1、咪唑类离子液体负载-环糊精树脂分离分析药物中大黄酚报报 告告 人：人：班班 级：级：指导老师：指导老师：2 研究背景研究背景 实验部分实验部分 结果与讨论结果与讨论 结论结论 致谢致谢 参考文献参考文献主要内容31.1.研究背景研究背景固相萃取固相萃取就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。固相萃取材料主要包括：纤维，硅胶，螯合固相萃取材料主要包括：纤维，硅胶，螯合树脂，纳米材料，活性炭，环糊精聚合物树脂，纳米材料，活性炭，环糊精聚合物本文合成新型咪唑类离子液体，应用浸渍法获本文合成新型咪唑类
2、离子液体，应用浸渍法获得咪唑类离子液体得咪唑类离子液体-环糊精树脂（环糊精树脂（IL-CDCP）4 -环糊精聚合物(Cydodextrin Polymer,-CDCP)是指将-环糊精分子以化学键合或物理混配的方法组入高分子结构而形成的含有多个环糊精单元的高分子衍生物。5离子液体是指在室温或接近室温下呈现液态的、完全由阴阳离子所组成的盐，也称为低温熔融盐。它一般由有机阳离子 和 无机阴离子组成季铵盐离子、季鏻盐离子、咪唑盐离子、吡咯盐离子卤素离子四氟硼酸根离子六氟磷酸根离子6离子离子液体液体环糊环糊精聚精聚合物合物可忽略的蒸汽压可忽略的蒸汽压较高表面积较高表面积温度工作范围大温度工作范围大高离子
3、导电性高离子导电性良好的机械稳定性良好的机械稳定性有许多孔隙或网洞有许多孔隙或网洞能够溶解不同极性的化合物能够溶解不同极性的化合物7离子离子液体液体环糊环糊精聚精聚合物合物粘度较大粘度较大传质速率较低传质速率较低无法重复利用无法重复利用对大分子化合物吸附能力较弱对大分子化合物吸附能力较弱交换容量较其他吸附剂无优势交换容量较其他吸附剂无优势负载负载聚合物将具有更高的交换容量，能够提供更多的螯合网点，聚合物将具有更高的交换容量，能够提供更多的螯合网点，减少了减少了IL的用量、保留了的用量、保留了IL的性质、提高了的性质、提高了IL传质速率、传质速率、实现了较高的回收率以及吸附剂易回收利用等。实现了
4、较高的回收率以及吸附剂易回收利用等。8OHOOHOCH3H图图1 1 大黄酚结构大黄酚结构大黄酚，六方形或单斜形结晶大黄酚，六方形或单斜形结晶，熔点熔点196，升华。几乎不溶于水，微溶于冷醇升华。几乎不溶于水，微溶于冷醇，易溶于易溶于沸乙醇沸乙醇，溶于苯溶于苯、氯仿氯仿、乙醚、冰醋酸及乙醚、冰醋酸及丙丙酮酮等等，极微溶于极微溶于石油醚石油醚大黄酚是一种中药材，具有较明显的止咳作大黄酚是一种中药材，具有较明显的止咳作用。对甲型链球用。对甲型链球菌菌、肺炎球菌、流感杆菌及、肺炎球菌、流感杆菌及卡他球菌有不同程度的抑制作用。能促进肠卡他球菌有不同程度的抑制作用。能促进肠管的运动管的运动，并能促使神经
5、兴奋和肌肉麻痹并能促使神经兴奋和肌肉麻痹大黄酚广泛的应用于药物当中，目前样品中测大黄酚广泛的应用于药物当中，目前样品中测定大黄酚的方法主要有高效液相色谱法、紫外定大黄酚的方法主要有高效液相色谱法、紫外可见光谱可见光谱法等，但是大黄酚在药物中的含量很法等，但是大黄酚在药物中的含量很少，因此找到一种高效分离富集方法至关重要少，因此找到一种高效分离富集方法至关重要。本文研究发现了本文研究发现了咪唑类离子液体负载咪唑类离子液体负载-环糊精树环糊精树脂脂作为固相吸附剂与紫外可见光谱法联用分离分作为固相吸附剂与紫外可见光谱法联用分离分析大黄酚的新方法析大黄酚的新方法 9合成1：环糊精聚合物（-CDCP）5
6、.0 g-CD，6.0 gNaOH固体，8 ml去离子水三颈瓶65，搅拌均匀搅拌下逐滴加入15 mL环氧氯丙烷，回流1 h淡黄色颗粒状共聚物，趁热抽滤，固体依次用丙酮和水洗数次至中性，抽干，用丙酮抽提24 h在90下干燥10 h，得白色颗粒状固体，研细备用2.2.实验部分实验部分10合成2：C4minPF60.3mol的溴代正己烷、1-甲基咪唑、KPF6 三颈瓶80，回流3.5h冷却至室温，往混合物中加入60 mL蒸馏水，上下分层，留下层离子液体 一定量的去离子水洗涤离子液体相，直至Br-完全除去(残余的Br-用AgNO3检验)后，再用乙醚洗涤(50 mL3)120 下真空干燥2 h，得到淡黄
