1、Page 1INSERT LOGO学习目标学习目标1.1.掌握消毒、灭菌、无菌及无菌操作的概念，掌握消毒、灭菌、无菌及无菌操作的概念，2.2.掌握常见物品的消毒灭菌方法，掌握常见物品的消毒灭菌方法，3.3.掌握正常菌群、条件致病菌及菌群失调的概念；熟悉菌群失调症掌握正常菌群、条件致病菌及菌群失调的概念；熟悉菌群失调症的防治措施。的防治措施。4.4.熟悉化学消毒剂的作用机制、种类、性质、用途及影响因素。熟悉化学消毒剂的作用机制、种类、性质、用途及影响因素。5.5.了解细菌在自然界和人体的分布。了解细菌在自然界和人体的分布。学习目标学习目标正确使用消毒灭菌方法、严格无菌操作，防止医院感染。正确使用
2、消毒灭菌方法、严格无菌操作，防止医院感染。确立牢固的生物安全意识。确立牢固的生物安全意识。土壤土壤 水域水域 空气空气第一节第一节 细菌的分布细菌的分布 二、细菌在正常人体的分布二、细菌在正常人体的分布三、人体正常菌群及其意义三、人体正常菌群及其意义 （一）正常菌群的概念（一）正常菌群的概念 在正常人体的体表及与外界相通的腔道中，存在着一些微生物，通在正常人体的体表及与外界相通的腔道中，存在着一些微生物，通常对人体无害，称为正常微生物，又称正常菌群。常对人体无害，称为正常微生物，又称正常菌群。（二）正常菌群的生理意义（二）正常菌群的生理意义 营养作用营养作用 生物拮抗作用生物拮抗作用 免疫作用
3、免疫作用 抗癌及抗衰老抗癌及抗衰老四、条件致病菌与微生态失调四、条件致病菌与微生态失调 （一）微生态失调（一）微生态失调 正常的微生物群之间及其与宿主之间的微生态平衡，在某些因素影响正常的微生物群之间及其与宿主之间的微生态平衡，在某些因素影响下，由生理性组合转变为病理性组合，导致宿主病理变化或患病，称微生下，由生理性组合转变为病理性组合，导致宿主病理变化或患病，称微生态失调。态失调。（二）条件致病菌（二）条件致病菌 在特定条件下可引起疾病的正常菌群，称为条件致病菌或机会致病菌在特定条件下可引起疾病的正常菌群，称为条件致病菌或机会致病菌 条件致病菌的致病的条件是：条件致病菌的致病的条件是：细菌寄
4、居部位的改变；细菌寄居部位的改变；机体免疫功能低下；机体免疫功能低下；长期或大量应用广谱抗生素后导致的菌群失调长期或大量应用广谱抗生素后导致的菌群失调第二节第二节 消毒与灭菌消毒与灭菌一、基本概念一、基本概念 杀灭病原微生物的方法称为消毒。杀灭病原微生物的方法称为消毒。杀灭物体上所有微生物，包括细菌芽胞的方法杀灭物体上所有微生物，包括细菌芽胞的方法，称灭菌。，称灭菌。：物体上无活的微生物存在，称为无菌。防止微生物进：物体上无活的微生物存在，称为无菌。防止微生物进入机体或物体的操作技术，称为无菌操作。入机体或物体的操作技术，称为无菌操作。防止或抑制微生物在物体中生长繁殖的方法，称防止或抑制微生物
5、在物体中生长繁殖的方法，称防腐。用于防腐的化学药品称防腐剂。防腐。用于防腐的化学药品称防腐剂。将微生物污染了的物体表面还原为安全水平将微生物污染了的物体表面还原为安全水平的处理过程。的处理过程。1.1.干热灭菌法干热灭菌法（1 1）焚烧和烧灼：用于废弃物和病人或动物尸体）焚烧和烧灼：用于废弃物和病人或动物尸体 （2 2）干烤：）干烤：160-170160-170维持维持2 2小时，耐热物品的灭菌小时，耐热物品的灭菌 2.2.湿热灭菌法：湿热灭菌法：（1 1）巴氏消毒法：）巴氏消毒法：61.1-62.861.1-62.8持续持续3030分钟或分钟或71.771.7持续持续15-3015-30秒秒
6、,用用于酒类和乳制品的消毒。于酒类和乳制品的消毒。（2 2）煮沸法：）煮沸法：100100持续持续5-105-10分钟，可用于手术器械、食具的消毒。分钟，可用于手术器械、食具的消毒。（3 3）流通蒸气法：又称为间歇灭菌法。常用于不耐高温的物品，如）流通蒸气法：又称为间歇灭菌法。常用于不耐高温的物品，如糖类、血清和鸡蛋培养基等的灭菌。糖类、血清和鸡蛋培养基等的灭菌。（4 4）高压蒸气灭菌法：压力）高压蒸气灭菌法：压力103.42Kpa103.42Kpa经经121.3121.3维持维持15-3015-30分钟，适分钟，适用于耐高压和湿热的物品，如培养基、手术衣、手术器械等。用于耐高压和湿热的物品，
