1、 HLA与血小板血型与血小板血型北京大学人民医院北京大学人民医院田文沁田文沁88325291主要内容主要内容HLA概念、基因结构及遗传特征概念、基因结构及遗传特征HLA生物学功能及临床应用生物学功能及临床应用HLA分型方法及抗体检测分型方法及抗体检测血小板血型抗原的概念及分类血小板血型抗原的概念及分类血小板血型抗原抗体的检测方法血小板血型抗原抗体的检测方法血小板血型抗原抗体的临床意义血小板血型抗原抗体的临床意义输血对器官移植的免疫学影响输血对器官移植的免疫学影响骨髓移植与输血骨髓移植与输血器官移植与输血器官移植与输血HLA的概念的概念（human leukocyte antigen）HLA是人
2、类白细胞抗原，是指第是人类白细胞抗原，是指第6条染条染色体短臂上一段基因和由其编码的抗原色体短臂上一段基因和由其编码的抗原的总称的总称 承担着机体承担着机体识别识别自己和非己的基本免疫自己和非己的基本免疫功能功能主要组织相容性抗原主要组织相容性抗原（Major histocompatibility system）与移植排斥有关的抗原与移植排斥有关的抗原 称为组织相容性抗原称为组织相容性抗原能引起快而强的排斥反应的抗原能引起快而强的排斥反应的抗原 称为称为主要组织相容性抗原主要组织相容性抗原MHS代表个体特异性，视作个体的代表个体特异性，视作个体的“身份证身份证”人类白细胞分化抗原人类白细胞分化
3、抗原（Leukocyte differentiation antigen LDA）是指不同谱系白细胞在分化发育不同是指不同谱系白细胞在分化发育不同阶段以及活化过程中，出现或消失的阶段以及活化过程中，出现或消失的表面标记表面标记 分化群分化群CD（Cluster of differentiation,CD）应用以单克隆抗体鉴定为主的方法，将不应用以单克隆抗体鉴定为主的方法，将不同实验室的单克隆抗体所识别的同一分化同实验室的单克隆抗体所识别的同一分化抗原，其编码基因及表达细胞均鉴定明确抗原，其编码基因及表达细胞均鉴定明确者，称者，称CD分化群分化群CD（Cluster of differentia
4、tion,CD）分组分组CD编号编号T细胞细胞CD2CD5，CD8，CD28，CD152B细胞细胞CD19CD24，CD40，CD7286血小板血小板CD41，CD42，CD63，CD107髓样细胞髓样细胞CD3136，CD6468，CD93NKCD16，CD5259内皮细胞内皮细胞CD105，CD106HLA基因结构与遗传基因结构与遗传HLA具有高度多态性具有高度多态性 HLA-A、HLA-B和和HLA-C抗原，抗原，统称为统称为HLA-I类抗原类抗原 HLA-DR、HLA-DQ和和HLA-DP 称为称为II类抗原类抗原 HLA基因结构与遗传基因结构与遗传HLA基因结构分为基因结构分为3个区
5、域，分别称之个区域，分别称之HLA-I类、类、HLA-II类和类和HLA-III类基因类基因编码膜蛋白编码膜蛋白膜蛋白膜蛋白编码可溶性分子编码可溶性分子HLA的生物学功能的生物学功能其中心功能是其中心功能是对外界侵入异物的识别和排斥对外界侵入异物的识别和排斥 对自身衰老和变异细胞的识别和清除对自身衰老和变异细胞的识别和清除HLA的生物学功能的生物学功能控制免疫应答控制免疫应答 抗原呈递抗原呈递 T细胞选择细胞选择 调节调节NK细胞的活性细胞的活性 参与妊娠免疫调节参与妊娠免疫调节 HLA的临床应用的临床应用输血输血（一）非溶血性发热反应（一）非溶血性发热反应临床输血中占临床输血中占55-75%
6、，多数是由，多数是由HLA抗体破坏白细胞后释放出致热原引起抗体破坏白细胞后释放出致热原引起 输血时选择少白细胞成分输血输血时选择少白细胞成分输血避免该反应的简单方法就是避免该反应的简单方法就是 滤除白细滤除白细胞胞 HLA的临床应用的临床应用输血输血（二）血小板输注无效（二）血小板输注无效 临床中反复输血，增加血小板输注无临床中反复输血，增加血小板输注无效发生率，多由效发生率，多由HLA抗体阳性造成，抗体阳性造成，20-25%同时伴有血小板特异性抗体。同时伴有血小板特异性抗体。处理方法：处理方法：少白细胞成分输注少白细胞成分输注 血小板特殊配型血小板特殊配型 HLA的临床应用的临床应用 减少减