7、色油状离子液体C6minPF6，收率86%11合成3：咪唑类离子液体负载-环糊精树脂（IL-CDCP）-CD树脂加入到C4minPF6中烧瓶搅拌浸泡三天抽滤，90下烘干24小时 获得的产物在C4minPF6 中再次浸泡一天 抽滤，90下干燥24小时，最终产物为IL-CDCP12FTIR表征图图2 红外光谱图红外光谱图 IL-CDCP(a),IL(b),-CDCP(c)500100015002000250030003500400031703125317031251085104010851040157414673430343015741467cba Wavenumer(cm-1)IL-CDCP表征
8、表征3.3.结果与讨论结果与讨论-CDCP中COH和COC基团的振动峰-CDCP表面 COH的吸收峰咪唑环的C=C振动吸收峰IL中芳香环的CH振动峰13固体核磁表征图图3 固体核磁图固体核磁图-CDCP(a),IL-CDCP(b),-CDCP-IL 与大黄酚包合物与大黄酚包合物(c)14大黄酚静态吸附与洗脱大黄酚静态吸附与洗脱震荡离心震荡离心IL-CDCP4g/mL大黄酚用用UV-Vis在在317nm处进行测定处进行测定用用UV-Vis在在430nm处进行测定处进行测定无水乙醇15 吸附条件优化吸附条件优化 pH影响24681012020406080100ba Retention Effici
9、ency%pH图4 pH对吸附率的影响pH 7.0,97.8%IL-CDCP-CDCP16温度影响051015202530354045020406080100 Retention Efficiency%T/.C图5 温度对吸附率的影响1517溶液体积影响01020304050020406080100 Retention Efficiency%V/mL图图6 溶液体积对吸附率的影响溶液体积对吸附率的影响10mL18吸附容量吸附容量102030405060012345 Retention Capacity/mg.g-1c/g.mL-1图图7 IL-CDCP对大黄酚的吸附容量对大黄酚的吸附容量3.9
10、4 mg/g19洗脱条件优化洗脱条件优化洗脱液选择NaOH(0.1mol/L)CTAB(1%)SDS(1%)Ethanol020406080100 Elution Efficiency%图8 不同洗脱液的洗脱率89.6%20图图9 洗脱液体积对脱附率的影响洗脱液体积对脱附率的影响洗脱液体积影响345678020406080100 Elution Efficiency(%)V/ml4mL21洗脱温度影响图图10 温度对脱附率的影响温度对脱附率的影响01020304050020406080100 Elution Efficiency(%)T/.C5022树脂重复利用树脂重复利用0123402040
11、6080100 Retention Efficiency%No.of Cycles图图11 不同洗脱次数脱附率的变化不同洗脱次数脱附率的变化23干扰试验干扰试验表表1 干扰物质的影响干扰物质的影响干扰物干扰倍数苯酚500H2PO4-400酒石酸、葡萄糖、Vc250柠檬酸125SO42-80Mg2+30栀子苷、熊果酸5Zn2+1大黄素0.824分析性能分析性能线性方程为线性方程为:A=0.051c+0.047(g/mL)线性范围为线性范围为:0.1-20.00(g/mL)相关系数相关系数:0.9930相对标准偏差：相对标准偏差：0.45%（n=3,c=4 g/L）检出限检出限(3S/N):0.0
12、2 g/mL富集倍数：富集倍数：2.525表表2 2 已报道的测定大黄酚的方法已报道的测定大黄酚的方法方法方法线性范围(gmL-1)检出限(gmL-1)参考文献参考文献毛细管电泳法毛细管电泳法-0.324反相高效液相色谱法反相高效液相色谱法3.181-101.8-25HPLC-荧光检测法0.256025.60-26浊点萃取-高效液相色谱法0.126-16.2-27固相萃取-紫外可见光谱法0.1-20.000.02本法26样品测定样品测定表表3 三黄片、麻仁丸中大黄酚含量的测定结果三黄片、麻仁丸中大黄酚含量的测定结果样品名称样品名称本实验方法本实验方法色谱法色谱法回收率回收率三黄片三黄片3.14