7、如培养基、手术衣、手术器械等。(二二)紫外线与电离辐射灭菌法紫外线与电离辐射灭菌法 使细菌形成胸腺嘧啶双聚体，使细菌形成胸腺嘧啶双聚体，DNADNA复制被干扰，从而导致细复制被干扰，从而导致细菌死亡。菌死亡。265-266nm265-266nm波长的紫外线杀菌力最强，但穿透力较弱。波长的紫外线杀菌力最强，但穿透力较弱。物体表面和空气的消毒。物体表面和空气的消毒。利用利用X X射线、射线、射线和高速电子等电离辐射进行灭菌，电离辐射可产生射线和高速电子等电离辐射进行灭菌，电离辐射可产生游离基，破坏游离基，破坏DNADNA，有较高的能量与穿透力，是一种适用于忌热物品的常温，有较高的能量与穿透力，是一
8、种适用于忌热物品的常温灭菌方法，又称之为灭菌方法，又称之为“冷灭菌冷灭菌”。(三三)超声波灭菌法超声波灭菌法 不被人耳感受的高于不被人耳感受的高于 2000Hz2000Hz的声波。通过液体时发生空化作用，空的声波。通过液体时发生空化作用，空化的强烈机械作用能有效地破坏和杀死某些细菌。此法主要用于粉碎细胞化的强烈机械作用能有效地破坏和杀死某些细菌。此法主要用于粉碎细胞，以提取细胞组分或制备抗原等。，以提取细胞组分或制备抗原等。(四四)滤过除菌滤过除菌 滤过除菌是用物理阻留的方法去除液体或气体中的细菌，以达到无菌滤过除菌是用物理阻留的方法去除液体或气体中的细菌，以达到无菌的目的。主要用于不耐热的血
9、清、抗毒素、抗生素、药液以及空气等的除的目的。主要用于不耐热的血清、抗毒素、抗生素、药液以及空气等的除菌。菌。（一）常用化学消毒剂的各类和应用（一）常用化学消毒剂的各类和应用（二）消毒剂的杀菌机制（二）消毒剂的杀菌机制1.1.使微生物的蛋白质变性使微生物的蛋白质变性 2.2.干扰微生物的酶系统及代谢干扰微生物的酶系统及代谢3.3.损伤细胞膜损伤细胞膜 (三三)影响消毒剂灭菌效果的因素影响消毒剂灭菌效果的因素 1.1.消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间2.2.细菌的种类、数量与状态细菌的种类、数量与状态3.3.环境中有机物的影响环境中有机物的影响 生物安全，是一个重要的国际
10、性问题。世界卫生组织（生物安全，是一个重要的国际性问题。世界卫生组织（WHOWHO）早就）早就认识到这个问题，因此早在认识到这个问题，因此早在1983 1983 年就出版了年就出版了实验室生物安全手册实验室生物安全手册（Laboratory Biosafety ManualLaboratory Biosafety Manual）第）第1 1 版。版。该手册的第该手册的第2 2版于版于1993 1993 年出版于年出版于20042004年在网上公布了该手册的第年在网上公布了该手册的第3 3版中文版版中文版Laboratory Biosafety Manual1st edition19831993
11、20032004生物安全术语与定义生物安全术语与定义 避免危险生物因子造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致避免危险生物因子造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施。危害的综合措施。一切微生物和生物活性物质。一切微生物和生物活性物质。一、实验室生物安全一、实验室生物安全就是在实验研究过程中，为避免危险生物因子造成实验室人员暴就是在实验研究过程中，为避免危险生物因子造成实验室人员暴露，向实验室外扩散并导致危害而采取的综合措施，以达到对人、环露，向实验室外扩散并导致危害而采取的综合措施，以达到对人、环境生态和社会的安全防护。境生态和社会的安全防护。通过防护屏障和配套通过防护屏障和配
12、套管理措施，达到生物安全要求的生物实验室和动物实验室。管理措施，达到生物安全要求的生物实验室和动物实验室。二、感染性微生物的危险度等级分类二、感染性微生物的危险度等级分类危险等级危险等级危害性危害性危险度危险度1 1级级(无或极低无或极低的个体和群体危险的个体和群体危险)不太可能引起人或动物致病的微生物不太可能引起人或动物致病的微生物危险度危险度2 2级级(个体危险个体危险中等，群体危险低中等，群体危险低)病原体能够对人或动物致病，但对实验室工作人病原体能够对人或动物致病，但对实验室工作人员、社区、牲畜或环境不易导致严重危害。实验员、社区、牲畜或环境不易导致严重危害。实验室暴露也许会引起严重感