7、少 HLA免疫免疫 辐照辐照灭活灭活WBC 滤除滤除 白细胞白细胞免疫抑制免疫抑制HLA的临床应用的临床应用器官移植器官移植HLA能激活能激活T淋巴细胞增殖和（或）细淋巴细胞增殖和（或）细胞溶解，产生宿主抗移植物反应胞溶解，产生宿主抗移植物反应（HVGR）或移植物抗宿主病）或移植物抗宿主病（GVHD），导致移植失败），导致移植失败。与与HLA最密切的器官移植是骨髓移植最密切的器官移植是骨髓移植（BMT），），HVGR和和GVHD是影响骨髓是影响骨髓存活的两个重要问题，发生的主要原因存活的两个重要问题，发生的主要原因是是HLA不合。不合。HLA的临床应用的临床应用疾病关联疾病关联系统性红斑狼疮系
8、统性红斑狼疮B8类风湿性关节炎类风湿性关节炎DR4慢性活动性肝炎慢性活动性肝炎B8 牛皮牛皮癣癣B37 重症肌无重症肌无力力D8 强直性脊柱炎强直性脊柱炎B27 特定特定HLA等位基因等位基因阳性关联阳性关联个体个体HLA的临床应用的临床应用骨髓库与脐血库骨髓库与脐血库 BMT要求要求HLA-I类及类及II类分子匹配类分子匹配由于由于HLA的多态性，随机人群中配型的多态性，随机人群中配型完全相合的概率极低，完全相合的概率极低，HLA相合的供相合的供者极难找到。者极难找到。建立大规模的志愿献髓者的建立大规模的志愿献髓者的HLA分型分型数据库，即数据库，即“骨髓库骨髓库”，具有重要的，具有重要的临
9、床意义。临床意义。HLA的分型方法的分型方法序列特异性引物（序列特异性引物（PCR/SSP）序列特异性寡核苷酸探针（序列特异性寡核苷酸探针（PCR-SSOP）每个每个HLA等位基因中存在一个特定的核等位基因中存在一个特定的核苷酸序列，它决定该苷酸序列，它决定该HLA的多态性和型的多态性和型别别 HLA的分型方法的分型方法人工合成的寡核苷酸探针可用于人工合成的寡核苷酸探针可用于检测这些已知的多态现象检测这些已知的多态现象将扩增和固定的将扩增和固定的DNA标本与人工标本与人工合成的合成的DNA探针一起孵育、洗涤探针一起孵育、洗涤再用放射性自显影技术检测再用放射性自显影技术检测阳性反应显示出与标记探
10、针匹配阳性反应显示出与标记探针匹配的的DNA序列序列 Platelet Antigen Genotyping:PCR-SSPHLA抗体检测抗体检测抗体筛选抗体筛选抗体鉴定抗体鉴定交叉淋巴细胞毒试验交叉淋巴细胞毒试验 本实验主要用于骨髓移植配型、本实验主要用于骨髓移植配型、肾移植配型和血小板配型肾移植配型和血小板配型 血小板血型血小板血型血型是所有血液成分的遗传性标志。血型是所有血液成分的遗传性标志。血型的发现血型的发现红细胞血型：红细胞血型：1900年，年，Landsteiner发现发现ABO血型。血型。血小板血型：血小板血型：1959年，年，Van Loghem发现发现Zwa血型血型白细胞血
11、型：白细胞血型：19601960年，年，LalezariLalezari发现发现HNA 1965年，年，Bassuat发现发现HLA血小板血型的发现血小板血型的发现HPA-1血型系统：血型系统：1959年，年，van LoghemHPA-2血型系统：血型系统：1962年，年，van der WeerdtHPA-3血型系统：血型系统：1980年，年，HPA-4血型系统：血型系统：1985年，年，FriedmanHPA-5血型系统：血型系统：1988年，年，Kiefel血小板血型系统血小板血型系统血小板表面具有复杂的血型抗原血小板表面具有复杂的血型抗原由遗传决定由遗传决定血小板血型抗原分类血小板血
