1、配液系统的清洁验证1 1、引言、引言1、引言 1.1 概述 PYG300-550型配液系统是冻干粉针剂车间2生产线的配液设备，位于C级洁净区内的浓配和稀配间内。该系统主要由进浓配罐、稀配罐、卫生离心泵、砂棒过滤器、微孔膜过滤器、分装罐、管道和控制器组成，物料与浓配罐、稀配罐、卫生离心泵、砂棒过滤器、微孔膜过滤器、分装罐、管道内表面直接接触。1、引言1.2 1.2 验证目的验证目的 通过试验结果证明所制定的PYG300-550型配液系统的清洁规程能够清除浓配罐、稀配罐、卫生离心泵、砂棒过滤器、微孔膜过滤器、管道内表面上的活性药物残留，使设备的清洗效果达到洁净要求，避免产品被残留物料和微生物污染。
2、1 1、引言、引言1.3 1.3 验证人员及其职责：验证人员及其职责：部门姓名职务职责冻干粉针车间 XX主任组长：负责验证方案、报告的起草，组织验证实施。负责对验证涉及的操作人员进行验证方案的培训 冻干粉针车间 XX技术员 参与并协助组长完成验证 中心化验室XXQC化验员取样及样品的检验质量保证中心 XXQA质检员QA质检员现场监控并复核冻干粉针剂车XX操作工按本方案实施清洁操作1 1、引言、引言1.4 1.4 验证周期：验证周期：每年进行一次再验证。出现下列情况之一时，必须进行清洁规程的再验证：增加新产品；设备、生产工艺或清洁规程发生变更；清洁/污染设备保留时间发生改变；清洁剂发生变更；处方
3、发生变更。1.5 1.5 验证进度安排：验证进度安排：2013年XX月XX日2013年XX月XX日2 2、清洁验证前的准备工作、清洁验证前的准备工作2.1 2.1 验证所需文件验证所需文件序号文件名称存放处1PYG300-550型配液系统标准操作规程冻干粉针车间2PYG300-550型配液系统维护保养标准操作规程3PYG300-550型配液系统清洁标准操作规程（草案）4PYG300-550型配液系统清洁验证文件（立项申请、方案审批、验证方案）5PYG300-550型配液系统的验证报告6PYG300-550型配液系统清洁验证方案7检验方法验证文件2 2、清洁验证前的准备工作、清洁验证前的准备工作
4、2.2 2.2 人员培训文件的检查人员培训文件的检查 参与PYG300-550型配液系统清洁验证的人员均接受了验证前的培训；验证人员已熟练掌握了验证原理和操作方法。3 3、执行的清洁灭菌规程、执行的清洁灭菌规程3.1 3.1 清洁规程及其编号清洁规程及其编号 PYG300-550型配液系统清洁标准操作规程（草案）文件编号SOP-FZ-2310-003.2 3.2 清洁汇总清洁汇总 清洁剂：注射用水、0.5%氢氧化钠溶液。清洁工具：丝光毛巾。清洁方式：手工清洁；在线清洁（CIP）；离线清洁（COP）。3 3、执行的清洁灭菌规程、执行的清洁灭菌规程3.3 3.3 清洁步骤清洁步骤 更换状态标识更换
5、状态标识 摘下PYG300-550型配液系统状态标识卡框中的绿色“正在生产中”卡，填写并插入黄色“待清洁”状态标识 拆卸拆卸 打开浓配罐、稀配罐的排污阀，排空配液罐；拧开快装卡箍、拆下砂棒过滤器、筒式过滤器和平板式过滤器（另行清洁）；用专用短管替代上述滤器，拧紧快装卡箍。3 3、执行的清洁灭菌规程、执行的清洁灭菌规程 预洗预洗 完全开启浓配罐顶部的注射用水阀门，用热水（7080）喷淋冲洗罐体内表面3分钟以上；关闭排污阀，继续冲洗浓配罐体内表面2分钟以上；启动浓配罐磁力搅拌器、搅拌清洗3分钟以上。在搅拌清洗过程中，不断开启取样阀，至少10次；启动1卫生泵，将浓配罐内的热水送至稀配罐内；启动2卫生
