1、无菌生产概念及非最终灭菌注射剂无菌生产概念及非最终灭菌注射剂生产和质量控制生产和质量控制上海市食品药品监督管理局认证审评中心上海市食品药品监督管理局认证审评中心张张 华华20072007年年9 9月月无菌生产概念及非最终灭菌注射剂无菌生产概念及非最终灭菌注射剂生产和质量控制生产和质量控制无菌药品的高风险分析无菌药品的高风险分析厂房设计、洁净度级别和环境控制厂房设计、洁净度级别和环境控制设备设备生产工艺生产工艺l配制配制l过滤过滤l无菌灌装无菌灌装无菌检查无菌检查从从“齐二药齐二药”事件谈物料和中间体质量控事件谈物料和中间体质量控制制人员监控人员监控l 冻干冻干l 从从“欣弗欣弗”事件谈灭菌工事
2、件谈灭菌工艺艺无菌药品的高风险分析无菌药品的高风险分析注射剂的特点注射剂的特点药效迅速、作用可靠药效迅速、作用可靠可用于不宜口服给药的患者可用于不宜口服给药的患者可用于不宜口服的药物可用于不宜口服的药物发挥局部定位作用发挥局部定位作用注射给药不方便且注射时疼痛注射给药不方便且注射时疼痛直接入血制剂，质量要求比其他剂型更严格，使直接入血制剂，质量要求比其他剂型更严格，使用不当更易发生危险用不当更易发生危险制造过程复杂，生产费用较大，价格较高制造过程复杂，生产费用较大，价格较高注射剂的一般质量要求注射剂的一般质量要求无菌无菌成品中不得含有任何活的微生物成品中不得含有任何活的微生物无热原无热原特别是
3、供静脉及脊椎注射的制剂特别是供静脉及脊椎注射的制剂澄明度澄明度不得有肉眼可见的浑浊或异物不得有肉眼可见的浑浊或异物安全性安全性不能引起对组织的刺激性或发生毒性反应，特别不能引起对组织的刺激性或发生毒性反应，特别是一些非水溶剂及一些附加剂，必须经过必要的是一些非水溶剂及一些附加剂，必须经过必要的动物实验，以确保安全动物实验，以确保安全注射剂的一般质量要求注射剂的一般质量要求渗透压渗透压与血浆的渗透压相等或接近与血浆的渗透压相等或接近pHpH要求与血液相等或接近（血液要求与血液相等或接近（血液pH7.4pH7.4）必要的物理和化学稳定性，以确保产品在必要的物理和化学稳定性，以确保产品在储存期内安全
4、有效储存期内安全有效降压物质降压物质有些注射液，如复方氨基酸注射液，其降压物质有些注射液，如复方氨基酸注射液，其降压物质必须符合规定，确保安全必须符合规定，确保安全注射剂生产的风险分析注射剂生产的风险分析内源性的影响因素内源性的影响因素l系统系统l设备设备l工艺过程工艺过程l物料和中间体的质量物料和中间体的质量外源性的影响因素外源性的影响因素l人员人员 无菌药品生产的管理要点无菌药品生产的管理要点防止微生物污染防止微生物污染防止热原或细菌内毒素的污染防止热原或细菌内毒素的污染防止产品中有异物防止产品中有异物装量准确装量准确厂房设计、洁净度级别厂房设计、洁净度级别和环境监控和环境监控国内企业常见
5、缺陷国内企业常见缺陷采用无菌工艺制造的洁净区内，无菌的操采用无菌工艺制造的洁净区内，无菌的操作区与有菌的操作区未完全分开作区与有菌的操作区未完全分开冻干灌装区所用工器具灭菌后，经事实上冻干灌装区所用工器具灭菌后，经事实上的非无菌区进入无菌区，带来微生物污染的非无菌区进入无菌区，带来微生物污染风险风险无菌区设水池及洁具间，或设地漏无菌区设水池及洁具间，或设地漏无菌区设单独的废物区无菌区设单独的废物区洁净区压差监控不到位洁净区压差监控不到位l采用最终灭菌工艺生产的灌装间倒压差采用最终灭菌工艺生产的灌装间倒压差厂房有重大变更，不做确认和验证厂房有重大变更，不做确认和验证无菌操作区布局示例图一无菌操作
6、区布局示例图一小机修零备件缓冲穿洁净衣暂存废物间洁具间废物暂存传递窗缓冲缓冲扎盖间灯检缓冲不合格品铝盖拆包铝盖灭菌铝盖存放缓冲女穿衣女更外穿洁净衣脱外衣更鞋原料拆包胶塞清洁灭菌缓冲穿无菌服二更缓冲间洁具间清洁灭菌器具存放间胶塞存放原料暂存缓冲粉针容器消毒冻干物料进口缓冲配液间滤过间无菌分装脱包缓冲脱衣缓冲洗瓶机电控洗瓶间隧道式干热灭菌器药液灌装间车间化验工长室冻干机房穿洁净衣脱衣走廊走廊前室缓冲无菌操作区布局示例图二无菌操作区布局示例图二技术夹层、CIP、SIP管控制柜脱、洗目检与包装已轧盖小瓶灭菌工具箱灭菌釜电气柜装匣传递窗公用工程图例人流注射用水系统中央控制室冷冻干燥机100冻干室LAF物
