；肠毒素；作用机制：毒素与肠道神经细胞受体作用，刺激作用机制：毒素与肠道神经细胞受体作用，刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的急性胃肠炎即食呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的急性胃肠炎即食物中毒。物中毒。22第22页，共108页。表皮剥脱毒素（表
13、皮剥脱毒素（exfoliative toxin）由质粒编码产生的一种蛋白质，可水解宿主表皮粒层的细由质粒编码产生的一种蛋白质，可水解宿主表皮粒层的细胞内桥胞内桥桥粒。在新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人中桥粒。在新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人中可引起烫伤样皮肤综合征可引起烫伤样皮肤综合征(SSSS)，表现为弥漫性红斑和水疱，表现为弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大片脱落，受损部位的炎症反应轻微。形成，继以表皮上层大片脱落，受损部位的炎症反应轻微。23第23页，共108页。毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）由噬菌体由噬菌体I群感染和产生。引起机体发热，增加对内群感染和产生
14、。引起机体发热，增加对内毒素的敏感性毒素的敏感性;多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征(toxic shok syndrome,TSS)。病人的临床表现主要包括急病人的临床表现主要包括急性高热、低血压、性高热、低血压、猩红热样皮疹伴脱屑，严猩红热样皮疹伴脱屑，严重者发生休克。重者发生休克。24第24页，共108页。2.所致疾病所致疾病感染类型感染类型 所致疾病所致疾病侵袭性侵袭性 局部感染局部感染 全身感染全身感染毒素性毒素性 食物中毒食物中毒 烫伤样皮肤综合征烫伤样皮肤综合征 SSSS 毒性休克综合征毒性休克综合征TSS25第25页，共108页。26第26页，
15、共108页。2013年，年，7月月18日，有网友爆料在福建泉州一家医院内的女婴日，有网友爆料在福建泉州一家医院内的女婴在恒温箱内烤死的事件，引来了很多网友的关注。在恒温箱内烤死的事件，引来了很多网友的关注。据悉，一名刚刚出生据悉，一名刚刚出生12天的女婴在恒温箱内死亡，其家属称孩子是天的女婴在恒温箱内死亡，其家属称孩子是被活活烤死，孩子的背部和腿部均有严重的溃烂，并且全身焦黑惨不忍睹。被活活烤死，孩子的背部和腿部均有严重的溃烂，并且全身焦黑惨不忍睹。死婴的家属找医院要说法，院方出面解释称，恒温箱的最高温度在死婴的家属找医院要说法，院方出面解释称，恒温箱的最高温度在3737度，度，根本不可能将初
16、生的婴儿烤死，因此也不能百分百的确定女婴的死与恒温根本不可能将初生的婴儿烤死，因此也不能百分百的确定女婴的死与恒温箱有直接关系。箱有直接关系。医院方面也站出来称，孩子是因为感染了葡萄球菌性烫伤样医院方面也站出来称，孩子是因为感染了葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征。因此身体的外表看上去就像烫伤一样。皮肤综合征。因此身体的外表看上去就像烫伤一样。福建泉州福建泉州“医院保温箱烤死婴儿医院保温箱烤死婴儿”事件事件27第27页，共108页。28第28页，共108页。人类凝固酶阴性葡萄球菌（人类凝固酶阴性葡萄球菌（CNSCNS）感染中以）感染中以表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌的感染最为常见。的感染最为常见。CNSCN
