1、临床病原学检测和标临床病原学检测和标本的正确留取本的正确留取痰液标本采集与运送痰液标本采集与运送l痰液由气管、支气管和肺泡所分泌痰液由气管、支气管和肺泡所分泌l正常情况下分泌物甚少，呼吸道粘膜受刺激时，正常情况下分泌物甚少，呼吸道粘膜受刺激时，分泌物增多，但多为清晰、水样，无临床意义。分泌物增多，但多为清晰、水样，无临床意义。l病理情况下痰量增多，呈不透明并有性状改变病理情况下痰量增多，呈不透明并有性状改变临床病原学检测和标本的正确留取2采集目的采集目的l一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸引物团菌的涂片或培养检测，经气
2、管穿刺吸引物可用于厌氧菌的检测。可用于厌氧菌的检测。临床病原学检测和标本的正确留取3l采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。l宜采集清晨第二口痰液。宜采集清晨第二口痰液。l对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，次，连续连续23天。不建议天。不建议24小时内多次采样送检，小时内多次采样送检，除非痰液外观性状出现改变。除非痰液外观性状出现改变。l怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰天清晨痰液送检。液送检。一般原则一般原则临床病原学检测和标本的正确留取4采集方法采集方法1、自然咳痰与雾化倒
3、痰法：无痰或痰量极少者可用、自然咳痰与雾化倒痰法：无痰或痰量极少者可用3%5%氯化钠溶液氯化钠溶液5ml雾化吸入约雾化吸入约5min后留取后留取痰液。如有可能，应在护理人员直视下留取清晨痰液。如有可能，应在护理人员直视下留取清晨第二口痰。嘱咐患者留取前摘去牙托，清洁口腔，第二口痰。嘱咐患者留取前摘去牙托，清洁口腔，如刷牙后反复用生理盐水漱口；深吸气后用力自如刷牙后反复用生理盐水漱口；深吸气后用力自气管深部咳出痰液，置无菌容器内。应尽可能防气管深部咳出痰液，置无菌容器内。应尽可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入样品，不应用纸巾包止唾液及鼻咽部分泌物混入样品，不应用纸巾包裹痰液。裹痰液。临床病原学检测和
4、标本的正确留取52、支气管镜法：鼻或口腔插入支气管镜。、支气管镜法：鼻或口腔插入支气管镜。常用采集方法有经支气管镜吸引、支气常用采集方法有经支气管镜吸引、支气管肺泡灌洗、防污染毛刷采样或防污染管肺泡灌洗、防污染毛刷采样或防污染支气管肺泡灌洗等。支气管肺泡灌洗等。采集方法采集方法临床病原学检测和标本的正确留取63、经人工气道吸引法：进行手卫生后将一次性吸、经人工气道吸引法：进行手卫生后将一次性吸痰管末端拆开，连接吸引器，调节吸引器置适痰管末端拆开，连接吸引器，调节吸引器置适宜负压（成人：宜负压（成人：40.053.3kpa;小儿：小儿：40.0kpa）。将一次性吸痰管外包装取出，戴手）。将一次性
5、吸痰管外包装取出，戴手套持吸痰管试吸生理盐水，检查管道是否通畅。套持吸痰管试吸生理盐水，检查管道是否通畅。折叠一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人折叠一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工气道至适宜深度，放开吸痰管末端，轻柔、工气道至适宜深度，放开吸痰管末端，轻柔、灵活、迅速地左右旋转上提吸痰管吸痰。灵活、迅速地左右旋转上提吸痰管吸痰。采集方法采集方法临床病原学检测和标本的正确留取7 见吸痰管内有痰液吸出，即折叠一次性吸痰见吸痰管内有痰液吸出，即折叠一次性吸痰管退出，将一次性吸痰管与吸引器分离（使用管退出，将一次性吸痰管与吸引器分离（使用人工呼吸机者，一次吸痰时间不超过人工呼吸机者，一次吸痰时
