1、第三章第三章 外界因素对微生物的影响外界因素对微生物的影响 1.灭菌（灭菌（sterilization）指杀灭物体中所有病原微生物和非指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。2.消毒（消毒（disinfection）指杀灭物体中的病原微生物的方法。指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。3.防腐（防腐（antisepsis）指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。指阻止或抑制微生物
2、生长繁殖的方法。物理因素对微生物的影响物理因素对微生物的影响 干干 燥燥物理因素物理因素渗透压渗透压温温 度度光光 线线滤过除菌滤过除菌 超声波超声波射射 线线 微生物在干燥的环境中失去大量水分，新陈代微生物在干燥的环境中失去大量水分，新陈代谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋白质变性和由谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。不同种类的于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。不同种类的微生物对干燥的抵抗力差异很大。主要作用是抑微生物对干燥的抵抗力差异很大。主要作用是抑菌，用于菌种和食品的保藏。菌，用于菌种和食品的保藏。一、干一、干 燥燥二、渗透压二、渗透压 高渗易造成质壁
3、分离；低渗则胞浆高渗易造成质壁分离；低渗则胞浆逸出。为避免影响常在人工培养基中加逸出。为避免影响常在人工培养基中加入适量的入适量的NaCl。(一)低温低温 大多数微生物对低温具有很强的抵抗力大多数微生物对低温具有很强的抵抗力。低温下，代谢活动降低到最低水平，生长繁殖低温下，代谢活动降低到最低水平，生长繁殖停止，但仍可长时间保持活力。停止，但仍可长时间保持活力。意义：意义：保存菌种、毒种、疫苗等保存菌种、毒种、疫苗等 三、温三、温 度度 热力灭菌法：热力灭菌法：干热灭菌干热灭菌 和湿热灭菌两种方法。和湿热灭菌两种方法。二者比较：二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。在同一温度下，后者效力比
4、前者为大。原因：原因：（1 1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固；）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固；（2 2）湿热的穿透力比干热大；）湿热的穿透力比干热大；（3 3）湿热的蒸汽有潜热存在。）湿热的蒸汽有潜热存在。(二二)高温：高温：高温对微生物具有明显的致死作用高温对微生物具有明显的致死作用.(1)火焰灭菌法火焰灭菌法:火焰直接烧灼，如接种环火焰直接烧灼，如接种环。1.干热灭菌法干热灭菌法(2)热空气灭菌法热空气灭菌法:干热灭菌器适用于高温下不损坏、不变质的物品干热灭菌器适用于高温下不损坏、不变质的物品,如玻璃器皿、瓷器等的灭菌。如玻璃器皿、瓷器等的灭菌。灭菌温度需灭菌温度需160维持维持2 h。(1)
5、煮沸灭菌法煮沸灭菌法:煮沸煮沸1020 min可杀死所有细菌的繁殖可杀死所有细菌的繁殖 体，芽胞常需煮沸体，芽胞常需煮沸12 h才被杀死才被杀死。用于饮水、一般器械。用于饮水、一般器械 如刀剪的消毒。如刀剪的消毒。(2)巴氏消毒法巴氏消毒法:以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法.1.低温维持巴氏消毒法低温维持巴氏消毒法 636530min 2.高温瞬时巴氏消毒法高温瞬时巴氏消毒法 717215s 3.超高温巴氏消毒法超高温巴氏消毒法 13212s 2.湿热
6、灭菌法湿热灭菌法 （3）流通蒸汽灭菌法流通蒸汽灭菌法：是一种常压蒸汽消毒法，细是一种常压蒸汽消毒法，细菌繁殖体菌繁殖体15-30分钟可杀灭，但芽孢不全部被杀灭。分钟可杀灭，但芽孢不全部被杀灭。(4)间歇灭菌法间歇灭菌法（反复多次流通蒸汽）（反复多次流通蒸汽）100维持维持30min 温箱过夜温箱过夜 100维持维持30min 温箱过夜温箱过夜 100维持维持30min 温箱过夜温箱过夜 100维维持持30min。此法常用于一些不耐高温的培养基，如鸡蛋培养基、此法常用于一些不耐高温的培养基，如鸡蛋培养基、血清培养基、糖培养基的灭菌血清培养基、糖培养基的灭菌。高压蒸汽灭菌器：高压蒸汽灭菌器：15磅
7、磅/平平方英寸，方英寸，121.3温度下维温度下维持持1520min。一定要充分排除灭菌器内原一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。用于普通培养有的冷空气。用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等。手术敷料等。手提式高压蒸汽灭菌器手提式高压蒸汽灭菌器（5）高压蒸汽灭菌法）高压蒸汽灭菌法 直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀菌因素。直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀菌因素。许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小时即许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多，可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多，往往需经往往
8、需经20h才死亡。日光的杀菌效力因地、因时及才死亡。日光的杀菌效力因地、因时及微生物所处环境不同而异微生物所处环境不同而异。日光光谱分为可见光线、。日光光谱分为可见光线、红外线和紫外线。红外线和紫外线。四、光线四、光线 波长波长200-300nm部分有杀菌作用。实验室常使用的紫外部分有杀菌作用。实验室常使用的紫外线杀菌灯紫外线波长为线杀菌灯紫外线波长为253.7nm。常用于微生物实验室、。常用于微生物实验室、无菌室、手术室等的空气消毒，或用于不能用高温或化学药无菌室、手术室等的空气消毒，或用于不能用高温或化学药品消毒的物品的表面消毒。还可用于诱变育种。品消毒的物品的表面消毒。还可用于诱变育种。
9、杀菌机理：杀菌机理：（1）损害）损害DNA构型，影响构型，影响DNA复制和转录复制和转录（2）O2 O3 O 杀菌杀菌紫外线紫外线(1)射线射线:电离辐射强电离辐射强，穿透力差（穿透力差（缺乏穿透力，不实用）缺乏穿透力，不实用）(2)射线射线:电离辐射强电离辐射强，穿透力强穿透力强(3)射线射线:电离辐射弱，电离辐射弱，穿透力强穿透力强（4）X射线：杀菌力不如紫外线，穿透力强射线：杀菌力不如紫外线，穿透力强 用途：忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面用途：忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面 杀菌机制：杀菌机制：射线使水电离为射线使水电离为H和和OH，这些游离基是强烈的，这些游离基是强
10、烈的还原剂和氧化剂，可直接作用于细菌本身还原剂和氧化剂，可直接作用于细菌本身。五、射线五、射线 滤过除菌滤过除菌:通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、霉形体以及生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、霉形体以及细菌细菌L型等小颗粒。主要用于不耐高温的营养液、血清、抗型等小颗粒。主要用于不耐高温的营养液、血清、抗菌素、空气等除菌。菌素、空气等除菌。六、滤过作用六、滤过作用 复习思考题复习思考题1.灭菌、消毒、防腐、无菌的概念。灭菌、消毒、防腐、无菌的概念。2.消毒灭菌方法主要有哪些类型？消毒灭菌方法主要有哪些类型？3.物理消毒灭菌方法主要有哪些？如何合理物理消毒灭菌方法主要有哪些？如何合理 选用这些消毒方法？选用这些消毒方法？
