1、乙型肝炎系列培训材料（一）乙肝病毒的病原学、流行病学乙肝病毒的病原学、流行病学（二）（二）乙型肝炎病毒血清标志物指乙型肝炎病毒血清标志物指 标及意义标及意义（三）我公司的乙肝试剂现状（三）我公司的乙肝试剂现状乙型肝炎系列培训材料1.1 乙肝病毒的流行现状。乙肝病毒的流行现状。1.2 乙肝病毒的形态和结构。乙肝病毒的形态和结构。1.3 乙肝病毒（乙肝病毒（HBV）的基因结构的基因结构。1.4 乙肝的传播途径。乙肝的传播途径。乙型肝炎系列培训材料我国HBV感染流行现状1.1.3乙肝亚型的地理分布 1.1.4乙肝的传播途径乙型肝炎系列培训材料乙型肝炎系列培训材料资料来源：骆抗先，乙型肝炎基础和临床第
2、二版资料来源：骆抗先，乙型肝炎基础和临床第二版乙型肝炎系列培训材料vayw多见于非洲、东地中海、中东及巴基多见于非洲、东地中海、中东及巴基斯坦；斯坦；vadw多见于北欧及美洲；多见于北欧及美洲；adr多见于东南多见于东南亚及远东，亚及远东，adw及及adr多见于印尼、马来多见于印尼、马来西亚、新几内亚及泰国西亚、新几内亚及泰国 v我国则具有一定的民族性，我国则具有一定的民族性，汉族人以汉族人以adr为主，为主，adw次之次之v蒙古族、维吾尔族、回族等兄弟民族几蒙古族、维吾尔族、回族等兄弟民族几乎都是乎都是ayw亚型亚型，ayr亚型极其少见，而亚型极其少见，而adr亚型几乎没有。亚型几乎没有。乙
3、型肝炎系列培训材料血液传播、血液传播、（输血、血制品、（输血、血制品、医疗器械等）医疗器械等）日常生活日常生活（伤口、共用刀具、（伤口、共用刀具、消化道粘膜破损或消化道粘膜破损或溃疡等）溃疡等）母婴母婴 传播传播性传播性传播乙型肝炎系列培训材料vHBV并不经口途径传播。依据是：并不经口途径传播。依据是：HBV不随粪便排出，除非有消化道出血者。不随粪便排出，除非有消化道出血者。试验证明：污染试验证明：污染HBsAg阳性血液的粪便保存阳性血液的粪便保存数日后数日后HBsAg即转阴。即转阴。未见有经水、食物污染而引起的乙肝暴发流行。未见有经水、食物污染而引起的乙肝暴发流行。v蚊、臭虫等吸血昆虫在蚊、
4、臭虫等吸血昆虫在HBV传播中的作用传播中的作用尚无确实的证据。尚无确实的证据。乙型肝炎系列培训材料v母亲是母亲是HBV感染者的婴儿感染者的婴儿v乙肝患者的家庭成员乙肝患者的家庭成员v吸毒者吸毒者v监狱犯人监狱犯人v性传播疾病病人性传播疾病病人v血液透析病人血液透析病人v医护人员医护人员乙型肝炎系列培训材料1.2.1 HBV的基本（电镜）结构的基本（电镜）结构1.2.2 HBV的基因结构的基因结构乙型肝炎系列培训材料大球形颗粒大球形颗粒（Dane颗粒）颗粒）管形颗粒管形颗粒小球形颗粒小球形颗粒乙型肝炎系列培训材料HBsAgHBcAgDNAP（外膜蛋白）（外膜蛋白）（核衣壳蛋白）（核衣壳蛋白）HB
5、V DNA乙型肝炎系列培训材料pre-s1pre-s2SP PC Cpre-cXHBV DNA 3.2 kbpre-S1 pre-S1蛋白蛋白pre-S2 pre-S2蛋白蛋白S HBsAgpre-C HBeAgC HBcAgP DNAPX HBxAgHBsAgpre-S2pre-S1乙型肝炎系列培训材料2.1 HBVHBV血清标志物及其临床意义血清标志物及其临床意义2.2 2.2 介绍几个临床乙肝检测的概念介绍几个临床乙肝检测的概念2.3 2.3 临床常见乙肝血清标志物反映模式临床常见乙肝血清标志物反映模式乙型肝炎系列培训材料v肝功能肝功能(主要为丙氨酸氨基转移酶主要为丙氨酸氨基转移酶(AL