7、流灌装压铝盖半成品暂存穿、消安全门预留部分装盒LAF10 000LAF 层流清洗烘干机洗灭准备区小瓶流向LAF工具箱洗瓶备件库原辅材料、胶塞物流脱衣更衣灭菌柜更衣消毒隧道灭菌釜LAF配制缓冲缓冲WFI脱衣备件清洁洁净度级别比较洁净度级别比较WHO（GMP）美国美国（209E）美国美国（习惯分类）（习惯分类）ISO/TC（209）EEC（GMP）AM3.5100ISO 5ABM3.5100ISO 5BCM4.510 000ISO 7CDM6.5100 000ISO 8DWHO GMP 2002 标准标准级别级别静态静态动态动态最大允许粒子数最大允许粒子数/立方米立方米最大允许粒子数最大允许粒子数
8、/立方米立方米0.5-5.0m5.0m0.5-5.0m5.0mA3 500035000B3 5000350 0002 000C350 0002 0003 500 00020 000D3 500 00020 000不作规定不作规定不作规定不作规定注：新标准分为动态及静态，差一个级别；注：新标准分为动态及静态，差一个级别；A A级没有要求连续微粒测试级没有要求连续微粒测试引自引自WHOWHO技术报告技术报告902902，20022002WHO GMP 2002 微生物指标微生物指标级别级别空气样空气样CFU/m3沉降碟沉降碟(90mm)CFU/4小时小时接触碟接触碟(55mm)CFU/碟碟5指手套
9、指手套CFU/手套手套A3333B10555C1005025D20010050注：沉降碟的暴露时间，一般注：沉降碟的暴露时间，一般4 4小时，我国为小时，我国为0.50.5小时小时 引自引自WHOWHO技术报告技术报告902902，20022002浮游菌采样仪浮游菌采样仪MERCK MAS-100Millipore FDA对洁净区划分的标准对洁净区划分的标准2004洁净区级别洁净区级别(0.5(0.5m m尘粒数尘粒数/立立方英尺方英尺)ISOISO名称名称0.5 0.5 m m尘粒数尘粒数/立方米立方米浮游菌浮游菌纠偏限度纠偏限度 (cfu/m(cfu/m3 3)沉降菌沉降菌纠偏限度纠偏限度
10、 (90mm;90mm;cfu/4h)cfu/4h)1001005 53,5203,5201 11 1100010006 635,20035,2007 73 310,00010,0007 7352,000352,00010105 5100,000100,0008 83,520,0003,520,0001001005050 所有级别均依据生产活动时在邻近暴露物料所有级别均依据生产活动时在邻近暴露物料/物品处测试的数据物品处测试的数据 浮游菌、沉降菌纠偏限度表示建议的环境质量水平。企业也可根据作业或浮游菌、沉降菌纠偏限度表示建议的环境质量水平。企业也可根据作业或分析方法的类型确定微生物纠偏措施标准
11、分析方法的类型确定微生物纠偏措施标准 引自引自Guidance for Industry Sterile Drug Products Produced by Guidance for Industry Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing Aseptic Processing Current Good Manufacturing Practice,FDA Current Good Manufacturing Practice,FDA中国中国 GMP（1998 修订）修订）洁洁 净净 级级 别别尘粒数尘粒数/立方米立方米微生物最
12、大允许数微生物最大允许数 0.5m 5m浮游菌浮游菌CFU/立方米立方米沉降菌沉降菌CFU/皿皿(90 mm 半半 小小 时时)100 3 50005110 000 350 0002 0001003100 000 3 500 00020 00050010300 000 10 500 00060 000100015我国百级标准采用了国际标准中我国百级标准采用了国际标准中B B级（乱流百级）的限度标准级（乱流百级）的限度标准标准没有阐明对气流组织的要求标准没有阐明对气流组织的要求关键操作区空气流向控制要求比较关键操作区空气流向控制要求比较洁净度洁净度级别级别WHO美国美国欧盟欧盟中国中国A100A
13、100空气流向空气流向单向流单向流单向流单向流单向流单向流无要求无要求风速风速0.45m/s20%0.45m/s20%产粉尘的操产粉尘的操作区风速应作区风速应更高更高 0.36-0.54m/s 无要求无要求洁净区压差控制要求比较洁净区压差控制要求比较WHO美国美国欧盟欧盟中国中国不同级别不同级别相邻房间相邻房间的压差的压差10-15Pa10-15Pa10-15Pa10-15Pa10-15Pa10-15Pa 5 5PaPa其它压差其它压差洁净区过滤洁净区过滤空气的送风空气的送风应能确保在应能确保在任何运行状任何运行状态下对周围态下对周围低级别区保低级别区保持正压及气持正压及气流方向，并流方向，并
