1、Chinese National Influenza CenterChinese National Influenza Centerh0人禽流感疫苗研究进展人禽流感疫苗研究进展 Chinese National Influenza Centerh1原型疫苗（原型疫苗（“Mock-up VaccineMock-up Vaccine”）Mimics the characteristics of a pandemic virus（最大限度地模拟大流行流感病毒的生物学特征）Contains viral antigens to which humans are immunologically nave（
2、带有人类免疫空白的病毒抗原）Confers protection against the pandemic virus（可保护大流行流感病毒的感染）H5N1H5N1病毒进化的多样性病毒进化的多样性 （从（从19961996-至今）至今）多分支多分支H5N1 H5N1 在禽类流行在禽类流行Clades co-circulating in birds in the past 3 years123456789HI Reactions of Influenza H5 Viruses1 A/VIETNAM/1194/042 A/VIETNAM/1203/043 A/THAILAND/16/044 A/I
3、NDONESIA/5/055 A/INDONESIA/CDC357/066 A/INDONESIA/CDC625/06*7 A/TURKEY/15/058 A/w.swan/MG/244/05 RG9 A/b-h gs/QINGHAI/1/0510 A/turkey/TURKEY/1/0511 A/duck/HUNAN/15/0412 A/ANHUI/1/0513 A/GUANGXI/1/05640320nd80ndnd80808080ndndndnd160160104040202010nd804010nd160160102010101010nd802020201010320320804040
4、4080201020nd101032064040408080nd201010nd80401608012801280640320nd202010nd101040404064032080nd1010102010102040406403201260160101010204040808016012806403201602040402020nd40ndnd320320160320ndndndnd16080402040202040nd160160ndnd1010402040401020nd160640320nd2010201020401020ndnd160160A/VN/1194/04A/VN/1203/
5、04A/TH/16/04A/INDO/5/05A/INDO/357/06A/INDO/625/06A/TURKEY/15/05A/ws/MG/244/05A/bhg/QINGHAI/1/05A/ty/TURKEY/1/05A/dk/HUNAN/15/04A/ANHUI/1/05A/GUANGXI/1/05Reference Ferret AntiseraClade 2.1Clade 2.2Clade 2.3Clade 1REFERENCE FERRET ANTISERAREFERENCE ANTIGENSCLADEVN/1203IND/5MG/244II/33487ANH/1JP/HKA/VI
6、ETNAM/1203/2004(VN/1203)1320201040-A/INDONESIA/5/2005(IND/5)2.1106408040-A/WHOOPER SWAN/MG/244/05(MG/244)2.220160320320-A/CHICKEN/INDIA/NIV-33487/2006(II/33487)2.2-3203203202080A/ANHUI/1/05(ANH/1)2.3.4403201020640A/JAPAN.WHITE EYE/HK/1038/06(JP/HK)2.3.4206404064012801280TEST ANTIGENSA/THAILAND/676/0
7、511602010-40-A/DUCK/VN/NCVD16/20071401010-10-A/MUSCKOVY DUCK/VIETNAM/33/0714040-40-A/DUCK/HUNAN/795/022.1802560-40-A/INDONESIA/6/052.11064080-A/INDONESIA/CDC1031/072.110640160-16010A/INDONESIA/CDC625L/06(Medan)2.1408020401020A/TURKEY/65-596/062.2160256051202560320320A/EGRET/EGYPT/NAMRU-3-1162/062.21
8、080640-1040A/CHICKEN/EGYPT/9402NAMRU3/072.2103201608080-A/CHICKEN/EGYPT/9403NAMRU3/072.210160408040-A/CHINESE POND HERON/HONG KONG/18/052.3.28040-40-A/COMMON MAGPIE/HONG KONG/5052/072.3.280320-40-A/ANHUI/2/052.3.41016010-320A/DUCK/LAOS/3295/062.3.41016010-32080A/HOUSE CROW/HK/719/20072.3.41080101032