17、S主要引起以下几种感染：泌尿系感染，主要引起以下几种感染：泌尿系感染，细菌性心内膜炎，败血症等，其中大多为医院细菌性心内膜炎，败血症等，其中大多为医院内感染。此外，心脏起搏器安装、置换人工心内感染。此外，心脏起搏器安装、置换人工心脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦可造成脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦可造成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。凝固酶阴性葡萄球菌的感染。凝固酶阴性葡萄球菌的致病性凝固酶阴性葡萄球菌的致病性29第29页，共108页。3.免疫性 人体有一定的天然免疫力,只有当皮肤黏膜受伤后,宿主免疫力降低时,才易引起葡萄球菌感染。感染后能获得一定的免疫力，但不强，难以防止再次感染。30第30
18、页，共108页。三、微生物学检查三、微生物学检查 标本采集标本采集 检查程序检查程序 检查方法检查方法31第31页，共108页。1.1.标本采集标本采集 根据病情采集标本根据病情采集标本 种类：脓液、伤口分泌物、穿刺液、血液、种类：脓液、伤口分泌物、穿刺液、血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。尿液、痰液、脑脊液、粪便等。注意：无菌操作，避免污染。注意：无菌操作，避免污染。32第32页，共108页。2.检查程序检查程序脓液、咽拭子、穿刺液脓液、咽拭子、穿刺液尿液、痰液尿液、痰液脑脊液血液脑脊液血液粪便、呕吐粪便、呕吐物物直接涂片染色直接涂片染色增菌培养增菌培养分离培养分离培养（血平板）（血平板）分
19、离培养分离培养（高盐甘露醇平（高盐甘露醇平板）板）取可疑菌落取可疑菌落鉴定试验药敏试验鉴定试验药敏试验涂片染色血浆凝固酶耐热核酸酶其他鉴定试验报告报告初初 报报33第33页，共108页。3.检查方法检查方法 直接涂片镜检直接涂片镜检 适用于：正常情况下无菌的标本（如脑脊液）适用于：正常情况下无菌的标本（如脑脊液）伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等初步报告：初步报告：“查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑为葡萄球菌”或：或：“查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌”34第34页，共108页。分离培养分离培养
20、 50ml50ml葡萄糖肉汤（增菌）葡萄糖肉汤（增菌）浑浊浑浊无菌（无菌（7 7天）天）报告：报告：无菌生长无菌生长脑脊液、脓液、脑脊液、脓液、穿刺液、咽拭、穿刺液、咽拭、尿液尿液血平板血平板血液标本血液标本5ml5ml粪便、粪便、呕吐物呕吐物高盐甘露醇高盐甘露醇平板平板3718-24h35第35页，共108页。药敏实验药敏实验36第36页，共108页。鉴定试验鉴定试验（1）血浆凝固酶试验：金黄色葡萄球菌（）血浆凝固酶试验：金黄色葡萄球菌（+）（2）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌（）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌（+）（3）耐热核酸酶试验：金黄色葡萄球菌（）耐热核酸酶试验：金黄色葡萄球菌（+）