6、泵，用稀配罐内的热水循环冲洗稀配罐与分装罐之间的循环管道3分钟以上；3 3、执行的清洁灭菌规程、执行的清洁灭菌规程 预洗（续）预洗（续）打开稀配罐的排污阀，排尽稀配罐内的清洗水；关闭排污阀，完全开启稀配罐顶部的注射用水阀门，用热水（7080）喷淋冲洗罐体内表面3分钟以上；启动稀配罐磁力搅拌器（45转/分），用稀配罐内的热水循环冲洗稀配罐与分装罐之间的循环管道3分钟以上；在搅拌清洗过程中，不断开启取样阀，至少10次；打开稀配罐的排污阀，排尽稀配罐内的清洗水。3 3、执行的清洁灭菌规程、执行的清洁灭菌规程 清洗清洗 开启浓配罐顶部的注射用水阀门，送热水（70 80）约250Kg至浓配罐内；启动浓配
7、罐磁力搅拌器（45转/分），加入1.5kg氢氧化钠，搅拌5分钟以上，补加注射用水至300kg；搅拌清洗浓配罐15分钟后，启动1卫生泵，将浓配罐内的0.5%氢氧化钠溶液送至稀配罐内；启动2卫生泵，用稀配罐内的碱液循环冲洗稀配罐与分装罐之间的循环管道15分钟以上。打开稀配罐的排污阀，排尽稀配罐内的碱液。3 3、执行的清洁灭菌规程、执行的清洁灭菌规程 冲洗冲洗 完全开启浓配罐顶部的注射用水阀门，连续喷淋冲洗罐体内表面，直至排出液的pH值与冲洗水的pH值一致（0.2）；关闭排污阀，继续冲洗浓配罐体内表面2分钟以上；启动1卫生泵，将水送至稀配罐内；启动2卫生泵，用稀配罐内的水循环冲洗稀配罐与分装罐之间的
8、循环管道3分钟以上；打开稀配罐的排污阀，排尽稀配罐内的清洗水。3 3、执行的清洁灭菌规程、执行的清洁灭菌规程 冲洗（续）冲洗（续）关闭稀配罐排污阀门，启动磁力搅拌器，完全开启稀配罐顶部的注射用水阀门，连续喷淋冲洗3分钟以上、循环冲洗3分钟以上；重复上述冲洗、循环，直至排出液的pH值与冲洗水水的pH值一致（0.2）；打开稀配罐排污阀门，排尽稀配罐内的清洗水。3 3、执行的清洁灭菌规程、执行的清洁灭菌规程 最终冲洗最终冲洗 关闭浓配罐、稀配罐阀门，完全开启浓配罐顶部的的注射用水阀门，喷淋冲洗罐体内表面1分钟。启动浓配罐磁力搅拌器，搅拌1分钟以上；将浓配罐内的最终冲洗水送至浓配罐内，启动2卫生泵，循
9、环冲洗稀配罐与分装罐之间的循环管道3分钟以上；打开浓配罐、稀配罐的排污阀，排尽罐内存水。3 3、执行的清洁灭菌规程、执行的清洁灭菌规程 灭菌灭菌 关闭浓配罐、稀配罐排污阀，打开纯蒸汽疏水阀；打开浓配罐体顶部的纯蒸汽阀门，向罐体通入纯蒸汽。待纯蒸汽疏水阀喷出汽水混合物时，分别打开浓配罐、稀配罐排污阀，排水（冷凝水）1分钟以上；关闭浓配罐、稀配罐排污阀，待管道终端温度达到121后，计时灭菌30分钟。4 4、最难清洁部位的确定、最难清洁部位的确定 由于药液在PYG300-550型配液系统中的浓配罐、稀配罐、分装罐内停留时间最长，加之喷淋球距罐底距离最远，清洗剂的流速相对较低，我们据此确定浓配罐、稀配
10、罐内表面底部为最难清洁部位。5 5、清洗验证标记产品的选择、清洗验证标记产品的选择产品名称毒性溶解性已知的清洗问题注射用胸腺肽1.84g/kg易溶无注射用促肝细胞生长素-易溶无注射用鹿瓜多肽-易溶无注射用骨瓜提取物-易溶无注射用穿琥宁675mg/kg溶解无注射用炎琥宁675mg/kg易溶无 从活性成分的毒性来讲，注射用穿琥宁和注射用炎琥宁的毒性最大。从溶解性方面来讲，注射用穿琥宁属于溶解。基于上述理由，注射用穿琥宁被确定为清洗验证的标记产品。6 6、可接受的残留限度、可接受的残留限度6.1 6.1 目检可接受限度：目检可接受限度：最终冲洗水与空白溶剂无颜色差异；可见异物符合规定。6 6、可接受
