1、一一 病毒性肝炎血清标志物检查病毒性肝炎血清标志物检查 甲肝病毒甲肝病毒(HAV)乙肝病毒乙肝病毒(HBV)丙肝病毒丙肝病毒(HCV)丁肝病毒丁肝病毒(HDV)戊肝病毒戊肝病毒(HEV)庚肝病毒庚肝病毒(HGV)输血传播病毒输血传播病毒(TTV)二二 HIV抗体的实验室检测抗体的实验室检测三三 梅毒的实验室检测梅毒的实验室检测第一节第一节 感染免疫检测感染免疫检测2020/11/41一 病毒性肝炎血清标志物检查第一节 感染免疫检测2 0 2 0/1 病毒性肝炎标志物:肝炎病毒本身、病毒性肝炎标志物:肝炎病毒本身、组成该病毒的成份及抗病毒的抗体等组成该病毒的成份及抗病毒的抗体等总称。总称。一一
2、病毒性肝炎病毒性肝炎血清标志物检查血清标志物检查3763762020/11/42 一 病毒性肝炎血清标志物检查3 7 6 2 0 2 0/1 1/4 2甲型肝炎病毒标志物甲型肝炎病毒标志物:甲肝抗体甲肝抗体(抗抗-HAV)-HAV)【参考值】【参考值】阴性阴性【临床意义】【临床意义】抗抗-HAV IgM阳性表示近期感染阳性表示近期感染过过HAV,抗,抗-HAV IgG阳性表示曾阳性表示曾经感染过经感染过HAV,见于甲肝恢复期。,见于甲肝恢复期。(一)(一)HAVHAV标志物检测标志物检测2020/11/43甲型肝炎病毒标志物:(一)H A V 标志物检测2 0 2 0/1 1/(二)HBV标志
3、物检测2020/11/44(二)H B V 标志物检测2 0 2 0/1 1/4 4大球形颗粒管形颗粒小球形颗粒2020/11/45大球形颗粒管形颗粒小球形颗粒2 0 2 0/1 1/4 5pre-s1pre-s2SPpre-cCHBV DNA 3.2 kbpre-S1 pre-S1蛋白蛋白pre-S2 pre-S2蛋白蛋白S HBsAgpre-C HBeAgC HBcAgP DNAP2020/11/46p r e-s 1 p r e-s 2 S P p r e-c C H B V D N A Dane颗粒(完整的病毒)形态HBsAgHBcAgHBV DNADNAP(外膜蛋白)(外膜蛋白)(核
4、衣壳蛋白)(核衣壳蛋白)2020/11/47D a n e 颗粒(完整的病毒)形态H B s A g H B c A g H B V D(1 1)乙肝血清学(二对半)乙肝血清学(二对半)HBsAg HBsAb HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBeAg HBeAb HBcAb HBcAb HBcAg PreS1 HBcAg PreS1(二)(二)HBVHBV标志物检测标志物检测2020/11/48(1)乙肝血清学(二对半)(二)H B V 标志物检测2 0 2 0/12020/11/492 0 2 0/1 1/4 9(2 2)HBVDNA测定测定PCR法法 参考值:阴性参考值:
5、阴性2020/11/410(2)H B V D N A 测定P C R 法 参考值:阴性2 0 2 0/1【临床意义】【临床意义】1.急性急性HBV感染可靠的诊断指标感染可靠的诊断指标2.HBVDNA与血清学结果的评价与血清学结果的评价HBsAg+HBsAb+HBeAg+HBeAb、HBcAb+HBV-DNA+-+2020/11/411【临床意义】H B s A g+H B s A b H B e A g H B e A b、H B【临床意义】【临床意义】3.3.抗病毒疗效观察抗病毒疗效观察 4.4.筛查献血队员筛查献血队员 5.5.检测疫苗安全性检测疫苗安全性2020/11/412【临床意义