6、间不超过15s，高，高浓度氧气浓度氧气12min）。将痰液注入无菌容器）。将痰液注入无菌容器（试管）内，如痰液粘稠可用一次性针筒向吸（试管）内，如痰液粘稠可用一次性针筒向吸痰管末端注入少量生理盐水，将痰液冲入无菌痰管末端注入少量生理盐水，将痰液冲入无菌容器（试管）内。容器（试管）内。采集方法采集方法临床病原学检测和标本的正确留取8标本运送标本运送 l痰以深咳排出后，应装于有密封瓶盖的无痰以深咳排出后，应装于有密封瓶盖的无菌塑料容器中，以免感染自己或他人。菌塑料容器中，以免感染自己或他人。l标本应及时送检，室温标本应及时送检，室温3h。l若不能及时处理，可选择运送培养基运送若不能及时处理，可选择
7、运送培养基运送和保存标本，但不应和保存标本，但不应48h。临床病原学检测和标本的正确留取9痰标本要求痰标本要求l白细胞（白细胞（WBC）25/LPF。l鳞状上皮细胞（鳞状上皮细胞（SEC）10/LPF。l如不符合上述指标，通知临床重新采样。如不符合上述指标，通知临床重新采样。临床病原学检测和标本的正确留取10血培养标本采集血培养标本采集一、血培养指征：一、血培养指征：l患者出现寒战，体温超过患者出现寒战，体温超过38或低体温（或低体温（36)l怀疑血流感染时，尤其存在以下情况时，应抽血做怀疑血流感染时，尤其存在以下情况时，应抽血做细菌和真菌培养：医院内肺炎；留置中心静脉导管细菌和真菌培养：医院
8、内肺炎；留置中心静脉导管超过超过72h；感染性心内膜炎；骨髓炎；有严重基础；感染性心内膜炎；骨髓炎；有严重基础疾病、免疫缺陷伴全身感染症状，临床医生怀疑有疾病、免疫缺陷伴全身感染症状，临床医生怀疑有血流感染可能的其他情况。血流感染可能的其他情况。l白细胞过多（白细胞过多（10000/l），并有核左移现象。），并有核左移现象。l中性粒细胞过少（中性粒细胞过少（1000/l）。）。临床病原学检测和标本的正确留取11二、采血时机：二、采血时机：l一旦怀疑有血流感染可能，应立即采血做血培养一旦怀疑有血流感染可能，应立即采血做血培养l最好在抗菌药物治疗前或停用抗菌药物最好在抗菌药物治疗前或停用抗菌药物2
9、4h后，后，以寒战、发热时采集为宜。以寒战、发热时采集为宜。血培养标本采集血培养标本采集临床病原学检测和标本的正确留取12三、采血流程：三、采血流程：消毒：消毒：1、培养瓶消毒程序：用酒精消毒培养瓶、培养瓶消毒程序：用酒精消毒培养瓶橡皮塞，待干燥后使用。橡皮塞，待干燥后使用。2、皮肤消毒程序：用安尔碘消毒液从穿、皮肤消毒程序：用安尔碘消毒液从穿刺点向外划圈消毒，至消毒区域直达刺点向外划圈消毒，至消毒区域直达5cm以上，以上，待消毒液挥发干燥后（常须待消毒液挥发干燥后（常须30s以上）穿刺采以上）穿刺采血。血。血培养标本采集血培养标本采集临床病原学检测和标本的正确留取13四、静脉穿刺和培养瓶接种
10、：采用负压血培养瓶，四、静脉穿刺和培养瓶接种：采用负压血培养瓶，将患者静脉直接吸入血培养瓶，减少污染环节。将患者静脉直接吸入血培养瓶，减少污染环节。先注于厌氧培养瓶，先注于厌氧培养瓶，血培养标本采集血培养标本采集临床病原学检测和标本的正确留取14五、采血部位五、采血部位l采血部位通常为肘静脉。采血部位通常为肘静脉。l对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶或髂前（后）上棘处消毒后抽取骨髓培养。或髂前（后）上棘处消毒后抽取骨髓培养。l疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。脉采血为宜。血培养标本采集血培养标本采集临床病原