14、有足够的自有足够的自净能力净能力 无菌操作间无菌操作间对相邻非洁对相邻非洁净区操作间净区操作间应始终保持应始终保持正压（如至正压（如至少少12.5Pa12.5Pa）洁净区过滤洁净区过滤空气的送风空气的送风应能确保在应能确保在任何运行状任何运行状态下对周围态下对周围低级别区保低级别区保持正压及气持正压及气流方向，并流方向，并有足够的自有足够的自净能力净能力 洁净区与室洁净区与室外大气的静外大气的静压差压差 10 10PaPa洁净区环境监控要求比较洁净区环境监控要求比较WHO美国美国欧盟欧盟中国中国关键操作关键操作区的尘粒区的尘粒为控制各级别的洁净为控制各级别的洁净区操作时的尘粒数，区操作时的尘粒
15、数，应对尘粒进行监测应对尘粒进行监测每一生产班次应定期每一生产班次应定期进行监控；进行监控；粒子计数探头的安放粒子计数探头的安放位置应能取到有代表位置应能取到有代表性的样品性的样品 应对应对A级区的空气粒子级区的空气粒子进行连续测定，并建议进行连续测定，并建议对对B级区也连续进行测级区也连续进行测定定 洁净室洁净室(区区)内空内空气的微生物数和气的微生物数和尘粒数应定期监尘粒数应定期监测，监测结果应测，监测结果应记录存档。记录存档。洁净室洁净室(区区)在静在静态条件下检测的态条件下检测的尘埃粒子数、浮尘埃粒子数、浮游菌数或沉降菌游菌数或沉降菌数必须符合规定，数必须符合规定，应定期监控动态应定期
16、监控动态条件下的洁净状条件下的洁净状况。况。关键操作关键操作区的微生区的微生物物无菌操作时，应频繁无菌操作时，应频繁对微生物进行动态监对微生物进行动态监测；测；关键操作结束后，应关键操作结束后，应对表面和人员的微生对表面和人员的微生物进行监测；物进行监测；应制定微生物监控的应制定微生物监控的警戒和纠偏标准，以警戒和纠偏标准，以监控空气质量的趋势监控空气质量的趋势关键区出现微生物污关键区出现微生物污染时，要进行必要的染时，要进行必要的调查调查无菌操作时，应频繁对无菌操作时，应频繁对微生物进行动态监测；微生物进行动态监测；除在生产过程中需进行除在生产过程中需进行微生物监控外，系统验微生物监控外，系
17、统验证、清洁和消毒等操作证、清洁和消毒等操作后，也应进行微生物监后，也应进行微生物监控；控；应对尘粒和微生物监控应对尘粒和微生物监控制定适当的警戒和纠偏制定适当的警戒和纠偏标准标准关键操作关键操作区的压差区的压差应设送风故障报警系应设送风故障报警系统；统；压差十分重要的毗邻压差十分重要的毗邻级别区之间应安装压级别区之间应安装压差表并定期记录压差差表并定期记录压差每一班操作过程中，每一班操作过程中，房间的压差应连续监房间的压差应连续监控并经常记录。所有控并经常记录。所有报警应有记录，超过报警应有记录，超过设定限度的各种偏差设定限度的各种偏差应进行调查。可列入应进行调查。可列入批记录中批记录中应设
18、送风故障报警系应设送风故障报警系统；统；压差十分重要的毗邻压差十分重要的毗邻级别区之间应安装压级别区之间应安装压差表；差表；压差数据应定期记录压差数据应定期记录或者归入有关文档中或者归入有关文档中无要求无要求关键操作区气流方向示例一关键操作区气流方向示例一MMSCIP灭菌直接包材接触部100级10000级关键操作区气流方向示例二关键操作区气流方向示例二MMSCIP灭菌灭菌直接包材直接包材接触部接触部0.4520%m/sGrade”A”Grade”B”关键点关键点操作者不能进入Grade”A”区域。厂房的检查要点厂房的检查要点厂房布局和建造厂房布局和建造洁净度级别的标准洁净度级别的标准关键操作区
19、的空气流向关键操作区的空气流向洁净区的压差洁净区的压差洁净区的清洁和消毒洁净区的清洁和消毒环境监控环境监控HVACHVAC系统的维护和监控系统的维护和监控设设 备备国内企业常见缺陷国内企业常见缺陷储存除菌过滤后药液的高位槽呼吸口未安装呼吸器储存除菌过滤后药液的高位槽呼吸口未安装呼吸器与药品直接接触的压缩空气、惰性气体未确认是否与药品直接接触的压缩空气、惰性气体未确认是否符合生产要求符合生产要求 灭菌和冻干设备管理不到位灭菌和冻干设备管理不到位l温度探头或控制仪未校准温度探头或控制仪未校准l温度探头损坏维修不及时温度探头损坏维修不及时（干热、湿热）灭菌、冻干设备无自动记录装置（干热、湿热）灭菌、
