经典课件-某某公司比色法测定生物试样中钙的含量.pptx

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1、1.钙在生物中的生理功能及其应用钙在生物中的生理功能及其应用2.实验原理简介实验原理简介3实验方法及步骤实验方法及步骤 钙与磷酸一起存在于骨骼中,在无机质中它是生钙与磷酸一起存在于骨骼中,在无机质中它是生物中含量最多的。作为电解质和钾、钠一起分布在体物中含量最多的。作为电解质和钾、钠一起分布在体液中,维持着各种重要的生理功能液中,维持着各种重要的生理功能.对于细胞渗透压的调节,钙具有使之减小的作用。对于细胞渗透压的调节,钙具有使之减小的作用。另外在增加肌肉紧张性的肌肉收缩方面也起着重要作另外在增加肌肉紧张性的肌肉收缩方面也起着重要作用。钙是使神经系统和肌肉兴奋的重要离子之一,另用。钙是使神经系

2、统和肌肉兴奋的重要离子之一,另外,作为酶的活性化成份,它是起血液凝固和消化作外,作为酶的活性化成份,它是起血液凝固和消化作用的重要成分。在内科领域中,对骨科、消化系统、用的重要成分。在内科领域中,对骨科、消化系统、循环系统、肾、内分泌、代谢、血液、神经等病患的循环系统、肾、内分泌、代谢、血液、神经等病患的病态生理起着重要的作用病态生理起着重要的作用.钙在生物中的生理功能及其应用 在体液中,钙在达到动态平衡的一定在体液中,钙在达到动态平衡的一定的狭窄范围里,浓度是一定的,此范围的狭窄范围里,浓度是一定的,此范围的微小变化,可作为诊断疾病的标准。的微小变化,可作为诊断疾病的标准。如上所述,在体液、

3、生物试样,特别是如上所述,在体液、生物试样,特别是血清中,钙浓度的变化,在临床上有重血清中,钙浓度的变化,在临床上有重要意义,所以它是临床检查上必须测定要意义,所以它是临床检查上必须测定的元素。的元素。真不可思议!真不可思议!实验原理简介 钙与邻甲酚酞氨羧络合剂显色,从而测定生物试样中钙的含量。由于生物试样中含有镁,且也能与邻甲酚酞氨羧络合剂显色,故需加入8-羧基喹啉-5磺酸作为镁的掩蔽剂,同时用巯基化合物,硫醚化合物、二硫醚化合物或这些化合物的混合物作为邻甲酚酞氨羧络合剂或8-羧基喹啉-5磺酸的稳定剂.显色时加入柠檬酸或柠檬酸盐或他们的混合物,使工作曲线成为一条通过原点的直线。保存期发色溶液

4、立即比色15天30天60天含巯乙醇的溶液0.3000.3000.3000.300不含含巯乙醇的溶液0.3000.3600.4140.571试剂空白值(以水作参比的吸光度)标准工作曲线示例图Ca的浓度吸光度未加缓冲溶液 加缓冲溶液 实验方法及步骤 试剂的配制:(1)将6毫克邻甲酚酞氨羧络合剂、0.4克8-羧基喹啉-5磺酸溶解在50毫升单乙醇胺水溶液中,用N-HCl调节pH=5.5,加蒸馏水稀释到100毫升。作为发色溶液 (2)将5.5克单乙醇胺和0.2克硼酸溶解于蒸馏水中,稀释到一百毫升作为缓冲溶液。(pH=11.0)(3)将0.1克柠檬酸(一水化合物)溶解于缓冲溶液1中,作为缓冲溶液2(pH=11.0)。标准曲线的绘制:分别取该浓度为2.5、5.0、7.5、10.0、15.0、20.0毫克每分升的标准溶液10毫升加入2.0毫升缓冲溶液2,加入1.0毫升发色溶液,摇匀后。放置5分钟,再570毫微米波长处对照试剂空白,测定吸光度。以纵轴为吸光度,横轴为钙浓度绘制工作曲线血清钙的测定:取50微升血清,加入2.0毫升缓冲溶液,摇匀后,加入1.0毫升发色溶液,摇匀,在570毫微米波长处,对照试剂空白测定吸光度。由标准工作曲线求出血清中钙的浓度。胡华东3 Q参考文献:03081043

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