11、学检测和标本的正确留取15六、采血量：以培养基与血液之比六、采血量：以培养基与血液之比10:1为宜，以为宜，以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。采稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。采血量过少会明显降低阳性率。成人每次每培养血量过少会明显降低阳性率。成人每次每培养瓶采血瓶采血810ml，婴幼儿每次每培养瓶采血，婴幼儿每次每培养瓶采血2ml。血培养标本采集血培养标本采集临床病原学检测和标本的正确留取16需要采集多少份血培养？需要采集多少份血培养？l每名患者应至少采集每名患者应至少采集2份血培养，最好为份血培养，最好为3份（份（CLSI规定采集规定采集23份血培养）。份血培养）。l在一名败血
12、症患者初期诊断时，绝不能只在一名败血症患者初期诊断时，绝不能只采集采集1份血培养（份血培养（CLSI强调了此观点）。强调了此观点）。l注意：注意：1“份份”是指一次静脉穿刺。是指一次静脉穿刺。血培养标本采集血培养标本采集临床病原学检测和标本的正确留取17 运送要求运送要求所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在2h内。内。如果不能及时送检，宜置于室温环境。切勿冷藏。如果不能及时送检，宜置于室温环境。切勿冷藏。送检标本应正确粘贴条形码，注明采样时间和送送检标本应正确粘贴条形码，注明采样时间和送检时间。检时间。安全防护：放标本的容器必须防漏，禁止将渗漏安全防
13、护：放标本的容器必须防漏，禁止将渗漏的标本送往实验室。的标本送往实验室。血培养标本采集血培养标本采集临床病原学检测和标本的正确留取18报告要求：报告要求：紧急口头（电话）报告：紧急口头（电话）报告：血培养出现阳性警血培养出现阳性警报时，立即进行革兰氏染色、镜检，并在最短报时，立即进行革兰氏染色、镜检，并在最短时间内将结果向临床主管医生进行紧急口头时间内将结果向临床主管医生进行紧急口头（电话）报告。（电话）报告。最终结果（书面）报告最终结果（书面）报告血培养标本采集血培养标本采集临床病原学检测和标本的正确留取19l穿刺腰椎获得，特殊情况可采用小脑延髓池或脑穿刺腰椎获得，特殊情况可采用小脑延髓池或
14、脑室穿刺室穿刺l采集后置无菌管立即送检，不能超过采集后置无菌管立即送检，不能超过1h1h，同时应，同时应避免凝固和混入血液避免凝固和混入血液l培养脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养菌时，培养脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养菌时，应将标本置于应将标本置于2525条件下保温送检，不可置冰箱条件下保温送检，不可置冰箱保存保存l做病毒检查的脑脊液标本应放置冰块，可在做病毒检查的脑脊液标本应放置冰块，可在44保保存存7272小时。小时。脑脊液采集和运送脑脊液采集和运送临床病原学检测和标本的正确留取20尿液采集和运送尿液采集和运送正常人膀胱中的尿液是无菌正常人膀胱中的尿液是无菌外尿道排出时受外尿道排出时受外