20、冻干设备无自动记录装置（干热、湿热）灭菌、冻干设备的自动记录未归档（干热、湿热）灭菌、冻干设备的自动记录未归档未使用联动生产线，采用单机灌封未使用联动生产线，采用单机灌封灭菌设备自动记录曲线图示例灭菌设备自动记录曲线图示例设备的检查要点设备的检查要点适用于产品的生产、清洁、消毒或灭菌适用于产品的生产、清洁、消毒或灭菌尽可能采用密闭系统尽可能采用密闭系统合理布置和安装合理布置和安装关键参数控制和记录仪表的校准关键参数控制和记录仪表的校准设备的确认、维护和维修设备的确认、维护和维修设备的清洁、消毒或灭菌设备的清洁、消毒或灭菌l共用设备应有防止交叉污染的措施共用设备应有防止交叉污染的措施设备应在确认
21、的范围内使用设备应在确认的范围内使用密闭系统示例密闭系统示例生产用隔离器示例一生产用隔离器示例一生产用隔离器示例二生产用隔离器示例二生产用隔离器示例三生产用隔离器示例三国内企业常见缺陷国内企业常见缺陷注射用水和纯化水标准不符合药典标准注射用水和纯化水标准不符合药典标准l工艺用水未做微生物限度的检测工艺用水未做微生物限度的检测注射用水和纯化水的微生物限度检查未采注射用水和纯化水的微生物限度检查未采用薄膜过滤法用薄膜过滤法注射用水循环系统温度检测点安装位置不注射用水循环系统温度检测点安装位置不合理，不能反映系统保持合理，不能反映系统保持6565以上循环以上循环未监测注射用水关键使用点的细菌内毒素未
22、监测注射用水关键使用点的细菌内毒素生产用水的检查要点生产用水的检查要点水处理设施及其分配系统的设计、安装和水处理设施及其分配系统的设计、安装和维护应能确保供水达到适当的质量标准。维护应能确保供水达到适当的质量标准。水系统的运行不应超越其设计能力。水系统的运行不应超越其设计能力。注射用水的生产、贮存和分配方式应能防注射用水的生产、贮存和分配方式应能防止微生物生长，例如，在止微生物生长，例如，在7070以上保持循以上保持循环环水源、水处理设施及水的化学和生物学污水源、水处理设施及水的化学和生物学污染状况应定期监测，必要时还应监测细菌染状况应定期监测，必要时还应监测细菌内毒素。监测结果以及所采取纠偏
23、措施的内毒素。监测结果以及所采取纠偏措施的记录应予归档记录应予归档生产工艺生产工艺生产工艺生产工艺配制配制过滤过滤无菌灌装无菌灌装冻干冻干从从“欣弗欣弗”事件谈灭菌工艺事件谈灭菌工艺无菌药品生产管理的要点无菌药品生产管理的要点生产加工的每生产加工的每个阶段（包括个阶段（包括灭菌前的各阶灭菌前的各阶段）都必须采段）都必须采取预防措施，取预防措施，以尽可能降低以尽可能降低污染污染配制配制国内企业常见缺陷国内企业常见缺陷l提高称量配制区域的洁净度级别，使其与灌装提高称量配制区域的洁净度级别，使其与灌装区域一致，共用同一洁净区的更衣设施、走廊区域一致，共用同一洁净区的更衣设施、走廊和和HVAC系统系统
24、l称量操作位置的正上方安装高效空气层流称量操作位置的正上方安装高效空气层流l不注意物料称量的先后顺序不注意物料称量的先后顺序l整包装的物料不称量即投料整包装的物料不称量即投料l不按照规定的处方配制不按照规定的处方配制l称量记录不完整称量记录不完整l操作区域受到活性炭污染操作区域受到活性炭污染配制区域的洁净度级别配制区域的洁净度级别应单独设置，注意称量区的空气流向，防应单独设置，注意称量区的空气流向，防止粉尘扩散止粉尘扩散应根据产品的特性设定相应的洁净度级别应根据产品的特性设定相应的洁净度级别欧盟无菌药品的欧盟无菌药品的GMP附录规定：附录规定：l原辅料和大多数产品的准备原辅料和大多数产品的准备
25、/配制应至少在配制应至少在D级区进行，以降低尘粒和微生物污染的风险，级区进行，以降低尘粒和微生物污染的风险，适于过滤及灭菌操作适于过滤及灭菌操作l微生物污染风险比较高时，如容易长菌的产品、微生物污染风险比较高时，如容易长菌的产品、配制后要等相当长时间方可灭菌的产品或因故配制后要等相当长时间方可灭菌的产品或因故主要不在密闭容器内进行配制操作的产品，配主要不在密闭容器内进行配制操作的产品，配制必须在制必须在C级环境中进行级环境中进行称量称量必须按照注册批准的处方配料必须按照注册批准的处方配料称量中应特别注意防止交叉污染称量中应特别注意防止交叉污染l一次称量一种物料一次称量一种物料l通常先称量辅料，