9、080A/LAOS/JP085/20072.3.41080-16040A/CHICKEN/VN/NCVD74/20072.3.4201010-40-A/DUCK/VN/NCVD81/20072.3.4101010-80-A/VIETNAM/HN31203I/20072.3.4101010-80-A/CHICKEN/MALAYSIA/935/062.3.41080101016040Reassortants with completed regulatory approvalVirusCladeInstitutionAvailabilityA/Vietnam/1203/20041CDCandSJ/
10、NIAIDYesA/Vietnam/1194/20041NIBSCYesA/Indonesia/5/20052.1CDCRequiresIndonesiaGovernmentpermissionA/Bar-headedgoose/Qinghai/1A/20052.2SJ/NIAIDYesA/Whooperswan/Mongolia/244/20052.2SJ/NIAIDYesA/turkey/Turkey/1/20052.2NIBSCYesA/Anhui/1/20052.3.4CDCYesA/Japanesewhite-eye/HongKong/1038/20062.3.4SJ/NIAIDYe
11、sReassortants prepared and awaiting regulatory approvalVirusCladeInstitutionAvailabilityA/Chicken/India/NIV33487/20062.2CDC/NIVPendingA/goose/Guiyang/337/20064SJ/NIAIDMay2008A/duck/Laos/3295/20062.3.4FDAMay2008A/Cambodia/R0405050/20071NIBSCMay2008Viruses proposed by WHO for candidate vaccine prepara
12、tionVirusCladeInstitutionA/duck/Hunan/795/20022.1SJ/NIAIDA/egret/Egypt/1162/2007-likeorA/Egypt/2321/2007-like2.2CDCA/CommonMagpie/HongKong/5052/20072.3.2SJ/NIAID人禽流感H5N1 疫苗的关键问题#野生型病毒:高致病性病毒种子株改造成低致病性病毒.#对于人类低的免疫原性.接种要求高的抗原含量#各分支存在抗原的多样性.缺乏交叉免疫反应#佐剂是必需和有益的.提高免疫原性 节约抗原 交叉保护Chinese National Influenza
13、Centerh9人禽流感疫苗种子株的筛选人禽流感疫苗种子株的筛选 Chinese National Influenza Centerh11Vaccine virus developmentVirus titration/ferret test 22dRG rescue 21dRG virus in eggs(lethality,titration,stocks)3d RG virus chicken IVPI test 10dRG virus ferret test 17d RG virus plaquing 3dRG virus sequencing 3d 41 days41 daysRG
14、virus to manufacturers day 27H5N1PandemicAvailability of vaccine virusesRG virus to manufacturers day 41Chinese National Influenza Centerh12人禽流感疫苗株生产工艺人禽流感疫苗株生产工艺 鸡胚及鸡胚及Vero 细胞基质疫苗细胞基质疫苗Chinese National Influenza Centerh15人禽流感疫苗临床试验人禽流感疫苗临床试验H5N1H5N1灭活疫苗研究进展灭活疫苗研究进展种类来源佐剂类型公司剂量免疫程序效果裂解疫苗鸡胚无Sanofi90u
15、g45ug2剂老人儿童有效裂解疫苗鸡胚AlumSanofi，Japan，Novartis不好裂解疫苗鸡胚MF59Novartis3.8ug7.5ug2剂成人有效裂解疫苗鸡胚AS03GSK3.8ug2剂成人有效H5N1H5N1灭活疫苗研究进展灭活疫苗研究进展种类来源佐剂类型公司剂量免疫程序效果全病毒疫苗VERO无Baxter3.8ug7.5ug2剂成人 儿童有效全病毒疫苗鸡胚Alum phosphateOmni6ug成人有效全病毒疫苗鸡胚Alum hydroxideJapan Sinovac CSL Microgen5-15ug2剂成人有效H5N1H5N1其它类型疫苗研究进展其它类型疫苗研究进展
16、 减毒活疫苗#ca A/Ann Arbor/6/60 MedImmune 低的免疫原性 原因在于重配的H5N1在上呼吸道复制受限 组分疫苗 Protein Science#rHA 蛋白 由杆状病毒载体蠕虫表达可以用于季节性流感和大流感疫苗的生产,该技术的季节性流感疫苗已经三期临床n疫苗类型：n亚单位H5N1疫苗n45 g/剂，2针n年龄组：29岁n人数：91n中和抗体结果：n第56天 抗体4倍增高疫苗类型：n亚单位H5N1疫苗n90 或 45g/剂，2针年龄组：65岁以上人数：259中和抗体结果：n第56天 抗体保护率水平n疫苗类型：n全病毒H5N1疫苗n3.8，7.5，15，27 g/剂，2
17、针n佐剂：+/-Aln年龄组：1860岁n人数：400nHI抗体结果：n2针后抗体保护率n疫苗类型：n亚单位H5N1疫苗n7.545 g/剂，2针n佐剂：MF59，Aln年龄组：1864岁n人数：390n中和抗体结果：n2针后GMT3.免疫途径的选择#肌肉注射 局部反应不明显#皮下 局部反应常见#皮内 抗原可以长时间滞留 无明显的益处#皮肤贴;呼吸道喷雾 新装置 临床实验#鼻腔内 ca-LAIV(冷适应低致病性禽流感)灭活疫苗 黏膜佐剂 应用装置4.交叉免疫反应Serum antibodies cross-reactive with different clades and subclades
