1、免疫学检测原理及临床应用免疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用1相关帮助需要相关抗体试剂的可以访问Fantibody全球抗体搜索引擎:fantibody全球抗体搜索引擎是一个供公共检索的抗体数据库，其抗体信息数据来源于全球范围的研究机构与商业公司。该引擎由商品化抗体数据库与抗体应用评价数据库两部分组成，以帮助研究者更高效的寻找并评估该抗体的性能。全球抗体搜索引擎是继基因与蛋白数据库之后更为复杂的应用型检索平台需要相关的实验室仪器设备、生物试剂、医疗器械、制药设备、医药原料、体外诊断试剂及耗材与技术服务信息的，可以访问探生网进行咨询，期待您的加入疫学检测原理及临床应用内容提要：概念基于抗
2、原抗原-抗体反应抗体反应的检测方法免疫细胞细胞检测免疫分子分子检测免疫学诊断诊断与检测掌握：掌握：原理原理 临床应用临床应用疫学检测原理及临床应用概念：概念：免疫学免疫学细胞生物学细胞生物学分子生物学分子生物学 应用：免疫相关疾病的诊断、病情应用：免疫相关疾病的诊断、病情检测和疗效评价等。检测和疗效评价等。抗原抗原抗体抗体免疫细胞免疫细胞细胞因子细胞因子检测检测理论和方法理论和方法定性定性 定量定量疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用 疫学检测原理及临床应用1、利用已知抗原检测未知抗体、利用已知抗原检测未知抗体（1）检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病：伤寒病、流行性乙型脑炎、AID
3、S病等。（2）检测自身抗体诊断自身免疫病：SLE、类风湿性关节炎等2、利用已知抗体检测未知抗原、利用已知抗体检测未知抗原（1）鉴定病原菌：诊断疾病）鉴定病原菌：诊断疾病（2）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌（3）检测血型抗原、）检测血型抗原、HLA抗原：鉴定血型，亲子鉴定抗原：鉴定血型，亲子鉴定（4）检测药物半抗原：）检测药物半抗原：确认运动员是否服用兴奋剂确认运动员是否服用兴奋剂疫学检测原理及临床应用（一）抗原（一）抗原-抗体结合反应的特点抗体结合反应的特点特异性带现象与可见性可逆性取决于抗原表位与抗体高变区结取决于抗原表位与抗体高变区结合部
4、位空间构型的合部位空间构型的互补互补的程度的程度疫学检测原理及临床应用抗原抗体结合的带现象带现象与可见性（一）抗原（一）抗原-抗体结合反应的特点抗体结合反应的特点疫学检测原理及临床应用可逆性：可逆性：（一）抗原（一）抗原-抗体结合反应的特点抗体结合反应的特点低低pH值值高浓度盐高浓度盐冻融等冻融等AgAb解离解离取决于亲取决于亲和力大小和力大小疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用（二）抗原抗体反应的影响因素（二）抗原抗体反应的影响因素电解质电解质酸碱度酸碱度温度温度抗原抗体的性质抗原抗体的性质疫学检测原理及临床应用1.电解质：电解质：亲水性亲水性-疏水性疏水性 失去电荷失去电荷-发生凝
5、集发生凝集（二）抗原抗体反应的影响因素（二）抗原抗体反应的影响因素疫学检测原理及临床应用2、酸碱度：、酸碱度：最适最适pH值：值：68 假阳性假阳性 假阴性假阴性（二）抗原抗体反应的影响因素（二）抗原抗体反应的影响因素疫学检测原理及临床应用3.温度：温度：适当温度适当温度-增加碰撞机会增加碰撞机会 加快结合速度加快结合速度 37（二）抗原抗体反应的影响因素（二）抗原抗体反应的影响因素疫学检测原理及临床应用4、抗原和抗体的性质、抗原和抗体的性质 关键因素关键因素-特异性和亲和力特异性和亲和力 决定因素决定因素-二者的比例二者的比例（二）抗原抗体反应的影响因素（二）抗原抗体反应的影响因素疫学检测原
6、理及临床应用（三）（三）抗原或抗体的检测方法抗原或抗体的检测方法 凝集反应凝集反应沉淀反应沉淀反应补体参与的反应补体参与的反应免疫标记技术免疫标记技术疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用 疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用对流免疫电泳对流免疫电泳(counterimmunoelectrophoresis)疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用2、补体结合试验、补体结合试验(complement fixation test)：检测抗原或抗体。：检测抗原或抗体。原理：用已知的指示系统检测试验系统是否结合补体进行诊断原理：用已知的指