13、染，但对感染有有效的室暴露也许会引起严重感染，但对感染有有效的预防和治疗措施，并且疾病传播的危险有限。预防和治疗措施，并且疾病传播的危险有限。危险度危险度3 3级级(个体危险个体危险高，群体危险低高，群体危险低)病原体通常能引起人或动物的严重疾病，但一般病原体通常能引起人或动物的严重疾病，但一般不会发生感染个体向其他个体的传播，并且对感不会发生感染个体向其他个体的传播，并且对感染有有效的预防和治疗措施。染有有效的预防和治疗措施。危险度危险度4 4级级(个体和群个体和群体的危险均高体的危险均高)病原体通常能引起人或动物的严重疾病，并且很病原体通常能引起人或动物的严重疾病，并且很容易发生个体之间的
14、直接或间接传播，对感染一容易发生个体之间的直接或间接传播，对感染一般没有有效的预防和治疗措施。般没有有效的预防和治疗措施。三、生物安全水平分级与相对应的实验室要求三、生物安全水平分级与相对应的实验室要求实验室伤害以及与工作有关的感染主要是由于人为失误，不良实实验室伤害以及与工作有关的感染主要是由于人为失误，不良实验技术以及仪器使用不当造成的。实验室可以分为基础实验室一级生物验技术以及仪器使用不当造成的。实验室可以分为基础实验室一级生物安全水平、二级生物安全水平、防护实验室三级生物安全水平和最高防安全水平、二级生物安全水平、防护实验室三级生物安全水平和最高防护实验室四级生物安全水平。护实验室四级
15、生物安全水平。与危险度等级相对应的生物安全水平、操作和设施与危险度等级相对应的生物安全水平、操作和设施危险度危险度等等 级级生物安全水平生物安全水平实验室类型实验室类型实验室操作实验室操作安全设施安全设施1 1级级基础实验室一级基础实验室一级生物安全水平生物安全水平基础的教学基础的教学、研究、研究GMTGMT不需要不需要;开放实验台开放实验台2 2级级基础实验室二级基础实验室二级生物安全水平生物安全水平初级卫生服初级卫生服务；诊断、务；诊断、研究研究GMTGMT加防护服、生加防护服、生物危害标志物危害标志开放实验台，此外开放实验台，此外需需BSCBSC用于防护可能用于防护可能生成的气溶胶生成的
16、气溶胶3 3级级防护实验室三级防护实验室三级生物安全水平生物安全水平特殊的诊断特殊的诊断、研究、研究在二级生物安全防在二级生物安全防护水平上增加特殊护水平上增加特殊防护服、进入制度防护服、进入制度、定向气流、定向气流 BSCBSC和和/或其他所有或其他所有实验室工作所需要实验室工作所需要的基本设备的基本设备4 4级级最高防护实验室最高防护实验室四级生物安全水四级生物安全水平平危险病原体危险病原体研究研究在三级生物安全防在三级生物安全防护水平上增加气锁护水平上增加气锁入口、出口淋浴、入口、出口淋浴、污染物品的特殊处污染物品的特殊处理理级级BSCBSC或或级级BSCBSC并穿着正压服、双并穿着正压
17、服、双开门高压灭菌器开门高压灭菌器(穿穿过墙体过墙体)、经过滤的、经过滤的空气空气学习小结学习小结正常人体的体表及其与外界相通的腔道粘膜上存在的细菌，在正常情正常人体的体表及其与外界相通的腔道粘膜上存在的细菌，在正常情况下对人体无害，称为正常况下对人体无害，称为正常菌群；在特殊条件下引起疾病的细菌，则称为条件致病菌。菌群；在特殊条件下引起疾病的细菌，则称为条件致病菌。在医学实践中，常采用物理、化学及生物的方法，来进行消毒灭菌，在医学实践中，常采用物理、化学及生物的方法，来进行消毒灭菌，以切断传播途径，保护易感人群，从而控制或消灭传染病。以切断传播途径，保护易感人群，从而控制或消灭传染病。生物安
18、全是生物性的传染媒介通过直接感染或间接破坏环境而导致对生物安全是生物性的传染媒介通过直接感染或间接破坏环境而导致对人类、动物或者植物的真实或者潜在的危险。实验室生物安全是指那些用人类、动物或者植物的真实或者潜在的危险。实验室生物安全是指那些用以防止发生病原体或毒素无意中暴露及意外释放的防护原则、技术以及实以防止发生病原体或毒素无意中暴露及意外释放的防护原则、技术以及实践。践。复习题复习题什么是正常菌群？在什么条件下可能致病？什么是正常菌群？在什么条件下可能致病？什么是消毒、灭菌、防腐、无菌和无菌操作？什么是消毒、灭菌、防腐、无菌和无菌操作？常用的热力灭菌法有哪些，各有何条件和应用范围？常用的热力灭菌法有哪些，各有何条件和应用范围？
