1、实验五实验五 维生素维生素C C含量的测定含量的测定 (2 (2，6 6一二氯酚靛酚法一二氯酚靛酚法)一、实验目的一、实验目的(1)(1)学习维生素学习维生素C C的化学检测的原理和方法。的化学检测的原理和方法。二、二、实验原理实验原理 (1)(1)维生素维生素C C：又叫L-抗坏血酸，是一种水溶性维生素，能够治疗坏血病并且具有酸性,所以称作抗坏血酸。在柠檬汁、绿色植物及番茄中含量很高。抗坏血酸是单斜片晶或针晶，容易被氧化而生成脱氢坏血酸,脱氢坏血酸仍具有维生素C的作用。在碱性溶液中，脱氢坏血酸分子中的内酯环容易被水解成二酮古洛酸。这种化合物在动物体内不能变成内酯型结构。在人体内最后生成草酸或
2、与硫酸结合成的硫酸酯，从尿中排出。因此，二酮古洛酸不再具有生理活性。维生素维生素C的结构式的结构式 维生素C：六碳的多羟基内酯CCCHOHOCHOOCHHOCH2OH1747年，英国海军军医林德，建议远航者多吃柠檬，以根治坏血病。1907年，挪威化学家霍尔斯特在柠檬汁中发现，1934年才获得纯品。人、灵长类及豚鼠因缺乏将L-古洛酸转变成为维生素C的酶类，不能合成维生素C，故必须从食物中摄取，维生素C生产（1）莱氏法工艺 q葡萄糖高压催化氢化黑醋菌氧化丙酮保护次氯酸钠氧化盐酸转化维生素C（2）两步发酵法q葡萄糖高压催化氢化两步微生物氧化酸（碱）转化维生素CqL-抗坏血酸易遭破坏n温度n金属离子n
3、空气接触npHq易氧化q易分解q变质的标志：色泽变黄维生素c作用n1参与氨基酸代谢，n2参与神经递质，胶原当白和组织细胞间隙的合成n3降低毛细血管通透性n4刺激凝血功能n5增加抵抗感染n6参与解毒n7抗组胺n8阻止致癌物质生成n9 补充营养n10 治疗坏血病n11 治疗牙龈肿胀，牙龈出血n12 治疗各种急慢性传染病n13病后恢复期，创伤愈合期的辅助治疗n14辅助治疗过敏性疾病2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量n其能还原2,6-二氯酚靛酚染料。n维生素C具有还原性的烯二醇基，我们通过氧化还原滴定来测定维生素CCCOHOH 2，6-二氯靛酚法2，6-二氯靛酚（DCPIP），），是一种染料，其
4、氧化型在酸性介质中为红色，碱性介质中为蓝色，与Vc反应后，生成无色的还原型酚亚胺，因此，在酸性条件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶液显玫瑰红色，即为终点；无需另加指示剂。CCCCCCHOHHOHOOH OHO2NOHClClO+CCCCCCOHOHOOH OHO2NOHClClO还原型抗坏血酸还原型抗坏血酸氧化型脱氢抗坏血酸氧化型脱氢抗坏血酸2，6二氯酚靛酚（红色）二氯酚靛酚（红色）还原型还原型2，6二氯酚靛酚（无色）二氯酚靛酚（无色）O蓝色)OH+NClClOHH三、三、实验仪器与试剂实验仪器与试剂 仪器：仪器：三角瓶三角瓶(100mL)4个，研钵一只，移液管个，研钵一只，移液管(10mL)4
5、支、支、(1 mL)1支，容量瓶支，容量瓶(100 mL)，微量滴定管，分析天，微量滴定管，分析天平，离心机，漏斗，滤纸。平，离心机，漏斗，滤纸。试剂：试剂：n1.标准抗坏血酸溶液标准抗坏血酸溶液n21%草酸溶液：草酸溶液：n32%草酸溶液：草酸溶液：n40.1%2，6二氯酚靛酚溶液：二氯酚靛酚溶液：四、操作方法三角瓶编号1234标准抗坏血酸溶液（0.1mgmL）（mL）1.01.01%草酸溶液（mL）9.09.0样品滤液（mL）10.010.0用0.1%2，6-二氯酚靛酚滴定消耗的mL数空白对照与样品消耗的2，6-二氯酚靛酚的平均mL数V空白=V样=用0.1%2，6-二氯酚靛酚滴定时，以滴定
6、至出现微红色15秒保持不退色即为滴定终点。五、数据处理：五、数据处理：T样V样品中含抗坏血酸含量（mg/%）100W0.1 VV空白样T=10 25W250按下式计算样品中抗坏血酸的含量：T1 mL染料，相当于抗坏血酸mg数；根据三角瓶编号为1、2的滴定结果：W10 mL样液相当于样品的克数：六六 注意事项注意事项n1为防止还原型抗坏血酸氧化，整个操作过程要迅速，滴定过程一为防止还原型抗坏血酸氧化，整个操作过程要迅速，滴定过程一般不超过般不超过2min。n22草酸有抑制抗坏血酸氧化酶的作用，草酸有抑制抗坏血酸氧化酶的作用，2草酸无此作用。草酸无此作用。n3若提取液中色素含量高时，可以用白陶土脱色，或者加若提取液中色素含量高时，可以用白陶土脱色，或者加1mL氯仿，氯仿，到达终点时，氯仿层呈现淡红色。到达终点时，氯仿层呈现淡红色。