26、后称量原料药通常先称量辅料，后称量原料药l活性炭应在单独区域中称量，称量后放在水溶活性炭应在单独区域中称量，称量后放在水溶液中液中衡器衡器l使用前应检查校准使用前应检查校准称量记录称量记录l最好采用客观的记录最好采用客观的记录l如实记录衡器的读数如实记录衡器的读数l复核复核配制工序的检查要点配制工序的检查要点操作区的设置和洁净度级别操作区的设置和洁净度级别配料处方配料处方称量操作称量操作称量记录称量记录防止污染和交叉污染的措施防止污染和交叉污染的措施过滤过滤国内企业常见缺陷国内企业常见缺陷l过滤器的安装位置远离灌装点过滤器的安装位置远离灌装点l采用无菌制造工艺时，除菌过滤的有菌操作区采用无菌制
27、造工艺时，除菌过滤的有菌操作区与无菌操作区未分隔与无菌操作区未分隔l未记录所用过滤器的型号、来源、批号未记录所用过滤器的型号、来源、批号l不做过滤器的完整性试验不做过滤器的完整性试验l过滤器完整性试验的合格标准设定不正确过滤器完整性试验的合格标准设定不正确l过滤后的溶液存放在开口的容器中过滤后的溶液存放在开口的容器中过滤器的安装过滤器的安装除菌过滤用过滤器通常使用除菌过滤用过滤器通常使用2 2只串联方式，只串联方式，确保过滤的可靠性确保过滤的可靠性可能情况下，应在紧挨灌装点的位置，用可能情况下，应在紧挨灌装点的位置，用除菌过滤器将所有药液，特别是大容量注除菌过滤器将所有药液，特别是大容量注射剂
28、进行除菌过滤射剂进行除菌过滤采用无菌制造工艺时，除菌过滤操作区域采用无菌制造工艺时，除菌过滤操作区域不得设在无菌操作区内，可通过管道传送不得设在无菌操作区内，可通过管道传送滤液滤液过滤器的完整性试验过滤器的完整性试验过滤器的相关信息应具有可追溯性过滤器的相关信息应具有可追溯性完整性试验的合格标准应参照供应商的说完整性试验的合格标准应参照供应商的说明书设定明书设定应在过滤前、过滤后分别测试应在过滤前、过滤后分别测试测试方法测试方法l起泡点试验起泡点试验l前进流试验前进流试验微生物挑战性试验由供应商做，以避免污微生物挑战性试验由供应商做，以避免污染产品染产品起泡点试验示意图起泡点试验示意图 压缩空
29、气压缩空气 或氮气或氮气 压力表压力表阀门阀门压力表压力表滤芯滤芯外壳外壳 排污阀排污阀阀门阀门亲水滤器起泡点试验亲水滤器起泡点试验水剂产品以产品或水水剂产品以产品或水湿润滤膜湿润滤膜 0.2 0.2 参考压力参考压力 0.31 MPa 0.31 MPa 0.45 0.45 参考压力参考压力 0.23 MPa 0.23 MPa详见供货商说明书详见供货商说明书疏水性滤器起泡点疏水性滤器起泡点6060(v/vv/v)异丙醇水溶液异丙醇水溶液6060-70-70(v/vv/v)乙醇水溶液乙醇水溶液前进流试验示意图前进流试验示意图 压缩空气压缩空气 或氮气或氮气 阀门阀门 压力表压力表滤芯滤芯外壳外壳
30、阀门阀门前进流前进流测试仪测试仪 排污阀排污阀前进流试验前进流试验在在 80 起泡点压起泡点压力下进行力下进行详见供货商说明书详见供货商说明书过滤工序的检查要点过滤工序的检查要点过滤器的安装位置过滤器的安装位置过滤器的相关信息过滤器的相关信息过滤器完整性试验的方法过滤器完整性试验的方法过滤前后的完整性试验和记录过滤前后的完整性试验和记录过滤器的更换、消毒或灭菌过滤器的更换、消毒或灭菌发现过滤器出问题后的处理发现过滤器出问题后的处理无菌灌装无菌灌装国内企业常见缺陷国内企业常见缺陷l关键操作区空气流向为乱流，而不是层流关键操作区空气流向为乱流，而不是层流l关键操作区不便于在洁净区外进行监控关键操作
31、区不便于在洁净区外进行监控l人员的无菌操作不规范人员的无菌操作不规范l不做或未定期做培养基模拟灌装验证不做或未定期做培养基模拟灌装验证l培养模拟灌装验证的合格标准设定不正确培养模拟灌装验证的合格标准设定不正确l培养基模拟灌装未模拟最差生产条件培养基模拟灌装未模拟最差生产条件l未对培养基模拟灌装阳性样品进行调查未对培养基模拟灌装阳性样品进行调查l培养模拟灌装验证数据作假培养模拟灌装验证数据作假培养基模拟灌装验证培养基模拟灌装验证目的目的l确定实际生产中（如开机前的调试、加入无菌确定实际生产中（如开机前的调试、加入无菌原辅材料、无菌连接、灌装和密封）产品污染原辅材料、无菌连接、灌装和密封）产品污染