6、】2 0 2 0/1 1/4 1 2 HbsAg HbsAb HbeAg HbeAb HbcAb 临床意义临床意义 +-+-活跃期,传染性强活跃期,传染性强 +-+携带者携带者/感染早期感染早期 +-+趋向恢复趋向恢复/传染性弱传染性弱 -+-+既往感染既往感染/恢复期恢复期 -+感染恢复期感染恢复期 -+窗口期窗口期/既往感染既往感染 -+-感染恢复期感染恢复期/疫苗疫苗 -+-+感染恢复期感染恢复期/潜在感潜在感 染后有免疫力染后有免疫力 +-+HBsAg变异2020/11/413 H b s A g H b s A b H b e A g H b e A b H b c(三)HCV标志物
7、检测【方法】【方法】ELISA、RIA、HCV RNA【参考值】阴性【参考值】阴性【临床意义】【临床意义】1.1.抗抗HCV阳性阳性 HCV感染标志感染标志 2.2.抗抗HCV-IgM阳性急性丙肝阳性急性丙肝3.3.抗抗HCV-IgG阳性慢性丙肝阳性慢性丙肝4.4.HCV RNA阳性阳性病毒复制活跃病毒复制活跃2020/11/414(三)H C V 标志物检测【方法】E L I S A、R I A、H C V 抗抗-HCV免疫测定试剂的阳性判断标准免疫测定试剂的阳性判断标准试剂名称试剂名称可判为阳性的可判为阳性的S/COS/COOrtho HCV version 3.0 ELISA3.8Ort
8、ho Virus anti-HCV assay8.0Abbott HC有关抗有关抗-HCV免疫测定试剂免疫测定试剂的阳性判断标准的阳性判断标准VEIA 2.03.8Abbott Axsym antibody to HCV10.0Abbott Architect anti-HCV5.02020/11/415抗-H C V 免疫测定试剂的阳性判断标准试剂名称可判为阳性的S/抗HCV筛查及确认试验结果的解释筛查试验筛查试验结果结果确认试验确认试验结果结果结果报告结果报告解解 释释阴性阴性不需检测不需检测抗抗HCV阴性阴性未感染未感染HCV,除非怀疑是最除非怀疑是最近感染近感染阳性且阳性且S/CO高高
9、未检测未检测抗抗HCV阳性阳性提示既往或现症提示既往或现症HCV感染感染但尚有但尚有5%5%的标本可能为假的标本可能为假阳性阳性阳性阳性阳性阳性抗抗HCV阳性阳性既往或现症既往或现症HCV感染感染阳性阳性不确定不确定抗抗HCV不确定不确定不能确定抗不能确定抗HCV及及HCV感感染状态染状态阳性阳性RIBA 阴性阴性HCV RNA阴性阴性抗抗HCV 阴性阴性HCV RNA阴性阴性未感染未感染HCV,筛查结果可能筛查结果可能为假阳性为假阳性2020/11/416抗H C V 筛查及确认试验结果的解释筛查试验确认试验结果报告解(四)四)HDV标志物检测标志物检测 HDAg、抗抗-HDV IgG和和I
10、gM检测检测【参考值】阴性【参考值】阴性【临床意义】【临床意义】1.1.抗抗-HDV IgM 急性感染急性感染 2.2.抗抗-HDV IgG 慢性感染慢性感染2020/11/417(四)H D V 标志物检测2 0 2 0/1 1/4 1 7(五)(五)HEV标志物检测标志物检测 戊型肝炎病毒标志物戊型肝炎病毒标志物:戊肝抗体戊肝抗体(抗抗-HEV)【参考值】【参考值】阴性阴性 【临床意义】【临床意义】1.1.抗抗-HEV IgM阳性表示近期感染阳性表示近期感染HEV 2.2.抗抗-HAV IgG阳性表示戊型肝炎恢复期阳性表示戊型肝炎恢复期(六)(六)HGV标志物监测标志物监测(七)(七)TT
11、V标志物监测标志物监测 2020/11/418(五)H E V 标志物检测2 0 2 0/1 1/4 1 8【筛选试验】【筛选试验】胶体金法、胶体金法、ELISAELISA【确诊试验】【确诊试验】WESTEN BLOT WESTEN BLOT、RT-PCRRT-PCR【参【参 考考 值】值】阴性阴性【临床意义】【临床意义】诊断诊断AIDSAIDS 流行病普查流行病普查二、二、HIV抗体抗体(Human Immunodeficiency Virus)2020/11/419【筛选试验】胶体金法、E L I S A 二、H I V 抗体2 0 2 0/1HIV 病毒及基因结构2020/11/420H
