1、细菌感染的诊断与防治细菌感染的诊断与防治第1页，共27页。第一节第一节 细菌学诊断细菌学诊断 可以引起人类感染的病原菌有成百上千种，对可以引起人类感染的病原菌有成百上千种，对于每一例患者来说，究竟是何种细菌引起的感染？于每一例患者来说，究竟是何种细菌引起的感染？是内源性感染或是外源性感染？是医院感染或是是内源性感染或是外源性感染？是医院感染或是社会感染？是偶发感染或是大规模流行性感染？社会感染？是偶发感染或是大规模流行性感染？要明确这些问题都必须进行准确、快速的病原学要明确这些问题都必须进行准确、快速的病原学鉴定。因此，病原学检测与鉴定是监测和防治传鉴定。因此，病原学检测与鉴定是监测和防治传染
2、病的最关键，最重要的步骤。染病的最关键，最重要的步骤。第2页，共27页。收集临床标本收集临床标本提供相关临床资料提供相关临床资料正确取材正确取材形态学检查形态学检查分离培养及鉴定分离培养及鉴定动物试验动物试验生化反应生化反应药敏试验药敏试验血清学鉴定血清学鉴定形态学鉴定形态学鉴定分子生物学鉴定分子生物学鉴定快速检测快速检测免疫学检测免疫学检测核酸检测核酸检测 自动化检测自动化检测 病原菌的检验程序病原菌的检验程序第3页，共27页。一、临床标本采集送检及原则临床标本采集送检及原则p尽早采集标本尽早采集标本p不同疾病取不同材料不同疾病取不同材料p不同病程取不同材料不同病程取不同材料p严格无菌操作，
3、尽量避免杂菌污染严格无菌操作，尽量避免杂菌污染p即使送检，正确即使送检，正确 运送运送p准确作好标识准确作好标识第4页，共27页。致病菌的检验程序致病菌的检验程序药物敏感试验药物敏感试验直接涂片检查直接涂片检查分离培养分离培养生化试验生化试验血清学试验血清学试验动物试验动物试验明明确确诊诊断断初步诊断初步诊断分子生物学技术分子生物学技术其他检测技术其他检测技术第5页，共27页。二、形态学检查二、形态学检查1.1.涂片染色与镜检涂片染色与镜检革兰染色革兰染色抗酸染色抗酸染色镀银染色镀银染色墨汁涂片负染色墨汁涂片负染色2.2.不染色标本检查细菌动力不染色标本检查细菌动力3.3.暗视野显微镜检查暗视
4、野显微镜检查第6页，共27页。三、三、分离培养与鉴定分离培养与鉴定培养原则培养原则1 1、营养要求不高的细菌用普通培养基、营养要求不高的细菌用普通培养基2 2、营养要求高的用营养培养基。如血琼脂培养基、营养要求高的用营养培养基。如血琼脂培养基3 3、厌氧菌用厌氧培养基、厌氧菌用厌氧培养基4 4、正常菌群部位采集的标本，应使用选择性或鉴、正常菌群部位采集的标本，应使用选择性或鉴别性培养基别性培养基第7页，共27页。鉴定原则鉴定原则 1 1、形态学检查、形态学检查 2 2、生化试验、生化试验 3 3、血清学试验、血清学试验 4 4、动物试验、动物试验 5 5、分子生物学技术、分子生物学技术第8页，
5、共27页。五、细菌快速检测法五、细菌快速检测法1.1.免疫学检测免疫学检测 用已知特异性抗血清或单抗，检测标本中相用已知特异性抗血清或单抗，检测标本中相应的细菌性抗原，作出早期诊断。常用方法有：应的细菌性抗原，作出早期诊断。常用方法有：ELISAELISA；直接法、间接法；直接法、间接法免疫荧光技术；直接法；间接法免疫荧光技术；直接法；间接法协同凝集试验；协同凝集试验；血凝试验；血凝试验；乳胶凝集试验；乳胶凝集试验；金标技术；金标技术；第9页，共27页。2.2.核酸检测核酸检测 包括核酸探针杂交和包括核酸探针杂交和PCRPCR。主要用于标本中含量少、生长极为缓慢或难主要用于标本中含量少、生长极