13、mg/g3.203.20mg/g98.13%98.13%麻仁丸麻仁丸35.61 1g/g36.2236.22g/g98.32%98.32%注：三黄片、麻仁丸样品溶液测定时用去离子水分别稀释注：三黄片、麻仁丸样品溶液测定时用去离子水分别稀释100、10倍倍27IL-CDCPIL-CDCP与大黄酚的包合机理与大黄酚的包合机理FTIR分析50010001500200025003000350040001618157434303430edcba Wavenumer(cm-1)图图12 红外谱图红外谱图 IL-CDCP与大黄酚包合物与大黄酚包合物(a),IL-CDCP(b),IL与大黄酚包合物与大黄酚包合
14、物(c),IL(d),大黄酚大黄酚(e)咪唑环的C=C振动吸收峰强度增强-CDCP表面 COH的吸收峰增强28固态核磁分析固态核磁分析图图13 固体核磁图固体核磁图-CDCP(a),IL-CDCP(b),-CDCP-IL 与大黄酚包合物与大黄酚包合物(c)2920025030035040035404550556065 1/A1/A1/C1/C-CD-CD(L/mol)(L/mol)包合常数20025030035040040455055606570 1/A1/A1/C1/CIL-CDIL-CD(L/mol)(L/mol)图图14 大黄酚大黄酚/-CD包合物、大黄酚包合物、大黄酚/IL-CD包合物
15、双倒数图包合物双倒数图K=38.54 L/molK=113.64L/mol304.结论结论本实验研究建立了本实验研究建立了IL-CDCP固相萃取固相萃取-紫外紫外可见吸收光谱法分离分析大黄酚的可见吸收光谱法分离分析大黄酚的新方法，考察了新方法，考察了IL-CDCP树脂的吸附行树脂的吸附行为。该方法的优点在于，可以增加样品与为。该方法的优点在于，可以增加样品与IL接触面积，减少了接触面积，减少了IL的使用量和在水中的使用量和在水中的损失且方法简单、稳定性好，样品测定的损失且方法简单、稳定性好，样品测定结果令人满意。结果令人满意。31参考文献参考文献1 孟丽艳孟丽艳,屈凌波屈凌波,杨冉杨冉,陈晓岚
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28、9)93-99.26 26 韩媛媛韩媛媛,王利勇王利勇,杜光玲杜光玲,赵燕燕赵燕燕,HPLC-荧光检测法测定东乐膏中大黄酸、大黄素、大荧光检测法测定东乐膏中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量黄酚的含量.药物分析杂志药物分析杂志,30(2010)1016-1018.27 27 张进文张进文,魏玉辉魏玉辉,武琴园武琴园,李波霞李波霞,段好刚段好刚,武新安武新安.浊点萃取结合高效液相色谱法测定大浊点萃取结合高效液相色谱法测定大鼠体内芦荟大黄素、大黄素和大黄酚的血药浓度鼠体内芦荟大黄素、大黄素和大黄酚的血药浓度.中国医院药学杂志中国医院药学杂志,30(2010)911-915.34致谢致谢在论文即将完成之际
29、，向所有帮助过我的老师和师兄师姐在论文即将完成之际，向所有帮助过我的老师和师兄师姐致以最衷心的感谢致以最衷心的感谢!首先要感谢我的指导老师朱霞石老师，本首先要感谢我的指导老师朱霞石老师，本论文是在朱老师的悉心指导下完成的，老师以严谨求实，一论文是在朱老师的悉心指导下完成的，老师以严谨求实，一丝不苟的治学态度和勤勉的工作态度深深感染了我，给我巨丝不苟的治学态度和勤勉的工作态度深深感染了我，给我巨大的启迪，鼓舞和鞭策，并成为我人生路上值得学习的榜样。大的启迪，鼓舞和鞭策，并成为我人生路上值得学习的榜样。其次要感谢平文卉师姐，她在我的实验过程和写其次要感谢平文卉师姐，她在我的实验过程和写论文过程中，论文过程中，都都给予了极大的指导、建议和帮助，教给了我很多实验的方给予了极大的指导、建议和帮助，教给了我很多实验的方法和技巧，同时对我的论文提出了宝贵的修改意见，使我的法和技巧，同时对我的论文提出了宝贵的修改意见，使我的实验和论文得以顺利进行。再次真诚感谢所有帮助过我的老实验和论文得以顺利进行。再次真诚感谢所有帮助过我的老师同学。师同学。通过通过这次毕业设计不仅提高了我独立思考问题解决这次毕业设计不仅提高了我独立思考问题解决问题的能力问题的能力，而且培养了而且培养了我我认真严谨认真严谨、一丝不苟的学习态度。一丝不苟的学习态度。