6、T)v乙肝病毒感染标志物乙肝病毒感染标志物 HBV-DNA 两对半两对半:抗原抗原 抗体抗体 外膜外膜 HBsAg HBsAb 核壳分泌蛋白核壳分泌蛋白 HBeAg HBeAb 核壳结构蛋白核壳结构蛋白HBcAb v 肝组织病理学检查肝组织病理学检查乙型肝炎系列培训材料v谷丙转氨酶（谷丙转氨酶（ALT）主要存在于肝细胞中。当主要存在于肝细胞中。当肝脏发生炎症、坏死时，肝脏发生炎症、坏死时，ALT就会从肝细胞内就会从肝细胞内大量释放入血，导致血清中大量释放入血，导致血清中ALT升高，因此升高，因此ALT升高是判断肝细胞损害的一个敏感指标。升高是判断肝细胞损害的一个敏感指标。v但是除了病毒性肝炎外
7、，其它类型的肝炎或肝但是除了病毒性肝炎外，其它类型的肝炎或肝脏疾病，脏疾病，ALT也会升高。也会升高。乙型肝炎系列培训材料DNA是基因，因此是基因，因此HBV-DNA是是HBV的遗的遗传物质，当传物质，当HBV侵入肝细胞后，就会以侵入肝细胞后，就会以HBV-DNA为模板，合成新的为模板，合成新的HBV颗粒颗粒并释放入血，故并释放入血，故HBV-DNA是病毒复制的是病毒复制的一个重要指标。一个重要指标。乙型肝炎系列培训材料肝组织病理学检查是肝组织病理学检查是“金标准金标准”：v 明确诊断明确诊断v 衡量肝脏炎症活动度衡量肝脏炎症活动度v 衡量纤维化程度衡量纤维化程度v 决定治疗方案，预测药物疗效
8、决定治疗方案，预测药物疗效 对肝病而言对肝病而言肝组织学检查是比血清肝组织学检查是比血清ALT 更灵敏而精确的指标更灵敏而精确的指标乙型肝炎系列培训材料 抗原抗原 抗体抗体外膜外膜 HBsAg HBsAb核壳分泌蛋白核壳分泌蛋白 HBeAg HBeAb核壳结构蛋白核壳结构蛋白 HBcAg HBcAb DNA HBV-DNA乙型肝炎系列培训材料出现时间：出现时间：HBV感染后感染后26个月（潜伏期）个月（潜伏期）持续时间：持续时间：急性自限性肝炎：急性自限性肝炎：6个月内可消失个月内可消失慢性肝炎或慢性慢性肝炎或慢性HBsAg携带者：可持续阳性携带者：可持续阳性曾用名：曾用名：HA、澳抗澳抗乙型
9、肝炎系列培训材料HBsAg 有抗原性而无传染性有抗原性而无传染性HBVS 基因基因整合整合肝细胞肝细胞DNA持续表达持续表达“空心汤团空心汤团”HBsAgHBsAg 的亚型的亚型adradwayrayw长江以北长江以北长江以南长江以南新疆、西藏、内蒙等新疆、西藏、内蒙等乙型肝炎系列培训材料出现时间：急性感染后期或出现时间：急性感染后期或HBsAg 消失后消失后（空白期（空白期 或或 窗口期）窗口期）抗抗-HBs为保护性抗体（中和抗体）为保护性抗体（中和抗体）其出现标志着其出现标志着HBV感染进入恢复期感染进入恢复期抗抗-HBs 对相同对相同 HBsAg亚型的亚型的HBV再感染有免再感染有免 疫
10、力，但对不同亚型的疫力，但对不同亚型的HBV保护力不完全。保护力不完全。乙型肝炎系列培训材料HBeAg是是HBcAg的降解产物的降解产物HBV CHBV C基因基因前前C区区C 区区前前C/C 蛋白蛋白HBeAgHBcAg表表 达达切割、加工切割、加工分泌到细胞外分泌到细胞外HBeAg只存在于血清中只存在于血清中乙型肝炎系列培训材料HBeAg是病毒复制和传染性的标志是病毒复制和传染性的标志血清血清HBeAg阳性者中，阳性者中，HBV DNA阳性率阳性率为为92%左右左右乙型肝炎系列培训材料出现时间：随着出现时间：随着HBeAg的消失而出现的消失而出现抗抗-HBe的出现标志着病毒复制减少、传染性
11、降低的出现标志着病毒复制减少、传染性降低抗抗-HBe阳性者中，阳性者中，16.3%30%左右左右HBV DNA仍阳性仍阳性 可能与前可能与前C基因变异有关基因变异有关 易加重病情、易演变为肝硬化易加重病情、易演变为肝硬化-干扰素疗效亦较差干扰素疗效亦较差乙型肝炎系列培训材料HBcAg主要存在于主要存在于HBV感染的肝细胞内或感染的肝细胞内或DANE颗粒颗粒 核心中，到血液中即被降解为核心中，到血液中即被降解为HBeAg。一般血清学方法检测不到一般血清学方法检测不到HBcAg，而只能检测到抗而只能检测到抗-HBc抗抗HBc-IgM：是是HBV近期感染或慢性感染者病毒活动的标志近期感染或慢性感染者