6、为缓慢或难于生长的细菌检测。于生长的细菌检测。核酸探针检测较为准确，但操作较复杂；核酸探针检测较为准确，但操作较复杂；PCRPCR技术快速、敏感，但常受到非特异性因素的技术快速、敏感，但常受到非特异性因素的影响。影响。第10页，共27页。3.3.临床细菌鉴定系统临床细菌鉴定系统 主要用于对临床分离获得的细菌进行种、属鉴定和抗生素敏主要用于对临床分离获得的细菌进行种、属鉴定和抗生素敏感试验快速自动化的分析。感试验快速自动化的分析。可由细菌鉴定系统和药敏试验系统两部分组成，能够检可由细菌鉴定系统和药敏试验系统两部分组成，能够检查出感染的病原菌及其耐药性。查出感染的病原菌及其耐药性。对于待测菌的分析
7、，常用数值分类法。该方法以细菌的各种特性对于待测菌的分析，常用数值分类法。该方法以细菌的各种特性同等重要为理论基础，根据每种生化反应特性在不同细菌中出现的概同等重要为理论基础，根据每种生化反应特性在不同细菌中出现的概率进行全面分析。通过比较待测菌与分类体系中已知菌的生化特性的率进行全面分析。通过比较待测菌与分类体系中已知菌的生化特性的相似性，判断待测菌的归属。该方法适于计算机进行大量的数据运算，相似性，判断待测菌的归属。该方法适于计算机进行大量的数据运算，是自动化分析仪器普遍采用的方法。是自动化分析仪器普遍采用的方法。第11页，共27页。HX-21细菌鉴定/药敏分析仪 第12页，共27页。第1
8、3页，共27页。第二节第二节 细菌感染的特异性预防细菌感染的特异性预防特异性预防特异性预防人工主动免疫人工主动免疫人工被动免疫人工被动免疫接种抗原性物质，接种抗原性物质，机体自动产生免疫力机体自动产生免疫力注入免疫物质，注入免疫物质，机体被动获得免疫力机体被动获得免疫力产生慢产生慢维持长维持长用于预防用于预防产生快产生快维持短维持短用于治疗或用于治疗或紧急预防紧急预防第14页，共27页。一、人工主动免疫一、人工主动免疫 所用生物制品，称为疫苗所用生物制品，称为疫苗 人工主动免疫人工主动免疫生物制品的种类生物制品的种类 包括细菌菌苗、病毒疫苗、新型疫苗（亚单位包括细菌菌苗、病毒疫苗、新型疫苗（亚
9、单位疫苗、核酸疫苗、治疗性疫苗等）、类毒素、疫苗、核酸疫苗、治疗性疫苗等）、类毒素、自身疫苗自身疫苗等。第15页，共27页。1.1.死疫苗死疫苗 选用免疫原性强的标准微生物经大量培养后，用物理或化选用免疫原性强的标准微生物经大量培养后，用物理或化学方法将其杀死后制成。其虽失去繁殖能力，但仍保持免疫学方法将其杀死后制成。其虽失去繁殖能力，但仍保持免疫原性原性 目前常用的死疫苗有伤寒、百日咳、钩端螺旋体、乙脑、目前常用的死疫苗有伤寒、百日咳、钩端螺旋体、乙脑、流脑等疫苗流脑等疫苗第16页，共27页。2 2活疫苗活疫苗 用减毒或无毒的病原体制成。用减毒或无毒的病原体制成。常用的有卡介苗、脊髓灰质灸疫
10、苗、麻疹疫苗等。常用的有卡介苗、脊髓灰质灸疫苗、麻疹疫苗等。此类疫苗进入机体后有一定的增殖能力，类似自然状态下此类疫苗进入机体后有一定的增殖能力，类似自然状态下的轻型或隐件感染，免疫系统受刺激的时间长，故一般只需的轻型或隐件感染，免疫系统受刺激的时间长，故一般只需注射一次即可获得较好的免疫效果注射一次即可获得较好的免疫效果 缺点是不易保存，有效期较短缺点是不易保存，有效期较短 死、活疫苗的比较见表死、活疫苗的比较见表第17页，共27页。活疫苗与死疫苗比较活疫苗与死疫苗比较第18页，共27页。3.3.类毒素类毒素 细菌的外毒素经细菌的外毒素经o.3o.3一一o.4o.4甲醒处理，毒性甲醒处理，毒
11、性消失而保留其免疫原性，即为类毒素消失而保留其免疫原性，即为类毒素 常用的类毒素有白喉、破伤风类毒素常用的类毒素有白喉、破伤风类毒素第19页，共27页。4.4.新疫苗的研制新疫苗的研制 (1)(1)亚单位疫苗亚单位疫苗 不含病原体核酸，仅含能诱发宿主产生中和抗不含病原体核酸，仅含能诱发宿主产生中和抗体的蛋白或表面抗原体的蛋白或表面抗原 如流感病毒血凝素、神经氨酸酶亚单位疫苗、如流感病毒血凝素、神经氨酸酶亚单位疫苗、腺病毒衣壳、脑膜炎球菌、肺炎球菌荚膜多糖亚腺病毒衣壳、脑膜炎球菌、肺炎球菌荚膜多糖亚单位疫苗等单位疫苗等 (2)(2)基因工程疫苗或基因工程疫苗或DNADNA重组疫苗重组疫苗 (3)