12、型抗原分类血小板血型抗原主要有二大类（除外药物血小板血型抗原主要有二大类（除外药物抗原）：抗原）：血小板特异性抗原血小板特异性抗原(HPA)血小板相关抗原血小板相关抗原(HLA)共有的共有的独特的独特的血小板血型抗原血小板血型抗原（一）血小板相关抗原：（一）血小板相关抗原：血小板表面存在的与其他细胞或血小板表面存在的与其他细胞或组织共有的抗原组织共有的抗原 包括组织相容性抗原（包括组织相容性抗原（HLA）和）和红细胞红细胞ABO血型系统相关抗原血型系统相关抗原 血小板血型抗原血小板血型抗原（二）血小板特异性抗原血小板特异性抗原(HPA)血小板特有的抗原血小板特有的抗原 表现独特的遗传多态性表现
13、独特的遗传多态性 在其它细胞和组织上不能发现在其它细胞和组织上不能发现血小板血型抗原血小板血型抗原ABO系统血型抗原系统血型抗原 血小板表面存在红细胞血小板表面存在红细胞ABOABO系统的系统的A A抗原抗原和和B B抗原，血小板上没有抗原，血小板上没有RhDRhD抗原抗原 ABOABO型不合的血小板输注，影响血小板寿型不合的血小板输注，影响血小板寿命命 尽量选择尽量选择ABOABO同型血小板输注同型血小板输注血小板血型抗原血小板血型抗原HLA血型抗原血型抗原血小板存在血小板存在HLA-AHLA-A和和B B位点的一类抗原位点的一类抗原尚未发现尚未发现DRDR、DPDP、DQDQ等二类抗原等二
14、类抗原应用氯喹或酸溶液在应用氯喹或酸溶液在00处理血小板，处理血小板，能够除去血小板表面能够除去血小板表面HLAHLA抗原，这为应抗原，这为应用处理后血小板治疗血小板输注无效用处理后血小板治疗血小板输注无效提供了重要依据提供了重要依据血小板血型抗原血小板血型抗原HPA抗原抗原（Human platelet antigen,HPA）人类血小板特异性抗原是位于人类血小板特异性抗原是位于 血小板膜糖蛋白（血小板膜糖蛋白（glycoprotein，GP）上的抗原表位。上的抗原表位。血小板特异性抗原是通过相应抗体血小板特异性抗原是通过相应抗体 的检出而发现的的检出而发现的血小板特异性抗原的命名血小板特异
15、性抗原的命名 血小板特异性同种抗原系统国际命名为血小板特异性同种抗原系统国际命名为 人类血小板抗原系统（人类血小板抗原系统（HPA）。）。不同的抗原系统按发现顺序用数字编号不同的抗原系统按发现顺序用数字编号 2 2个对偶抗原组成的遗传系统中个对偶抗原组成的遗传系统中,对偶基因分别对偶基因分别用英文小写字母用英文小写字母a a和和b b表示。表示。只有在只有在2 2个对偶抗原全被检测出来后个对偶抗原全被检测出来后,才能被称才能被称为系统。为系统。目前被国际输血协会确认的血小板特异性抗原目前被国际输血协会确认的血小板特异性抗原有有7个系统共个系统共28种抗原，正式命名为种抗原，正式命名为HPA-1
16、HPA-6，HPA15。PNCPNC(血小板命名委员会血小板命名委员会)2003年国际输血协会（年国际输血协会（ISBT）和国际血栓）和国际血栓和止血协会（和止血协会（ISTH）建立了血小板命名委）建立了血小板命名委员会（员会（The Platelet Nomenclature Committee，PNC）。血小板特异性抗原的分子生物学血小板特异性抗原的分子生物学 在已知其分子机理的在已知其分子机理的28个血小板抗原中，个血小板抗原中，其基因多态性大多是由于相应血小板膜其基因多态性大多是由于相应血小板膜糖蛋白结构基因中的糖蛋白结构基因中的SNP(single nucleotide polymo
17、rphism)引起，而致相引起，而致相应位置的单个氨基酸变异所致。应位置的单个氨基酸变异所致。HPA 4HPA 5HPA 1HPA 2HPA 3血小板血型检测技术血小板血型检测技术近年来，随着分子免疫学、分子生物学近年来，随着分子免疫学、分子生物学的发展和各种标记技术在医学领域的应的发展和各种标记技术在医学领域的应用，血小板血清学检测方法有了很大进用，血小板血清学检测方法有了很大进展，一些分子生物学技术也开始应用于展，一些分子生物学技术也开始应用于血小板血型分型。血小板血型分型。血小板血型检测技术血小板血型检测技术除血小板特异性抗原除血小板特异性抗原HPA外，血小板表面外，血小板表面的的HLA