15、尿道中正常菌群污染外尿道中正常菌群污染混有细菌。混有细菌。采集时机：宜为抗菌药物使用之前的清晨第一采集时机：宜为抗菌药物使用之前的清晨第一次尿液。次尿液。临床病原学检测和标本的正确留取21采集方法采集方法 l采集消毒中段尿，在采集尿液前，须以肥皂和清采集消毒中段尿，在采集尿液前，须以肥皂和清水洗净尿道口，弃去前段尿，留取中段尿或无菌水洗净尿道口，弃去前段尿，留取中段尿或无菌操作取中段尿于无菌容器中，立即送检，操作取中段尿于无菌容器中，立即送检，2h2h接种。接种。l取经尿道排出的中段尿，细菌数不会超过取经尿道排出的中段尿，细菌数不会超过103cfu/ml103cfu/ml。l泌尿系感染时，尿中
16、细菌数高于泌尿系感染时，尿中细菌数高于1045/ml1045/ml。l因而，以此为界作为诊断泌尿系感染依据因而，以此为界作为诊断泌尿系感染依据尿液采集和运送尿液采集和运送临床病原学检测和标本的正确留取22标本运送标本运送l标本采集后应及时送检并接种，室温下保标本采集后应及时送检并接种，室温下保存时间不应超过存时间不应超过2h2h（夏季保存时间应适当（夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存）。如果不能及时运送或缩短或冷藏保存）。如果不能及时运送或接种，应接种，应44冷藏，但保存时间也不应超冷藏，但保存时间也不应超过过8h.8h.尿液采集和运送尿液采集和运送临床病原学检测和标本的正确留取24注意事项注意
17、事项l不应从集尿袋中采集尿液。不应从集尿袋中采集尿液。l尿液中不应加防腐剂或消毒剂。尿液中不应加防腐剂或消毒剂。l若尿液培养前患者曾使用抗菌药物，应反复多若尿液培养前患者曾使用抗菌药物，应反复多次送检。次送检。l多次采集或多次采集或24h尿不应用于尿液培养。尿不应用于尿液培养。l除非进行流行病学调查，不应对长期留置导尿除非进行流行病学调查，不应对长期留置导尿管患者常规进行尿液培养。管患者常规进行尿液培养。l培养结果应结合临床表现、菌落计数以及微生培养结果应结合临床表现、菌落计数以及微生物种类等，进行综合判断。物种类等，进行综合判断。尿液采集和运送尿液采集和运送临床病原学检测和标本的正确留取25
18、手术部位感染标本采集及运送手术部位感染标本采集及运送 一般原则一般原则l在抗菌药物使用前，且仅在有临床感染症状或伤口在抗菌药物使用前，且仅在有临床感染症状或伤口恶化或长期不能愈合时采集标本。恶化或长期不能愈合时采集标本。l皮肤或粘膜表面的清洁：皮肤或粘膜表面的清洁：1 1、闭合伤口和穿刺物标本：、闭合伤口和穿刺物标本：消毒方法同血培养标本的皮肤消毒；消毒方法同血培养标本的皮肤消毒；2 2、开放伤口：、开放伤口：无菌生理盐水充分冲洗伤口部位。不可以用消毒剂。无菌生理盐水充分冲洗伤口部位。不可以用消毒剂。3 3、采集新鲜的感染组织，避免采集浅表的组织碎屑。、采集新鲜的感染组织，避免采集浅表的组织碎
19、屑。4 4、若可以采集穿刺物或活检标本，应避免拭子标本。、若可以采集穿刺物或活检标本，应避免拭子标本。容器：含有少量生理盐水的带螺纹口的无菌塑料容：含有少量生理盐水的带螺纹口的无菌塑料容 器。器。临床病原学检测和标本的正确留取26采集方法：采集方法：l封闭性脓肿：封闭性脓肿：1 1注射器穿刺抽取浓度。注射器穿刺抽取浓度。2 2若无法抽若无法抽到脓液，应先皮下注射少量无菌生理盐水，再次到脓液，应先皮下注射少量无菌生理盐水，再次穿刺抽吸脓液；若脓液过多，应先切开引流，在穿刺抽吸脓液；若脓液过多，应先切开引流，在基底部或脓肿壁采集标本。脓液的量以大于基底部或脓肿壁采集标本。脓液的量以大于1ml1ml