21、（4）肠毒素测定：）肠毒素测定：金黄色葡萄球菌产生金黄色葡萄球菌产生（5）SPA检测：检测：金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌（6）凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌鉴定）凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌鉴定37第37页，共108页。肠肠 毒毒 素素 测测 定定病人呕吐物、粪便、剩余食物病人呕吐物、粪便、剩余食物高盐肉汤高盐肉汤3724h分离培养分离培养肉汤煮沸肉汤煮沸30min30min，离心，取上清夜离心，取上清夜幼幼 猫猫观察症状（观察症状（4h4h出现）出现）38第38页，共108页。SPA 的的 检检 测测致病性葡萄球菌致病性葡萄球菌 （SPA)SPA)兔抗羊红细胞兔抗羊红细胞AbAb（Ig
22、GFcIgGFc）SRBC致敏羊红细胞致敏羊红细胞39第39页，共108页。防防注意消毒注意消毒隔离隔离注意个人注意个人卫生卫生防止院内防止院内交叉感染交叉感染防止耐药防止耐药菌株产生菌株产生治治抗菌素抗菌素药敏试验药敏试验自身菌自身菌苗疗法苗疗法四、防治原则四、防治原则40第40页，共108页。第二节第二节 链球菌属链球菌属 (Streptococcus)41第41页，共108页。类别类别溶血现象溶血现象名称名称致病性致病性甲型溶血性甲型溶血性链球菌链球菌草绿色溶血草绿色溶血环环 溶血溶血多为条件致病菌多为条件致病菌乙型溶血性乙型溶血性链球菌链球菌完全溶血环完全溶血环 溶血溶血致病力强致病力
23、强丙型链球菌丙型链球菌不溶血不溶血无致病性无致病性1、根据溶血现象分类:按在血平板上培养后是否产生溶血分类42第42页，共108页。根据溶血现象分类根据溶血现象分类 甲甲型型溶溶链链乙乙型型溶溶链链丙丙型型链链球球菌菌43第43页，共108页。2、抗原结构分类:根据细胞壁中抗原结构（C多糖抗原）不同，分成AV 20个血清群，对人致病的链球菌菌株90%属A群。对人类致病的对人类致病的A群链球菌多数呈现乙型溶血群链球菌多数呈现乙型溶血。44第44页，共108页。一、生物学特性一、生物学特性1.形态与染色形态与染色 G+，球形或椭，球形或椭圆形，呈链状排列，圆形，呈链状排列，无鞭毛、无芽胞，无鞭毛、
24、无芽胞，有荚膜。有荚膜。A A 群群 链链 球球 菌菌45第45页，共108页。2.2.培养特性培养特性条件：多数为兼性厌氧菌，营养要求较高，条件：多数为兼性厌氧菌，营养要求较高，血平血平板板生长良好，生长良好，溶血；液体：液体：沉淀生长沉淀生长。形成长链形成长链及及絮状沉淀絮状沉淀46第46页，共108页。链球菌菌落（血平板）：链球菌菌落（血平板）：细小，灰白色，圆形，细小，灰白色，圆形，突起，光滑，湿润，边缘整突起，光滑，湿润，边缘整齐，菌落周围齐，菌落周围有有溶血溶血。47第47页，共108页。3.生化反应生化反应 活泼分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。活泼分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。菊糖
25、（菊糖（-）胆汁溶菌试验（胆汁溶菌试验（-）optochinoptochin敏感试验（敏感试验（-）触酶触酶（-）（区别于葡萄球菌属）（区别于葡萄球菌属）（区别甲链与肺链）（区别甲链与肺链）48第48页，共108页。4.抗原构造抗原构造 多糖抗原（多糖抗原（C C抗原）：群特异性。抗原）：群特异性。蛋白抗原（蛋白抗原（M M、T T、R R、S S）：型特异性，与致病有关的）：型特异性，与致病有关的是是M M蛋白抗原蛋白抗原。核蛋白抗原：无特异性。核蛋白抗原：无特异性。抵抗力不强，抵抗力不强，60 30min60 30min被杀死，对常用消毒剂敏感。被杀死，对常用消毒剂敏感。干燥尘埃中生存数月