18、、ABO等抗原具有重要临床意义。等抗原具有重要临床意义。由于由于ABO血型可用相关红细胞方便地检测，血型可用相关红细胞方便地检测，故临床上对血小板血型的检测主要集中在故临床上对血小板血型的检测主要集中在HPA和和HLA的检测上。的检测上。血小板抗原抗体血清学检测血小板抗原抗体血清学检测也称血小板血型相容性检测也称血小板血型相容性检测同红细胞血型血清学检测一样，包括同红细胞血型血清学检测一样，包括血型鉴定、抗体筛检和鉴定，以及交血型鉴定、抗体筛检和鉴定，以及交叉配血叉配血微柱凝集间接免疫反应技术使血小板微柱凝集间接免疫反应技术使血小板免疫学工作有突破性进展免疫学工作有突破性进展血小板抗原抗体血清
19、学检测血小板抗原抗体血清学检测 l固相红细胞吸附试验（固相红细胞吸附试验（SPRCASPRCA）l修饰的抗原捕获修饰的抗原捕获ELISAELISA分析分析(ELISA,MACE)(ELISA,MACE)l单克隆抗体固着血小板抗原分析（单克隆抗体固着血小板抗原分析（MAIPAMAIPA）l流式细胞术流式细胞术(FCM)(FCM)l微柱凝胶间接免疫分析技术（微柱凝胶间接免疫分析技术（MGIAMGIA）l基因检测技术基因检测技术固相红细胞粘附实验（固相红细胞粘附实验（SPRCA）AHGAHG致敏红细胞作为指示细胞致敏红细胞作为指示细胞Commercial Assay(Capture P);Rapid
20、 testCommercial Assay(Capture P);Rapid test敏感性和特异性低。敏感性和特异性低。使用完整血小板作为抗原，不能分辨抗体类别使用完整血小板作为抗原，不能分辨抗体类别主观性比较强，通过红细胞的凝集作为判断标准。主观性比较强，通过红细胞的凝集作为判断标准。试剂有效期短。试剂有效期短。血小板抗原与抗体血小板抗原与抗体自身抗体同种抗体抗原抗体复合物洗涤静置4小时或离心抗体抗原SPRCASPRCA包被了抗人包被了抗人IgG的指示红细胞的指示红细胞阳性反应阳性反应阴性反应阴性反应血小板抗体检测抗体分类抗体分类 一类主要是针对人类组织相容性抗原一类主要是针对人类组织相容
21、性抗原 HLAHLA类抗原的抗体类抗原的抗体,即血小板表面相关抗即血小板表面相关抗体体(PAIgGPAIgG)一类是针对一类是针对GPGP抗原的血小板特异性抗体抗原的血小板特异性抗体 (PBIgGPBIgG)血小板特殊配型血小板特殊配型双盲交叉配血：微量淋巴细胞毒试验双盲交叉配血：微量淋巴细胞毒试验目的：血小板特殊配型，避免无效输注目的：血小板特殊配型，避免无效输注原理：原理：结果：选择反应阴性供者输注结果：选择反应阴性供者输注 患者血清患者血清供者供者Lc补体补体着色阳性着色阳性伊红染色伊红染色细胞穿洞细胞穿洞非着色阴性非着色阴性血小板交叉试验血小板交叉试验 最有效、最有效、经济、简便经济、
22、简便交叉试验是一种非常好的解决交叉试验是一种非常好的解决血小板输注无效的方法血小板输注无效的方法血小板抗体发生率血小板抗体发生率 检测检测223 例血小板输注无效患者例血小板输注无效患者 血小板抗体阳性血小板抗体阳性80例例（35.87%）（）（20-5020-50）HPA抗体抗体1例例（占（占1.25%），），HLA抗体抗体75例例（占（占93.75%），同时含有），同时含有HLA和和HPA 抗体抗体者者4例（例（5%）输注无效绝大多数由输注无效绝大多数由HLA抗体引起抗体引起血小板输注无效的处理血小板输注无效血小板输注无效（首先排除非免疫因素及血小板质量低下首先排除非免疫因素及血小板质量低
