1、实验一实验一 普通光学显微镜技术、普通光学显微镜技术、细胞形态与结构的观察细胞形态与结构的观察?实验室规则1.进入实验室穿白大衣,不迟到、不早退,迟到或者早退者每次扣实验5分;2.遵守实验操作规程和实验室规定,认真记录填写实验报告,按时交报告;3.实验室内不要高声喧哗,保持肃静;4.爱护仪器用品,注意节约,损害物品及时报告登记(班长作为代表领去器材,注意清点数目和查看有无破损);5.实验完毕后,把所有的仪器、标本等擦拭干净,放回原处,保持桌面整洁,值日生同学打扫卫生(桌面、地面、水池),关闭门窗、电灯、水等实验完毕后,同学及时洗手,养成良好的个人卫生习惯6.实验室的药品、器械等不要私自带走,否
2、则予以一定的罚款7.自觉遵守纪律,养成良好的科研习惯和态度考试比例:理论考试70实验考试20作业10?实验室规则v 光学显微镜技术(P1)v 细胞临时玻片标本制备(P26)v 细胞结构观察(P26)v 细胞生物学绘图?内容安排一、光学显微镜技术一、光学显微镜技术人口腔上皮细胞(400)蛙血涂片(400)v 认识显微镜的结构v 显微镜的正确使用方法v 显微镜使用的注意事项?(一)实验内容一、光学显微镜技术v熟悉光学显微镜基本结构和用途;v掌握显微镜维护的基本知识;v初步掌握低倍镜、高倍镜使用方法;v学会计算显微镜放大倍数的方法。?(二)实验目的一、光学显微镜技术v材料:生物玻片标本(蛙血细胞)v
3、用品:普通光学显微镜?(三)实验材料一、光学显微镜技术p 机械系统部分:镜座、镜筒、镜壁、物镜转换器、载物台、调焦装置p 光学系统部分:目镜、物镜和照明装置光学显微镜的构造一、光学显微镜技术镜座:支持作用照明光源,反射镜镜臂:支持作用载物台:放置标本聚光器、光阑标本移动器调焦装置:粗调螺旋、细调螺旋镜筒:上接目镜,下连物镜转换器(物镜镜头)目镜:10,目镜指针;物镜低倍镜(4,10):0.25,160高倍镜(40):0.65,160/0.17油 镜(100):1.25,160/0.17显微镜总的放大倍数 目镜放大倍数物镜放大倍数 取镜(右手握臂、左手托座)放镜(左侧、5cm)对光(物镜对位、开
4、光圈)放片 调焦(先粗调焦后细调焦)观察光学显微镜的使用低倍镜的使用一、光学显微镜技术 低倍镜下找到目的物 从侧面观察物镜,转动物 镜转换器,高倍镜对准通光孔 细调螺旋(前后三圈),清晰图像观察 取片、収镜载物台下降;取玻片;物镜成“八”字形;关闭光圈、电源;电线盘好光学显微镜的使用高倍镜的使用一、光学显微镜技术显微镜持取正确姿势使用前后的镜头维护注意标本的放置方向观察时不可用粗调螺旋高倍镜不得使用粗调严禁拆卸任何部件使用后恢复机器原貌光学显微镜使用注意事项一、光学显微镜技术二、细胞临时玻片标本制备及细胞结构观察二、细胞临时玻片标本制备及细胞结构观察p人口腔上皮细胞涂片标本的制备与观察 p蛙血
5、细胞涂片标本的制备与观察?(一)实验内容p1、掌握临时制备玻片标本的方法;p2、通过光学显微镜下观察细胞的形态,掌握人体及动物等真核细胞的基本形态结构;p3、初步掌握光镜下所见细胞、组织结构的生物学绘图方法。?(二)实验目的二、细胞临时玻片标本制备及细胞结构观察?(三)实验材料p材料:口腔黏膜上皮、牛蛙血p用品:普通光学显微镜、载玻片、盖玻片等二、细胞临时玻片标本制备及细胞结构观察擦片载玻片、盖玻片清洗干净漱口去除食物残渣,影响观察取材牙签钝头轻轻刮取涂片一定方向连续均匀涂片染色 一滴甲苯胺蓝,染色1min加盖玻片缓慢加避免气泡产生镜检、绘图先低倍后高倍观察,绘图吸多余染液吸水纸从一侧吸取多余
6、染液(一)人口腔上皮细胞涂片标本的制备细胞生物学绘图的要求和方法 1.课前准备(铅笔、橡皮、作业本、直尺);2.绘图前应对标本进行仔细地观察,选择结构清晰,有代表性进行绘图;不能夸大想象;3.图空间分布(纸偏左)及大小要适宜,图各部分结构使用直线标注(右对齐)并附上名称,一个图中标注一个细胞;4.图中所有部分都要以点或线来表示,明暗之处用点的疏密表示;勿以铅笔涂出阴影,纸面力求整洁(细胞核和细胞质的绘制);5.图标题写在图下方,并标注放大倍数人口腔上皮细胞(400)擦片载玻片、盖玻片清洗干净漱口去除食物残渣,影响观察取材牙签钝头轻轻刮取口腔脸颊内侧涂片一定方向连续均匀涂片染色 一滴甲苯胺蓝,染
7、色1min加盖玻片缓慢加避免气泡产生镜检、绘图先低倍后高倍观察,绘图(一)人口腔上皮细胞涂片标本的制备吸多余染液吸水纸从一侧吸取多余染液擦片载玻片(2个)清洗干净处死(双毁髓处死)牛蛙枕骨大孔插入,捣毁脊髓和脑髓,“倒T法”解剖,露出心脏取心脏血注射器抽取心脏血(不要穿透心脏)滴片在载玻片右端1/4滴芝麻粒血滴推片另一载玻片倾斜,推片均匀而迅速晾干空气中自然晾干镜检、绘图观察蛙血涂片和细胞,并绘图(二)蛙血细胞涂片标本的制备与观察 牛蛙血涂片(400)1、绘2-3个人口腔上皮细胞以及牛蛙血细胞;2、普通光学显微镜使用有哪些注意事项?(一)人口腔上皮细胞涂片标本的制备(一)人口腔上皮细胞涂片标本的制备擦片 漱口取材涂片染色加盖片 吸去多余染液 1min甲苯胺蓝绘图镜检(二)蛙血细胞涂片标本的制备与观察(二)蛙血细胞涂片标本的制备与观察 擦片 处死(双毁髓处死)取心脏血滴片推片晾干 绘图镜检