26、。对青霉素、红霉素、四环素、杆菌干燥尘埃中生存数月。对青霉素、红霉素、四环素、杆菌肽和磺胺药都很敏感。肽和磺胺药都很敏感。49第49页，共108页。多糖抗原多糖抗原蛋白质抗原蛋白质抗原核蛋白核蛋白抗原抗原链球菌抗原构造模式图链球菌抗原构造模式图荚膜荚膜50第50页，共108页。1.致病物质致病物质 A群链球菌致病力最强，可产生多种外毒素和胞外酶。群链球菌致病力最强，可产生多种外毒素和胞外酶。胞壁成分等胞壁成分等 外毒素外毒素 胞外侵袭酶类胞外侵袭酶类（二）致病性与免疫性（二）致病性与免疫性51第51页，共108页。1)胞壁成分胞壁成分(1)粘附素，包括：粘附素，包括：脂磷壁酸（脂磷壁酸（lip
27、oteichoic acid,LTA）与生物膜有高）与生物膜有高度亲和力，是该菌定植在机体皮肤和呼吸道黏膜等度亲和力，是该菌定植在机体皮肤和呼吸道黏膜等表面的主要侵袭因素。表面的主要侵袭因素。F蛋白（蛋白（protein F）位于化脓性链球菌细胞壁内，）位于化脓性链球菌细胞壁内，其结合区暴露在菌体表面，是纤维粘连蛋白其结合区暴露在菌体表面，是纤维粘连蛋白（fibronectin,FBP）的受体。有利于细菌定植和）的受体。有利于细菌定植和繁殖。繁殖。52第52页，共108页。53第53页，共108页。(2)(2)M M蛋白（蛋白（M proteinM protein）是是A A群链球菌的主要致病
28、因子，含群链球菌的主要致病因子，含M M蛋白的链球菌蛋白的链球菌具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用；与某些超敏具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用；与某些超敏反应疾病有关。反应疾病有关。(3)(3)肽聚糖肽聚糖 A A群链球菌的肽聚糖具有致热、溶解血小板、提高血管群链球菌的肽聚糖具有致热、溶解血小板、提高血管通透性和诱发实验性关节炎等作用。通透性和诱发实验性关节炎等作用。54第54页，共108页。2）外毒素(1)致热外毒素（pyrogenic exotoxin）是引起猩红热的主要毒性物质。对机体具有致热和细胞毒作用。(2)链球菌溶素（streptolysin）溶解RBC、破坏WBC和血小板。链球菌溶素O
29、（SLO）：对哺乳动物多种 细胞有毒性作用 链球菌溶素S（SLS）：对白细胞和多种组 织细胞有破坏作用55第55页，共108页。3）侵袭性酶）侵袭性酶(1)透明质酸酶透明质酸酶（hyaluronidase）：）：分解间质内透明质酸，使病菌易分解间质内透明质酸，使病菌易扩散扩散。(2)链激酶链激酶（streptokinase,SK）：）：使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，溶解血块或阻使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，溶解血块或阻止血浆凝固，利于病菌止血浆凝固，利于病菌扩散扩散。(3)链道酶链道酶（streptodomase,SD）：）：亦称链球菌亦称链球菌DNA酶，降解酶，降解DNA，使脓液
30、稀薄，促进，使脓液稀薄，促进病菌病菌扩散扩散。56第56页，共108页。透明质酸酶、链激酶、链道酶的扩散作用透明质酸酶、链激酶、链道酶的扩散作用57第57页，共108页。2.所致疾病所致疾病A群链球菌引起的疾病约占人类链球菌感染的90%淋巴管炎、淋巴管炎、蜂窝组织炎、蜂窝组织炎、扁桃体炎等。扁桃体炎等。猩红热猩红热(3)超敏反应性疾病超敏反应性疾病(1)化脓性感染化脓性感染(2)中毒性疾病中毒性疾病风湿热风湿热急性肾小球肾炎急性肾小球肾炎病灶界限不清病灶界限不清,脓汁稀薄脓汁稀薄58第58页，共108页。3.免疫性免疫性 感染后可获得一定的免疫力，主要是抗感染后可获得一定的免疫力，主要是抗M蛋