18、 of H5N1 viruses were induced by;铝佐剂全病毒疫苗 新型佐剂混合物裂解疫苗 Vero 细胞生产野生型全病毒疫苗 Stock-piling of pre-pandemic vaccines and priming strategies became realistic.1)中和实验的标准化和抗体表示的一致化.2)血清抗体滴度和保护性效果的相关性?3)确定大流行疫苗临床评价有效性的标准.4)血清抗体持续的时限?5)如同抗原变异株一样,不同的 Clades and subclades 间的交叉保护反应?6)儿童,孕妇,老年人,高危组的问题?7)不同疫苗组分首免和加强的
19、效果?其 它Chinese National Influenza Centerh26人禽流感血清学评价人禽流感血清学评价 流感病毒疫苗流感病毒疫苗CHMPCHMP(人用医药产品委员会人用医药产品委员会)标准标准 血清阳转率血清阳转率:达到如下标准的血清百分比 HI:疫苗免疫前 HI 抗体阴性并且免疫后抗体滴度40 或者疫苗免疫前 HI 抗体阳性并且免疫后抗体滴度至少四倍升高.SRH:疫苗免疫前抗体阴性并且免疫后抗体融血圈面积25 mm2 或者疫苗免疫前抗体阳性并且免疫后融血圈面积至少增加50%流感病毒疫苗流感病毒疫苗CHMPCHMP(人用医药产品委员会人用医药产品委员会)标准标准2 2.血清保
20、护率血清保护率:达到如下标准的血清百分比;免后血清HI抗体滴度40 或者 SRH 融血圈面积 25 mm23.3.GMT(GMT(抗体升高平均几何均数抗体升高平均几何均数):):GMT 升高.季节性流感疫苗季节性流感疫苗如下的年龄组必须满足至少以下三种血清学标准中的一个(每年龄组至少50人):原型疫苗株和流感大流行前疫苗株原型疫苗株和流感大流行前疫苗株 所有三个标准必须满足(EMEA)至少满足一个(FDA)EMEACommitteeofHumanMedicalProducts(CHMP)criteriafortheannualupdateofhumanseasonalinfluenzavacc
21、ines(basedonHIorSRHtestresults)Mock-uppandemicvaccines 基于动物实验.HI,MNT 和 SRH实验抗体滴度间的相关性需要进一步阐述清楚.季节性流感和大流行流感在免疫原性和保护性方面的相关性没有必要解释清楚.MNTresultsarealsoapplicableforthecriteria.AppliedtoH5N1 疫苗关注的问题 H5N1 感染人不像季节性流感 系统性的病毒扩散到各组织脏器 “细胞因子风暴”导致多器官功能衰竭 重症和不良转归导致高的死亡率 常规 H5N1 疫苗组分在人群表现低的免疫原性 没有数据支持 HI 和 MN抗体滴度
22、间的相关性 许多 H5N1 疫苗需要佐剂 目前对于季节性流感疫苗免疫原性的标准可能对于目前对于季节性流感疫苗免疫原性的标准可能对于H5NH5N1 1大流行疫苗是不够的大流行疫苗是不够的.H5N1H5N1血清抗体实验血清抗体实验免前免后血清同时滴定并设立平行实验.血清抗体滴度由两次独立结果的几何均数(GMT)获得.H5N1 病毒疫苗抗体滴度没有必要与季节性流感病毒抗体滴度做比较.没有 H5N1标准检测方法、标准试剂和血清 HI 实验应用不同种的红细胞:鸡 RBC vs.马RBC HI 和 MNT 抗体滴度相关性不详 没有关于HI抗体和人群保护性之间关系的数据Chinese National In
23、fluenza Centerh33 小结小结Chinese National Influenza Centerh34未来的研究和发展（WHO指南）接种一剂就可以达到好的保护性反应。能够诱导针对季节性和大流行流感均广泛、持久的免疫反应。1）应用新型佐剂和抗原递呈技术来优化现有疫苗的保护效果和免疫原性。2）发展新型疫苗（基于病毒的保守蛋白）从而诱导广谱长效的免疫反应。3）提高现有的疫苗评价系统。Chinese National Influenza Centerh35Global Pandemic Vaccine Action Plan(GAP)目的：提升疫苗的应用 策略：短-中期：流感大流行前疫苗
24、储备或 者提前保证性购买。长期：能力建设(1.提高季节性流感的使用和生产。2提升地方疫苗生产能力)Chinese National Influenza Centerh36我国关于人禽流我国关于人禽流感疫苗能力储备感疫苗能力储备1、反向遗传技术的成熟应用。2、疫苗种子株制备过程的GLP认证认可。3、中国疾控中心和北京科兴生物公司联合研制的“PanFlu”获得SFDA的批准并作为疫苗储备。4、中国军事医学院和华兰生物公司的人用禽流感疫苗进入临床试验阶段。Chinese National Influenza Centerh37关于WHO 国际人禽流感H5N1 疫苗储备一些事实情况 有机会缩减因H5N1 病毒引起流感大流行带来的损失 不能满足多数国家的需要 不能作为国家流感大流行计划的替代（大流行计划要不断修正，疫苗组分也要补充和更新）Chinese National Influenza Centerh38关于WHO 国际人禽流感H5N1 疫苗储备挑战病毒的进化问题目前针对H5N1 疫苗认识的局限性 安全性 儿童免疫 交叉免疫原性,交叉保护性 加强免疫引发的长效免疫反应 免疫效果评价指标和标准试剂 政策法规的复杂性 规章的 疏忽 接受国的法规的准备 批次的发放 规章应用后的期望值 谢谢 谢谢!