11、的残留限度、可接受的残留限度6.2 6.2 化学残留可接受限度化学残留可接受限度 最低日治疗剂量的1/1000 计算公式：L1/1000=(MTDa/1000)(Nb/MDDb)FV 式中：MTDa为清洗前产品最小每日给药剂量中的活性成分含量；Nb清洗后产品的批量（285Kg）；MDDb为清洗后产品的最大日给药剂量的活性成分含量；F为安全因子（F=50%）；V为最终淋洗循环水体积(100000ml)。6 6、可接受的残留限度、可接受的残留限度6.2 6.2 化学残留可接受限度（续化学残留可接受限度（续1 1）化学残留可接受限度列表 清洗后产品清洗前产品（穿琥宁）胸腺肽7.13mg/ml促肝细胞
12、生长素5.70mg/ml鹿瓜多肽23.75mg/ml骨瓜提取物5.70mg/ml炎琥宁1.43mg/ml6 6、可接受的残留限度、可接受的残留限度6.2 6.2 化学残留可接受限度（续化学残留可接受限度（续2 2）浓度限度10ppm（10mg/kg）计算公式：L=10BF/V 式中：L为化学残留物可接受限度（mg/ml）；10为化学残留可接受限度（10ppm）；B为下批产品的最小生产批量（285Kg）；F为安全因子（F=50%）；V为最终淋洗循环水体积(100000ml)。6 6、可接受的残留限度、可接受的残留限度6.2 6.2 化学残留可接受限度（续化学残留可接受限度（续3 3）化学残留可接
13、受限度列表 清洗后产品清洗前产品（穿琥宁）胸腺肽14.25mg/ml 促肝细胞生长素14.25mg/ml鹿瓜多肽14.25mg/ml骨瓜提取物14.25mg/ml炎琥宁14.25mg/ml 从最低日治疗剂量的1/1000和浓度限度10ppm计算可知，穿琥宁在最终冲洗循环水中的残留限度不得超过1.43mg/ml。6 6、可接受的残留限度、可接受的残留限度6.3 6.3 最终冲洗水微生物可接受限度：最终冲洗水微生物可接受限度：最终冲洗水微生物8CFU/100ml 7 7、取样、取样 7.1 7.1 取样点的确认取样点的确认 对于配液系统而言，设备不便拆卸，也就不可能对“最难清洁部位”进行直接擦拭取
14、样。选择清洗线路相对最下游的排污口（浓配罐、稀配罐）作为取样点，也能够体现系统的整体清洁效果。7 7、取样、取样7.2 7.2 取样方法取样方法(淋洗法淋洗法)化学残留取样 反复开关取样阀5次以上（含5次），冲洗取样阀；用试剂瓶接取水样，冲洗瓶内壁两次，装样200250ml，加塞密封；在瓶签上注明取样日期、取样位置、样品名称及取样目的。7 7、取样、取样 微生物限度取样 执行先取化学残留样，后取微生物限度样的原则；用75%酒精棉球擦拭取样阀外表面、灭菌试剂瓶口外表面各二遍；用灭菌试剂瓶接取水样，冲洗瓶内壁两次，装样200250ml，密封；在瓶签上注明取样日期、取样位置、样品名称及取样目的。在样
15、品传递和储存期间，应避免样品受热（25）或过冷（8），并在取样的当日处理完毕。7 7、取样、取样7.3 7.3 取样方法取样方法(淋洗法淋洗法)的验证的验证 淋洗法限度检查不需做回收率验证，只需对最终冲洗水直接检测或稀释后检测即可。如：注射用穿琥宁在最终冲洗水中的残留限度为1.43mg/ml，则冲洗水样的峰面积低于该限度值对应的峰面积即可。淋洗法定量检查需作回收率验证，可以将已知量的活性成分（在限度附近）溶液均匀涂抹在配液罐内表面，用淋洗溶剂冲洗，回收率应不低于95%。8.检验方法验证检验方法验证8.1 8.1 专属性试验专属性试验 试验方法：精密称取葡萄糖约7.5mg（与10mg穿琥宁相对应