31、白抗蛋白抗体。体。型别间无交叉免疫，故常发生反复感染。型别间无交叉免疫，故常发生反复感染。猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫。猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫。59第59页，共108页。三、微生物学检查三、微生物学检查 标本采集标本采集 检查程序检查程序 检查方法检查方法60第60页，共108页。1.标本采集标本采集 根据病情采集标本根据病情采集标本 种类：脓液、鼻咽拭子、血液等种类：脓液、鼻咽拭子、血液等 风湿热查血清抗体风湿热查血清抗体61第61页，共108页。2.检查程序检查程序痰、脓、穿刺液咽拭子等脑脊液脑脊液血血 液液直接涂片染直接涂片染色色测抗原测抗原分离培养分离培养增菌培养
32、增菌培养(5%CO2(5%CO2葡萄糖肉汤葡萄糖肉汤)血平板（血平板（5%CO25%CO2）可疑菌落可疑菌落鉴定试验鉴定试验初步报告初步报告血清学鉴定血清学鉴定（分群）（分群）杆菌肽试验杆菌肽试验 optochin optochin 胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验 其他鉴定其他鉴定 敏感试验敏感试验 试验试验62第62页，共108页。3.检验方法检验方法 直接镜检直接镜检（痰、脓、穿刺液、（痰、脓、穿刺液、咽拭子等）咽拭子等）初报：发现初报：发现G G+球菌，球菌，呈链状排列呈链状排列63第63页，共108页。分离培养分离培养 血液、脑脊液血液、脑脊液 肉汤增菌肉汤增菌 脓液、咽拭子等脓液、咽拭子等
33、 血平板分离血平板分离64第64页，共108页。血清学试验：血清学试验：抗抗O试验试验（ASO testASO test）原理：毒素与抗毒素的中和试验，用原理：毒素与抗毒素的中和试验，用SLOSLO检测检测血清中的血清中的ASOASO。方法：间接凝集。方法：间接凝集。结果：效价结果：效价1:400 1:400 单位有诊断意义。单位有诊断意义。意义：辅助诊断急性风湿热、风湿活动期、意义：辅助诊断急性风湿热、风湿活动期、急性肾小球肾炎。急性肾小球肾炎。65第65页，共108页。积极治疗儿童链球菌感染，防止发生急积极治疗儿童链球菌感染，防止发生急性肾炎和风湿热。抗生素首选青霉素：用长效性肾炎和风湿热
34、。抗生素首选青霉素：用长效青霉素预防链球菌感染，对减少肾小球肾炎及青霉素预防链球菌感染，对减少肾小球肾炎及风湿热的发生有一定效果。风湿热的发生有一定效果。(四四)防治原则防治原则66第66页，共108页。广泛分布于自然界，常寄居正常人的鼻咽腔中，多数不广泛分布于自然界，常寄居正常人的鼻咽腔中，多数不致病，仅少数有致病力，是细菌性肺炎、脑膜炎、支气管炎的致病，仅少数有致病力，是细菌性肺炎、脑膜炎、支气管炎的主要病原菌。主要病原菌。肺炎链球菌肺炎链球菌S.pneumoniae67第67页，共108页。1.形态与染色：形态与染色：G、矛头状、矛头状、多多成双排列成双排列；平面相对、；平面相对、尖面相
35、背；无鞭毛、无芽胞，尖面相背；无鞭毛、无芽胞，有厚荚膜。有厚荚膜。一、生物学性状一、生物学性状68第68页，共108页。2.培养特性培养特性条件：条件：营养要求较高营养要求较高，兼性厌氧菌，兼性厌氧菌，5-10%CO2生长最好。生长最好。产生自溶酶。产生自溶酶。液体：培养液体：培养24h呈均匀混浊，后期因产生自呈均匀混浊，后期因产生自溶而变得澄清。溶而变得澄清。普通琼脂平板：不生长。普通琼脂平板：不生长。血液琼脂平板：灰白色，圆形，扁平，较血液琼脂平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围有草绿色溶血环（小，周围有草绿色溶血环（溶血溶血）69第69页，共108页。70第70页，共108页。3.抗原构