32、的概率的概率基本思路基本思路l应综合考虑生产线可能造成污染的各种因素，应综合考虑生产线可能造成污染的各种因素，并能对工艺受控的状态做出准确的评估并能对工艺受控的状态做出准确的评估l应尽可能模拟实际生产的无菌操作，可能时，应尽可能模拟实际生产的无菌操作，可能时，应包括最差条件的相关活动，以挑战无菌操作应包括最差条件的相关活动，以挑战无菌操作无菌灌装检查要点无菌灌装检查要点关键操作区和生产设备关键操作区和生产设备l清洁、消毒或灭菌清洁、消毒或灭菌无菌灌装用各类物料、器具的准备或灭菌无菌灌装用各类物料、器具的准备或灭菌处理处理生产用气体生产用气体人员的无菌操作人员的无菌操作装量控制装量控制培养基模拟
33、灌装验证培养基模拟灌装验证无菌检验样品的取样无菌检验样品的取样检查时应不能影响正常的生产检查时应不能影响正常的生产冻干冻干国内企业常见缺陷国内企业常见缺陷l不测共晶点不测共晶点l批量不固定批量不固定l不同装量的产品同时冻干不同装量的产品同时冻干l冻干操作人员需在冻干过程中随时调整参数设置冻干操作人员需在冻干过程中随时调整参数设置l未对不同装量、不同批量的产品分别进行冻干工艺未对不同装量、不同批量的产品分别进行冻干工艺验证验证l冻干工艺未经验证冻干工艺未经验证影响冻干产品质量的主要因素影响冻干产品质量的主要因素冻结冻结l产品溶液处方产品溶液处方l冷冻速率冷冻速率l冷冻方式冷冻方式l产品装量和数量
34、产品装量和数量干燥干燥l搁板温度搁板温度l产品温度产品温度l冷凝器温度和真空度冷凝器温度和真空度l冷冻干燥室的真空度冷冻干燥室的真空度l产品装量和数量产品装量和数量冻干工艺的关键控制参数冻干工艺的关键控制参数冷冻速率冷冻速率搁板温度搁板温度产品温度产品温度冷凝器温度和真空度冷凝器温度和真空度冷冻干燥室的真空度冷冻干燥室的真空度冻干机的灭菌冻干机的灭菌乙醇只能起到消毒的作用，不能做到灭菌乙醇只能起到消毒的作用，不能做到灭菌普遍认可的方法为湿热灭菌法普遍认可的方法为湿热灭菌法氮气、空气过滤器和进气口管道应灭菌完氮气、空气过滤器和进气口管道应灭菌完全全冷冻干燥室的灭菌应使蒸汽在搁板间自由冷冻干燥室的
35、灭菌应使蒸汽在搁板间自由流通流通冷冻干燥室在各批次间应进行灭菌冷冻干燥室在各批次间应进行灭菌灭菌程序的验证应采用生物指示剂灭菌程序的验证应采用生物指示剂冷凝器应灭菌冷凝器应灭菌灭菌应有完整的记录灭菌应有完整的记录冻干检查要点冻干检查要点冻干产品的包装形式、装量冻干产品的包装形式、装量冻干产品的装载方式和装载数量冻干产品的装载方式和装载数量冻干工艺和曲线冻干工艺和曲线冻干工艺的验证冻干工艺的验证冻干产品进出冷冻干燥室的操作冻干产品进出冷冻干燥室的操作冻干机的灭菌冻干机的灭菌冻干机冻干机l关键参数控制和记录仪表的校准关键参数控制和记录仪表的校准l管路的连接管路的连接冻干的记录冻干的记录从从“欣弗欣
36、弗”事件谈灭菌工艺事件谈灭菌工艺欣弗事件的发生欣弗事件的发生l20062006年年7 7月月l安徽华源l克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液l不良事件报告81例，涉及10个省份欣弗到底怎么了？欣弗到底怎么了？克林霉素磷酸酯注射剂产品的调查克林霉素磷酸酯注射剂产品的调查克林霉素磷酸酯氯化钠注射克林霉素磷酸酯氯化钠注射（100ml:0.6g100ml:0.6g）l采用半无菌工艺生产采用半无菌工艺生产l灭菌条件灭菌条件100100、7 7分钟分钟l贮存条件贮存条件阴凉阴凉l有效期有效期1 1年年l有些企业的处方中含有有些企业的处方中含有苯甲醇苯甲醇l稳定性考察稳定性考察有一批留样的有关物质为有一批留样的有关物
37、质为7.9l有关物质有关物质总杂不得过总杂不得过8.0 单杂不得过单杂不得过5.0克林霉素磷酸酯注射剂产品的调查克林霉素磷酸酯注射剂产品的调查克林霉素磷酸酯注射液克林霉素磷酸酯注射液（2ml:0.3g2ml:0.3g）l灭菌条件灭菌条件100100、3 31010分钟分钟l贮存条件贮存条件遮光、密闭保存遮光、密闭保存l有效期有效期2 2年年l处方中含有苯甲醇处方中含有苯甲醇l有关物质有关物质总杂不得过总杂不得过6.06.0（20042004年底改年底改为为8.08.0）单杂不得过单杂不得过4.04.0克林霉素磷酸酯注射剂产品的调查克林霉素磷酸酯注射剂产品的调查注射用克林霉素磷酸酯注射用克林霉素
38、磷酸酯（0.3g0.3g或或0.6g0.6g）l冻干粉冻干粉针针l贮存条件贮存条件遮光、密闭，在阴凉处保存遮光、密闭，在阴凉处保存l有效期有效期2 2年年l有的处方中含有苯甲醇有的处方中含有苯甲醇l有关物质有关物质总杂不得过总杂不得过4.04.0单杂不得过单杂不得过2.52.5克林霉素磷酸酯注射剂产品克林霉素磷酸酯注射剂产品质量标准中有关物质项比较质量标准中有关物质项比较有关物质有关物质LVPLVP（100ml100ml）SVPSVP(2ml)(2ml)粉针剂粉针剂原料药原料药总杂总杂8.0%8.0%8.0%8.0%4.0%4.0%4.0%4.0%单杂单杂5.0%5.0%4.0%4.0%2.5