12、病毒活动的标志抗抗HBc-IgG：凡凡“有过有过”HBV感染者均可阳感染者均可阳性性HBcAg的免疫原性最强的免疫原性最强持续时间：持续时间：618个月个月可终身阳性可终身阳性乙型肝炎系列培训材料HBsAg HBV感染，但未必是急性肝炎或者感染，但未必是急性肝炎或者 慢性病变活动的病原。慢性病变活动的病原。抗抗HBs 感染后免疫；对疫苗的免疫应答；或感染后免疫；对疫苗的免疫应答；或HBIG的被动免疫的被动免疫HBeAg 反映反映HBV复制，有病毒血症，血液高传染性复制，有病毒血症，血液高传染性抗抗HBe ALT持续正常者表示持续正常者表示HBV低复制或不复制，低复制或不复制，HBsAg (+)
13、血液低传染性。血液低传染性。ALT波动者表示病毒变异。波动者表示病毒变异。抗抗HBc 低滴度表示过去感染；高滴度表示现行感染。低滴度表示过去感染；高滴度表示现行感染。IgM抗抗HBc 高滴度表示急性或近期感染；高滴度表示急性或近期感染；活动性病变可出现低滴度。活动性病变可出现低滴度。乙型肝炎系列培训材料“两对半两对半”血清抗原血清抗原抗体转换率：抗体转换率：HBeAg 抗抗-HBe “转转 阴阴”常用指标常用指标：血清血清HBeAg抗原抗原抗体转换率抗体转换率 HBV DNA 阴转率阴转率乙型肝炎系列培训材料序号HBsAg 抗-HBs HB eAg 抗-HBe 抗-HBc 临床意义1-过去和现
14、在未感染过HBV。2-+1)既往感染未能测出抗-HBs；2)恢复期HBsAg已消，抗-HBs尚未出现；3)无症状HBsAg携带着。3-+1)既往感染过HBV；2)急性HBV感染恢复期；3)少数标本仍有传染性。HBV感染已过；抗HBs出现前的窗口期4-+-1)注射过乙肝苗有免疫；2)既往感染；3)假阳性5-+-+急性HBV感染后康复。6+-+1)急性HBV感染；2)慢性HBsAg携带者；3)传染性弱。7-+-+既往感染，仍有免疫力。HBV感染，恢复期。8+-+1)急性HBV感染趋向恢复；2)慢性HBsAg携带者；3)传染性弱。即俗称的“小三阳”。9+-+-+急性或慢性乙型肝炎感染。提示HBV复制
15、，传染强。即俗称的“大三阳”。乙型肝炎系列培训材料3.1各项的检测方法及生物所和临检中心质各项的检测方法及生物所和临检中心质量要求。量要求。3.2我公司的试剂的基本情况我公司的试剂的基本情况3.3国内主要厂家试剂的的对比情况国内主要厂家试剂的的对比情况3.4临床操作及售前、售后服务过程中的注临床操作及售前、售后服务过程中的注意事项意事项3.5临床常见问题的分析临床常见问题的分析 乙型肝炎系列培训材料v1 乙肝表面抗原（乙肝表面抗原（HBsAg）：）：双抗体夹心法。双抗体夹心法。v 国家标准国家标准:特异性参比：特异性参比：20/20 阳性参比：阳性参比：3/3v 灵敏度参比：灵敏度参比：adr
16、0.5ng/ml adw1ng ay1ngv 精密性参比：精密性参比：Cv1 5 v 临检中心行业标准：临检中心行业标准：0.5ng v v2 乙肝表面抗体（抗乙肝表面抗体（抗-HBs）：）：双抗原夹心法双抗原夹心法。v 国家标准国家标准:特异性参比：特异性参比：20/20 灵敏度灵敏度:10mIuv 精密性参比：精密性参比：Cv 15 临检中心行业标准临检中心行业标准:30mIu乙型肝炎系列培训材料v3 乙肝乙肝E抗原（抗原（HBeAg）：）：双抗体夹心法。双抗体夹心法。v国家标准国家标准:特异性参比：特异性参比：15/15 阳性参比：阳性参比：9/10v 灵敏度参比：灵敏度参比：1#1:6
