原发性高血压患者中医不同证候与血管紧张素原基因7个位点多态性的相关性研究课件.ppt

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1、原发性高血压患者中医不同证候与血管紧张原发性高血压患者中医不同证候与血管紧张素原基因素原基因7 7个位点多态性的相关性研究个位点多态性的相关性研究【目的】【目的】通过不同证型原发性高血压(通过不同证型原发性高血压(EHEH)患者)患者血管紧张素原血管紧张素原(AGT)(AGT)基因基因7 7个位点多态性研个位点多态性研究,探寻影响究,探寻影响EHEH证候的功能基因位点,从证候的功能基因位点,从分子遗传学的角度初步揭示分子遗传学的角度初步揭示EHEH证候实质。证候实质。【方法】【方法】选择选择EHEH患者中医四个不同证型共患者中医四个不同证型共400400例,例,正常人正常人100100例。采用

2、多重高温连接酶检测例。采用多重高温连接酶检测反应基因分型技术(反应基因分型技术(imLDRTMimLDRTM)检测)检测AGTAGT基基因多态性。因多态性。【结果】【结果】AGT rs5049AGT rs5049(G-217AG-217A)基因型在各)基因型在各中医证型和对照组比较有显著性差异,中医证型和对照组比较有显著性差异,其中其中CCCC基因型在痰湿壅盛组和阴阳两基因型在痰湿壅盛组和阴阳两虚组最高。虚组最高。【结论】【结论】EHEH中医证候与中医证候与AGTAGT基因多态性存在关基因多态性存在关联性,联性,AGT rs5049AGT rs5049在汉族人在汉族人EHEH发病中具发病中具有

3、重要意义,有重要意义,CCCC基因型可能使痰湿壅盛基因型可能使痰湿壅盛证和阴阳两虚证的发生风险增加。证和阴阳两虚证的发生风险增加。研究方法研究方法 研究结果研究结果 讨论讨论1.11.1病例来源病例来源 均来自均来自20122012年年1010月月-2013-2013年年7 7月就诊于安徽月就诊于安徽中医药大学第一附属医院心血管内科。设中医药大学第一附属医院心血管内科。设EHEH肝火亢盛组、阴虚阳亢组、痰湿壅盛组、阴肝火亢盛组、阴虚阳亢组、痰湿壅盛组、阴阳两虚组各阳两虚组各100100例和健康对照组例和健康对照组100100例。例。1.21.2诊断标准诊断标准 高血压的诊断标准依据高血压的诊断

4、标准依据20102010年版年版WHO/ISHWHO/ISH高血压处理指南中的诊断分级标准。高血压处理指南中的诊断分级标准。EH EH辨证分型标准参照辨证分型标准参照20022002年版中药新年版中药新药临床研究指导原则中的中药新药治疗药临床研究指导原则中的中药新药治疗高血压病的临床研究指导原则来确定高血高血压病的临床研究指导原则来确定高血压辨证分型标准,共分为压辨证分型标准,共分为4 4型。型。1.31.3病例纳入标准病例纳入标准 (1 1)年龄大于)年龄大于1818周岁;符合周岁;符合20102010年年WHO/ISHWHO/ISH高血高血压的诊断标准。压的诊断标准。(2 2)取血前未服用

5、)取血前未服用受体阻滞剂、血管紧张素转受体阻滞剂、血管紧张素转化酶抑制剂(化酶抑制剂(ACEIACEI)和血管紧张素受体拮抗剂)和血管紧张素受体拮抗剂(AT1RAT1R),若服用上述药物,则停药),若服用上述药物,则停药5 5个半衰期后个半衰期后纳入。在停药期间,使用纳入。在停药期间,使用受体阻滞剂替代;受体阻滞剂替代;(3 3)同意参加本项临床研究者;两个以上主治医)同意参加本项临床研究者;两个以上主治医师确认。师确认。1.41.4排除病例标准排除病例标准(1 1)排除继发性高血压和恶性高血压患者;)排除继发性高血压和恶性高血压患者;(2 2)严重的瓣膜性心脏病、心肌病、)严重的瓣膜性心脏病