7、示系统检测试验系统是否结合补体进行诊断疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用1、免疫荧光法、免疫荧光法（immunofluorescence,IF）用荧光标记抗体，再与待检标本用荧光标记抗体，再与待检标本中抗原反应那个，所形成的抗原中抗原反应那个，所形成的抗原抗体复合物在荧光显微镜下散发抗体复合物在荧光显微镜下散发荧光，借此对抗原进行定性和定荧光，借此对抗原进行定性和定量。量。疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用 疫学检测原理及临床应用卵白及某些微生物中的蛋白质卵白及某些微生物中的蛋白质疫学检测原理及临床应用3、免疫组化、免疫组化 (immunohitochemistry)应用标
8、记的抗体与组织或细胞抗应用标记的抗体与组织或细胞抗原反应，借助形态学观察，对组原反应，借助形态学观察，对组织或细胞表面抗原进行定性、定织或细胞表面抗原进行定性、定量、定位检测。量、定位检测。疫学检测原理及临床应用4、放射免疫测定法、放射免疫测定法 （radioimmunassay,RIA）用发射性核素标记抗体或抗用发射性核素标记抗体或抗原进行免疫学检测。原进行免疫学检测。疫学检测原理及临床应用5、化学发光免疫分析、化学发光免疫分析（chemiluminescence immunoassay）将发光物质标记抗原或抗体，发光将发光物质标记抗原或抗体，发光物质在反应剂激发下生成激发态中物质在反应剂激
9、发下生成激发态中间体，当回复至稳定的基态时发射间体，当回复至稳定的基态时发射光子，通过自动发光分析仪测定管光子，通过自动发光分析仪测定管子参量，可反应样品中抗体或抗原子参量，可反应样品中抗体或抗原含量。含量。疫学检测原理及临床应用6、免疫印记法、免疫印记法（immunoblotting）又称又称western 印记法：结合凝胶电泳和固印记法：结合凝胶电泳和固相免疫技术，将借助电泳所区分的蛋白相免疫技术，将借助电泳所区分的蛋白质转移至固相载体，在应用酶免疫、放质转移至固相载体，在应用酶免疫、放射免疫等技术进行检测。射免疫等技术进行检测。疫学检测原理及临床应用机体免疫功能状态的重要指标机体免疫功能
10、状态的重要指标免疫细胞来源免疫细胞来源-外周血外周血疫学检测原理及临床应用（一）免疫细胞及其亚类计数（一）免疫细胞及其亚类计数疫学检测原理及临床应用（1 1）尼龙棉柱分离法）尼龙棉柱分离法 B B细胞滞留与柱上细胞滞留与柱上 T T细胞流出细胞流出（2 2）E E花环分离法花环分离法成熟人成熟人T T细胞表面有细胞表面有CDCD2 2，绵羊红细绵羊红细胞的受体胞的受体疫学检测原理及临床应用（3）洗淘法）洗淘法（panning）（4）流式细胞仪）流式细胞仪（flowcytometry,FCM）（5 5）磁珠分离法：）磁珠分离法：用抗用抗CD4CD4交联的微珠可将交联的微珠可将T T细胞细胞 中的
11、中的CD4CD4+T T细胞与细胞与CD8CD8+T T细胞分。细胞分。疫学检测原理及临床应用3 3、淋巴细胞亚群计数、淋巴细胞亚群计数免疫荧光计数免疫荧光计数微量细胞毒试验微量细胞毒试验疫学检测原理及临床应用 疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用（3）分泌功能测定）分泌功能测定检测细胞因子分泌细胞检测细胞因子分泌细胞检测抗体形成细胞检测抗体形成细胞2、测定淋巴细胞功能的体内试验、测定淋巴细胞功能的体内试验结合菌素试验结合菌素试验迟发型超敏反应迟发型超敏反应疫学检测原理及临床应用疫学检测原理及临床应用（一）免疫球蛋白测定（一）免疫球蛋白测定1、体外用已知抗原检测相