23、下）HLA交叉配血（交叉配血（HLA抗体）抗体）仍输注无效仍输注无效 抗体特异性预测抗体特异性预测 交叉配血配不上的交叉配血配不上的 选择供者选择供者 血小板特殊配型血小板特殊配型血小板血小板HPA抗体检测抗体检测血小板抗原检测血小板抗原检测血小板血型的主要临床意义血小板血型的主要临床意义免疫性血小板减少症免疫性血小板减少症 自身免疫性血小板减少症（自身免疫性血小板减少症（AITP)同种免疫性血小板减少症同种免疫性血小板减少症 （ITP）药物诱导免疫性血小板减少症药物诱导免疫性血小板减少症(DIIT)血小板抗原同种免疫的反应机制血小板抗原同种免疫的反应机制血小板糖蛋白被自身或同种异基因效应血小
24、板糖蛋白被自身或同种异基因效应T细胞和细胞和B细胞所识别，产生相应的抗体，细胞所识别，产生相应的抗体，结合到相应的血小板抗原上结合到相应的血小板抗原上巨噬细胞表面的巨噬细胞表面的Fc受体与抗体分子的受体与抗体分子的Fc片段结合后，在脾脏内血小板被巨噬细片段结合后，在脾脏内血小板被巨噬细胞吞噬，引起血小板减少症胞吞噬，引起血小板减少症自身免疫性血小板减少症自身免疫性血小板减少症（AITP)AITP)AITP比自身免疫性溶血性贫血比自身免疫性溶血性贫血（AIHA)更常见。更常见。PAIgG检测是其最有价值的试验。检测是其最有价值的试验。但是但是PAIgG并非特异，其阳性诊断并非特异，其阳性诊断价值
25、仅为价值仅为46%，阴性诊断价值为，阴性诊断价值为82%。同种免疫性血小板减少症同种免疫性血小板减少症 新生儿同种免疫性血小板减少症新生儿同种免疫性血小板减少症（NAIA）输血后紫癜输血后紫癜（PTP）血小板输注无效血小板输注无效（PTR）NAITP Ethiologyplateletplateletplatelet新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜（NAIA NAIA）NAIA类似于红细胞血型系统的类似于红细胞血型系统的HDN80%是是由由HPA1a抗体引起抗体引起的的NAIA的死亡率约为的死亡率约为10%，第一胎的发生率，第一胎的发生率约为约为2059%。产前
26、诊断对预后非常重要。产前诊断对预后非常重要。血小板输注无效血小板输注无效（PTR）约有约有2050%白血病患者，白血病患者，80%再障患者再障患者在长期输注血小板后，发生血小板输注在长期输注血小板后，发生血小板输注无效。无效。血小板输血效果评价血小板输血效果评价出血症状改善出血症状改善凝血时间减少凝血时间减少输血后输血后1h和和24h血小板数增加血小板数增加血小板输注无效的判定指标血小板输注无效的判定指标实际血小板回收率实际血小板回收率（PPR）是通过检测患者输注血小板是通过检测患者输注血小板1小时或小时或 24 小时后的血小板计数进行计算。小时后的血小板计数进行计算。用以评价血小板输注后的实
27、际效果。用以评价血小板输注后的实际效果。实际血小板回收率 PI(109/L)血容量（血容量（L）PPR=100%N(1011)2/3PI=输注后的血小板计数输注前计数输注后的血小板计数输注前计数 N=输入血小板的绝对数量输入血小板的绝对数量 2/3=输入的血小板约输入的血小板约1/3进入脾脏血小板进入脾脏血小板 贮存池贮存池 实际血小板回收率以下应考虑血小板输注无效：以下应考虑血小板输注无效：输注输注1小时后小时后 PPR 60 输注输注24小时后小时后 PPR 40血小板输注无效的判定指标血小板输注无效的判定指标血小板计数增加校正指数血小板计数增加校正指数（CCI）（CCI,correcte
28、d platelet count increment)是依是依体表面积体表面积计算，以期减少个体差计算，以期减少个体差 异的影响而准确评估输注效果。异的影响而准确评估输注效果。血小板计数增加校正指数 PI(109/L)S(m2)CCI=N(1011)S=0.0061H(cm)+0.0128W(kg)+0.01529S=患者体表面积患者体表面积H=患者身高患者身高N=输入血小板的绝对数量输入血小板的绝对数量PI=输注后的血小板计数输注前计数输注后的血小板计数输注前计数 血小板计数增加校正指数以下应考虑血小板输注无效：以下应考虑血小板输注无效：输注输注1小时后小时后 CCI 10 输注输注24小时
