1、总复习基因工程基因工程1 基因工程概论基因工程概论2 天然天然DNA的制备的制备3 分子克隆工具酶分子克隆工具酶4 分子克隆载体分子克隆载体 5 表达载体表达载体 6 PCR技术及其应用技术及其应用 7 目的基因的制备目的基因的制备8 基因克隆的筛选策略基因克隆的筛选策略 10 细菌基因工程细菌基因工程 11 酵母基因工程酵母基因工程 12 植物基因工程植物基因工程 13 13 动物基因工程动物基因工程 14 基因工程的安全基因工程的安全9 转基因及其表达转基因及其表达 1 名词解释名词解释 基因工程、遗传工程、基因工程、遗传工程、DNA重组、基因克隆重组、基因克隆、基因操作、基因操作 2 简
2、要回答下列问题简要回答下列问题 1）简述基因工程研究发展历史。简述基因工程研究发展历史。2）简述基因工程研究的主要内容。简述基因工程研究的主要内容。3）说明基因工程的理论基石和技术基础。说明基因工程的理论基石和技术基础。4）简述基因工程的主要应用领域。简述基因工程的主要应用领域。5）用用5个词描述基因工程的过程。个词描述基因工程的过程。第第1章章 概论概论 1 名词解释名词解释 DNA变性；变性；DNA复性；复性；Tm值值 2 简要回答下列问题简要回答下列问题 1）举例说明浓缩举例说明浓缩DNA或或RNA的方法。的方法。2）简述简述DNA与基因工程有关的主要特性。与基因工程有关的主要特性。3）
3、简要说明天然简要说明天然DNA的主要提取过程。的主要提取过程。第第2章章 天然天然DNA的制备的制备 1 名词解释名词解释 限制性核酸内切酶；同裂酶；同尾酶；限制性核酸内切限制性核酸内切酶；同裂酶；同尾酶；限制性核酸内切酶星活性；限制性图谱；平末端；粘性末端；衔接头；连酶星活性；限制性图谱；平末端；粘性末端；衔接头；连接子接子 2 简要回答下列问题简要回答下列问题 1）基因工程中常用的酶有哪些？各有何的用途？）基因工程中常用的酶有哪些？各有何的用途？2）何谓定向克隆？如何进行？）何谓定向克隆？如何进行？3）说明限制性核酸内切酶产生）说明限制性核酸内切酶产生Star活性的原因及其克服活性的原因及
4、其克服措施。措施。第第4章章 分子克隆工具酶分子克隆工具酶 1 1 名词解释名词解释 载体，克隆载体，表达载体,质粒，cccDNA(scDNA)，松弛型质粒，严谨性质粒，附加体，选择标记，转化子，重组子，cosmid，噬菌粒载体，YAC，PAC，BAC，MAC，基因打靶，定位整合平台，定位整合克隆载体，穿梭载体，结合型质粒，非结合型质粒，迁移作用，显性质粒，隐蔽质粒，组织特异性表达载体，分泌型表达载体，诱导型表达载体，报告载体，反义表达载体，RNAi2 2 简要回答下列问题简要回答下列问题 1）按来源可将基因克隆载体分为哪几类？并说明各自的主要特点。2）作为克隆载体必须具备的主要条件是什么？3
5、）作为表达载体必须具备的主要条件是什么？4）如何鉴定转化子、重组子和转基因生物？第第4、5章章 分子克隆载体分子克隆载体 1 名词解释名词解释 PCR,RT-PCR,定量PCE,反向PCR,RACE,TAIL-PCR,巢式PCR 2 简要回答问题简要回答问题 特殊特殊PCR主要有那些主要有那些?各自的原理是什么各自的原理是什么?如何设计PCR引物?3 分析讨论分析讨论 试述试述PCR反应的原理与应用反应的原理与应用.第第6章章 PCR技术及其应用技术及其应用 1 名词解释名词解释 SSH、RDA、DDRT-PCR、ESTs、酵母双杂交、cDNA文库、基因组文库2 简要回答问题简要回答问题 1）
6、简述）简述cDNA文库构建的原理与步骤文库构建的原理与步骤 2）简述基因组文库构建的原理与步骤）简述基因组文库构建的原理与步骤 3）简述）简述酵母双杂交的原理与步骤酵母双杂交的原理与步骤3 分析讨论分析讨论 试述分离和筛选目的基因的主要方法和原理试述分离和筛选目的基因的主要方法和原理.第第7、8章章 目的基因制备与筛选策略目的基因制备与筛选策略一、名词解释一、名词解释 受体细胞、感受态细胞、转化子、重组子、-互补、目的重组子、转基因沉默、启动子、增强子、终止子、绝缘子、反义子、SD序列、外显子、内含子、融合蛋白、表达标签蛋白、包涵体、RNAi、MicroRNA二、思考题二、思考题 1 简述转基