17、4 2#1:128 3#1:32v 精密性参比：精密性参比：Cv20 v 临检中心行业标准：临检中心行业标准：2 NCu v4 乙肝乙肝E抗体（抗抗体（抗-HBe）：）：竞争抑制法。竞争抑制法。v国家标准国家标准:特异性参比：特异性参比：15/15 阳性参比：阳性参比：9/10v 灵敏度参比：灵敏度参比：61#1:32 57#1:32 55#1:32v 精密性参比：精密性参比：Cv20 v 临检中心行业标准：临检中心行业标准：4 Ncuv 乙型肝炎系列培训材料v5 乙肝核心抗体（抗乙肝核心抗体（抗-HBc）：）：竞争抑制法。竞争抑制法。国家标准国家标准:特异性参比：特异性参比：15/15 阳性
18、参比：阳性参比：14/15v 灵敏度参比：灵敏度参比：2#1:32 3#1:8 4#1:16v 精密性参比：精密性参比：Cv20 v 临检中心行业标准：临检中心行业标准：2 Ncuv 乙型肝炎系列培训材料vA 操作简单操作简单。vB 结果直观。结果直观。vC 特异性好。特异性好。vD 显色快且稳定显色快且稳定。vE 临床符合率高。临床符合率高。乙型肝炎系列培训材料HBsAg2004-9-2N2N30.5ng 2ng5ng阴对阳对KH(20040816)0.058 0.123 0.271 0.792 1.618 0.049 3.408RSH(20040603)0.046 0.083 0.197
19、0.547 1.068 0.104 3.5LC2+(20040901 0.058 0.071 0.227 0.682 1.375 0.066 3.256乙型肝炎系列培训材料2004-9-2N14N4 30mIu P1P4阴对阳对LC2+(20040901)0.066 0.074 0.44 0.476 0.722 0.043 3.5KH(20040816)0.058 0.049 0.421 0.477 0.96 0.051 3.173RSH(20040603)0.079 0.044 0.52 0.615 0.953 0.046 3.228乙型肝炎系列培训材料2004-9-2N3N4 0.2Ncu
20、0.5Ncu 2Ncu 阴对 阳对LC2+(20040901)0.047 0.046 0.361 1.033 3.328 0.047 3.5KH(20040816)0.093 0.07 0.331 1.046 3.469 0.05 3.362RSH(20040603)0.077 0.087 0.105 0.241 2.433 0.054 3.366乙型肝炎系列培训材料2004-9-2N2N14 4Ncu 大三阳 P4阴对 阳对LC2+(20040901)2.765 2.723 0.856 2.756 0.075 1.892 0.056KH(20040818)1.926 1.562 0.763
21、2.056 0.308 1.439 0.046RSH(20040603)1.538 1.081 0.409 1.616 0.06 0.818 0.063乙型肝炎系列培训材料2004-9-2N2N14N3CP6P4阴对 阳对LC2+(20040901)3.139 2.725 2.841 0.055 0.201 1.879 0.057RSH(20040603)2.615 1.987 2.486 0.059 0.122 1.913 0.057KH(20040810)1.948 1.711 1.89 0.054 0.106 1.737 0.04乙型肝炎系列培训材料v1 前三项：前三项：KH本地高，假阳