36、造抗原构造荚膜多糖抗原：据此将肺炎链球菌分荚膜多糖抗原：据此将肺炎链球菌分85型，型，对人致病的有对人致病的有20多型。多型。-型引起大叶性肺型引起大叶性肺炎。炎。菌体多糖抗原：种特异性，菌体多糖抗原：种特异性，C多糖多糖可与可与CRP反应，产生沉淀，在炎症活动期反应，产生沉淀，在炎症活动期(如风湿热如风湿热)含量增多。含量增多。M蛋白抗原：型特异性。蛋白抗原：型特异性。71第71页，共108页。4.抵抗力抵抗力 较弱较弱，加热，加热56，20min即死亡。即死亡。对一般消毒剂敏感，对干燥抵抗力较强。对一般消毒剂敏感，对干燥抵抗力较强。5.变异性变异性 荚膜变异：有荚膜的光滑（荚膜变异：有荚膜
37、的光滑（S）型菌有毒力，）型菌有毒力，失去荚膜的粗糙（失去荚膜的粗糙（R）型毒力减低或消失。）型毒力减低或消失。72第72页，共108页。1.1.致病物质致病物质 荚膜：肺炎球菌的致病力，主要是荚膜的抗吞荚膜：肺炎球菌的致病力，主要是荚膜的抗吞噬作用。噬作用。蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎链球菌溶素蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎链球菌溶素O等等 溶血毒素溶血毒素“O”：自溶后释放，能溶解人和动：自溶后释放，能溶解人和动物的红细胞，高浓度对动物有坏死及致死作用。物的红细胞，高浓度对动物有坏死及致死作用。二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性73第73页，共108页。2.2.所致疾病所致疾病 存在于正常人上
38、呼吸道，为存在于正常人上呼吸道，为条件致病菌条件致病菌，仅，仅在人体抵抗力下降时才引起疾病。在人体抵抗力下降时才引起疾病。可引起：可引起：大叶性肺炎，支气管炎，大叶性肺炎，支气管炎，胸膜炎，胸膜炎，脓胸，中耳炎，脑膜炎，败血症等。脓胸，中耳炎，脑膜炎，败血症等。病后可获得型特异性免疫。病后可获得型特异性免疫。74第74页，共108页。三、微生物学检查三、微生物学检查 标本采集标本采集 痰液，脓液，血液，脑脊液等。痰液，脓液，血液，脑脊液等。检查程序检查程序 检查方法检查方法75第75页，共108页。检验程序检验程序痰、脓脑脊液血液直接涂片直接涂片 分离培养分离培养革兰染色、美兰染色革兰染色、美
39、兰染色 荚膜肿胀试验荚膜肿胀试验增菌培养（葡萄糖肉汤、增菌培养（葡萄糖肉汤、硫酸镁肉汤）硫酸镁肉汤）（血平板）（血平板）挑选可疑菌落挑选可疑菌落纯培养纯培养初报初报兔血清肉汤兔血清肉汤小白鼠毒力试验小白鼠毒力试验涂片涂片 荚膜肿胀试验荚膜肿胀试验胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验 菊糖发酵菊糖发酵 OptochinOptochin试验试验药敏试验药敏试验报报 告告76第76页，共108页。检查方法检查方法1 1、直接镜检直接镜检 适用于：痰、脓、脑脊液标本。适用于：痰、脓、脑脊液标本。报告：报告：“找到肺炎链球菌找到肺炎链球菌”2 2、分离培养分离培养 血平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围有血平板：灰
40、白色，圆形，扁平，较小，周围有草绿色溶血环（草绿色溶血环（溶血）。溶血）。77第77页，共108页。3 3、鉴定试验、鉴定试验 荚膜肿胀试验荚膜肿胀试验 胆汁溶菌试验：胆汁溶菌试验：+Optochin Optochin试验：试验：+菊糖发酵试验：菊糖发酵试验：+小鼠毒力试验：有毒力的菌株，接种后小鼠毒力试验：有毒力的菌株，接种后12-36h12-36h，死亡。死亡。78第78页，共108页。胆汁溶菌试验阳性：胆汁溶菌试验阳性：加入胆汁或加入胆汁或10%10%去氧胆酸钠，去氧胆酸钠，3737，5-10min5-10min，激活本菌，激活本菌的自溶酶，出现溶菌的自溶酶，出现溶菌现象。现象。79第7