12、应抗体、体外用已知抗原检测相应抗体2、用已知抗体定性、定量测定各、用已知抗体定性、定量测定各类免疫球蛋白类免疫球蛋白疫学检测原理及临床应用（二）补体测定（二）补体测定免疫比浊法免疫比浊法ELISARIA疫学检测原理及临床应用（三）细胞因子检测（三）细胞因子检测IL-2、IL-2R、rIFN、TNF等检测等检测疫学检测原理及临床应用（三）细胞因子检测（三）细胞因子检测2.生物活性测定法生物活性测定法 原理：不同细胞因子具有特定原理：不同细胞因子具有特定的生物学活性，借助相应指示系的生物学活性，借助相应指示系统与之反应，从结果得知细胞因统与之反应，从结果得知细胞因子的活性子的活性疫学检测原理及临床
13、应用2.生物活性测定法生物活性测定法促进细胞增殖和增殖抑制法促进细胞增殖和增殖抑制法抗病毒活性测定法抗病毒活性测定法直接杀伤法直接杀伤法趋化活性测定法趋化活性测定法3.分子生物学测定法分子生物学测定法PCR疫学检测原理及临床应用（四）（四）CD分子、表面受体和粘分子、表面受体和粘附分子的测定附分子的测定（五）（五）HLA分型分型疫学检测原理及临床应用第第23章章 免疫学防治免疫学防治免疫学预防免疫学预防免疫学治疗免疫学治疗疫学检测原理及临床应用（一）人工主动免疫（一）人工主动免疫（artificial active immunizationartificial active immunizat
14、ion）用疫苗、类毒素接种机体，用疫苗、类毒素接种机体，使之产生特异性的免疫，从而预使之产生特异性的免疫，从而预防感染的措施。防感染的措施。疫学检测原理及临床应用 人工主动免疫人工主动免疫常用制剂常用制剂疫苗、类毒素疫苗、类毒素 死疫苗死疫苗（灭活疫苗）是选用免疫原性强（灭活疫苗）是选用免疫原性强的病原体，经理化方法使其失去活力制备而成的的病原体，经理化方法使其失去活力制备而成的疫苗。伤寒菌、百日咳杆菌、霍乱弧菌、钩端螺疫苗。伤寒菌、百日咳杆菌、霍乱弧菌、钩端螺旋体、流感病毒、狂犬病病毒、乙脑病毒疫苗均旋体、流感病毒、狂犬病病毒、乙脑病毒疫苗均为灭活疫苗。为灭活疫苗。减毒活疫苗减毒活疫苗：是用
15、减毒或无毒力的是用减毒或无毒力的活病原体制成的疫苗。脊髓灰质病毒、卡介苗、活病原体制成的疫苗。脊髓灰质病毒、卡介苗、麻疹病毒疫苗是常用的减毒活疫苗。麻疹病毒疫苗是常用的减毒活疫苗。类类 毒毒 素素：细菌外毒素经甲醛处理后，细菌外毒素经甲醛处理后，失去毒性而保留其免疫原性即为类毒素。常用的失去毒性而保留其免疫原性即为类毒素。常用的类毒素有破伤风类毒素、白喉类毒素等类毒素有破伤风类毒素、白喉类毒素等。疫学检测原理及临床应用53死疫苗和活疫苗的比较死疫苗和活疫苗的比较疫学检测原理及临床应用（二）新型疫苗（二）新型疫苗亚单位疫苗亚单位疫苗 乙肝表面抗原制备乙肝疫苗乙肝表面抗原制备乙肝疫苗结合疫苗结合疫
16、苗合成肽疫苗合成肽疫苗基因工程疫苗基因工程疫苗（三）核酸疫苗（三）核酸疫苗疫学检测原理及临床应用 人工被动免疫人工被动免疫 是给人体注射含特异性抗体的免疫是给人体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞因子等制剂，以治疗或紧急血清或细胞因子等制剂，以治疗或紧急预防感染疾病。人工被动免疫力维持的预防感染疾病。人工被动免疫力维持的时间短，约时间短，约23周。常用制剂有：周。常用制剂有：抗毒素抗毒素 人免疫球蛋白制剂人免疫球蛋白制剂 细胞因子制剂细胞因子制剂 单抗单抗/基因工程抗体基因工程抗体疫学检测原理及临床应用56免免 疫疫 治治 疗疗(immunotherapy)借助物理、化学和生物手段，借助物理、化
17、学和生物手段，人为增强或抑制机体免疫功人为增强或抑制机体免疫功能，以达到治疗疾病的目的能，以达到治疗疾病的目的疫学检测原理及临床应用57（一）特异性免疫治疗（一）特异性免疫治疗1、主动免疫治疗：、主动免疫治疗：（1）肿瘤疫苗）肿瘤疫苗 （2）治疗病毒性疾病的疫苗）治疗病毒性疾病的疫苗 （3）治疗自身免疫病的疫苗）治疗自身免疫病的疫苗疫学检测原理及临床应用2、被动免疫治疗、被动免疫治疗抗体，抗毒素抗体，抗毒素人免疫球蛋白人免疫球蛋白激活的淋巴细胞激活的淋巴细胞疫学检测原理及临床应用人工自动免疫与人工被动免疫的比较人工自动免疫与人工被动免疫的比较疫学检测原理及临床应用（二）非特异性免疫治疗（二）非特异性免疫治疗免疫增强剂免疫增强剂 微生物及其产物、植物多糖、中草药、微生物及其产物、植物多糖、中草药、细胞因子、化学合成药物细胞因子、化学合成药物免疫抑制剂免疫抑制剂 化学合成药物、肾上腺糖皮质激素、抗化学合成药物、肾上腺糖皮质激素、抗生素、抗体、中草药生素、抗体、中草药（三）免疫重建与免疫替代（三）免疫重建与免疫替代疫学检测原理及临床应用