16、），置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。按穿琥宁含量测定方法，精密量取10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。接受标准：辅料（葡萄糖）不干扰穿琥宁的限度检测。8.检验方法验证检验方法验证8.2 检测限试验检测限试验 试验方法：精密称取约穿琥宁10mg，置100ml容量瓶中，加流动相溶解稀释至刻度，摇匀，作为母液。分别取母液稀释成10g/ml、5g/ml、1g/ml、0.2g/ml、0.04g/ml的溶液，精密量取10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。接受标准：以信噪比为3：1计算检测限。8.检验方法验证检验方法验证8.3 8.3 化学残留限度测定化学残留限度测定 色谱条件与系统适用性
17、试验色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂剂；以0.05%磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节PH值至2.50.05）-甲醇（3：7）为流动相；检测波长为251nm。理论板数按脱水穿心莲内酯琥珀酸半脂峰计算不低于3000。测定法：测定法：精密量取最终冲洗水7.5ml（约相当于残留穿琥宁10mg），置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10l，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品，同法测定。接受标准接受标准：最终冲洗水中残留穿琥宁的峰面积不得超过对照品的峰面积。8.检验方法验证检验方法验证8.4 8.4 样品溶液稳定性试验样品溶液稳定性试验
18、 试验方法：将最终冲洗水样室温放置24小时，每隔2小时测定一次含量，共6次。接受标准：测定结果不低于初始值的90%。9、喷淋球覆盖验证 操作方法：取维生素B2(核黄素)50mg，加水5000ml使溶解。用洁净布蘸取维生素B2溶液，均匀涂抹在浓配罐和稀配罐内表面，尤其是罐顶封头部位。放置4小时，用荧光灯照射罐体内表面，可见明显黄绿色荧光。完全开启浓配罐、稀配罐顶部的注射用水阀门，用热水（7080）喷淋冲洗罐体内表面3分钟。接受标准：在荧光灯照射下，罐体内表面无荧光显现。1010、清洁验证实施、清洁验证实施 操作方法：按注射用穿琥宁生产工艺规程（STP-FZ-1007-00）规定的处方量（0.2g每9.2万支处方）连续进行3个批次的配液操作，每天1批。灌装结束后，放置4小时，再按PYG300-550型配液系统清洁标准操作规程（草案）清洁配液系统。按本方案规定的取样位置、取样方法、取样量，由经培训合格的取样人取样。接受标准：记录准确、完整。11、清洁有效期的确认、清洁有效期的确认 操作方法：清洁保留24小时后，最终冲洗方法再次冲洗配液系统，取样，检查微生物限度；接受标准：8CFU/100ml。12、偏差的处理 根据验证结果超标情况，对清洁验证过程，包括清洁规程、取样方法、清洁实施情况等方面进行调查；风险分析；制定新方案；重新验证。