39、%2.5%2.5%2.5%克林霉素磷酸酯水溶液克林霉素磷酸酯水溶液热稳定性研究热稳定性研究江苏省的一家药厂经江苏省的一家药厂经试验发现，克林霉素试验发现，克林霉素磷酸酯水溶液加热到磷酸酯水溶液加热到6060，含量下降，含量下降86%86%因无法采用灭菌工艺因无法采用灭菌工艺生产，该企业最终申生产，该企业最终申报了克林霉素磷酸酯报了克林霉素磷酸酯的冻干粉针剂的冻干粉针剂从上述调查从上述调查看国内灭菌注射剂生产的缺陷看国内灭菌注射剂生产的缺陷对灭菌的认识不正确对灭菌的认识不正确产品研发未考虑灭菌产品研发未考虑灭菌工艺的可行性工艺的可行性忽视工艺的可行性，忽视工艺的可行性，盲目跟风报批盲目跟风报批注
40、射剂用原料药的杂注射剂用原料药的杂质控制不严质控制不严忽视产品的安全性忽视产品的安全性中国医药报中国医药报 2007年年1月月4日日 A6版版灭菌工艺的选择灭菌工艺的选择湿热灭菌法湿热灭菌法干热灭菌法干热灭菌法除菌过滤法除菌过滤法环氧乙烷灭菌法环氧乙烷灭菌法辐射灭菌法辐射灭菌法无菌药品常用灭菌工艺的比较无菌药品常用灭菌工艺的比较类别类别Fo值值微生物存活概率微生物存活概率要点说明要点说明过度过度杀灭法杀灭法Fo1210-6热稳定性产品热稳定性产品以杀灭微生物作为实现无菌的手段以杀灭微生物作为实现无菌的手段残存残存概率法概率法8Fo710-3不能加热的产品不能加热的产品不能除去病毒、支原体等微生
41、物不能除去病毒、支原体等微生物LRV=log reduction value 过滤对数下降值一过滤对数下降值一般上游为般上游为107下游为下游为1，则，则LRV=7由于操作较多，最终产品达到的无菌保证水由于操作较多，最终产品达到的无菌保证水平远低于除菌过滤的水平平远低于除菌过滤的水平影响湿热灭菌效果的因素影响湿热灭菌效果的因素待灭菌产品中含有微生物的种类和数量待灭菌产品中含有微生物的种类和数量待灭菌产品的包装形式待灭菌产品的包装形式待灭菌产品的装载方式和装载数量待灭菌产品的装载方式和装载数量湿热灭菌工艺条件湿热灭菌工艺条件湿热灭菌设备湿热灭菌设备无菌保证水平无菌保证水平SAL无菌保证水平无菌保
42、证水平（Sterility Assurance Sterility Assurance LevelLevel）l表示物品被灭菌后的无菌状态表示物品被灭菌后的无菌状态l按国际标准，湿热灭菌法的无菌保证值不得低按国际标准，湿热灭菌法的无菌保证值不得低于于10-6，即灭菌后微生物存活的概率不得大于，即灭菌后微生物存活的概率不得大于百万分之一。百万分之一。灭菌工艺验证的必要性灭菌工艺验证的必要性灭菌产品的无菌保证不能依赖于最终产品灭菌产品的无菌保证不能依赖于最终产品的无菌检验，而是取决于生产过程中采用的无菌检验，而是取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺、严格的合格的灭菌工艺、严格的GMPGMP管理和良好
43、管理和良好的无菌保证体系的无菌保证体系灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件灭菌工艺经过验证后，方可正式用于生产灭菌工艺经过验证后，方可正式用于生产国内企业灭菌工艺验证常见缺陷国内企业灭菌工艺验证常见缺陷无包装规格无包装规格无装载方式无装载方式未对每一种产品每一种包装规格的每一种装载方未对每一种产品每一种包装规格的每一种装载方式进行验证式进行验证采用留点温度计监测温度采用留点温度计监测温度无温度探头校准记录无温度探头校准记录验证的灭菌工艺与实际工艺不一致验证的灭菌工艺与实际工艺不一致未验证最差灭菌条件未验证最差灭菌条件设定的验证合格标准达不到无菌保证水平（设定的验
44、证合格标准达不到无菌保证水平（SAL）10-6生物指示剂使用不规范生物指示剂使用不规范灭菌工艺检查要点灭菌工艺检查要点生产环境和待灭菌产品中含有微生物的种类和数生产环境和待灭菌产品中含有微生物的种类和数量研究和监控量研究和监控待灭菌产品的包装形式、装载方式和装载数量待灭菌产品的包装形式、装载方式和装载数量灭菌工艺条件灭菌工艺条件灭菌设备灭菌设备l关键控制参数的控制和记录仪表的校准关键控制参数的控制和记录仪表的校准l设备维护和维修设备维护和维修灭菌的记录灭菌的记录灭菌工艺的验证灭菌工艺的验证l选用的生物指示剂选用的生物指示剂l热分布试验，找出最冷点位置热分布试验，找出最冷点位置无菌检验样品的取样