29、后小时后 CCI 5判断原则判断原则 不成功输注：不成功输注：1小时小时 CCI10 PPR60%24小时小时CCI5 PPR40%如果如果CCI或或PPR不能得到，则输后血小板增加不能得到，则输后血小板增加5109/L(输注输注1个治疗量）可作为输注无效个治疗量）可作为输注无效 指标。指标。影响血小板输注的因素影响血小板输注的因素非免疫因素非免疫因素血小板的质量血小板的质量发热感染发热感染弥漫性血管内凝血弥漫性血管内凝血(DIC)(DIC)脾肿大脾肿大骨髓移植骨髓移植免疫因素免疫因素红细胞相关抗体红细胞相关抗体HLAHLA抗体抗体(占占707080%)80%)血小板特异性抗体血小板特异性抗体
30、 (HPA(HPA抗体抗体)与药物相关抗体与药物相关抗体自身抗体自身抗体ABOABO血型抗体血型抗体 ABO血型系统抗体在血型系统抗体在PTR中的作用中的作用 经常被忽视。事实上，抗经常被忽视。事实上，抗A、抗、抗B 可以缩短血小板寿命，也是引起可以缩短血小板寿命，也是引起 PTR的原因。的原因。（正常人血小板存活期为（正常人血小板存活期为8-11天），天），HLAHLA抗体抗体 是引起免疫性是引起免疫性PTR的主要原因。的主要原因。血小板上的血小板上的HLA-I类抗原不足以引发抗体类抗原不足以引发抗体产生，白细胞的污染是输注血小板后产生产生，白细胞的污染是输注血小板后产生HLA抗体的主要原因
31、抗体的主要原因。因人群差异，在输注未去除白细胞的血液因人群差异，在输注未去除白细胞的血液的病人中，的病人中，30100%可产生可产生HLA抗体。抗体。HPAHPA抗体抗体 输注去白细胞红细胞或血小板，输注去白细胞红细胞或血小板，HPA抗体产生概率仅为抗体产生概率仅为1.5%。HPA抗体多与抗体多与HLA抗体同时存在。抗体同时存在。血小板输注无效对策血小板输注无效对策 许多因素涉及血小板输注无效，一些临床许多因素涉及血小板输注无效，一些临床因素和可能的致免疫性反应因素的调查，因素和可能的致免疫性反应因素的调查，对于制定一个好的对策非常重要。对于制定一个好的对策非常重要。血小板输注无效对策血小板输
32、注无效对策输注输注ABO相合的高质量的血小板，以防止相合的高质量的血小板，以防止因因ABO抗体或血小板质量问题而引起的输抗体或血小板质量问题而引起的输注无效。注无效。对于一些因血小板消耗增加而致的输注无对于一些因血小板消耗增加而致的输注无效（如发热、效（如发热、DIC等），缩短输注时间比增等），缩短输注时间比增加输注量更重要。加输注量更重要。对于脾肿大，则应以增加输注量为主。对于脾肿大，则应以增加输注量为主。血小板输注无效对策血小板输注无效对策如果存在自身抗体，用激素、免疫抑制剂如果存在自身抗体，用激素、免疫抑制剂或或IVIg、血浆置换、血浆置换治疗，可有疗效。治疗，可有疗效。原因不明的原因不
33、明的PTR，往往应考虑药物性抗体，往往应考虑药物性抗体，停用某种药物或换药是首选。停用某种药物或换药是首选。血小板输注无效的诊治对策血小板输注无效的诊治对策 血小板输注无效发生在输后血小板输注无效发生在输后1 1小时小时(CCI10)(CCI10)1.1.选择新鲜的选择新鲜的ABOABO同型的血小板同型的血小板2.2.评估输后评估输后1 1小时的血小板增加率小时的血小板增加率3.3.确定导致无效的因素确定导致无效的因素(同种免疫、非同种免疫、医源性同种免疫、非同种免疫、医源性)输注同型的血小板输注同型的血小板1 1小时后无效小时后无效(CCI10)(CCI10)检测血小板同种抗体检测血小板同种
34、抗体若存在血小板同种抗体（若存在血小板同种抗体（HLA/HPAHLA/HPA）选择血小板血型配合型的血小板输注选择血小板血型配合型的血小板输注 若无同种抗体？若无同种抗体？自身抗体？自身抗体？激素、激素、IVIGIVIG、血浆置换、血浆置换 药物？药物？是否可以停药，还其他药物是否可以停药，还其他药物 危重病人？危重病人？加大剂量和次数加大剂量和次数对策HLA抗体筛选和血小板特殊配型抗体筛选和血小板特殊配型HLA抗体筛选阴性，可随机输注；抗体筛选阴性，可随机输注；HLA抗体阳性，选择交叉配型方法，以选抗体阳性，选择交叉配型方法，以选择相关择相关HLA抗原阴性的血小板进行输注。抗原阴性的血小板进