12、(3)核酸疫苗核酸疫苗 (4)(4)转基因植物疫苗转基因植物疫苗第20页，共27页。二、人工被动免疫二、人工被动免疫 生物制品生物制品：免疫血清（抗毒素、抗菌血清）、丙种球蛋白、免疫血清（抗毒素、抗菌血清）、丙种球蛋白、免疫球蛋白、免疫细胞、细胞因子等免疫球蛋白、免疫细胞、细胞因子等1 1抗毒素抗毒素 主要有破伤风抗毒素、白喉抗毒素、肉毒抗毒主要有破伤风抗毒素、白喉抗毒素、肉毒抗毒 素及气性坏疽多价抗毒素等素及气性坏疽多价抗毒素等。2.2.胎盘球蛋白和血浆丙种球蛋白胎盘球蛋白和血浆丙种球蛋白 此类制剂可作为以上病原体感染的紧急预此类制剂可作为以上病原体感染的紧急预 防。防。此外还可用于治疗丙种
13、球蛋白缺乏症患者此外还可用于治疗丙种球蛋白缺乏症患者 3.3.细胞因子细胞因子第21页，共27页。(1)(1)转移因子（转移因子（TF)TF)是从外周血、扁桃体、脾脏等部位的白细胞冻是从外周血、扁桃体、脾脏等部位的白细胞冻融后提取的可透析物制成的低分子物质。能特异融后提取的可透析物制成的低分子物质。能特异性地转移细胞免疫，从而增强受者的细胞免疫功性地转移细胞免疫，从而增强受者的细胞免疫功能，主要用于细胞免疫功能低下引的疾病的免疫能，主要用于细胞免疫功能低下引的疾病的免疫治疗。如皮肤念珠菌病、肿瘤等。治疗。如皮肤念珠菌病、肿瘤等。第22页，共27页。(2)(2)干扰素（干扰素（IFN)IFN)是
14、由干扰素诱生剂诱导有关细胞产生的一种具有抗病是由干扰素诱生剂诱导有关细胞产生的一种具有抗病毒活性及免疫调节效应的糖蛋白。毒活性及免疫调节效应的糖蛋白。IFNIFN可用于治疗病毒性感染可用于治疗病毒性感染 如乙型肝炎、单纯疱疹性角膜炎、如乙型肝炎、单纯疱疹性角膜炎、带状疱疹、呼吸道病毒感染等。因其能增强巨噬细胞和带状疱疹、呼吸道病毒感染等。因其能增强巨噬细胞和NKNK细胞活细胞活性所以也用于多种肿瘤的免疫治疗性所以也用于多种肿瘤的免疫治疗(3)(3)肿瘤坏死因子（肿瘤坏死因子（TNF)TNF)是由巨噬细胞、淋巴细胞产生的，能引起培养细胞及肿是由巨噬细胞、淋巴细胞产生的，能引起培养细胞及肿瘤细胞的
15、坏死并对免疫细胞有调节、诱导作用。现已重组成瘤细胞的坏死并对免疫细胞有调节、诱导作用。现已重组成功可用于肿瘤治疗，但有功可用于肿瘤治疗，但有定的副作用。定的副作用。第23页，共27页。(4)(4)白细胞介素白细胞介素22 是由活化的是由活化的T T细胞产生的细胞产生的种具有多种生物学种具有多种生物学效应的淋巴因子。它能促进效应的淋巴因子。它能促进T T细胞、细胞、B B细胞、细胞、NKNK细细胞的增殖、分化增强各种免疫效应细胞的治胞的增殖、分化增强各种免疫效应细胞的治疗诱导干扰素产生及参与免疫调节等疗诱导干扰素产生及参与免疫调节等 目前已用于多种与免疫相关病的治疗，如肿瘤、目前已用于多种与免疫
16、相关病的治疗，如肿瘤、病毒感染、自身免疫病、艾滋病等。特别是在肿病毒感染、自身免疫病、艾滋病等。特别是在肿瘤的免疫治疗中，显示出较好效果瘤的免疫治疗中，显示出较好效果.第24页，共27页。三、生物制品使用的注意事项三、生物制品使用的注意事项 对象对象 途径途径 剂量剂量 次数次数 时间时间 禁忌症等禁忌症等第25页，共27页。人工主动免疫与被动免疫比较人工主动免疫与被动免疫比较人工主动免疫人工主动免疫人工被动一面免疫人工被动一面免疫产生免疫的物质产生免疫的物质抗原（微生物制剂、抗原（微生物制剂、毒素制剂）毒素制剂）现成的免疫抗体现成的免疫抗体免疫力出现的时间免疫力出现的时间慢、要经慢、要经1-41-4周诱周诱导期导期快、无须诱导快、无须诱导免疫力保持时间免疫力保持时间长（数月长（数月-数年）数年）较短（较短（2 2周周-数月）数月）用途用途主要用于预防主要用于预防主要用于治疗及紧主要用于治疗及紧急预防急预防第26页，共27页。第27页，共27页。