45、无菌检验样品的取样无菌检查无菌检查国内企业常见缺陷国内企业常见缺陷未对无菌检验方法进行验证未对无菌检验方法进行验证未测试培养基的灵敏度未测试培养基的灵敏度未对每柜灭菌产品进行取样并进行无菌检未对每柜灭菌产品进行取样并进行无菌检验验未考虑产品本身的抑菌作用未考虑产品本身的抑菌作用无菌种分离鉴别的条件无菌种分离鉴别的条件出现阳性结果时的调查不完整出现阳性结果时的调查不完整无菌检查的局限性无菌检查的局限性无菌的定义无菌的定义l理论上：无菌没有任何活的微生物理论上：无菌没有任何活的微生物l实际上：我们无法证明产品中没有活微生物存在实际上：我们无法证明产品中没有活微生物存在无法对整批产品进行无法对整批产
46、品进行100%100%检验检验l无菌检验的结果只是一个基于无菌检验的结果只是一个基于“可能性可能性”的判断的判断无菌检验用培养基有其局限性无菌检验用培养基有其局限性l只进行细菌和真菌的检验只进行细菌和真菌的检验l对实验结果的判定是基于对实验结果的判定是基于“是否在培养基中生长是否在培养基中生长”l培养条件（如温度和时间）是有限的培养条件（如温度和时间）是有限的我们的工作环境及操作是在相对无菌的状态我们的工作环境及操作是在相对无菌的状态美国非肠道药物学会注射剂无菌测试结果美国非肠道药物学会注射剂无菌测试结果试验目的：不合格的可能性试验目的：不合格的可能性(%)试验批量：试验批量：60,000支支
47、试验方法：按美国药典无菌测试方法试验方法：按美国药典无菌测试方法真实的不合格率真实的不合格率测试测试20支样品支样品不合格的可能性不合格的可能性测试测试40支样品支样品不合格的可能性不合格的可能性118.2%33.1%564.2%87.2%1596.1%99.8%3099.9%100.0%上述无菌测试结果的启示上述无菌测试结果的启示含有少量微生物污染产含有少量微生物污染产品的批次也有可能品的批次也有可能“通通过过”无菌检验无菌检验一批产品的染菌率越低，一批产品的染菌率越低，根据无菌检验的结果来根据无菌检验的结果来判定整批产品的无菌，判定整批产品的无菌，其风险就越大其风险就越大如何用无菌检验来证
48、明整批产品无菌如何用无菌检验来证明整批产品无菌要求有一个取样计要求有一个取样计划来涵盖整个批号划来涵盖整个批号有足够的取样量和有足够的取样量和检验量检验量选择适用的培养基选择适用的培养基采用经验证的无菌采用经验证的无菌检验方法检验方法良好的环境监控良好的环境监控无菌检验的取样计划无菌检验的取样计划何时取何时取?如何取如何取?何处取？何处取？l无菌灌装产品无菌灌装产品批开始、结束及重大故障和调整后批开始、结束及重大故障和调整后最多最多2424小时为一批小时为一批 USP USP 每天灌装的产品应分别做无菌检验每天灌装的产品应分别做无菌检验l最终灭菌产品最终灭菌产品从灭菌柜中最冷点取样从灭菌柜中最
49、冷点取样对经不同灭菌柜灭菌的产品应分别进行无菌检验对经不同灭菌柜灭菌的产品应分别进行无菌检验无菌检验的取样计划无菌检验的取样计划取多少样品（检验数量）？取多少样品（检验数量）？l取决于产品的批量取决于产品的批量 CP2005CP2005年版大于500500：取2%2%或2020支支（取少），用于每个培养基检验小于等于100100：取10%10%或4 4个（取多），用于每个培养基检验l取决于产品的数量取决于产品的数量CP2005CP2005年版剂量小于1毫升，就要取4040支l同时要考虑检验耗损和复试的需要同时要考虑检验耗损和复试的需要无菌检验的取样计划无菌检验的取样计划每个样品测试多少数量（检
50、验量）？每个样品测试多少数量（检验量）？l药典上规定了每次检验的供试品总量药典上规定了每次检验的供试品总量装量小于装量小于 1ml1mlCP2005CP2005年版年版 每支样接入每个培养基为全量每支样接入每个培养基为全量装量大于等于装量大于等于 1ml1mlPh.EurPh.Eur 半量，但不超过半量，但不超过 20ml 20ml CP2005CP2005年版年版 半量，半量，2-500ml2-500ml无菌检验用培养基无菌检验用培养基培养基的种类培养基的种类l用于真菌培养的改良马丁培养基，培养温度用于真菌培养的改良马丁培养基，培养温度23-2823-28l用于厌氧和需氧细菌培养的硫乙醇酸盐