41、9页，共108页。取肉汤培养液均匀涂于取肉汤培养液均匀涂于血平板上用血平板上用optochin纸片贴纸片贴于接种区中央（或分区划于接种区中央（或分区划线法，纸片贴于线法，纸片贴于1-2区），区），35需氧培养过夜，抑菌圈需氧培养过夜，抑菌圈 18mm。OptochinOptochin敏感试验阳性：敏感试验阳性：80第80页，共108页。Optochintest81第81页，共108页。肺炎链球菌的主要鉴定依据肺炎链球菌的主要鉴定依据 1 1、镜下形态镜下形态：革兰阳性球菌，矛头状成双排列，：革兰阳性球菌，矛头状成双排列，平端相对，尖端向外；平端相对，尖端向外；2 2、血平板菌落特点血平板菌落特
42、点：直径：直径0.5-1.5mm0.5-1.5mm，灰白色，半透，灰白色，半透明，光滑（有些菌株为粘液状），扁平，周围有草绿色溶明，光滑（有些菌株为粘液状），扁平，周围有草绿色溶血环。血环。培养或放置培养或放置24h24h以上，菌落中央可塌陷，呈脐窝状。以上，菌落中央可塌陷，呈脐窝状。3 3、生化鉴定生化鉴定：OptochinOptochin试验试验+，胆汁溶菌试验，胆汁溶菌试验+。82第82页，共108页。肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的鉴别肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的鉴别 形态形态 菌落菌落 血清血清 胆汁胆汁 菊糖菊糖 Opto-小鼠毒小鼠毒 肉汤肉汤 溶菌溶菌 chin 力试验力试验肺
43、肺链链甲甲链链矛头状，稍大，湿润矛头状，稍大，湿润 浑浊浑浊 +成双，成双，扁平，扁平，有荚膜有荚膜 脐窝状脐窝状圆形，圆形，较小，稍干较小，稍干 沉淀沉淀 无荚膜无荚膜 圆，凸起圆，凸起83第83页，共108页。多价肺炎球菌荚膜多糖菌苗多价肺炎球菌荚膜多糖菌苗预防预防治疗治疗抗生素抗生素四、防治原则四、防治原则84第84页，共108页。第四节第四节 奈瑟菌属奈瑟菌属 Neisseria 特点特点：G-双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛，双球菌，无鞭毛，无芽胞，有菌毛，需氧，氧化酶及触酶需氧，氧化酶及触酶+，细胞内寄生。，细胞内寄生。对人致病的只有对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌(merni
44、ngococcus)和和淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌(gonorrhoeae)，其其余均为鼻、咽喉和口腔粘膜的正常菌群。余均为鼻、咽喉和口腔粘膜的正常菌群。85第85页，共108页。病例分析病例分析一个一个2323岁男子因尿痛、尿频，尿道有黄绿色脓性岁男子因尿痛、尿频，尿道有黄绿色脓性排出物或分泌物而入院。脓性分泌物涂片镜检显示有排出物或分泌物而入院。脓性分泌物涂片镜检显示有大量多形核白细胞，其内有革兰染色阴性双球菌。病大量多形核白细胞，其内有革兰染色阴性双球菌。病人最可能感染的病原体是：人最可能感染的病原体是：A.A.脑膜炎球菌脑膜炎球菌 B.B.杜克嗜血杆菌杜克嗜血杆菌 C.C.溶脲脲原体溶脲脲原
45、体 D.D.淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 E.E.性病淋巴肉芽肿衣原体性病淋巴肉芽肿衣原体86第86页，共108页。脑膜炎奈瑟菌 (N.meningitidis)俗称脑膜炎球菌，俗称脑膜炎球菌，是是流行性脑脊髓膜炎（流脑）流行性脑脊髓膜炎（流脑）的病原体。的病原体。87第87页，共108页。1.形态结构形态结构G-，肾形，肾形成双排列成双排列，有荚膜、菌毛；，有荚膜、菌毛；在患者脑脊液标本中，在患者脑脊液标本中，多位于中性粒细胞内多位于中性粒细胞内。（一）生物学性状（一）生物学性状88第88页，共108页。2培养特性培养特性专性需氧，营养要求高，常用专性需氧，营养要求高，常用巧克力培养基巧克力培养基。