20、为为宜。宜。3 3排除注射器内部及针头的气体用无菌橡皮塞排除注射器内部及针头的气体用无菌橡皮塞封闭针头送检；或直接打入血培养瓶中。疑为厌封闭针头送检；或直接打入血培养瓶中。疑为厌氧菌，应迅速将脓液打入厌氧血培养瓶中氧菌，应迅速将脓液打入厌氧血培养瓶中 手术部位感染标本采集及运送手术部位感染标本采集及运送临床病原学检测和标本的正确留取27组织和活标本：组织和活标本：1 1、采集足够大的组织，体积以、采集足够大的组织，体积以1mm31mm3为宜，避免在坏死区域采集。为宜，避免在坏死区域采集。2 2、将小块的组织放在运输培养基内；较大的放在无、将小块的组织放在运输培养基内；较大的放在无菌容器中，并加
21、入少量无菌生理盐水。菌容器中，并加入少量无菌生理盐水。3 3、开放伤口：（、开放伤口：（1 1）无菌生理盐水彻底冲洗浅表部）无菌生理盐水彻底冲洗浅表部位，去除表面的渗出物和碎屑。（位，去除表面的渗出物和碎屑。（2 2）用拭子深入）用拭子深入伤口的基底部或伤口伤口的基底部或伤口-正常组织边缘采集两个标本，正常组织边缘采集两个标本，分别用于培养和革兰氏染色。分别用于培养和革兰氏染色。手术部位感染标本采集及运送手术部位感染标本采集及运送临床病原学检测和标本的正确留取28 标本的标识：填写患者信息、标本类型（深部组织、标本的标识：填写患者信息、标本类型（深部组织、表浅组织、脓肿和穿刺物等）、标本的来源
22、（腹腔、表浅组织、脓肿和穿刺物等）、标本的来源（腹腔、腿和上臂等），记录标本采集的日期和时间及是否腿和上臂等），记录标本采集的日期和时间及是否在使用抗菌药物前采集，选择检查项目（需氧培养在使用抗菌药物前采集，选择检查项目（需氧培养或厌氧培养）或厌氧培养）标本的送检：为了更好的分离病原菌，标本应在采集标本的送检：为了更好的分离病原菌，标本应在采集后的后的30min内送到实验室。送检时应保持标本的湿内送到实验室。送检时应保持标本的湿润。在送检前或运送过程中，禁止将标本放于冰箱。润。在送检前或运送过程中，禁止将标本放于冰箱。手术部位感染标本采集及运送手术部位感染标本采集及运送临床病原学检测和标本的正
23、确留取29l正常人粪便中含有大量细菌（大肠埃希菌、产气正常人粪便中含有大量细菌（大肠埃希菌、产气肠杆菌、肠球菌和各种厌氧菌）。肠杆菌、肠球菌和各种厌氧菌）。标本采集和运送标本采集和运送l用药前自然排便，采集脓血、粘液部分用药前自然排便，采集脓血、粘液部分2-3g；外；外观无异常的应不同部位取材；婴幼儿患者，可用观无异常的应不同部位取材；婴幼儿患者，可用直肠拭子法采集标本。直肠拭子法采集标本。l标本采集后应尽快送检，有条件的提倡使用运送标本采集后应尽快送检，有条件的提倡使用运送培养基。培养基。l许多重要病原微生物如志贺菌在许多重要病原微生物如志贺菌在PH变化、温度变化、温度时不能存活，应立即送检
24、。时不能存活，应立即送检。粪便粪便临床病原学检测和标本的正确留取30l正常的内生殖器应是无菌的。正常的内生殖器应是无菌的。l外生殖器及接触体表部分可有多种细菌。外生殖器及接触体表部分可有多种细菌。l常见的细菌有：葡萄球菌、链球菌、类白喉棒状杆菌、常见的细菌有：葡萄球菌、链球菌、类白喉棒状杆菌、大肠埃希菌、大肠埃希菌、变形杆菌、双歧杆菌及耻垢分枝杆菌变形杆菌、双歧杆菌及耻垢分枝杆菌等。等。生殖道标本生殖道标本临床病原学检测和标本的正确留取31标本采集及送检标本采集及送检l分泌物：用无菌生理盐水清洗尿道口，无菌棉分泌物：用无菌生理盐水清洗尿道口，无菌棉签采取脓液标本，置无菌试管中。签采取脓液标本，