35、行输注。特配输注无效，则考虑检测特配输注无效，则考虑检测HPA抗体，特抗体，特别是在排除非免疫因素引起血小板输注无别是在排除非免疫因素引起血小板输注无效的情况下。效的情况下。尽量选择尽量选择ABO血型一致的血小板。血型一致的血小板。输血对器官移植的免疫学影响主要表现在以下几个方面：主要表现在以下几个方面：致敏反应致敏反应诱导免疫耐受诱导免疫耐受介导输血相关性移植物抗宿主病介导输血相关性移植物抗宿主病输血对器官移植的免疫学影响致敏反应致敏反应移植前的输血，诱导受体产生移植前的输血，诱导受体产生HLA抗体，对供者抗体，对供者组织抗原特异性的组织抗原特异性的T细胞致敏细胞致敏移植后，因表达类似组织抗
36、原移植物的再次刺激，移植后，因表达类似组织抗原移植物的再次刺激，诱发强烈的排斥反应诱发强烈的排斥反应急性排斥反应最为常见，多发生在移植后急性排斥反应最为常见，多发生在移植后7-90天，天，以细胞免疫应答为主以细胞免疫应答为主慢性排斥反应多发生在移植后数月或数年，已体慢性排斥反应多发生在移植后数月或数年，已体液免疫为主。液免疫为主。除排斥反应外，血小板输注无效和发热反应除排斥反应外，血小板输注无效和发热反应 滤除白细胞滤除白细胞输血对器官移植的免疫学影响诱导免疫耐受诱导免疫耐受输血可降低机体的免疫功能，造成输血可降低机体的免疫功能，造成T细胞细胞对抗原刺激的不敏感、对抗原刺激的不敏感、NK细胞数
37、量的减细胞数量的减少以及巨噬细胞吞噬和趋化能力的下降，少以及巨噬细胞吞噬和趋化能力的下降，诱导免疫耐受诱导免疫耐受输血诱导的免疫耐受主要见于肾移植输血诱导的免疫耐受主要见于肾移植输血对器官移植的免疫学影响介导输血相关性移植物抗宿主病介导输血相关性移植物抗宿主病GVHD是最为严重的输血并发症，死亡率极高是最为严重的输血并发症，死亡率极高输入含免疫活性淋巴细胞的血液后，淋巴细胞输入含免疫活性淋巴细胞的血液后，淋巴细胞经受体组织抗原的刺激激活，大量增殖，攻击经受体组织抗原的刺激激活，大量增殖，攻击和破坏受体组织细胞，导致多脏器损害甚至死和破坏受体组织细胞，导致多脏器损害甚至死亡亡亲属间输血、新鲜血液
38、均易发生亲属间输血、新鲜血液均易发生TA-GVHD，与，与HLA单倍型相同及淋巴细胞活性有关单倍型相同及淋巴细胞活性有关移植患者、亲属间输血应输注经辐照的血液成移植患者、亲属间输血应输注经辐照的血液成分，以预防分，以预防TA-GVHD骨髓移植与输血骨髓移植成功后实现血型转换骨髓移植成功后实现血型转换供受体血型不合的输血会延迟造血重建、供受体血型不合的输血会延迟造血重建、影响红细胞发育和生成，甚至引起严重溶影响红细胞发育和生成，甚至引起严重溶血或死亡血或死亡 移植前后全过程的血液免疫学检测和评估移植前后全过程的血液免疫学检测和评估对安全、有效的输血具有重要意义对安全、有效的输血具有重要意义连续的
39、、准确的血型抗体滴度检测为移植连续的、准确的血型抗体滴度检测为移植过程的输血提供有力证据过程的输血提供有力证据 临床与实验室相结合临床与实验室相结合肾脏移植与输血早期肾移植输血：从否定到肯定时期，认早期肾移植输血：从否定到肯定时期，认为移植前多次输血可因免疫耐受而显著提为移植前多次输血可因免疫耐受而显著提高移植肾的存活率高移植肾的存活率 近年来由于免疫抑制剂的广泛应用，术前近年来由于免疫抑制剂的广泛应用，术前随机输血已被临床逐渐弃用随机输血已被临床逐渐弃用去白细胞血液的选择，大大降低了去白细胞血液的选择，大大降低了HLA抗抗体产生和急性排斥反应的发生体产生和急性排斥反应的发生肝脏移植与输血实体