6、、心肌病、6 6月内发生过不月内发生过不稳定性心绞痛者;稳定性心绞痛者;(3 3)严重肾病和肝功能障碍者;)严重肾病和肝功能障碍者;(4 4)孕妇及哺乳期妇女;)孕妇及哺乳期妇女;(5 5)有酗酒、滥用药物或精神疾病史者;)有酗酒、滥用药物或精神疾病史者;(6 6)恶性肿瘤患者或伴有明显的其它系统疾病者。)恶性肿瘤患者或伴有明显的其它系统疾病者。2.2.基因多态性的检测基因多态性的检测 (1)用低渗法分离白细胞,提取DNA。(2)选取经证实的AGT基因7个单核甘酸多态性位点。(3)采用imLDR对AGT 7个SNP位点进行分型检测。3.3.统计处理统计处理 建立数据库,利用建立数据库,利用SP

7、SS 13.0SPSS 13.0统计软件分统计软件分析数据。析数据。(1 1)计量资料用均数标准差来表示;)计量资料用均数标准差来表示;(2 2)单位点的基因型及基因频率在组间)单位点的基因型及基因频率在组间的分布差异用四表格法分析;的分布差异用四表格法分析;(3 3)计数资料的比较采用)计数资料的比较采用x2x2检验。检验。研究方法研究方法 研究结果研究结果 讨论讨论 4.1 EH4.1 EH组与正常对照组一般临床资料比较组与正常对照组一般临床资料比较4.2 EH4.2 EH各证型与对照组各证型与对照组AGTAGT七个七个位点基因型及等位基因频率比较位点基因型及等位基因频率比较 4.2.1

8、rs5049(G-217A)4.2.1 rs5049(G-217A)基因型及等位基因基因型及等位基因频率比较频率比较4.2.2 rs214858(C+31T)4.2.2 rs214858(C+31T)基因型及等位基因频基因型及等位基因频率比较率比较4.2.3 rs11568020(G152A)4.2.3 rs11568020(G152A)基因型及等位基因基因型及等位基因频率比较频率比较4.2.4rs4762(C3889T)4.2.4rs4762(C3889T)基因型及等位基因频率基因型及等位基因频率比较比较 4.2.5 rs5050(A20C)4.2.5 rs5050(A20C)基因型及等位基

9、因频率基因型及等位基因频率比较比较4.2.6 rs5051(A6C)4.2.6 rs5051(A6C)基因型及等位基因频率比基因型及等位基因频率比较较4.2.7 rs699(C4027T)4.2.7 rs699(C4027T)基因型及等位基因频率基因型及等位基因频率比较比较 研究方法研究方法 研究结果研究结果 讨论讨论 RAS RAS对正常血压的维持、对正常血压的维持、EHEH的发生、发展的发生、发展以及以及EHEH靶器官损害等方面起着非常重要的作靶器官损害等方面起着非常重要的作用。用。AGT AGT 是是RASRAS酶系中第一步限速反应底物,酶系中第一步限速反应底物,也是肾素作用的唯一底物,

10、其基因变异尤为也是肾素作用的唯一底物,其基因变异尤为关键。关键。疾病易感基因的多态性与中医证候类疾病易感基因的多态性与中医证候类型的多样性存在着共同的作用背景,易型的多样性存在着共同的作用背景,易感基因多态性及其编码的基因产物是形感基因多态性及其编码的基因产物是形成疾病不同证候的内在因素之一。成疾病不同证候的内在因素之一。EHEH中中医证候与医证候与AGTAGT基因多态性之间也许存在一基因多态性之间也许存在一定关联定关联。根据本研究结果推测根据本研究结果推测AGT rs5049AGT rs5049基因基因CCCC基基因型可能与因型可能与EHEH痰湿壅盛或阴阳两虚证的发生痰湿壅盛或阴阳两虚证的发生有关,而有关,而AGTAGT基因的其他六个位点的基因型及基因的其他六个位点的基因型及等位基因在各中医证型和对照组的比较则均等位基因在各中医证型和对照组的比较则均无统计学意义。无统计学意义。因此,因此,AGT rs5049AGT rs5049在安徽合肥汉族人在安徽合肥汉族人EHEH发发病中具有重要意义,病中具有重要意义,CCCC基因型可能使痰湿壅基因型可能使痰湿壅盛证和阴阳两虚证的敏感因子。盛证和阴阳两虚证的敏感因子。

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