12、 I V 病毒及基因结构2 0 2 0/1 1/4 2 0HIV感染窗口期窗口期HIV进入人体后,需要经过一段时间血液才会产生进入人体后,需要经过一段时间血液才会产生HIV抗体,抗体,在此期间抗体检测呈阴性,这段时间即为窗口期。窗口期在此期间抗体检测呈阴性,这段时间即为窗口期。窗口期HIV感染者病毒复制水平高,传染性强。感染者病毒复制水平高,传染性强。2020/11/421H I V 感染窗口期窗口期H I V 进入人体后,需要经过一段时间血液三、梅毒螺旋体抗体检测三、梅毒螺旋体抗体检测2020/11/422三、梅毒螺旋体抗体检测2 0 2 0/1 1/4 2 2【定性试验】【定性试验】快速血
13、浆反应素试验快速血浆反应素试验(Rapid Plasma Reagin test,RPR)【确诊试验】【确诊试验】梅毒螺旋体血清试验梅毒螺旋体血清试验(Treponemal Pallidum Hemagglutination Test,TPHA)【参考值】【参考值】RPR、TPHA均阴性均阴性 三、梅毒螺旋体抗体检测三、梅毒螺旋体抗体检测2020/11/423【定性试验】三、梅毒螺旋体抗体检测2 0 2 0/1 1/4 2 3梅毒螺旋体反应素试验1-1-原倍阳性血清原倍阳性血清 2-12 2-12 稀释血清稀释血清3-14 3-14 稀释血清稀释血清4-18 4-18 稀释血清稀释血清5-11
14、6 5-116 稀释血清稀释血清6-132 6-132 稀释血清稀释血清7-164 7-164 稀释血清稀释血清8-1128 8-1128 稀释血清稀释血清2020/11/424梅毒螺旋体反应素试验1 -原倍阳性血清 2 0 2 0/1 1/4梅毒螺旋体抗原血清试验2020/11/425梅毒螺旋体抗原血清试验2 0 2 0/1 1/4 2 5【临床意义】【临床意义】1.RPR(+)TPHA(+)梅毒梅毒2.RPR(-)TPHA(+)感染过梅毒感染过梅毒3.RPR(+)TPHA(-)进一步观察进一步观察TPHA (-)排除排除 TPHA(+)确诊确诊 4.RPR(+)可见于)可见于SLE、IM、
15、TB、PSS2020/11/426【临床意义】2 0 2 0/1 1/4 2 6四、四、TORCH病毒抗体检测病毒抗体检测 弓形虫(弓形虫(Toxoplasma,TOXO)风疹病毒(风疹病毒(Rubella Virus,RV)巨细胞病毒(巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)单纯疱疹病毒(单纯疱疹病毒(Herpes Virus,HSV)或其他原因(或其他原因(Others)2020/11/427四、T O R C H 病毒抗体检测弓形虫(T o x o p l a s ma,T O四、四、TORCH病毒抗体检测病毒抗体检测349【参考值】【参考值】IgM(-),),IgG(-)【
16、临床意义】【临床意义】1.IgM+、IgG+:早期感染过体内有抗体,近期复发感染,应终止妊:早期感染过体内有抗体,近期复发感染,应终止妊娠。娠。2.IgM+、IgG-:急性期初次感染,危险性极高,应终止妊娠。急性期初次感染,危险性极高,应终止妊娠。3.IgM-、IgG+:早期感染过,体内有抗体,有一定免疫力;:早期感染过,体内有抗体,有一定免疫力;4.IgM-、IgG-:无感染史,体内无抗体,无免疫力。无感染史,体内无抗体,无免疫力。2020/11/428四、T O R C H 病毒抗体检测3 4 9【参考值】I g M(-),I g第二节第二节 肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测333333【定义