22、性偏多。灵敏度本地高，假阳性偏多。灵敏度及个别阳性及个别阳性OD值较值较LC高。高。v2 后两项：后两项：LC阴性阴性OD值高于值高于KH，但阳性率但阳性率低于低于KH。v3 整体五项：整体五项：KH与与LC均存在特殊模式且均存在特殊模式且KH比比LC偏多。偏多。v4 外观：外观：KH的触感及视感好于的触感及视感好于LC。v5 品牌：品牌：KH较较LC高。高。乙型肝炎系列培训材料v试剂盒自冰箱中取出后应置室温平衡试剂盒自冰箱中取出后应置室温平衡30分钟以分钟以上。上。v实验前，仔细阅读说明书，严格按照反应时间实验前，仔细阅读说明书，严格按照反应时间及温度孵育。及温度孵育。v不同批试剂组分不得混
23、用。不同批试剂组分不得混用。v手工洗板时避免孔内液体外溢，以避免相互污手工洗板时避免孔内液体外溢，以避免相互污染，造成假阳性。染，造成假阳性。v实验物品及试剂盒均按传染品处理。实验物品及试剂盒均按传染品处理。v使用后的剩余试剂及时回收至使用后的剩余试剂及时回收至4度冰箱。度冰箱。乙型肝炎系列培训材料v1 忘加或错加酶标结合物。忘加或错加酶标结合物。v2 漏加底物或显色剂或把终止液当成底漏加底物或显色剂或把终止液当成底物或显色剂加入。物或显色剂加入。v3 显色温度不够。显色温度不够。v4 操作前没看，拿错包被板操作前没看，拿错包被板。白板即整板没颜色的常见原因白板即整板没颜色的常见原因乙型肝炎系
24、列培训材料v1 本批标本弱阳性多。本批标本弱阳性多。v2 手工洗板时，洗涤不均一，或机洗时手工洗板时，洗涤不均一，或机洗时部分孔堵塞或不彻底。部分孔堵塞或不彻底。v3 部分标本处理不好，有溶血或纤维蛋部分标本处理不好，有溶血或纤维蛋白析出。白析出。v4 显色时间长。显色时间长。v5 试剂盒试剂盒 的灵敏度高。的灵敏度高。乙型肝炎系列培训材料v1 运输过程中温度过高且时间长，或试运输过程中温度过高且时间长，或试剂在冰箱中保存时贴壁结冻。剂在冰箱中保存时贴壁结冻。v2 试剂盒和样品没有平衡室温。试剂盒和样品没有平衡室温。v3 洗涤次数太多，洗涤时间太长。洗涤次数太多，洗涤时间太长。v4 温育时间不
25、够和显色温度过低。温育时间不够和显色温度过低。v5 加样量不足。加样量不足。乙型肝炎系列培训材料v1 试剂被污染变色试剂被污染变色v2 加样量过大。加样量过大。v3 洗板次数不够。洗板次数不够。v4 温育或显色时间长，温箱温度偏高。温育或显色时间长，温箱温度偏高。v5 试剂盒灵敏度偏高。试剂盒灵敏度偏高。乙型肝炎系列培训材料v1 以上原因在不同项中出现均可导致结以上原因在不同项中出现均可导致结果与实验分析不一致的情况。果与实验分析不一致的情况。v2 实验标本比较特殊，其临床不确定。实验标本比较特殊，其临床不确定。v3 操作人员改变。操作人员改变。v4 实验室仪器操作程序改变。实验室仪器操作程序
26、改变。v5 部分试剂出现问题出现假阳性或假阴部分试剂出现问题出现假阳性或假阴性性。乙型肝炎系列培训材料v1.未按说明书正规操作未按说明书正规操作.v2.加样时间过长加样时间过长v3.需稀释比例不够需稀释比例不够v4.标本污染、溶血、红细胞、纤维蛋白含量过标本污染、溶血、红细胞、纤维蛋白含量过多等标本因素多等标本因素v5.洗板不彻底洗板不彻底v5.判断有误判断有误v6.试剂盒本身有问题试剂盒本身有问题乙型肝炎系列培训材料v1.未按说明书正规操作未按说明书正规操作v2.加样量加样量,反应时间、温度不够反应时间、温度不够v3.漏加，错加标本或试剂漏加，错加标本或试剂v4.显色时间及温度不够显色时间及温度不够v5.洗板过量洗板过量v6.判断有误判断有误v7.试剂盒本身有问题试剂盒本身有问题乙型肝炎系列培训材料v1.临床确实存在不同的模式临床确实存在不同的模式v2.操作不规范操作不规范v3.判断有误判断有误v4.特殊人群的存在特殊人群的存在v5.S基因变异及亚型的感染基因变异及亚型的感染乙型肝炎系列培训材料