40、器官移植中，肝移植的输血最为实体器官移植中，肝移植的输血最为复杂、输血量最大复杂、输血量最大随着技术的完善，肝移植术中失血量随着技术的完善，肝移植术中失血量和输血量已显著下降和输血量已显著下降肝移植输血的主要目的是肝移植输血的主要目的是 维持组织氧供维持组织氧供 恢复机体的凝血功能恢复机体的凝血功能 维持有效的容量负荷维持有效的容量负荷 肝脏移植与输血输血评估与输注原则输血评估与输注原则 大量输血降低肝移植患者的存活率，还伴大量输血降低肝移植患者的存活率，还伴有许多潜在风险，须严格掌握输血指征，有许多潜在风险，须严格掌握输血指征，综合考虑机体对贫血的耐受综合考虑机体对贫血的耐受大量输血增加外源
41、性感染机会，围术期感大量输血增加外源性感染机会，围术期感染率上升染率上升 限制性输血（限制性输血（Hb70g/L）比开放性输血）比开放性输血（Hb100g/L）具有更好的效果）具有更好的效果肝脏移植与输血成分输血推荐比率成分输血推荐比率2单位红细胞单位红细胞+1单位单位FFP+200ml晶体液晶体液输血血型输血血型输血血型一般选择患者血型，特殊情况依输血血型一般选择患者血型，特殊情况依临床及免疫血液学结果综合判断临床及免疫血液学结果综合判断肝脏移植与输血肝移植术大多存在凝血功能障碍，须肝移植术大多存在凝血功能障碍，须针对缺乏的血液成分选择性补充针对缺乏的血液成分选择性补充，术术前应进行评估及纠
42、正前应进行评估及纠正术中大量输血导致稀释性凝血因子和术中大量输血导致稀释性凝血因子和血小板缺乏，必要时补充血小板缺乏，必要时补充 肝脏移植与输血不规则抗体筛检和特异性鉴定对于安全输不规则抗体筛检和特异性鉴定对于安全输血极为重要，可有效防止溶血反应等严重血极为重要，可有效防止溶血反应等严重并发症并发症 ABO血型不合的肝移植，植入后，供者血型不合的肝移植，植入后，供者B淋巴细胞分泌的血型抗体能溶解受者或输淋巴细胞分泌的血型抗体能溶解受者或输入的红细胞引起溶血。因此，对入的红细胞引起溶血。因此，对ABO血型血型不合的患者，肝移植术后应进行连续免疫不合的患者，肝移植术后应进行连续免疫血液学监测。血液
43、学监测。总结总结（HLAHLA）HLA承担着机体免疫识别功能承担着机体免疫识别功能临床输血中非溶血性发热反应临床输血中非溶血性发热反应、血小板输注无效、血小板输注无效、GVHD等均与等均与HLA相关，预防选择少白细胞制品相关，预防选择少白细胞制品HLA抗原匹配程度是器官移植与抗原匹配程度是器官移植与BMT成功的关键成功的关键输血和妊娠是引起输血和妊娠是引起HLA同种免疫两种主要的危险因素同种免疫两种主要的危险因素 滤除白细胞和辐照灭活白细胞可减少滤除白细胞和辐照灭活白细胞可减少HLA免疫免疫 总结总结（血小板血型）（血小板血型）血小板抗原分为三类：血小板相关抗原、血小板特异性血小板抗原分为三类
44、：血小板相关抗原、血小板特异性抗原和药物抗原。相关抗原与抗原和药物抗原。相关抗原与ABO血型系统及血型系统及HLA有关有关 血小板输注无效与免疫、非免疫因素有关血小板输注无效与免疫、非免疫因素有关HLA抗体筛选和血小板特殊配型是解决抗体筛选和血小板特殊配型是解决PTR的有效措施的有效措施妊娠和输血是导致同种异体免疫的主要原因妊娠和输血是导致同种异体免疫的主要原因 滤除白细胞、辐照血液和血小板特殊配型等可减少同种滤除白细胞、辐照血液和血小板特殊配型等可减少同种免疫的发生免疫的发生总结（器官移植）总结（器官移植）输血诱导受体产生输血诱导受体产生HLA抗体导致排斥反应抗体导致排斥反应输血可降低机体的免疫功能，诱导免疫耐受输血可降低机体的免疫功能，诱导免疫耐受 输血介导输血介导TA-GVHD，选择辐照制品预防，选择辐照制品预防连续、准确的血型抗体滴度检测为移植过程的连续、准确的血型抗体滴度检测为移植过程的输血提供有力证据输血提供有力证据 器官移植的输血原则是：维持组织氧供、恢复器官移植的输血原则是：维持组织氧供、恢复机体的凝血功能和维持有效的容量负荷机体的凝血功能和维持有效的容量负荷 谢谢 谢！谢！北京大学人民医院北京大学人民医院 田文沁田文沁