7、因的主要方法与原理。2 简述在基因工程主要表达受体中提高表达效 率的策略。3 简述重组子的筛选与分子鉴定的主要方法和原理。4 说明原核与真核生物基因表达调控的特点。5 说明转基因沉默的机制与克服措施。第第9章章 转基因及其表达转基因及其表达1 名词解释名词解释 融合表达融合表达,融合蛋白融合蛋白,分泌表达分泌表达,包涵体包涵体,转导转导,转化，转转化，转染，表面展示染，表面展示.2 简要回答下列问题简要回答下列问题 试述促进转基因在大肠杆菌中表达的策略。试述促进转基因在大肠杆菌中表达的策略。简述原核生物基因工程常用的载体和受体细胞。简述原核生物基因工程常用的载体和受体细胞。简述细菌基因工程的主
8、要应用。简述细菌基因工程的主要应用。简述外源基因在细菌中的主要表达形式及优缺点简述外源基因在细菌中的主要表达形式及优缺点。第第10章章 细菌基因工程细菌基因工程1 名词解释名词解释 YEp;YIp;YRp;YCp;营养缺陷型营养缺陷型2 简答题简答题 简要描述表面展示和酵母双杂交的原理。简要描述表面展示和酵母双杂交的原理。酵母基因工程的主要宿主有哪些酵母基因工程的主要宿主有哪些?酵母基因工程的载体有哪些酵母基因工程的载体有哪些?各有和特点各有和特点?酵母转基因的方法有哪些酵母转基因的方法有哪些?为什么说酵母是一个非常重要的基因工程宿主为什么说酵母是一个非常重要的基因工程宿主?3 分析和讨论分析
9、和讨论 如何在酵母中实现高效分泌表达如何在酵母中实现高效分泌表达?第第11章章 酵母基因工程酵母基因工程1 名词解释名词解释 植物整体转化植物整体转化,全能性全能性,组成性表达启动子组成性表达启动子,组织转星星表组织转星星表达启动子达启动子,诱导表达启动子诱导表达启动子,花蕾浸泡转化法花蕾浸泡转化法,清洁清洁DNADNA转化转化,Ti,Ti质粒质粒,卸甲卸甲TiTi质粒质粒,双元载体系统双元载体系统 2 解答题解答题 植物转基因的方法主要有那些植物转基因的方法主要有那些?植物转基因的载体主要有那些植物转基因的载体主要有那些?如何利用农杆菌进行植物遗传转化如何利用农杆菌进行植物遗传转化?转基因植
10、物的主要成就有哪些转基因植物的主要成就有哪些?3 分析讨论题分析讨论题 如何控制转基因在转基因植物中的表达如何控制转基因在转基因植物中的表达?第第12章章 植物基因工程植物基因工程1 名词解释名词解释 胚胎干细胞胚胎干细胞,限制性内切酶介导的整合限制性内切酶介导的整合,插入载体插入载体,替代载替代载体体,稳定表达，瞬时表达，脂质体转化，乳腺生物反应器稳定表达，瞬时表达，脂质体转化，乳腺生物反应器 2 简答题简答题 进行动物细胞转基因的目的是什么进行动物细胞转基因的目的是什么?主要载体有哪些？转基主要载体有哪些？转基因方法有哪些？因方法有哪些？怎样获得转基因老鼠？怎样获得转基因老鼠？如何获得转基
11、因蛙如何获得转基因蛙?转基因羊乳腺生物反应器是如何获得的转基因羊乳腺生物反应器是如何获得的?3 分析讨论分析讨论 如何实现在高等动物中细胞中的高效稳定表达如何实现在高等动物中细胞中的高效稳定表达?第第13章章 动物基因工程动物基因工程1 名词解释（名词解释（10个个30分）分）2 填空题（有的话填空题（有的话20分）分）3 载体填图（载体填图（10分）分）4 匹配题（匹配题（10分）分）5 简答题（简答题（10分或分或30分）分）6 设计题设计题（20分）分）考试题型考试题型1.酵母2质粒复制原点 2.3 4.5.6.1、启动子启动子 受体细胞受体细胞 NOS启动子 农杆菌 SV40早期启动子 哺乳动物 玉米ubiquitin-1启动子 高等植物2、选出适合扩增图示序列之间、选出适合扩增图示序列之间DNA的的PCR引物。引物。3、载体或载体源 受体细胞 Ti质粒 烟草 pYES2 牛 腺病毒 大肠杆菌 pBR322 酵母 人类