17、】肿瘤细胞合成、释放肿瘤细胞合成、释放或由机体对肿瘤细胞反或由机体对肿瘤细胞反应异常产生的一类反映应异常产生的一类反映肿瘤存在物质。肿瘤存在物质。2020/11/429第二节 肿瘤标志物检测3 3 3【定义】2 0 2 0/1 1/4 2 91.1.甲种胎儿球蛋白(甲种胎儿球蛋白(alpha fetoprotein,APF)alpha fetoprotein,APF)-岩藻糖苷酶(岩藻糖苷酶(alpha fucosidase,AFU)alpha fucosidase,AFU)【参考范围】【参考范围】APF APF2525g/L;g/L;AFU AFU(3-11U/L)3-11U/L)【临床意义
18、】【临床意义】原发性肝细胞癌;生殖腺胚胎癌;原发性肝细胞癌;生殖腺胚胎癌;胃癌;胰腺癌;病毒性肝炎;肝硬化;胃癌;胰腺癌;病毒性肝炎;肝硬化;妇女妊娠妇女妊娠3 3个月后个月后APFAPF开始升高,开始升高,7-8 7-8个月达到高峰,分娩后个月达到高峰,分娩后3 3周恢复正常。周恢复正常。2020/11/4301.甲种胎儿球蛋白(a l p h a f e t o p r o t e i n,A2.2.癌胚抗原癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)【临床意义】【临床意义】2020/11/4312.癌胚抗原(c a r c i n o e mb r y o n i
19、 c a n t i g3.3.癌抗原癌抗原125125(cancer antigen125,CA-125cancer antigen125,CA-125)人附睾蛋白人附睾蛋白4(HE4)HE4)4.4.癌抗原癌抗原15-315-3(cancer antigen15-3,CA15-3cancer antigen15-3,CA15-3)5.5.糖链抗原糖链抗原19-919-9(CA19-9CA19-9)6.6.糖链抗原糖链抗原72-472-4(CA72-4CA72-4)胃蛋白酶元胃蛋白酶元I I、IIII2020/11/4323.癌抗原1 2 5(c a n c e r a n t i g e
20、n 1 2 5,C A7.7.前列腺特异性抗原前列腺特异性抗原 (Prostate specific antigen(Prostate specific antigen,PSA)PSA)前列腺特异磷酸酶(前列腺特异磷酸酶(Prostatic acid phosphataseProstatic acid phosphatase,PAPPAP)8.8.鳞状细胞癌抗原鳞状细胞癌抗原(squamous cell carcinoma,SCC)squamous cell carcinoma,SCC)10.10.神经元特异性烯醇神经元特异性烯醇(neuronspecificenolase(neuronspe
21、cificenolase,NSE)NSE)11.11.细胞角蛋白细胞角蛋白1919片断(片断(CYFRA21-1)CYFRA21-1)12.12.人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)human chorionic gonadotropin,hCG)2020/11/4337.前列腺特异性抗原(P r o s t a t e s p e c i f i c 对应疾病对应疾病肿瘤标志物肿瘤标志物消化系统消化系统 肝癌肝癌AFP/AFUAFP/AFU结肠癌结肠癌CEACEA CA199CA199胃癌胃癌CA72-4CA72-4CEAC