46、血平板：半透明，灰褐色，圆形，湿润光滑血平板：半透明，灰褐色，圆形，湿润光滑似露滴状菌落。似露滴状菌落。易自溶。易自溶。89第89页，共108页。3.抗原结构抗原结构可分可分13个血清群，我国个血清群，我国95%以上为以上为A群。群。4抵抗力抵抗力 很弱很弱四怕：热、寒冷、干燥、消毒剂。四怕：热、寒冷、干燥、消毒剂。90第90页，共108页。1.致病物质致病物质 菌毛、荚膜、内毒素菌毛、荚膜、内毒素2.所致疾病所致疾病 传染源：病人和带菌者传染源：病人和带菌者 传播途径：呼吸道传播，飞沫或接触传播途径：呼吸道传播，飞沫或接触 所致疾病：流行性脑脊髓膜炎所致疾病：流行性脑脊髓膜炎3.免疫性免疫性
47、 病原可产生群特异性抗体，但不持久。病原可产生群特异性抗体，但不持久。（二）致病性与免疫性（二）致病性与免疫性91第91页，共108页。病菌病菌上呼吸道炎症上呼吸道炎症菌血症或内菌血症或内毒素血症毒素血症寒战高热、恶心寒战高热、恶心和出血性皮疹和出血性皮疹突破血脑屏障突破血脑屏障流行性脑脊髓膜炎流行性脑脊髓膜炎剧烈头痛、喷射性呕吐、颈项强剧烈头痛、喷射性呕吐、颈项强直直92第92页，共108页。(三三)微生物学检查微生物学检查 1 1标本采集标本采集 菌血症期病人采集血液菌血症期病人采集血液 有出血点或瘀斑者，可取瘀斑渗出液有出血点或瘀斑者，可取瘀斑渗出液 有脑膜刺激症状，抽取脑脊液有脑膜刺激
48、症状，抽取脑脊液 带菌者：咽拭子带菌者：咽拭子 注意事项：注意事项：立即送检，注意保温（勿放冰立即送检，注意保温（勿放冰箱），防干燥，防紫外线箱），防干燥，防紫外线93第93页，共108页。、检查程序、检查程序 血血 液液增菌培养（葡糖肉增菌培养（葡糖肉汤）汤）分离培养分离培养（巧克力、血平板）（巧克力、血平板）鉴定试验鉴定试验涂染检涂染检 氧化酶氧化酶 葡、麦糖葡、麦糖 多价血清多价血清 药敏试验药敏试验 结果报告结果报告 鼻咽拭子鼻咽拭子 卵黄双抗平板卵黄双抗平板510%co237 1824h37 1824h37 1824h脑脊液脑脊液 瘀血点瘀血点离心离心上沉上沉清淀清淀液物液物510%
49、2涂片涂片染色染色初步初步报告报告直接凝集直接凝集94第94页，共108页。（四）防治原则（四）防治原则 预防：儿童注射预防：儿童注射A群脑膜炎球菌荚膜多糖抗原群脑膜炎球菌荚膜多糖抗原疫苗。疫苗。6个月个月-2岁接种两次，间隔岁接种两次，间隔1月。月。治疗：抗生素。治疗：抗生素。95第95页，共108页。淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）（一）生物学性状（一）生物学性状1形态结构形态结构G-，球形或肾形，成双排列，似，球形或肾形，成双排列，似一对咖啡豆，常位于中性粒细胞一对咖啡豆，常位于中性粒细胞内；内；有荚膜和菌毛。有荚膜和菌毛。96第96页，共108页。2培养特性培养特性专性需氧，营
50、养要求专性需氧，营养要求高，常用高，常用巧克力血平巧克力血平板板；菌落：凸起，光滑、圆菌落：凸起，光滑、圆形，灰褐色，半透明。形，灰褐色，半透明。3.抵抗力抵抗力 弱，热、冷、干燥和弱，热、冷、干燥和消毒剂极敏感。消毒剂极敏感。97第97页，共108页。1.致病物质致病物质菌毛菌毛:粘附、抗吞噬；粘附、抗吞噬；外膜蛋白外膜蛋白:有助于粘附；有助于粘附；脂寡糖：损伤上皮细胞；脂寡糖：损伤上皮细胞；IgA1蛋白酶：损害人体黏膜的蛋白酶：损害人体黏膜的重要因素。重要因素。（二）致病性与免疫性（二）致病性与免疫性98第98页，共108页。淋病淋病gonorrhea人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主，人类是淋病
