1、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 1.实验原理 斐林试剂斐林试剂苏丹苏丹橘黄色橘黄色红色红色砖红色沉淀砖红色沉淀紫色紫色苏丹苏丹 双缩脲试剂双缩脲试剂鉴定物质鉴定物质试剂试剂实验现象实验现象还原性糖还原性糖脂肪脂肪蛋白质蛋白质淀粉淀粉 碘碘 蓝色蓝色 必修必修1 1第第18181919页页生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定l实验原理实验原理鉴定原理解析鉴定原理解析 1、Cu(OH)2被还原基团还原成被还原基团还原成Cu2O（呈（呈砖红砖红色沉淀色沉淀）2、Cu2+与肽键作用形成紫色络合物（呈紫色反与肽键作用形
2、成紫色络合物（呈紫色反应）。应）。3、脂肪与苏丹吸附作用（呈橘黄色或红色）。、脂肪与苏丹吸附作用（呈橘黄色或红色）。4、碘遇淀粉变蓝色。、碘遇淀粉变蓝色。选材：含糖量较高的选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织白色或近于白色的植物组织(排除色素对排除色素对显色的干扰显色的干扰)，苹果、梨最好，苹果、梨最好。l实验流程实验流程(步骤步骤)1.可溶性还原糖可溶性还原糖 制备组织样液：制备组织样液：制浆：去皮、切块、研磨，制浆：去皮、切块、研磨，过滤：（用单层纱布）过滤：（用单层纱布）取液：取液：（mL）显色反应显色反应 现象：现象：(用前混匀用前混匀)5065.C水浴水浴加热加热2min还原糖
3、的检测和观察：还原糖的检测和观察：还原糖的检测结果还原糖的检测结果2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定（制作子叶临时装片）（制作子叶临时装片）取材：花生种子（浸泡取材：花生种子（浸泡h），去皮，将子叶削成薄片），去皮，将子叶削成薄片 制片：制片：选取最薄的薄片移至载玻片中央选取最薄的薄片移至载玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加苏丹苏丹(或苏丹或苏丹)染液染液2 3滴，滴，染色染色min滴加体积分数为滴加体积分数为50%的酒精的酒精溶液溶液12滴，洗滴，洗去浮色去浮色(多余的苏丹多余的苏丹)吸去余液，滴吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片临时装片显微观察：显微观察：先
4、在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察现象：现象：有被染成有被染成橘黄色橘黄色(或红色或红色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒脂肪的检测结果脂肪的检测结果脂肪的其他鉴定方法脂肪的其他鉴定方法 1、将子叶适当烘烤，在纸上用一定力量挤压。纸质上出将子叶适当烘烤，在纸上用一定力量挤压。纸质上出 现油渍！（油点试验）现油渍！（油点试验）2、将少量油脂配制成油水状态，向溶液中加、将少量油脂配制成油水状态，向溶液中加2-3滴苏丹滴苏丹或苏丹或苏丹染液。观察样液染色情况。（显色反应）染液。观察样液染色情况。（显色反应）3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 选材与制
5、备选材与制备组织样液：组织样液：黄豆组织样液（黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液要尽量稀或鸡蛋蛋清稀释液要尽量稀）黄豆浸泡黄豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨过滤过滤滤液滤液 显色反应显色反应现象：现象：无色无色紫色或紫红色紫色或紫红色(创设碱性条件创设碱性条件)(提供提供Cu2+)蛋白质的检测结果蛋白质的检测结果蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定-双缩脲试剂双缩脲试剂鸡蛋清溶液鸡蛋清溶液 NaOH 溶液溶液滴加滴加CuSO2 溶液溶液,每次滴加均需摇匀每次滴加均需摇匀结果显示结果显示:紫色紫色4.淀粉的鉴定淀粉的鉴定取材：马铃薯匀浆取材：马铃薯匀浆检测：检测：碘液碘液2滴滴现象：现象：摇匀后变成蓝色摇匀后变
6、成蓝色问题探讨问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？一部分样液？作对照作对照2、使用双缩脲试剂时为什么、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加液只能加34滴而不能滴而不能过量？过量？过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反应，使溶液呈蓝色，反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？时间太长，时间太长，Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液就沉淀在试管底部而悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。无法参与反应。
7、l深化深化5、实验的材料的选择和处理有什么要求？、实验的材料的选择和处理有什么要求？材料的选择材料的选择材料的处理材料的处理还原性糖的鉴定还原性糖的鉴定脂肪的鉴定脂肪的鉴定含糖高，颜色为含糖高，颜色为白色的植物组织，白色的植物组织，如苹果和梨如苹果和梨富含脂肪的种子富含脂肪的种子，如花生，如花生浸泡浸泡34小时小时/蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定富含蛋白质的富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清黄豆或鸡蛋清黄豆需浸泡黄豆需浸泡1-2天，天，鸡蛋清要先稀释鸡蛋清要先稀释淀粉的鉴定淀粉的鉴定马铃薯马铃薯/各种可供实验的材料各种可供实验的材料梨梨 黄桃黄桃 胡萝卜胡萝卜 黄豆黄豆 花生种子花生种子 小麦种子小麦种子 其
8、中适合于鉴定其中适合于鉴定可溶性还原糖可溶性还原糖的是的是 ，理由是，理由是梨的组织细胞梨的组织细胞 ，你打算用什么试剂鉴定你打算用什么试剂鉴定?。小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为因为 ，你打，你打算用什么试剂鉴定算用什么试剂鉴定?.例例 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题：验材料。请根据下表所列各种材料回答问题：梨梨 颜色为白色，并且糖含量较高颜色为白色，并且糖含量较高
9、斐林试剂斐林试剂脂肪含量不如花生高，也不容易做切片脂肪含量不如花生高，也不容易做切片 用苏丹用苏丹或苏丹或苏丹试剂试剂小麦种子中糖类化合物小麦种子中糖类化合物 含量很高，却不适合用含量很高，却不适合用来鉴定来鉴定 _，这是因为，这是因为 _。适合于鉴定蛋白质的是适合于鉴定蛋白质的是 ，理由是，理由是 ，鉴定所用的试剂是，鉴定所用的试剂是 。蛋白质含量高蛋白质含量高 黄豆和花生黄豆和花生 双缩脲试剂双缩脲试剂淀粉淀粉 可溶性还原糖可溶性还原糖 淀粉是非还原糖且不溶于水淀粉是非还原糖且不溶于水 知识结构1、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂作用产生
10、砖红色沉淀，下列结论中最合理的是作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是()A青苹果汁中有淀粉，不含还原糖青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉 C苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖 D苹果转熟时单糖聚合成淀粉苹果转熟时单糖聚合成淀粉 Cl例题例题、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，肯定不需要用到的化学试剂是肯定不需要用到的化学试剂是()A.斐林试剂斐林试剂 B.红墨水红墨水C.双缩脲试剂双缩脲试剂 D.苏丹苏丹染液染液 Bl例题例题3(2005.广东广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是物的鉴定实验中，以下操作错误的是()A、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用A