22、EACA199 CA199 胰腺癌胰腺癌/胆管癌胆管癌CA199 CA199 CEACEA泌尿生殖泌尿生殖系统系统乳腺癌乳腺癌CA153 CA153 CEACEA卵巢癌卵巢癌CA125CA125 CA72-4 CA72-4 绒毛癌绒毛癌/精原细胞癌精原细胞癌HCG HCG 前列腺癌前列腺癌PSA/PAPPSA/PAP宫颈癌宫颈癌SCC SCC CEA CEA HPV HPV 呼吸系统呼吸系统小细胞肺癌小细胞肺癌NSENSE非小细胞肺癌非小细胞肺癌CYFRA21-1 CYFRA21-1 CEACEA2020/11/434对应疾病肿瘤标志物消化系统 肝癌A F P/A F U 结肠第三节第三节 细
23、胞免疫检测细胞免疫检测3093092020/11/435第三节 细胞免疫检测3 0 9 2 0 2 0/1 1/4 3 5(一)(一)T T细胞分化抗原检测细胞分化抗原检测-免疫荧光法免疫荧光法【原理】【原理】流式细胞术流式细胞术【参考值】【参考值】CD3(69.40CD3(69.404.86)%CD4(41.174.86)%CD4(41.175.28)%5.28)%CD8(24.58 CD8(24.584.02)%CD4/CD8 0.9-2.04.02)%CD4/CD8 0.9-2.0一一 细胞表型分析细胞表型分析2020/11/436(一)T 细胞分化抗原检测-免疫荧光法【参考值】C D
24、3 ((一)(一)T细胞分化抗原检测细胞分化抗原检测【临床意义】【临床意义】1 T1 T细胞总数的变化(细胞总数的变化(CD3CD3)CD3CD3见于:见于:免疫缺陷病免疫缺陷病 自身免疫病自身免疫病 病毒感染病毒感染 恶性肿瘤恶性肿瘤 应用免疫抑制剂应用免疫抑制剂2020/11/437(一)T 细胞分化抗原检测【临床意义】2 0 2 0/1 1/4 3 7(一)(一)T细胞分化抗原检测细胞分化抗原检测2 T2 T细胞亚群的变化细胞亚群的变化CD4CD4见于:免疫缺陷病,病毒感染,恶性见于:免疫缺陷病,病毒感染,恶性肿瘤,应用免疫抑制剂肿瘤,应用免疫抑制剂CD8CD8见于:自身免疫病见于:自身
25、免疫病CD4/CD8CD4/CD8:AIDSAIDS3 CD33 CD3CD4CD4CD8CD8,同时伴,同时伴CD2CD2 CD5 CD5 CD7CD7,应考虑急性,应考虑急性T T淋巴细胞白血病。淋巴细胞白血病。2020/11/438(一)T 细胞分化抗原检测2 T 细胞亚群的变化2 0 2 0/1 1(二)(二)B细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定【参考值】【参考值】CD19阳性率(阳性率(11.743.73)%【临床意义】【临床意义】(1)CD19见于见于B细胞恶性增殖性疾病,如细胞恶性增殖性疾病,如急淋、慢淋、多发性骨髓等。急淋、慢淋、多发性骨髓等。(2)CD19见于体液免疫缺陷病,如
26、无丙种见于体液免疫缺陷病,如无丙种球蛋白血症,化疗或应用免疫抑制剂球蛋白血症,化疗或应用免疫抑制剂2020/11/439(二)B 细胞分化抗原测定【参考值】2 0 2 0/1 1/4 3 9(一)(一)玫瑰花结形成实验玫瑰花结形成实验【参考值】【参考值】64.46.7%二二 细胞功能测定细胞功能测定2020/11/440(一)玫瑰花结形成实验【参考值】6 4.4 6.7%二 细【原【原 理】理】T T细胞细胞-ConA-ConA或或(PHA)-(PHA)-淋巴母细胞淋巴母细胞【参考值】【参考值】(60.1 (60.17.6)%7.6)%(形态学计数法)(形态学计数法)SI SI2 2 (H3H3掺入法或掺入法或MTTMTT法)法)【临床意义】【临床意义】1.1.判定机体细胞免疫功能水平淋转率判定机体细胞免疫功能水平淋转率见于见于 a a 细胞免疫缺陷细胞免疫缺陷 b b 细胞免疫功能细胞免疫功能:恶性肿瘤、免疫缺陷病、自身免疫病:恶性肿瘤、免疫缺陷病、自身免疫病 病毒感染、应用免疫抑制剂病毒感染、应用免疫抑制剂2.2.估计疾病疗效及预后估计疾病疗效及预后(二)(二)T T细胞功能检测细胞功能检测2020/11/441(二)T 细胞功能检测2 0 2 0/1 1/4 4 1