25、置无菌试管中。l怀疑梅毒的患者怀疑梅毒的患者 ：从外生殖器硬下疳处先以：从外生殖器硬下疳处先以无菌生理盐水清理创面，再从溃疡底部挤出少无菌生理盐水清理创面，再从溃疡底部挤出少许组织液，用清洁玻片直接蘸取，加盖玻片后许组织液，用清洁玻片直接蘸取，加盖玻片后送检。送检。l女性生殖道标本的采集女性生殖道标本的采集 ：用长的无菌棉签采用长的无菌棉签采集阴道后穹隆分泌物。集阴道后穹隆分泌物。生殖道标本生殖道标本临床病原学检测和标本的正确留取32l所有盛装标本的容器均进行无菌处理，并达到无菌所有盛装标本的容器均进行无菌处理，并达到无菌要求。要求。l采用不易碎且坚硬的材料；容器口的大小要求便于采用不易碎且坚
26、硬的材料；容器口的大小要求便于患者留取标本；容器盖要求为外置的螺旋盖，且不患者留取标本；容器盖要求为外置的螺旋盖，且不渗漏液体。渗漏液体。l血液、骨髓标本的专用培养基应有相关科室提供。血液、骨髓标本的专用培养基应有相关科室提供。微生物标本容器的要求微生物标本容器的要求临床病原学检测和标本的正确留取33l泌尿生殖系统、眼、耳分泌物及咽刷的泌尿生殖系统、眼、耳分泌物及咽刷的拭子：管为无菌塑料，拭子杆为塑料或拭子：管为无菌塑料，拭子杆为塑料或金属，拭子头为人造纤维。金属，拭子头为人造纤维。l组织、痰、尿液、粪便、脑脊液、穿刺组织、痰、尿液、粪便、脑脊液、穿刺液、引流液及其他无菌体液：采用广口、液、引
27、流液及其他无菌体液：采用广口、无菌带螺口盖的密闭塑料盒。无菌带螺口盖的密闭塑料盒。微生物标本容器的要求微生物标本容器的要求临床病原学检测和标本的正确留取34l结核分枝杆菌培养的标本：采用无菌带螺口盖结核分枝杆菌培养的标本：采用无菌带螺口盖的塑料离心管没有有好质量的标本，实验室的塑料离心管没有有好质量的标本，实验室l采取任何先进的分离、鉴定和药敏技术都是无采取任何先进的分离、鉴定和药敏技术都是无几于事的。几于事的。l因此，正确、规范的采集标本是保证临床微生因此，正确、规范的采集标本是保证临床微生物学检验质量的最重要的前提。物学检验质量的最重要的前提。临床规范收集标本可以加快报告时间，临床规范收集
28、标本可以加快报告时间，提高检提高检验质量。验质量。微生物标本容器的要求微生物标本容器的要求临床病原学检测和标本的正确留取35l社区获得社区获得MRSA(CaMRSA)l耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（HaMRSA)l耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCons）l万古霉素耐药的金葡菌（全球万古霉素耐药的金葡菌（全球6株，中国株，中国0%）l万古霉素耐药的肠球菌（美国最高万古霉素耐药的肠球菌（美国最高17%中国中国0-5%）耐万古霉素肠球菌（耐万古霉素肠球菌（VRE)全球关注的多重耐药的阳性球菌全球关注的多重耐药的阳性球菌临床病原学检测和标本的正确留取36微生物检验报告单微生物检验报告单l临床医师对利用临床微生物检验资料发生空前困惑临床医师对利用临床微生物检验资料发生空前困惑l国外不少医院均有感染病专家的会诊、咨询。而我国外不少医院均有感染病专家的会诊、咨询。而我国很多医院缺少这一角色。国很多医院缺少这一角色。l微生物室应承担临床微生物专家的角色，帮助解决微生物室应承担临床微生物专家的角色，帮助解决临床判读报告单时的困难。临床判读报告单时的困难。l正常菌群、污染菌和感染菌的鉴别与判断；l检验报告为少见菌或罕见菌的意义；l细菌培养阴性时的可能原因；l药敏试验结果判读标准和局限性等。临床病原学检测和标本的正确留取37
